胆囊结石病患者胆道系统的螺杆菌DNA

目的近来,螺杆菌属细菌与胆道疾病的关系日益受到重视,并在胆固醇结石中检测到细菌DNA.为进一步研究胆囊结石病与螺杆菌感染的关系,对胆囊结石患者的胆石、胆汁,胆囊黏膜行螺杆菌16S rRNA基因检测.方法研究对象为29例胆囊结石病患者.胆汁和胆囊黏膜标本接种于需氧、厌氧和非选择性微需氧培养基培养.利用两对特异性的螺杆菌16S rRNA基因引物对患者的胆石、胆汁、胆囊黏膜标本行nested-PCR扩增,利用特异的螺杆菌DNA探针,对PCR产物行Southern杂交检测,并对1例胆囊黏膜PCR产物直接测序,将测序结果与基因库中的标准螺杆菌株序列作比较,采用Neighbor-joining法绘制种系发生树.氧化酶法测定胆石胆固醇含量.结果胆汁和胆囊黏膜标本经需氧、厌氧、微需氧培养,未发现螺杆菌生长.29例胆石标本nested-PCR分析,2例阳性(6.9%),23例胆汁中9例阳性(39.1%),29例胆囊黏膜中22例阳性(75.9%).PCR阳性的标本Southern杂交均为阳性.1例胆囊黏膜标本的PCR扩增产物纯化后直接测序,证实为螺杆菌属细菌.29例胆囊结石的平均胆固醇含量为(62.2±3.8)%,PCR结果阳性的2例胆石为胆固醇为主的混合性结石.结论螺杆菌DNA存在于胆囊结石、胆汁及胆囊黏膜中,胆道系统螺杆菌感染可能和胆囊结石的形成有一定关系.

人肝细胞生长因子重组腺病毒的构建及其对人胎肝细胞细胞周期的影响

目的利用AdEasy系统构建人肝细胞生长因子(HGF)复制缺陷型重组腺病毒(AdHGF),并观察其对人胎肝细胞细胞周期的影响.方法将质粒pUCHGF扩增、酶切获得人HGF cDNA片段,插入腺病毒穿梭载体质粒pAdTrack巨细胞病毒(CMV)启动子下游,构建重组穿梭载体pAdTrack-CMV-HGF,线性化后与骨架载体AdEasy-1在细菌BJ5183内同源重组得到腺病毒质粒pAdHGF,经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒AdHGF;将AdHGF体外感染人胎肝细胞,以RT-PCR检测HGF在胎肝细胞的表达;同时通过流式细胞仪测定AdHGF对胎肝细胞细胞周期的作用.结果连接、重组后通过酶切和测序法筛选出pAdHGF;经293细胞包装,3 d后观察到绿色荧光蛋白(GFP)明显表达,氯化铯梯度离心纯化终获得约4×1010efu/ml滴度的重组病毒;AdHGF体外感染人胎肝细胞3d后,HGF表达明显增加,流式细胞仪检测结果显示感染后的胎肝细胞由G0/G1期向S期和G2/M期转化.结论利用新型腺病毒载体AdEasy系统可在短期内制备同时表达GFP和HGF的重组腺病毒Ad-HGF;AdHGF体外感染胎肝细胞可显著提高HGF的表达并促进肝细胞增殖,这将为肝细胞移植和基因治疗肝纤维化提供新的手段.

肠易激综合征患者肠黏膜肥大细胞与神经纤维的关联

目的探讨肠黏膜肥大细胞与神经纤维之间的关联及其与肠易激综合征(IBS)发病的关系.方法应用电镜和免疫组化双重染色技术,对56例符合罗马Ⅱ标准的腹泻型IBS患者和12例非IBS对照组患者末端回肠和直肠-乙状结肠交界部位肠黏膜内的肥大细胞与神经纤维的关联进行了检测.结果IBS患者和对照组肠黏膜内多数肥大细胞与神经纤维紧邻.患者末端回肠、直肠-乙状结肠交界处黏膜内神经元特异性烯醇化酶(NSE)、P物质、5-羟色胺(5-HT)的表达明显高于对照组(P＜0.05),肥大细胞周围NSE、P物质、降钙素基因相关肽(CGRP)、5-HT的表达也明显增强.IBS患者末端回肠黏膜内肥大细胞的数目(10.98±2.96)与对照组(6.05±0.51)相比明显增多(P＜0.01).IBS患者与对照组相比,末端回肠内NSE(6.73±1.02比4.25±0.50)、P物质(6.84±0.85比4.28±0.40)、CGRP(6.73±0.82比4.33±0.54)、5-HT(6.72±0.81比4.00±0.63)阳性神经纤维紧邻的肥大细胞数目亦明显增多(P＜0.01).结论IBS患者肠黏膜内肥大细胞数量的增多及其周围神经肽表达的增强表明:免疫系统与肠神经丛之间通路的活化可能与IBS的发病有关.

肝硬化患者胃排空与小肠通过时间的研究

目的研究肝硬化患者胃肠运动变化,探讨肝功能、胃肠激素对患者胃肠运动的影响.方法选择50例肝硬化患者及14例正常人作为研究对象,检测肝硬化患者肝功能,按Child-Pugh分级将患者分为三组.运用核素法检测所有受试者胃半排时间(GET1/2)和小肠通过时间(SITT),放免法检测受试者的血浆胃肠激素:血管活性肠肽(VIP)、胃动素(MT).结果50例肝硬化患者GET1/2与正常对照组间差异无显著性(P＞0.05),但Child C级患者GET1/2较正常对照、Child B级、A级均明显延长(P＜0.05);50例肝硬化患者SITT较正常对照明显延长(P＜0.05),且Child C级和B级患者SITT较正常对照组和Child A级患者明显延长(P＜0.05).肝硬化患者的凝血酶原时间(PT)与SITT呈正相关,胆碱酯酶(CHE)与SITT呈负相关.血浆VIP与GET1/2和SITT均呈正相关,而血浆MT与GET1/2和SITT无明显的相关性.结论肝硬化患者存在胃肠运动障碍,肝功能越差,胃肠运动异常的程度越重.肝硬化患者胃肠运动受多种因素的影响,其中肝储备功能、升高的血浆VIP对胃肠运动起一定的延缓作用,而血浆MT与患者的胃肠运动关系不密切.

rdxA基因在幽门螺杆菌对甲硝唑耐药机制中的作用

目的探讨rdxA基因变异与幽门螺杆菌(Hp)对甲硝唑耐药之间的关系.方法随机收集快速尿素酶试验(RUT)阳性的病人(51例),取胃窦部黏膜1块,在体外微需氧培养.甲硝唑耐药率检测分别用E试验和临界点药敏法.PCR扩增Hp的rdxA基因片断(886 bp)并测序.对耐药株和敏感株的rdxA基因序列与标准菌株Hp26695相应序列进行同源性分析.结果共分离出Hp临床分离菌47株.甲硝唑用E试验法检测耐药率为34%(16/47),临界点药敏法为31.9%(15/47),其中15株两种方法均耐药.测序15株Hp耐药株和8株敏感株的rdxA基因片断,与标准菌株Hp26695相应序列对比,15株耐药株(MtzR)的rdxA基因核酸序列相似性范围在90%～95%之间,平均为92.5%,而8株敏感株(Mtzs)相似性范围在94%～95%之间,平均为94.5%.大多数耐药株rdxA基因的变异为点变异、单个碱基插入或缺失,未发现大片段序列的插入和缺失,且突变位点是不固定的.结论在耐甲硝唑的大多数Hp临床分离株中,rdxA基因发生多处点变异,单个碱基插入或缺失,但未发现大片段序列的插入和缺失,且变异位点是不固定的.

胰腺巨细胞癌临床病理特征分析

目的探讨胰腺巨细胞癌的临床病理特征.方法以96例普通胰腺腺癌为对照组,回顾性研究分析经病理确诊的19例胰腺巨细胞癌的临床病理特征.结果19例胰腺巨细胞癌8例(42.1%)位于胰头,11例(57.9%)位于胰体尾.首发症状以腹痛多(57.9%),确诊时主要症状为腹痛(73.7%)、消化不良(63.2%)、体重下降(36.8%)等,黄疸较为少见.常规化验检查异常率较普通胰腺癌低,肿瘤标志物检测与普通胰腺癌接近.超声、螺旋CT、MRI诊断敏感率、准确率较高.肿瘤生长大,处于Ⅳ期者近半数(9例,47.4%),较普通胰腺癌稍高.病理镜检部分有骨样结构形成,肿瘤以低分化为主.1年存活率为17.6%,较普通胰腺癌稍低.结论胰腺巨细胞癌临床病理特征与普通胰腺腺癌确有不同之处,应联合应用影像学检查及肿瘤标志物检测手段早期诊断巨细胞癌,努力改善预后.

蛙皮素对人胃黏膜上皮永生细胞系GES-1细胞生长作用和机制的研究

目的观察蛙皮素对人永生细胞系(GES-1)生长的调节和作用机制.方法①分子水平观察GES-1细胞胃泌素释放肽(GRP)受体mRNA的表达.②利用受体化学交联和细胞膜组织化学法观察GRP受体蛋白表达.③观察不同浓度的蛙皮素及其受体拮抗剂对GES-1细胞生长的影响.④观察蛋白激酶C(PKC)抑制剂对蛙皮素促进GES-1细胞作用的影响.⑤观察蛙皮素作用GES-1细胞后,细胞内三磷酸肌醇(IP3)和PKC活性以及观察蛙皮素对此细胞系作用后GRP受体mRNA表达量的变化.结果①GFS-1细胞表达GRP受体mRNA,Southern杂交进一步证明表达特异性mRNA.②GRP受体蛋白相对分子质量为75×103,该受体位于细胞膜.③蛙皮素可促进此细胞生长,而蛙皮素特异性受体拈抗剂可抑制此促生长作用.④蛙皮素对该细胞的促生长作用可被PKC抑制剂所抑制.⑤蛙皮素可引起细胞内IP3含量显著增加以及引起细胞内PKC活性自细胞质向细胞膜转移.⑥蛙皮素作用GES-1细胞后可引起GRP受体mRNA表达增加.结论此研究证明人胃黏膜上皮细胞系GES-1表达GRP受体mRNA和蛋白.蛙皮素对GES-1细胞的促生长作用是通过特异性受体介导,引起细胞内IP3增加和PKC活性转移来实现的.蛙皮素作用后引起该细胞GRP受体mRNA表达量增加,说明蛙皮素对其自身受体有上调作用.

血清肝细胞生长因子在慢性肝病中的意义

目的肝细胞生长因子(HGF)能促进上皮细胞增生、运动、变形,是肝再生的起始因子之,近来发现其在肝硬化和肝肿瘤的发生发展中也有重要作用.现主要探讨血清HGF水平在慢性肝病中的意义.方法检测197例个体血清HGF水平,包括肝细胞癌(HCC)80例,肝硬化(LC)57例,慢性肝炎(CH)22例,正常对照38例.ELISA法检测血清HGF水平,并描绘受试者工作曲线(ROC),确定HCC和LC患者HGF水平的佳临界点.运用Spearman相关分析HGF水平和ALT、AST、GGT、白蛋白、总胆红素、凝血时间、肝癌大小、病理分级的相关性.结果HCC、LC、CH和正常对照组的血清HGF中位值分别是6.767、151.200、7.017和3.476pg/ml.其中HCC组(P＜0.05)和LC组(P＜0.01)的血清HGF水平显著高于正常对照组.LC组根据Child分级分层发现,Child C级患者的HGF水平明显高于Child A、B级.肝硬化ROC曲线显示,14pg/ml为临界值时效率高.血清HGF水平仅发现与凝血时间有相关性(r=0.45,P＜0.01).在HCC组中,未发现血清HGF水平与肿瘤大小、病理分级有任何相关.结论血清中HGF水平增高与LC程度有关.

血管内皮抑素转基因口服制剂治疗结肠癌的实验研究

目的采用血管内皮抑素转基因双歧杆菌口服制剂(ETB-2)对裸鼠结肠癌模型进行治疗,并探讨其抑瘤机制.方法人结肠癌细胞LoVo接种于BALB/C裸鼠皮下建立动物模型,随机分为四组:对照组(6只)以生理盐水灌胃、ETB-2 A组(9只)、ETB-2 B组(9只)、ETB-2 C组(9只),分别给予ETB-2 3.0、4.5、6.0 g@kg-1@d.接种后24 h灌胃给药,持续21 d,第28天处死动物,计算抑瘤率.观察病理变化,免疫组化检测微血管密度(MVD)、增殖细胞核抗原(PCNA)指数和血管内皮生长因子(VEGF)阳性率,RT-PCR检测VEGF mRNA、TGF-β1 mRNA,DNA原位末端标记(TUNEL)检测凋亡率.结果对照组抑瘤率为0,ETB-2 A、ETB-2 B、ETB-2 C分别为23.7%,59 2%,67.9%,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05),ETB-2 C组与ETB-2 A组相比差异也有显著性(P＜0.05).ETB-2 A、ETB-2 B、ETB-2 C组MVD与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05),ETB-2 B、ETB-2 C组VEGF阳性率、VEGF mRNA、TGF-β1mRNA与对照组相比差异有显著性(P＜0.05);PCNA指数治疗组有降低趋势,但各组间比较差异无显著性(P＞0.05).ETB-2 A、ETB-2 B、ETB-2 C组凋亡率分别与对照组相比,差异有显著性(P＜0.01).结论ETB-2可显著抑制裸鼠人结肠癌的生长,并呈量效关系;其治疗机制可能为抑制肿瘤内血管生成,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制VEGF、TGF-β1表达,使肿瘤细胞增殖能力降低.

肝肺综合征大鼠肾上腺髓质素及其受体的表达

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)在肝肺综合征(HPS)发病机制中的作用.方法采用Wistar大鼠行胆总管结扎术(CBDL)制备HPS动物模型,进行血气分析,使用放射免疫方法检测血浆和肺组织匀浆中ADM水平;采用RT-PCR方法检测肺组织中ADM mRNA及其特异性受体L1mRNA的表达.结果(1)从术后第3周至第5周,CBDL组大鼠血浆和肺组织中ADM水平动态升高;(2)CBDL5周组大鼠肺组织中ADMmRNA的表达较对照组升高,差异有显著性(P＜0.05),而两组问L1mRNA的表达差异无显著性(P＞0.05);(3)相关分析表明,各阶段血浆和肺组织ADM水平均与天冬氨酸转氨酶(AST)、门静脉压力、肺泡-动脉氧分压差(A-aDO2)呈正相关,出现腹水者血浆和肺组织ADM水平高于未出现腹水者.结论在HPS形成过程中,血浆和肺组织中扩血管物质ADM水平持续升高,与肝功能受损状态、门脉压力升高程度、腹水形成及PaO2降低有关,提示ADM增多可能参与HPS时肺内血管扩张(IPVD)的发生.

腹主动脉夹层动脉瘤误诊误治一例

患者男，62岁，因腹痛、腹胀4d入院。4d前进食后约30min突感两侧腰背部剧烈疼痛，并漫延至上腹部，呈持续性胀痛，伴大汗，呕吐，呕吐物为胃内容物。无腹泻与黑便。

原发性肝类癌伴反复腹水一例

患者女,68岁,因反复右上腹胀痛17年,加重伴腹水1年入院.1985年,无诱因下渐感右上腹胀痛,不伴寒战、发热、黄疸、恶心、呕吐及黑便.

华支睾吸虫病一例

患者男,48岁.患有食欲不振,腹泻,腹胀,肝脾不适等症状.近1个月患者病情加重,消瘦,巩膜及皮肤重度黄染,乏力加剧伴呕吐,于2002年8月来我院就诊.

遗传性毛细血管扩张症合并肝硬化一例

患者女,68岁.自1982年起手、足、口腔、颜面出现鲜红色斑点,反复有牙龈、上腭出血及鼻出血.因呕血1次收入院.家族中无同类疾病患者.

组织细胞增生症X并发肝硬化一例

患者男,16岁.因间断乏力、食欲不振1年,呕血4h入院.患者1年前无明显诱因下出现乏力、食欲不振,时有腹胀,无低热、盗汗,无反酸、嗳气,未予诊治.

胃恶性间质瘤伴穿孔一例

患者女,48岁,因反复中上腹疼痛5年余,加重10余天入院.患者于1997年因中上腹疼痛住本院,胃镜示胃角及胃窦小弯畸形明显,黏膜隆起约2 cm,质硬,有2个深凹陷伴出血,苔污秽,约1cm×1cm和0.5cm×0.6cm.诊断:胃窦前壁溃疡,恶变待排.

十二指肠球部溃疡伴Wernicke脑病一例

患者男,31岁.因反复上腹部不适1年,伴乏力、恶心呕吐3d,于2002年8月11日入院.患者有上腹部不适,进食后可缓解,伴反酸、偶有恶心,但无腹痛,外院胃镜示十二指肠球部溃疡活动期,给于雷尼替丁和中药治疗,症状时好时坏,近1个月出现食欲差、乏力、心悸,伴有双下肢麻木,3d前恶心、呕吐明显,每天10余次,粪便呈褐色,粪隐血++,因"上消化道出血"收住入院.平时很少吃水果及新鲜蔬菜,因害怕溃疡病进食量较前有明显减少,体重下降约10kg.

西咪替丁致喉头水肿一例

患者男,38岁,2001年8月20日因上腹胀痛、黑便1周入院.1周前饮酒100 ml后出现间断上腹胀痛,放射到腰背部,以餐后、夜间明显,次日开始解黑便,量不多.

γ-干扰素对肝纤维化的影响

近年来,干扰素制剂已广泛应用于临床.许多研究表明,作为干扰素家族中的重要成员,γ-干扰素(IFN-γ)具有较强的抗肝纤维化作用.本文就其对肝纤维化的影响及机制作一综述.

原发性肝癌的诊断:从临床到亚临床

原发性肝癌(肝癌)是我国常见恶性肿瘤之一.在恶性肿瘤死亡之顺位中仅次于胃癌占第二位.肝癌的诊断曾经有过一个相当长的、可称为"黑暗时期"的过程.

胃大部切除术后反复腹泻、消瘦

病历摘要患者男,53岁,海员.因胃大部切除术后反复腹泻,伴消瘦14年于2001年11月28日入院.患者14年前因胃溃疡穿孔在外院行胃大部切除术(毕氏Ⅱ式).术后1个月开始腹泻,每天4～5次,多则10余次.

埃索美拉唑与兰索拉唑治疗糜烂性食管炎疗效比较

质子泵抑制剂(PPI)是目前治疗糜烂性食管炎(EO)有效的药物之一。但是不同PPI的疗效比较尚缺乏大型临床试验结果，即在判断临床疗效差别时缺乏足够的把握度。在美国开展了一项大型的多中心临床试验比较埃索美拉唑和兰索拉唑治疗反流性食管炎(GERD)中EO的疗效和症状缓解情况。有关该研究的具体细节已有发表。

替勃龙与西沙必利对绝经期功能性消化不良患者胃肠动力的影响

检测M2抗体早期发现原发性胆汁性肝硬化

三代H2受体阻滞剂致药物性精神病比较

胃内胆汁反流相关因素的研究

基质溶素在早期大肠癌中的表达及其意义

重症急性胰腺炎的非手术治疗

热盐水所致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜组织细胞p53和ras表达的实验研究

多烯紫杉醇抑制肝癌细胞生长及诱导凋亡

丝裂原活化蛋白激酶在幽门螺杆菌致胃癌发生中的作用机制研究

胃溃疡愈合质量初探

慢性胃炎和胃癌的幽门螺杆菌基因分型