中药药理与临床杂志
Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica 중약약리여림상
- 主管单位： 四川省中医管理局
- 主办单位： 中国药理学会 四川省中医药科学院
- 影响因子： 0.99
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-859X
- 国内刊号： 51-1188/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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大黄配伍前后对大鼠肝肾的影响
目的:观察大黄分别与甘草、炙甘草、黄连配伍后,以及在复方制剂泻心汤中大黄对大鼠的肝肾毒性,为临床合理应用大黄提供依据.方法:备配伍组制备总提取物,以大黄生药量计,按18g/kg(大黄生药)灌胃,每天给药1次,连续30天.结果:大鼠在给药大黄总提物18g/kg(大黄生药)两周后就表现出一定肝肾毒性,生化指标ALT、AST、CR呈不同程度地升高.并且给药30天后ALT、AST、CR不同程度地升高,BUN略降低,肝脏有轻度嗜酸性病变及轻度水肿,肾脏出现轻度淤血、水肿和核固缩.除炙甘草外,大黄与甘草、黄连配伍后及在泻心汤中均显示大黄肝肾毒性有所降低.结论:大黄配伍后在一定程度上减轻其肝肾毒性.
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丹皮的抗内毒素和解热作用研究
目的:研究丹皮的抗内毒素和解热作用.方法:丹皮抗内毒素作用采用体外鲎试剂法,解热作用采用内毒素、酵母和2,4-二硝基酚所致大鼠发热试验.结果:丹参生药于10mg/kg能在体外对内毒素有拮抗作用;丹皮10 ～40g/kg于体内能使内毒素、酵母和2,4-二硝基酚所致发热消退.结论:丹皮有一定的解热作用.
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白扁豆多糖抗神经细胞缺氧性坏死与凋亡
目的:探讨白扁豆多糖(WHBP,white hyacinth bean polysaccharide)抗胚鼠大脑皮层神经细胞缺氧性坏死及凋亡的作用.方法:实验分正常对照组,凋亡阳性组,白扁豆多糖0.5g/L、3.5g/L、8.0g/L组;采用无血清体外培养SD胚大鼠大脑皮层神经细胞;应用MTT法、Trypan blue拒染法、Annexin V-FITC/PI流式细胞术等方法观察白扁豆多糖的合适使用剂量和缺氧性神经细胞坏死及凋亡保护作用.结果:①常氧条件下白扁豆多糖2.0g/L～6.0g/L促进神经细胞相对增殖率达28.85％～15.38％,与正常对照组比较P＜0.01;而缺氧条件下白扁豆多糖2.5g/L～ 3.5g/L与正常对照组比较P＞0.05,但与凋亡阳性组比较白扁豆多糖0.5g/L～6.0g/L相对增殖率均高(P＜0.01).②Annexin V-FITC/PI染色流式细胞测定表明,白扁豆多糖0.5g/L、3.5g/L、8.0g/L组的坏死率分别为9.45±5.28％、8.39±3.44％、9.85±2.90％,与凋亡阳性组(10.01±2.94％)及正常对照组(5.38±1.46％)比较P＞0.05;而早期凋亡率分别为19.83±2.50％ (P ＜0.05)、9.34±2.47％ (P ＜0.01)、23.35±5.14％,与凋亡阳性组(28.72±2.74％)比较差异显著,而与正常对照组(4.54±0.34％)比较除3.5g/L组外,其余两组均P＜0.01.结论:白扁豆多糖具有促进神经细胞生长,阻断缺氧引起的神经细胞生长抑制,以及显著地抗神经细胞缺氧性凋亡功效.
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黄芩苷、栀子苷对大鼠脑缺血保护作用的机制
目的:研究黄芩、栀子不同配伍对脑缺血大鼠的保护作用,探讨黄芩苷、栀子苷及其配伍防治脑缺血损伤的作用及机制.方法:雄性大鼠100只,采用线拴法建立脑缺血大鼠模型.分别分为黄芩苷组、黄芩苷∶栀子苷(3∶7)组、黄芩苷∶栀子苷(1∶1)组、黄芩苷∶栀子苷(7∶3)组、栀子苷组、三七总皂苷组(阳性对照)、假手术组及模型组,持续灌胃7天后,用线栓法建立大鼠脑缺血损伤模型,灌胃给予黄芩苷、栀子苷及其不同比例的配伍,24h后观察大鼠神经功能症状,测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)含量.结果:黄芩苷:栀子苷(3∶7、1∶1、7∶3)组、栀子苷组都可以增强大鼠的横木行走能力;黄芩苷组、黄芩苷:栀予苷(3∶7、1∶1、7∶3)组、栀子苷组都可提高触觉刺激反应,降低Bederson评分;黄芩苷∶栀子苷(3∶7)组可降低血清中TNF-α、IL-1β的含量.结论:黄芩、栀子及其配伍对大鼠脑缺血具有保护作用,其作用机制可能与减轻炎症反应有关.
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葛根素对3T3-L1前脂肪细胞分化及胰岛素抵抗模型糖代谢的影响
目的:研究葛根素(Pur)对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响,以及在胰岛素抵抗状态下对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖代谢的影响.方法:不同浓度Pur干预3T3-L1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响;油红0染色法检测其对前脂肪细胞分化过程及成脂的影响;地塞米松诱导3T3-L1细胞建立胰岛素抵抗模型,用不同浓度Pur进行干预,测定细胞的葡萄糖消耗量.结果:Pur(3～ 300μmol/L)对3T3-L1前脂肪细胞增殖无明显影响;Pur(30～ 300μmol/L)促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,且具有量效关系.结论:Pur能够促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,改善胰岛素抵抗.
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基于顶空气相色谱法研究急性酒精中毒小鼠的TK-TD相关性
目的:探讨小鼠酒精中毒时全时程内血液中乙醇浓度与醉倒率的经时变化及其相关性,为酒精中毒的防治提供科学依据.方法:制作小鼠酒精中毒模型,采用顶空气相色谱法测定模型小鼠全血中乙醇浓度变化,同时计算小鼠在各个时间点的醉倒率,研究乙醇浓度变化与小鼠醉倒率的相关性.结果:酒精中毒后小鼠的睡眠潜伏期为22.77±20.94min,睡眠维持期为317.36±77.48min,苏醒时间为422.00±121.33min;全血中乙醇浓度在造模后第1h和第4h时出现双峰现象,造模后第12h时开始明显降低,至第24h时降至低.结论:小鼠的醉倒率与血中乙醇浓度呈现明显的正相关,但二者的达峰时间不一致,提示小鼠酒精中毒行为的物质基础不仅为乙醇,还可能包括其代谢产物乙醛和乙酸等.
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酸柏栀油软胶囊对小鼠学习记忆及脑中NO、Ach的影响
目的:观察酸柏栀油软胶囊对小鼠的促学习记忆作用并初步探讨其机制.方法:采用Morris水迷宫法观察酸柏栀油软胶囊对小鼠的学习记忆影响,并测定小鼠脑内NOS、ChaE、AChE的含量.结果:酸柏栀油软胶囊1.25～5ml/kg能缩短小鼠登台潜伏期,增加穿越原平台次数,以中剂量作用强;且登台潜伏期随训练时间的延长,各组作用均逐渐增强,d20的作用尤为明显.酸柏栀油软胶囊尚能增加小鼠脑内NOS、ChaE活性,降低AChE活性,也以中剂量作用为佳.结论:酸柏栀油软胶囊对小鼠学习记忆有促进作用,该作用可能与其富含不饱和脂肪酸,增加脑内NO、Ach的含量有关.
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赤白芍对血虚证动物模型补血作用及机制研究
目的:探讨不同基源和同基源赤、白芍对血虚证动物模型外周血象及Na+-K+-ATP酶活性的影响,观察其补血作用方法:应用综合放血制备血虚证小鼠模型,检测各组动物外周血常规及Na+-K+-ATP酶活性.结果:血虚证动物模型外周血象及Na+-K+,-ATP酶活性均有显著变化.当归(2.4g/kg)、野生芍药(2.4g/ks)对血虚模型降低的RBC有显著升高作用,同时野生芍药(2.4g/kg)对降低的HGB也具有显著升高作用.结论:当归(2.4g/kg)、野生芍药(2.4g/ks)对血虚模型有明显补血作用,其作用机制可能与增强红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性相关.
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复方金钱草胶囊对角叉菜胶致大鼠非细菌性列腺炎模型的作用研究
目的:研究复方金钱草胶囊对角叉菜胶致大鼠非细菌性前列腺炎的作用.方法:以1％角叉菜胶注入雄性大鼠双侧前列腺腹叶诱导大鼠非细菌性前列腺炎模型,计算前列腺指数、光镜下观察前列腺组织的病理变化.结果:复方金钱草胶囊在12 g(原生药)/kg剂量下可改善大鼠前列腺外观形态;在6、12g(原生药)/kg剂量下可降低前列腺指数;在3、6、12g(原生药)/kg剂量下光镜下可见前列腺水肿及炎细胞浸润明显减轻、腺体变性坏死轻微、无菌性炎症反应程度均低于模型对照组.结论:复方金钱草胶囊可减轻前列腺组织水肿及炎细胞浸润,有助于前列腺功能的恢复,对角叉菜胶所致大鼠无菌性前列腺炎有明显的保护作用.
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荆芥挥发油体外抗甲型流感病毒作用及机制的研究
目的:观察荆芥挥发油及其主要成分胡薄荷酮与薄荷酮体外对甲型流感病毒(H1N1)增殖的影响,并探讨其TLR/IFN信号通路机制.方法:MTT法检测受试药对狗肾传代细胞(MDCK)的半数中毒浓度(TC50)及大无毒浓度(TC0);血凝法测定甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)对MDCK细胞的感染性;MTT法和细胞病变法(CPE)测定三种药物体外抑制流感病毒增殖的有效浓度(IC50)和治疗指数(TI).Real-Time PCR法观察药物对H1N1感染MDCK细胞后8h细胞TLR7、IFN-β mRNA表达水平的影响.结果:荆芥挥发油、胡薄荷酮和薄荷酮对MDCK细胞的TC50分别为0.20mg/ml、0.36mg/ml与0.43mg/ml,TC0分别为0.10mg/ml、0.10mg/ml与0.25mg/ml.荆芥挥发油和胡薄荷酮3.1×10-3～0.1mg/ml浓度时能抑制流感病毒增殖,其IC50分别为1.7×10-3 mg/ml与1.9×10-3 mg/ml,TI分别为120.83、184.54,呈一定量效关系;薄荷酮对流感病毒染毒的MDCK细胞几乎无保护作用.荆芥挥发油3.1×10-3～0.10mg/ml浓度,胡薄荷酮1.3×10-2～0.10mg/ml及薄荷酮7.8×10-3 ～0.10mg/ml浓度时对流感病毒具有明显直接杀灭作用,其IC50分别为3.1 x10-3、7.2×10-3与1.9×103mg/ml,TI分别为63.99、50.00和82.88.荆芥挥发油和胡薄荷酮0.1 mg/ml浓度时均显著提高TLR7、IFN-β mRNA表达水平,0.25mg/ml薄荷酮显著提高TLR7 mRNA表达水平.结论:荆芥挥发油与胡薄荷酮体外明显抑制甲型流感病毒(H1N1)在MDCK细胞中的增殖,薄荷酮作用不明显;三者均对流感病毒有显著直接杀灭作用.其抗病毒作用机制可能与其激活TLR7,诱导IFN-β高表达,激活病毒模式识别系统有关.
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栀子总环烯醚萜苷对脑出血大鼠内皮屏障的影响
目的:探讨栀子总环烯醚萜苷对脑出血大鼠内皮屏障的影响.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和栀子总环烯醚萜苷(30、15和5mg/kg)组,采用自体血注入诱发大鼠脑出血模型,术后24、48、72和120h时间点各组各取10只大鼠脑组织标本,采用免疫组织化学染色检测脑出血周围血肿组织中内皮屏障抗原(endothelial barrier antigen,EBA)和血管内皮整合素αVβ3(αVβ3-Integrin)表达,ELISA法测定促血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)和血栓调解蛋白(Thrombomodulin,TM)含量变化.结果:与假手术组比较,术后24～ 120h模型大鼠脑血肿周围组织中EBA免疫消失区面积增多,整合素αVβ3平均光密度值增加,Ang-1和TM浓度升高.与模型组比较,30mg/kg栀子总环烯醚萜苷组在术后24～120h各时间点EBA免疫消失区面积和整合素αVβ3表达降低,Ang-1和TM浓度降低.15 mg/kg栀子总环烯醚萜苷组仅在术后24 ～ 72h有效.结论:栀子总环烯醚萜苷可保护或修复内皮屏障,减少EBA消失区面积和整合素αVβ3表达,降低Ang-1和TM水平.
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糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的:观察糙叶败酱大孔吸附树脂提取物(PsBe)对Sarcoma 180 (S180)荷瘤小鼠的免疫调节作用.方法:建立S180腹水瘤动物模型,以环磷酰胺0.01g/kg作为阳性对照,分别给予PsBe 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg治疗,观察荷瘤小鼠胸腺和脾脏脏器指数变化,MTT法测T细胞、B细胞转化功能,及NK细胞、LAK细胞活性及B细胞抗体产生能力,流式细胞术检测脾脏T细胞亚群.结果:PsBe 0.5～2.0g/kg可提高S180荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数,增强T、B脾淋巴细胞转化功能和NK细胞、LAK细胞杀伤能力,提高B细胞抗体产生能力,增加脾T细胞亚群CD4+细胞和CD4+/CD8+比值,其中1.0g/kg组和2.0g/kg组与模型组比较,有显著性差异.结论:PsBe具有增强S180荷瘤小鼠免疫功能的作用.
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虎杖对人外周血单个核细胞炎症因子基因表达的影响
目的:观察虎杖提取物对人外周血单个核细胞炎症因子基因的影响,以期阐明虎杖提取物抗痛风性关节炎的作用机制.方法:分离与培养人外周血单个核细胞,台盼蓝测细胞活力为95％以上,RT-PCR检测人外周血单个核细胞IL-1βmRNA、IL-8mRNA的表达.结果:虎杖提取物1000mg/L,100mg/L组IL-1βmRNA和IL-8 mRNA表达与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.01).地塞米松磷酸钠组表达与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.01).结论:虎杖提取物能抑制人外周血单核细胞炎症因子基因的表达,可能是其治疗急性痛风性关节炎的作用机制之一.
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朱砂七抗Ⅱ型单纯疱疹病毒的体外研究
目的:研究朱砂七粗提物和总蒽醌体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用.方法:运用单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ),以非洲绿猴肾细胞(Vero)作为宿主细胞,通过三种给药方式观察感染病毒后的细胞变性反应(CPE)和MTT比色法,检测不同浓度朱砂七粗提物和总蒽醌对Ⅱ型单纯疱疹病毒的直接杀灭、预防和阻止复制作用.结果:朱砂七粗提物和总蒽醌能抑制HSV-Ⅱ病毒的复制,但无预防和直接杀灭作用,朱砂七粗提物抑制HSV-Ⅱ病毒复制IC50为0.1008 mg/ml,治疗指数(TI)为6.2;总蒽醌抑制HSV-Ⅱ病毒复制IC50为0.0067mg/ml,治疗指数(TI)为11.66.结论:朱砂七粗提物和总蒽醌在体外具有明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅱ病毒复制的作用.
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吴茱萸挥发油单次给药对小鼠肝毒性“量-时-毒”关系研究
目的:研究吴茱萸挥发油组分单次给药致小鼠肝毒性的时毒、量-毒关系.方法:取小鼠按不同时间点和不同剂量分组给药,观察小鼠死亡情况和毒性反应,检查血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),计算肝、脾、胸腺脏器指数,光学显微镜下观察肝组织形态变化.结果:“时-毒”关系研究表明:小鼠单次灌服1.35 ml/kg的吴茱萸挥发油后,血清ALT、AST值随时间不同造成肝损害程度也不同,均可导致肝脏指数明显升高,小鼠血清ALT、AST均在给药后6h达到高峰;肝组织病理学检查显示,吴茱萸挥发油可在给药8～72 h内对肝组织产生明显损伤.“量-毒”关系研究表明:与正常组比较,吴茱萸挥发油不同剂量组对肝组织产生不同程度的损伤,且随着剂量增大,ALT、AST升高显著,呈剂量依赖关系.结论:小鼠单次灌服吴茱萸挥发油可造成小鼠一定的急性肝损伤,其对肝损伤程度呈现有一定的“量-时-毒”关系.
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复方乌骨藤胶囊对60Coγ照射S180荷瘤小鼠的增效减毒作用
目的:观察复方乌骨藤胶囊对60Coγ射线照射S180荷瘤小鼠的增效减毒作用.方法:小鼠72只,随机分为6组:荷瘤对照组,荷瘤+60Coγ照射组,荷瘤+60Coγ照射+贞芪扶正颗粒组,荷瘤+60Coγ照射+复方乌骨藤胶囊大、中、小剂量组.建立S180荷瘤小鼠模型,除荷瘤对照组外,其余各组于造模后第6d进行60Coγ射线照射,照射后即开始给药,1次/d,连续给药9d,末次给药后次日,检测体重、瘤重、脾指数、脾集落形成单位(CFU-S)、血常规和骨髓有核细胞数.结果:荷瘤+60Coγ照射+复方乌骨藤胶囊2.25g/kg组使瘤重明显下降,骨髓有核细胞数、CFU-S、网织红细胞明显升高;荷瘤+60Coγ照射+复方乌骨藤胶囊1.125g/kg组使瘤重明显下降,网织红细胞、CFU-S明显升高;荷瘤+60Coγ照射+复方乌骨藤胶囊0.5625g/kg组使瘤重明显下降.结论:复方乌骨藤胶囊对60Coγ照射的荷瘤小鼠有增效、减毒作用.
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肾复康Ⅱ号对大鼠肾间质纤维化及转化生长因子-β1的影响
目的:观察肾复康Ⅱ号胶囊对大鼠肾问质纤维化及转化生长因子-β1的表达情况的影响.方法:采用单侧输尿管结扎的方法制造大鼠肾间质纤维化模型.90只SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、模型组、肾复康Ⅱ号2.25g/kg组、4.5g/kg组、9g/kg组,肾复康Ⅱ号胶囊各组分别以以上剂量水溶剂灌胃,假手术组及模型组每天同时间以等体积的蒸馏水灌胃.给药7、14、21天后分别将造模大鼠的肾脏进行HE、Masson染色,观察肾间质纤维化的面积的变化;通过免疫组化的方法检测肾间质中转化生长因子-β1的表达情况.结果:模型组和肾复康Ⅱ号胶囊各组均出现肾间质纤维化病理改变,备剂量组(有效剂量2.25g/ks～9g/ks)病变程度与模型组相比较轻,具有显著性差异.肾复康Ⅱ号胶囊各组之间无显著性差异.TGF-β1表达在模型组和肾复康Ⅱ号胶囊组明显强于假手术组,肾复康Ⅱ号胶囊各组(有效剂量2.25g/kg～ 9g/kg) TGF-β1表达较模型组明显减少.结论:肾复康Ⅱ号胶囊可以有效抑制肾问质纤维化及转化生长因子-β1的表达,这可能是益肾散结法抗肾间质纤维化的部分途径.
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感毒清颗粒抗炎镇痛作用研究
目的:考察感毒清颗粒的抗炎、镇痛作用.方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀法、鸡蛋清和角叉菜胶致大鼠足肿胀法、小鼠腹腔毛细血管通透性亢进法、小鼠棉球肉芽肿法和大鼠棉球内芽肿法考察感毒清颗粒的抗炎作用;采用热板法和醋酸扭体法考察感毒清颗粒的镇痛作用.结果:抗炎作用研究表明,感毒清颗粒高、中、低剂量均对二甲苯致小鼠耳肿胀、蛋清和角叉菜胶致大鼠足肿胀、冰醋酸致小鼠毛细血管通透性亢进有显著的拮抗作用,与空白对照组比较有显著的统计学意义(P＜0.05),但对大、小鼠棉球肉芽肿均无显著的抑制作用(P＞0.05);热板法和醋酸扭体法研究结果表明,感毒清颗粒高、中剂量能明显提高小鼠热刺激致痛阈值,显著减少化学刺激致痛的扭体次数,与空白对照组比较有的统计学意义(P＜0.05).结论:感毒清颗粒具有良好的拮抗急性和亚急性炎症的作用,对慢性炎症无明显拮抗效应,且具有较好的镇痛作用.
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坤复康胶囊对混合菌液致盆腔炎模型大鼠血液流变学和病理形态学的影响
目的:研究坤复康胶囊对混合菌液致盆腔炎模型大鼠血液流变学和病理形态学的影响.方法:采用混合菌液致大鼠盆腔炎模型,观察坤复康胶囊对模型大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积值、血沉值的影响;HE染色后对子宫壁逐层进行病理组织学检查,并计算大鼠子宫卵巢的脏体比、肿胀度等.结果:与模型组比较,坤复康胶囊在0.322～1.330 g/kg剂量范围内均能降低血流变指标;坤复康中剂量组(0.665g/kg)和大剂量组(1.330g/kg)能显著改善病理结构变化;坤复康胶囊大剂量组(1.330g/kg)可明显降低子宫肿胀度.结论:坤复康胶囊能有效改善盆腔炎模型大鼠血液流变性,不同程度改善大鼠子宫病理结构,减轻模型大鼠子宫内膜慢性炎症的损伤.
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通络醒脑泡腾片对痴呆大鼠突触素表达的影响
目的:探讨通络醒脑泡腾片对AD大鼠学习记忆和海马突触素表达的影响,为其防治老年痴呆提供依据.方法:建立Ap25-35海马注射痴呆大鼠模型,采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学和图像分析技术对大鼠海马突触素表达进行定量分析.结果:通络醒脑泡腾片7.56g/kg、3.78 g/kg和1.89 g/kg均能够显著缩短大鼠定向航行测试的逃避潜伏期,显著延长空间探索测试第一象限停留时间和平台停留时间,增加经过平台次数,与模型对照组比较有显著的统计学意义(P＜0.05),并能够显著提高海马区突触素平均光密度,提高海马区、尤其是海马CA1区突触素的表达,与模型对照组比较有显著的统计学意义(P＜0.05).结论:通络醒脑泡腾片具有提高AD大鼠学习记忆能力,促进海马突触素表达的作用,提示其益智作用与促进海马突触素重塑有关.
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槐定碱对LPS致急性肺损伤模型小鼠血清IL-6、IL-10、NO、SOD和MDA含量的影响
目的:研究槐定碱对内毒素(LPS)致急性肺损伤(ALI)小鼠血清中白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量的影响.方法:随机将60只KM小鼠分成6组:①正常组、②模型组、③槐定碱5mg/kg预防给药组、④槐定碱2.5mg/kg组、⑤槐定碱5mg/kg组、⑥槐定碱9 mg/kg组,每组10只.①、②、④、⑤、⑥组腹腔注射生理盐水0.5ml,连续6d.③组腹腔注射5mg/kg槐定碱,连续6d.上述②～⑥组均在末次注射生理盐水或药物后1h腹腔注射LPS 9mg/kg造模,造模2h后④～⑥组分别给槐定碱2.5mg/kg、5mg/kg、9mg/kg,4h后取材.结果:槐定碱组IL-6较模型组降低(P＜0.05),槐定碱组IL-10含量介于正常组与模型组之间(P＜0.01),NO、SOD、MDA结果显示:与模型组比较,给药四组氧化损伤均有明显改善,其中5mg/kg的槐定碱组效果较好.病理切片显示,模型组小鼠肺组织结构明显遭到破坏,槐定碱组较模型组有不同程度的改善.结论:槐定碱能降低ALI小鼠血清中IL-6、IL-10、NO、MDA的含量,提高SOD含量,改善肺脏病理损伤,具有抗ALI的作用.
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珠子参对小鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用
目的:珠子参醇提物对小鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用.方法:珠子参醇提物低、高剂量组(2.5,5.0g/kg)灌胃给药7d后制作大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血24小时后,观察进行神经症状评分、斜板试验,取大脑并用2,3,5-三苯基四氮唑染色后测定梗塞梗死面积和用失重法计算脑组织含水量;进行脑组织形态学学的检查和制作脑匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na+-K+-ATP、Ca2-Mg2+-ATP活性和乳酸(LD)、丙二醛(MDA)含量,光学显微镜观察小鼠脑病理变化,实时定量PCR技术检测SOD/GPX/CAT反应系统SOD1～SOD3、CAT和GPX1基因表达水平.结果:珠子参醇提物(2.5,5.0g/kg)能显著提高MCAO模型小鼠成活率,明显改善缺血小鼠的神经症状,降低脑梗死面积和脑含水量,改善脑组织病理变化;并能明显增加SOD、GSH-PX、CAT、Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,降低LDH活性和LD、MDA含量;并且脑组织SOD/GPX/CAT反应系统基因的表达水平明显上调,尤其是珠子参醇提物5.0g/kg剂量组.结论:珠子参醇提物(2.5,5.0g/kg)预处理对小鼠局灶性脑缺血损伤具有明显的保护作用,其机制可能是通过上调SOD/GPX/CAT反应系统的基因表达,从而减轻脑缺血诱导的氧化应激对脑的损伤.
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蛇葡萄素对人前列腺癌PC3细胞增殖与凋亡的影响
目的:研究蛇葡萄素对人前列腺癌PC3细胞的细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法:利用MTT比色法检测蛇葡萄索对PC3细胞的抑制作用,并计算IC50;流式PI单染法检测细胞周期;流式Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率.结果:蛇葡萄素能明显抑制PC3细胞增殖,并呈剂量依赖关系;使细胞增殖阻滞于S期,G0/G1期细胞数减少;蛇葡萄索对PC3细胞作用72小时后的凋亡率随剂量增加而加大.结论:蛇葡萄素显著抑制PC3细胞的增殖,引起细胞S期阻滞,诱导细胞凋亡.
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苍耳子及苍术苷对大鼠原代肝细胞的毒性作用研究
目的:研究苍耳子水提物及苍术苷对大鼠原代肝细胞的毒性效应,探讨其可能的毒性机制.方法:制备大鼠原代肝细胞,观察苍耳子水提物及苍术苷在不同时间点对肝细胞形态的影响,并测定不同时问点培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(ALB)及尿素氮(BUN)的含量.结果:药物作用24h后,各给药组肝细胞均出现不同程度的形态改变及死亡,并随时间的增加细胞死亡数量亦增加,48h时,苍术苷和水提物低浓度组仍可见少量活细胞,而水提物高浓度组肝细胞几乎已全部死亡.ALT和LDH在给药2h或24h出现升高,含量呈时间依赖性增加,ALB和BUN在给药2h出现降低,在所试时间内一直处于较低水平.结论:苍耳子水提物0.18、0.018 g原生药/ml及苍术苷44 μg/ml对大鼠原代肝细胞有明显的毒性.
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疏肝利胆颗粒对急性胰腺炎大鼠的保护作用
目的:研究疏肝利胆颗粒对急性胰腺炎大鼠的保护作用.方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、疏肝利胆颗粒低剂量(3g/kg)组、中剂量(6g/kg)组、高剂量(12g/kg)组.灌胃给予相对应剂量的药物,每天1次连续灌胃给药10d,正常组与模型组给予等量的生理盐水.造模前禁食12h,自由饮水.末次灌胃给药后1h,除正常组外,其余各组大鼠每次按1.5g/kg腹腔注射6％左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg),共3次,每次间隔1h,诱导急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠模型.末次腹腔注射给药后12h处置动物,分光光度法测定一氧化氮(nitric oxide,NO)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、诱生性NO合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、淀粉酶(amylase,AMS)的含量;放免法检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-1和IL-6的含量;HE染色法检查胰腺组织病理学改变.结果:与模型组相比,疏肝利胆颗粒中、高剂量(6g/kg、12g/kg)组血清中NO、NOS、iNOS、AMS、IL-1和IL-6的含量明显降低,胰腺组织损伤程度明显减轻.结论:疏肝利胆颗粒对急性胰腺炎大鼠有一定的保护作用.
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花仙宫血胶囊治疗功能性子宫出血的研究
目的:通过实验研究花仙宫血胶囊治疗功能性子宫出血的药理学依据.方法:用剪尾法及毛细玻管法、玻片法测定各组大、小鼠出、凝血时间,观察花仙宫血胶囊对大、小鼠出凝血时间的影响;通过扭体实验观察其镇痛作用;对成年去卵巢雌性小鼠灌服不同剂量的花仙宫血胶囊药液,采用放免法测定各组小鼠血清中的雌二醇(E2)和孕酮(P)的含量,观察药物对成年去卵巢雌性小鼠生殖神经内分泌的影响.结果:花仙宫血胶囊0.92g/kg、0.46g/kg、0.23g/kg 3个剂量组均能缩短大鼠凝血时间和出血时间,与空白组比较有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05);花仙宫血胶囊2.92g/kg、1.46g/kg 、0.73g/kg各剂量组均能明显缩短小鼠凝血,0.73g/kg剂量组缩短出血时间,与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05).花仙宫血胶囊2.92g/kg、1.46g/kg、0.73g/kg各剂量组对抗缩宫索引起的扭体次数均明显减少,与模型对照组比较有显著性差异(p ＜0.01,P＜0.05);花仙宫血胶囊2.92g/kg、1.46g/kg剂量组对抗醋酸诱导的小鼠的扭体次数明显减少,与模型对照组比较有显著性差异(p＜0.01).花仙宫血胶囊2.92g/kg、1.46g/kg、0.73g/kg各剂量组均能增加去势小鼠血清雌二醇和孕酮水平,与模型组比较,2.92g/kg剂量组雌二醇、1.46g/kg剂量组孕酮升高有显著性差异(P＜0.05,p＜0.01).结论:花仙宫血胶囊具有止血、镇痛和调节小鼠雌孕激素水平等作用.
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丹莪妇康煎膏对小鼠痛经模型的影响
目的:观察丹莪妇康煎膏对缩宫素诱发小鼠痛经的镇痛作用.方法:小鼠随机分为空白对照组、模型组、少腹逐瘀丸组、丹莪妇康煎膏高剂量组及低剂量组.除空白对照组外,其余各组小鼠灌胃给药同时灌服己烯雌酚,连续7天,末次给药30分钟后,除空白对照组外,其余各组小鼠腹腔注射缩宫素,观察小鼠离体子宫平滑肌收缩变化、小鼠30分钟内扭体反应次数,并检测小鼠血浆血栓烷B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α),血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及子宫组织一氧化氮(NO)、内皮素(ET)含量.结果:高剂量丹莪妇康煎膏(5.6g/kg体重)能显著抑制缩宫素诱导小鼠子宫平滑肌收缩,明显减少小鼠扭体次数,明显降低小鼠血浆TXB2、血清MDA及子宫组织ET值,明显升高血浆6-Keto-PGF1α及子宫组织NO水平,虽能使血清SOD值有升高的趋势,但无统计学意义;低剂量丹莪妇康煎膏(2.8g/kg体重)能明显抑制缩宫素诱导小鼠子宫平滑肌收缩张力,显著降低血浆TXB2水平,虽能使小鼠扭体次数、血清MDA和子宫组织ET值有下降的趋势,血浆6-Keto-PGF1α、血清SOD和子宫组织NO值有升高的趋势,但无统计学意义.结论:丹莪妇康煎膏对缩宫素诱导小鼠痛经模型有较好治疗作用,其作用可能与调节TXB2与6-Keto-PGF1α、NO与ET比值、抗氧化有关.
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丹黄保肝颗粒保肝利胆研究
目的:观察丹黄保肝颗粒对实验性肝损伤模型的改善作用及其利胆作用;方法:建立腹腔注射CCl4、D-半乳糖胺诱发小鼠急性肝损伤模型,观察受试药物的保肝作用;通过胆管插管引流法,观察受试药物对正常大鼠胆汁流量的影响;结果:丹黄保肝颗粒在0.5 ～2.0 g/kg剂量范围内,能明显抑制CCl4、D-半乳糖胺致肝损伤小鼠肝脏系数增大,降低血清ALT、AST水平,有效改善肝功能;同时药物也能明显提高CCl4所致肝损伤小鼠肝脏抗氧化功能,提高SOD活力,降低MDA含量;此外,丹黄保肝颗粒还能明显增加正常大鼠的胆汁流量,显示出利胆作用;结论:丹黄保肝颗粒具有较好的保肝利胆作用,其机制可能与提高机体抗氧化能力有关.
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麝香、冰片、薯蓣皂苷及栀子苷对大鼠脑缺血再灌注急性期炎性损伤的保护作用
目的:研究麝香、冰片、薯蓣皂苷及栀子苷对大鼠脑缺血再灌注炎性损伤的保护作用.方法:将165只大鼠分为假手术组、模型对照组、麝香、冰片、薯蓣皂苷及栀子苷大小剂量组,醒脑静组.各组预防给药4d后,采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注模型,缺血24小时后,考察麝香、冰片、薯蓣皂苷及栀子苷对缺血再灌注后对神经功能损伤的改善作用,脑组织环氧化物酶(COX-2)及5脂氧酶(5-LOX)活性的影响.结果:麝香50mg/kg组及冰片50mg/kg栀子苷30mg/kg组能明显改善神经损伤引起的行为学异常;麝香组、冰片25mg/kg组、薯蓣皂苷60mg/kg组及栀子苷60mg/kg组可降低缺血再灌注后脑内COX-2的活力;麝香组、冰片50mg/kg组及薯蓣皂苷、栀子苷60mg/kg组大鼠脑组织可明显降低缺血再灌注后脑内5-LOX活性.结论:麝香、冰片、薯蓣皂苷及栀子苷对脑缺血再灌注急性期炎性损伤有一定的保护作用.
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泰利心胶囊Ⅰ期临床人体耐受性试验
目的:评价健康受试者对泰利心胶囊的耐受性和安全性,为Ⅱ期临床试验给药方案提供依据.方法:选择健康受试者44例,随机进入7个单次给药组和2个连续给药组.单次给药组分别口服泰利心胶囊100mg、200mg、300mg、500mg、700mg、900mg、1200mg,连续给药组口服泰利心胶囊1次200mg和300mg,1天2次,服药7天.观察生命体征、实验室检查指标、临床症状和不良反应.结果:单次给药无不良反应,连续给药剂量组有轻微头痛的不良反应.结论:健康人体对泰利心胶囊耐受性较好,临床应用较安全,仅见轻微头痛.推荐Ⅱ期临床试验给药剂量范围是1次100mg～200mg,1天2次.
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葛根素注射液治疗急性脑梗死的Meta分析
目的:评价葛根素注射液治疗急性脑梗死的治疗效应和安全性.方法:检索PubMed、CNKI、维普中文科技期刊全文数据库及万方数据库,纳入葛根素治疗急性脑梗死的随机对照临床试验研究文献,采用Jadad评分标准评价纳入研究项目的质量,用RevMan5.0统计软件进行分析.结果:15篇文献共纳入受试者1603例.采用随机效应模型分析,葛根素治疗急性脑梗死与对照组比较总有效率具有显著差异[RR=0.16,95％CI(0.11,0.21),Z=6.04,P＜0.00001].采用固定效应模型分析,葛根素治疗急性脑梗死的神经功能缺损评分值与对照组比较具有显著差异[OR=-3.85,95％ CI(-4.24,-3.46),Z=19.33,P＜0.00001].结论:葛根素注射液治疗急性脑梗死疗效优于对照组治疗.但由于纳入的研究少、质量低,故尚不能得出完全肯定的结论,需高质量、大样本、多中心的随机研究进一步验证.
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活血化瘀类方抗肝纤维化疗效比较
目的:基于方证相对原理,通过肝肾纤维化方证数据库筛选分析,选择膈下逐瘀汤、复肝丸、燮枢汤、鳖甲丸4首方剂,观察他们对二甲基亚硝胺(DMN)大鼠肝纤维化的药效作用.方法:大鼠随机分为正常组、模型组、膈下逐瘀汤组、复肝丸组、燮枢汤组、鳖甲丸组和N-乙酰半胱氨酸对照药组.除正常组外,各组大鼠均以DMN10μg/kg腹腔注射,每天1次,每周连续3天,共4周.造模第3周开始给予相应药物灌胃:膈下逐瘀汤7.03g/kg、复肝丸6.43g/kg、燮枢汤12.51g/kg、鳖甲丸5.40g/kg,正常组与模型组给予等体积的生理盐水灌胃,每天1次,连续4周.试剂盒测定血清ALT、AST、γ-GT活性及Alb、T.Bil含量,盐酸水解法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,HE染色与天狼猩红染色观察肝组织炎症与胶原沉积情况.结果:与正常组比较,模型组大鼠体重明显降低,脾体比升高,腹水形成;血清ALT、AST、Tbil及肝组织Hyp含量明显升高,血清Alb明显降低;肝组织病理染色可见大量炎性细胞浸润、胶原纤维沉积明显,纤维间隔、部分假小叶形成.与模型组比较,复肝丸组、N-乙酰半胱氨酸组脾体比和ALT、Hyp含量等显著降低,肝细胞变性和炎症坏死明显减轻,胶原沉积明显减少,AST、Tbil、γ-GT无明显变化;膈下逐瘀汤组脾体比、ALT、Hyp含量等降低,但死亡率较高,肝组织病理炎症及纤维化程度均较重;燮枢汤组脾体比降低,其余指标无明显变化;鳖甲丸组脾体比降低,ALT、Hyp含量有所降低,但肝细胞变性、炎症坏死和胶原沉积无明显变化;结论:与N-乙酰半胱氨酸相似,复肝丸有较好的抗DMN大鼠肝纤维化作用.
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凉膈散对内毒素致急性肺损伤大鼠肺水肿的保护作用
目的:探讨凉膈散对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤肺水肿及肺水通道蛋白(aquaporin,AQP)1、5表达的影响.方法:大鼠随机分成LPS组、LPS+三个不同剂量凉膈散组、LPS+地塞米松组、对照组,LPS造模动物,又分为注射LPS后1、2、4、8、16 h不同时相处死组.各组大鼠在相应时间点处死后取肺组织测定大鼠肺水含量、肺系数以及观察肺组织形态学的改变,采用蛋白免疫印迹分析(Western blot)法和免疫组化法(SP)检测大鼠肺组织中AQP-1、AQP-5蛋白表达和分布情况.结果:与对照组相比,LPS组大鼠致损伤后2h,肺水含量、肺系数持续增高,肺组织内AQP-1、AQP-5表达开始下降,损伤4h后,AQP-1表达略有回升,而AQP-5表达随着损伤时间的延长持续降低;病理形态学显示肺泡隔增厚、肺间质及肺泡水肿,并有大量炎性细胞的浸润.与LPS组比较,凉膈散各剂量及地塞米松干预组大鼠病理损伤明显减轻,肺水含量、肺系数值显著降低(P ＜0.05,P＜0.01),肺组织内AQP-1、AQP-5表达显著增加(P ＜0.05,P＜0.01).结论:凉膈散对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺水肿有保护作用,其机制可能与上调急性肺损伤时肺组织内AQP-1、AQP-5蛋白的表达有关.
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参附汤血中移行成份对心源性休克大鼠血流动力学及能量代谢的影响
目的:观察参附汤血中移行成份对心源性休克大鼠血流动力学及能量代谢的影响.方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支(LAD)复制心源性休克模型,观察参附汤血中移行成份对麻醉大鼠血流动力学及能量代谢各项指标的作用;取心肌进行能量代谢相关酶的检测.结果:参附汤(3g/kg)、参附汤血中移行成份(相当于生药3g/ks)可升高左室内压(LVSP)、±dp/dtmax;提高休克大鼠心肌细胞ATP、ADP含量降低AMP含量,降低MOD含量.结论:参附汤及其血中移行成份对大鼠急性心源性休克具有一定的治疗作用并能调整心脏能量代谢.
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血府逐瘀胶囊对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响
目的:观察血府逐瘀胶囊对自发性高血压左心室肥厚大鼠心肌纤维化的影响.方法:32只14周龄雄性SHR随机分为4组,每组8只,分为模型对照组、血府逐瘀胶囊8g/kg、4g/kg及洛汀新组2mg/k8只作为正常对照组.每两周测量一次血压,给药14周后,测量左心室质量指数、左心室功能;采用H.E.、Masson染色法观察大鼠心肌组织病理形态学变化;电镜观察各组大鼠心肌超微结构.结果:与正常对照组相比,模型对照组血压和左心室质量指数明显增加(P＜0.05),心功能明显降低(P＜0.05).病理学检查显示,模型对照组心肌细胞肥大,水肿变性明显,排列紊乱,血管周围见增厚的纤维组织,心肌间质间见大量增生的纤维,肌原纤维、肌节变性坏死.与模型对照组比较,血府逐瘀胶囊8g/kg、4g/kg能明显降低左心室质量指数(P＜0.05),增加左心室舒缩功能(P＜0.05),改善心肌组织血管周围与间质胶原纤维增生.结论:血府逐瘀胶囊具有抑制高血压左心室肥厚大鼠心肌纤维化的作用.围与间质胶原纤维增生.结论:血府逐瘀胶囊具有抑制高血压左心室肥厚大鼠心肌纤维化的作用.
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冠心苏合胶囊含药血清对乳鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用
目的:采用血清药理学方法探讨冠心苏合胶囊对过氧化氢(H2O2)致心肌细胞过氧化损伤的保护作用.方法:血清药理学方法制备含药血清(0.8g生药/kg),体外培养原代乳鼠心肌细胞,随机分为正常对照组、空白血清对照组、H2O2损伤模型组、冠心苏合低、中、高剂量(5％,7.5％,10％)干预组,建立H2O2氧化损伤模型,以不同剂量的冠心苏合含药血清进行干预.MTT法测定细胞存活率,并检测各组心肌细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)的含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)及过氧化氢酶(CAT)的活性.结果:100μmol/L H2O2处理2h,原代乳鼠心肌细胞存活程度适中,模型制备的重复性较好;与H2O2单纯损伤组和空白血清对照组比较,冠心苏合低、中、高(5％,7.5％,10％)剂量干预组的心肌细胞有较高存活率(P＜0.01),且呈现一定的剂量依赖性;与正常细胞相比,H2O2损伤后MDA、LDH含量明显升高,T-SOD、CAT活性降低,而冠心苏合含药血清可剂量依赖性的降低损伤细胞MDA、LDH含量,升高CAT、T-SOD活性,结果具有显著统计学差异.结论:冠心苏合胶囊能够提高H2O2诱导的原代乳鼠心肌细胞存活率;下调MDA、LDH水平,上调CAT、SOD水平,对氧化损伤的心肌细胞起保护作用
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大秦艽汤抗炎作用研究
目的:研究大秦艽汤的抗炎作用.方法:分别采用冰醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加、二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足趾浮肿、大鼠棉球肉芽肿等炎症动物模型研究大秦艽汤对急慢性炎症的作用.结果:大秦艽汤30g/kg,15g/kg和7.5g/kg各剂量组均能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀,与模型组比较有显著性差异;30g/kg和15g/kg剂量组可以降低毛细血管通透性,吸光度值明显降低,与模型对照组比较有明显差异.大秦艽汤20g/kg,10g/kg和5g/kg各剂量组均可抑制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀,与模型对照组比较,大秦艽汤20g/kg剂量组在致炎后1、2、3、6h足跖肿胀率降低均有显著性差异;大秦艽汤各剂量组棉球肉芽肿重均较模型组大鼠低,与模型对照组比较,20g/kg剂量组有明显差异,能明显抑制大鼠棉球肉芽组织的增生.结论:实验结果提示大秦艽汤能明显减轻实验动物的急性炎症和慢性炎症,具有明显的抗炎作用.
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补中益气汤对脾虚大鼠胃粘膜TFF1mRNA与蛋白表达的影响
目的:观察脾虚大鼠胃粘膜TFF1mRNA与蛋白表达变化及补中益气汤对其表达的影响,并探讨相关作用机制.方法:SD大鼠随机分为空白对照、脾虚损伤、补中益气汤、非脾虚损伤组.脾虚损伤组、补中益气汤组大鼠给予100％大黄水煎剂灌胃,一天2次,连续10天.第11天补中益气汤组给予补中益气汤灌胃治疗7天.第18天,除空白对照组外,另三组灌服消炎痛溶液造成胃粘膜损伤,采用逆转录PCR(RT-PCR)检测TFF1mRNA,采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测TFF1蛋白表达的变化.结果:与非脾虚损伤组比较,脾虚损伤组大鼠胃粘膜TFF1mRNA、TFF1蛋白表达明显降低;与脾虚损伤组比较,补中益气汤组大鼠胃粘膜TFF1mRNA、蛋白明显上调.结论:脾虚大鼠消炎痛攻击后胃粘膜TFF1mRNA、蛋白表达显著下调,提示脾虚大鼠胃粘膜防御能力减弱,补中益气汤可提高脾虚大鼠消炎痛攻击后胃粘膜TFF1mRNA与蛋白的表达,这可能是补中益气汤保护胃粘膜,降低脾虚大鼠胃粘膜易损性的机理之一.
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麻黄-甘草药对的抗炎、利尿作用研究
目的:观察麻黄-甘草药对的抗炎、利尿作用.方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加实验、角叉菜胶致大鼠足肿胀、大鼠棉球肉芽肿实验观察麻黄-甘草药对的抗炎作用;采用麻黄-甘草药对对正常大鼠排尿量及电解质排泄的影响观察其利尿作用.结果:麻黄-甘草药对22.4、11.2、5.6g/kg灌胃,均能抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀;11.2g生药/kg、22.4g生药/kg灌胃,能抑制醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增加;22.4g生药/kg能抑制角叉菜胶注射后3h,5h,7h的大鼠足肿胀和大鼠棉球肉芽肿形成、增加大鼠排尿量及尿液中K+的排泄.结论:麻黄-甘草药对有抗炎、利尿作用.
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逍遥散抗抑郁作用的BDNF/CREB信号机制
目的:探讨逍遥散抗抑郁作用的BDNF/CREB信号机制.方法:采用小鼠慢性温和不可预知应激(CUMS)结合孤养抑郁模型,逍遥散水煎液30g/kg灌胃给药4周,测定小鼠体重、自主活动及糖水消耗量的变化以评价药物的抗抑郁效应.ELISA法测定血清BDNF水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)测定小鼠海马及皮质部位CREB、BDNF mRNA表达,Western-blot方法测定小鼠脑内ERK1/2及磷酸化ERK1/2(pERK1/2)的蛋白表达量.结果:与模型组比较,逍遥散30g/kg能提高模型小鼠体重、自主活动及糖水消耗量,并有提高模型动物血清BDNF含量的趋势;逍遥散30g/kg显著增加模型小鼠海马BDNF、CREB mRNA及皮质BDNF mRNA的表达量,对模型动物海马部位pERK1/2的表达量有提高趋势.结论:逍遥散对CUMS结合孤养的小鼠抑郁模型具有抗抑郁效应,作用机制与干预BDNF/CREB信号途径的关键分子的表达与功能有关.
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微孔比浊法测定牛黄上清片的抗菌效价
目的:建立牛黄上清片抗菌效价的微孔比浊法.方法:采用L9(34)正交表制备牛黄上清片供试品溶液,采用二倍微孔等倍稀释法,测定各供试品溶液对6种标准菌株的MIC和MBC,确定供试品溶液的制备方法和试验菌株;考察二倍微孔等倍稀释法中培养基pH、板位等因素对抗菌结果(OD值)的影响;按照《中国药典》2010年版(二部)抗生素微生物检定法的比浊法原理,确定黄芩苷+栀子苷(5:2)为参照药物,以0.035g/ml(规定为1000 U/ml)为中心浓度,按剂距0.8配制终浓度,以二倍微孔等倍稀释法测定各溶液的OD差值,绘制黄芩苷+栀子苷(5∶2)的量-效标准曲线,计算方程式;进行稳定性、重复性和平均回收率试验;对3各厂家的牛黄上清片进行效价测定,确定效价限度.结果:牛黄上清片水煎醇沉法1.6号供试品溶液(10倍量水煎1.5小时,醇沉浓度为50％)对金黄色葡萄球菌的抗菌作用强.培养基pH和板位对OD值的影响不大,选用pH7.0为培养基pH;黄芩苷+栀子苷(5:2)的中间浓度为0.035g/ml,其浓度在0.016 ～0.08g/ml范围内,光密度和溶液浓度对数呈较好的线性关系,标准曲线回归方.程为y =-0.3291X-0.3978,r2 =0.9738.误差项S2=0.0612,标准误差Sm =0.078,R的平均β的可信限率FL％ =11.34％;供试品在5h内稳定性良好,RSD(％)为5.14;供试品重复性良好,RSD(％)为8.68;平均回收率为100.41％,RSD=1.9;由黄芩苷+栀子苷标准曲线方程计算得出,三个厂家的牛黄上清片效价分别为1431.03U/g、1396.55U/g、1448.28U/g.结论:牛黄上清片供试品的制备方法为:取牛黄上清片20片,去除糖衣,用乳钵碾成细粉.精密称取本品10g,加水200ml煎煮1.5h,过滤,滤液加乙醇使含醇浓度50％,沉淀过夜,过滤,滤液浓缩,用灭菌PBS液定容至10ml,即得.使用前用0.22μm微孔滤膜过滤.参照药物溶液的制备方法为:精密称取黄芩苷3.5714g和栀子苷1.4286g混匀,置于10ml的容量瓶中,加适量的无菌PBS溶解完全,稀释至刻度,做为标准品储备液,4℃保存,备用.试验菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923,培养时间为6小时.测定方法为:配制pH值7.0抗生素Ⅲ号培养基和选取金黄色葡萄球菌标准菌株按照微孔比浊法测定抗菌效价,可信限率不得大于12％.本品每1g的效价不得少于1100黄芩苷和栀子苷5∶2混合物单位.所建立的微孔比浊法用于牛黄上清片抗菌效价的测定,方法简便,稳定性、重复性和回收率好,基本符合抗生素微生物比浊法的要求.
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蟾毒灵抗肿瘤作用机制研究进展
蟾毒灵是蟾酥的主要活性成分之一.现代药理研究表明蟾毒灵具有高效、多靶点的抗肿瘤作用,可抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤血管生成、诱导肿瘤细胞自噬、调节机体免疫功能等.本文就近年来国内外有关蟾毒灵的抗肿瘤作用及其相关机制进行综述.
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丁苯酞脑缺血治疗作用的相关药理学研究进展
丁苯酞是治疗脑缺血等脑部疾病的一种疗效显著的药物,临床主要用于治疗轻、中度急性缺血性脑卒中等心脑血管疾病.近十多年来国内外大量实验证实丁苯酞可阻断缺血性脑卒中所致脑损伤的多个病理环节,具有较强的抗脑缺血作用、明显缩小大鼠局部脑缺血的梗塞面积、减轻脑水肿、改善脑能量代谢和缺血脑区的微循环和血流量、抑制神经细胞凋亡,以及抗脑血栓形成和抗血小板聚集等药理作用.本文就丁苯酞的药理作用、药代动力学、临床应用等面进行综述及展望.
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姜黄素的药理作用及在治疗膀胱癌中的研究进展
膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,目前研究发现对其发生机制研究及治疗新药物的发现是解决膀胱癌临床治疗的根本途径.而姜黄的主要有效成分姜黄素具有抗纤维化、抗肿瘤、抗突变、抗炎症、抗微生物、抗氧化、降血脂和抗动脉粥样硬化等诸多药理作用.本文综述目前姜黄素及其在膀胱癌的应用研究进展.
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柴胡、黄芩抗肝纤维化研究进展
慢性肝病在我国发病率较高,并呈上升趋势.肝纤维化是多种慢性肝病发展成肝硬化的重要阶段[1],临床如能在肝纤维化早期采取抗纤维化措施,有可能使之停止发展或逆转.中医药抗肝纤维化具有独特疗效,多采用舒肝理气、活血化瘀类中药,显示良好抗肝纤维化疗效,对于多种慢性肝病治疗有积极意义[2].经典名方小柴胡汤是临床治疗肝病常用的方剂,具有确切的抗肝纤维临床疗效[3].柴胡和黄芩是小柴胡汤的重要功能药对,也是临床治疗肝肝纤维化多个方药的核心组成_].柴胡具有疏肝解郁、解表退热等功效,在临床用于治疗多种肝病.黄芩具有清热燥湿,泻火解毒等功效,也具有保肝护肝的药理效应,多项研究表明,柴胡、黄芩均具有确切的保肝和抗肝纤维化作用.
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赶黄草的药学研究和应用
赶黄草长期以来被用于改善饮酒和药物所致的肝脏损害.现代研究表明,赶黄草中主要含有黄酮、生物碱、多糖等成分,具有清热利湿、活血、解毒、平肝、健脾等作用.已有的药学研究方法已对赶黄草中活性成分及药理作用进行不断的探究,为赶黄草的应用开辟广阔前景.本文重点针对赶黄草的生药学、化学成分、药理作用以及其临床应用等药学方面的研究进行概述,为进一步深入研究和开发利用赶黄草提供理论依据和实践指导.
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高交感活性诱导心肌损伤氧化应激受体依赖机制研究
目的:研究高交感活性诱导心肌氧化应激损伤受体依赖途径.方法:MTT法确定NE、H2O2诱导心肌细胞损伤模型,以心肌细胞存活率为60％确定NE、H2O2的浓度及作用时间;以普萘洛尔(Pro)、哌唑嗪(Praz)、维生素E(VE)为反向药物探针,以心肌细胞形态变化、MTT法、LDH活力及外漏率分析、SOD活力与MDA水平为检测指标,分析三者相互作用对NE诱导的心肌细胞损伤的保护作用.结果:NE在1μmol/L作用24h细胞存活率在60％,Pro、Praz、Pro+Praz(各1μmol/L)、Pro+Praz +VE(1+1+20μmol/L)及VE(20μmol/L)均能降低细胞损伤,提高SOD,降低MDA;而Pro+Praz对H2O2(200μmoL/L)引起损伤未见明显保护作用,相反VE对H2O2及NE诱导的损伤均具有保护作用.结论:受体依赖是高交感活性诱导心肌氧化应激损伤的重要途径.
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长期高糖高脂饮食对大鼠血压及肝肾功能的影响
目的:结合高血压与长期高糖高脂饮食的密切联系,采用动物长期高糖高脂饲料喂养,以期得到接近人类病症的生活性高血压动物模型.方法:采用SD大鼠长期高糖高脂饲料(普通饲料、蔗糖、猪油、胆固醇、胆盐按一定比例配比制成)喂养,每天正常饮水,连续30周,建立生活性高血压大鼠模型.于造模0、6、15、21、30周分别采用无创尾动脉法测定大鼠收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP);于8、10、12、18、20、24周取血,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)水平;于7、9、11、16、19、22周进行尿代谢,收集4h尿液,测尿Cr、UA水平.结果:大鼠高糖高脂饲料喂养6周则血压开始明显升高,15周收缩压达到160mmHg;大鼠高糖高脂饲料喂养12周血清ALT、AST、GGT、ALP、TP、ALB、UA、Cr水平升高(P＜0.01～0.05),9周时尿液UA水平降低(P ＜0.01～0.05),16周时尿液Cr水平降低(P ＜0.01～0.05),提示肝肾功能生化指标出现紊乱;大鼠高糖高脂饲料喂养10周血清中TC、TG含量升高,提示血脂生化指标出现紊乱.结论:采用长期高糖高脂饲料喂养造模法,连续造模15周以上能使SD大鼠的血压升高到一定程度,达到轻、中度高血压水平,同时还能造成肝肾损伤以及血脂异常等伴随症状.
关键词： 高血压模型肝功能肾功能高糖高脂 -
猪的冠状动脉内皮细胞体外培养方法
目的:建立实验小型猪的冠状动脉内皮细胞体外培养方法.方法:冠状动脉血管块短暂酶消化后采用植块法进行培养.结果:植块培养2日细胞从植块中移出;培养6日植块周围细胞呈铺路石样特征,传代/纯化一次后5日细胞单层贴壁生长,融合成片.细胞因子Ⅷ免疫荧光检测内皮细胞表达阳性,纯度100％.结论:成功建立猪冠状动脉内皮细胞体外培养方法,此方法操作简单、快速,得到细胞纯度高.
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大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的动态变化
目的:探索大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤严重的时间点,确定开展发病机制及药理学研究合适的时间窗.方法:制造线栓法阻塞大脑中动脉致大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO),缺血后2h再灌注,术后动态观察大鼠的状态,神经行为学,脑梗死比率和血液中的相关生化指标.结果:模型大鼠的病理损害具有明显的时相性,随着时间的推移逐渐加重,于48h达到高峰,96h时病理损害仍然存在,但明显减弱;在脑缺血第48h时,脑梗死比率、神经行为学和血清中脂质过氧化指标等病理损害均比较严重,且动物的体重和状态开始下降.结论:MCAO大鼠脑缺血后第48h时适宜于开展发病机制及药理学研究,且雄性SD大鼠更适宜制作该模型.
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维吾尔医买朱尼治疗48例子宫腺肌病临床疗效观察
目的:探讨维吾尔医治疗子宫腺肌病的疗效.方法:对48例子宫腺肌病患者用维吾尔医观察治疗3个月前后的症状、体征变化、对其追踪随访,B超复查.结果:48例患者总有效率为87.5％,治愈率为29.2％,显效率62.5％.治疗后临床症状、体征消失或明显改善,痛经明显缓解,月经量明显减少,子宫内膜厚度明显变薄,治愈的患者子宫体积与放置前比较,显著性变化.结论:维吾尔医药治疗方法可有效缓解内异症(腺肌病)患者痛经等临床症状,治疗该病的药物和治疗方法是安全有效.
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痛风及其动物模型研究初探
近年来随着我国人民生活水平的提高,痛风和高尿酸血症的发病率逐年上升,本文主要探讨痛风的发病机制及动物模型选择上进行了系统的综述,并且对其中存在的问题进行了阐释.
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地锦草有效部位对红色毛癣菌羊毛甾醇生物合成的影响
目的:研究地锦草有效部位对红色毛癣菌中羊毛甾醇含量的影响.方法:样品在24孔板中培养七天,经皂化提取、甲醇定容后,采用高效液相色谱法进行定量测定.结果:地锦草有效部位浓度小为32 μg/ml能使真菌中的羊毛甾醇含量发生蓄积(P＜0.01),在32μg/ml～128μg/m1之间有明显的剂量依赖性.结论:地锦草有效部位可使真菌中羊毛甾醇蓄积,导致细胞膜毒角甾醇的合成受阻来发挥其抗真菌作用.
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维医成熟剂和清除剂治疗166例进展期白癜风疗效观察
目的:观察维吾尔医成熟剂和清除剂治疗进展期白癜风的临床疗效.方法:对116例进展期白癜风患者分步使用成熟剂和清除剂,比较患者白斑总面积和色素点总面积与入院时的情况.结果:与入院时比较,使用成熟剂和清除剂后患者的白斑平均总面积明显缩小(P＜0.001),白斑区明显色素再生(P＜0.001).结论:成熟剂和清除剂对控制白斑的扩散有显著的作用.
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维吾尔药高孜斑糖浆治疗心律失常60例临床观察及安全性评价
目的:观察维药高孜斑糖浆治疗心律失常的临床疗效及安全性.方法:采用非药物治疗的同时给予复方高孜班糖浆,根据病情为其传输阿瓦依奈斯米(Awayi nasmi)给予低流量氧气,总疗程28±3天.结果:维药高孜斑糖浆治疗心率失常有明显的疗效,治疗后可使心电图改变、临床症状得到明显改善.
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土大黄化学成分及药理作用研究进展
土大黄在我国民间已有悠久的入药历史,主要的化学成分为蒽醌类、黄酮类、二苯乙烯类等,现代药理研究表明,土大黄具有抑菌、止血、抗肿瘤和抗氧化等作用,具有极大的开发价值.本文拟对近年来有关土大黄的化学成份和药理活性研究进展进行系统地综述,以期为今后的研究能够有所启示和帮助.
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依提菲力白热斯蜜膏对A375黑色素瘤细胞的增殖、酪氨酸酶活性、黑色素合成的影响
目的:研究维吾尔医经典方剂依提菲力白热斯蜜膏(简称蜜膏)对A375人黑素瘤细胞株细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成的影响,探讨验方治疗白癜风的配伍组成含义.方法:蜜膏按维吾尔医拆方,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定对细胞增殖的影响,用酶学方法测定对酪氨酸酶活性的影响;比色法测定对黑素含量的影响.结果:蜜膏全方组(主药+辅助药+调解药)对A375细胞的增殖促进作用强,其次为主药组;主药组对酪氨酸酶活性上调作用强,其次为(主药+调节药)组;主药组对黑素合成具有较强的促进作用,其次为(主药+调解药)组.结论:依提菲力白热斯蜜膏对A375人黑素瘤细胞株促进细胞增殖、酪氨酸酶活性增强和黑素含量增加作用.
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土大黄提取物中蒽醌类成分的含量测定及其对ECV-304细胞的增值作用
目的:探讨土大黄不同乙醇提取物对ECV-304细胞的生长抑制作用.方法:采用HPLC法测定土大黄提取物中蒽醌类成分的含量;采用培养的ECV-304细胞,应用MTr比色法分析其活性;用光学显微镜观察细胞的形态学变化.结果:土大黄95％乙醇提取物总蒽醌成分可充分提取;在0.025～ 10 μg/ml范围内,除水提物外均能明显抑制ECV-304细胞的增值.结论:土大黄95％乙醇提取物中蒽醌类成分的含量及其对ECV-304细胞的抗增殖作用明显优于其他提取物.
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艾菲提蒙汤对动脉粥样硬化大鼠的抗氧化作用
目的:研究艾菲提蒙汤对动脉粥样硬化大鼠抗氧化作用的影响.方法:采用高脂乳剂灌胃给予大鼠,造成动脉粥样硬化大鼠模型,分别采用治疗给药和预防给药两种方式,研究艾菲提蒙汤对动脉粥样硬化大鼠血清MDA、T-SOD、GSH-PX、NO的影响.结果:艾菲提蒙汤在3.0g/kg～12.0g/kg剂量范围内,可明显降低MDA、NO水平.结论:艾菲提蒙汤具有显著地抗氧化作用,这可能是其抗动脉粥样硬化作用机制之一.
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鹰嘴豆总皂苷对2型糖尿病大鼠的抗氧化作用
目的:观察鹰嘴豆总皂苷(TSCA)对2型糖尿病大鼠抗氧化作用的影响.方法:以高脂饲料喂养后的雄性Wister大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病模型,造模动物分别灌胃给予鹰嘴豆总皂苷低剂量100 mg/kg、高剂量300 mg/kg,4周后,测定各组大鼠肝脏、肾脏、肺、骨骼肌等组织中相关抗氧化指标.结果:与糖尿病模型组相比,鹰嘴豆总皂苷100 mg/kg、300mg/kg剂量均能升高肝脏、肾脏、骨骼肌、肺组织中的TSOD、GSH-Px活力,升高肝脏、肾脏、骨骼肌中CAT活力,降低MDA含量,降低肺组织中的CAT活力.结论:鹰嘴豆总皂苷能够改善2型糖尿病大鼠的抗氧化能力.
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维医药综合治疗与白癜风患者神经内分泌免疫功能的相关性研究
目的:探讨维医药综合治疗白癜风及其对患者神经内分泌免疫功能的相关性.方法:白癜风患者采用维医药综合治疗方法,进行治疗前、中、后疗效及安全性评价,采用酶联免疫吸附试验测定治疗前或用药前、用药后患者血清5-HT等15项神经内分泌免疫因子水平,并与正常人对照组比较;同时心理干预前后测定血清CRH、ACTH、CORTIS水平并与正常对照组比较.结果:维医对白癜风临床痊愈率11.4％、显效率49.3％、有效率33.1％、无效率6.2％,总有效率为93.8％,其中成熟剂和清除剂对控制白斑的扩散有显著的作用(P＜0.01).入组患者治疗前ANG-Ⅱ、EP-β、IFN-γ、sICAM-1、5-HT、IL-10、IgG抗体、NE、Cortisol、E的浓度显著高于对照组(P＜0.01),而TNF-α、IL-8、IL-2、IL-6浓度低于对照组(P＜0.01);治疗后5-HT、IL-10、sICAM-1、EP-β、E等指标较治疗前降低(P＜0.05),IFN-γ、NE、ACTH、IgG抗体等指标较治疗前升高(P＜0.05);心理干预后,干预组HAMA、HRSD评分低于对照组.结论:白癜风发生和发展过程是一个神经内分泌免疫网络的综合效应过程,这与维医自然力失调致白癜风理论相映,是一种失衡的状态,而疾病的发展是这种状态的升级,其产生与存在反馈抑制代谢补偿等动态效应过程;维医药对白癜风具有独特的疗效,心理干预提高维医药对白癜风的治愈率.
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维吾尔医药治疗315例小儿呼吸系统疾病
目的:观察维吾尔医治疗小儿呼吸系统疾病的临床疗效.方法:采用维吾尔医药物及物理疗法进行315例小儿呼吸道疾病的治疗,一个疗程为10～14天.结果:315例患儿中全部治愈255例,好转47例,总有效率96％,治疗期间未见任何毒副作用.结论:维吾尔医治疗小儿呼吸系统疾病具有良好临床疗效.
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维吾尔药卡巴比其尼洗液治疗150例糖尿病周围神经病变症状的临床疗效观察报告
目的:以使用雏药卡巴比其尼洗液对糖尿病周围神经病变(DPN)主观症状的疗效观察为研究对象,在前期治疗工作的基础上,针对维吾尔医药卡巴比其尼洗液进行临床观察,评价维吾尔医药卡巴比其尼洗液对DPN主观症状的临床效果.方法:采选维医理论基础下寒性和热性糖尿病引起的150例周围神经病变的患者,采用治疗前后症状自身对照方法评价临床疗效.结果:卡巴比其尼洗剂对糖尿病周围神经病变的症状有显著疗效,临床痊愈32.7％,显效15.3％,有效44.7％,无效7.3％,总有效率92.7％.
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白癜风与外周血象的关系
目的:探讨白癜风与外周血象的关系.方法:将87例白癜风患者和100例健康人分别进行外周血象(红细胞及其分类、白细胞及其分类、血小板及其分类)检测.结果:与健康人组比较,白癜风患者组RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC均降低(P＜0.05),RDW-SD升高(P＜0.05);WBC、LYMP、NEUT均降低(P＜0.05);PDW升高(P＜0.05).结论:与健康人比较,白癜风患者外周血象有差异,其中红细胞及其分类上差异较明显.
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一枝蒿有效部位抗乙肝病毒作用研究
目的:研究一枝蒿有效部位体内外抗乙肝病毒的作用.方法:采用2.2.15细胞模型,以HBV-DNA、HbsAg及HBeAg 作为药效评价指标,研究一枝蒿有效部位体外抗乙肝病毒的作用;体内实验采用DHBV-DNA阳性鸭血清感染雏鸭,建立鸭乙型肝炎病毒感染模型,一枝蒿有效部位12.5、25和50 mg/kg灌胃给药14天,以HBV-DNA作为药效评价指标,研究其体内抗乙肝病毒的作用.结果:体外实验一枝蒿有效部位0.59 ～ 16.05μg/ml对2.2.15细胞HBV-DNA(抑制率9.02％)、HbsAg(抑制率35.31％)、HbeAg(抑制率11.58％)具有一定的抑制作用;体内实验一枝蒿有效部位50 mg/kg可显著降低鸭血清DHBV-DNA水平.结论:一枝蒿有效部位具有一定的体内外抗乙肝病毒作用.
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高良姜血清药物化学研究
目的:研究高良姜的血清药物化学.方法:在建立高良姜高效液相指纹图谱的基础上,通过比较高良姜给药与未给药大鼠血清的HPLC指纹图谱,分析入血成分,进一步对原药材进行分离纯化,富集入血成分,进行结构鉴定.结果:有1个原型入血成分,确认高良姜素为高良姜入血成分.结论:高良姜素可能为高良姜的直接作用物质和药效物质基础.
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维药艾菲提蒙汤治疗原发性高血压的临床疗效与安全性评价
目的:观察维药传统方剂艾菲提蒙汤对原发性高血压病患者的临床疗效,对该方剂的有效性及安全性进行科学客观的评价.方法:采用自身前后对照方法,对患者100例原发性高血压病患者进行维吾尔医辨证分型,观察服用艾菲提蒙汤后的疗效.结果:50例病例中动态血压显效率为2.0％、有效率为94.0％、无效率4.0％、加重率0.0％;实验室安全性评价指标治疗前后均值都处在该指标正常参考值范围之内.结论:艾菲提蒙汤治疗原发性高血压有明显疗效,药物未引起显著的副作用和不良反应.
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祛风湿药抗炎作用的文献再评价
目的:对祛风湿药抗炎作用的可靠性进行文献再评价.方法:选择《中药药理学》教材具有抗炎作用的祛风湿药作为再评价对象,通过查阅、整理和分析2012年以前公开发表的各位药抗炎作用的原始研究文献,根据重复和综合评价等原则,自拟中药抗炎作用的评定标准,对祛风湿药的抗炎作用进行文献再评价,以确定其可靠性.结果:雷公藤、秦艽、威灵仙抗炎作用确切,羌活、稀莶草、防已有一定抗炎作用,木瓜、青风藤、五加皮、独活实验依据不足,臭梧桐未见相关研究文献.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 06 |
| 2010 | 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 03 04 05 06 |
