中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位: 国家中医药管理局
- 主办单位: 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子: 1.62
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1005-9903
- 国内刊号: 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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佛手挥发油的抗抑郁作用机制探讨
目的:在探讨佛手挥发油对慢性应激所致大鼠抑郁模型(CUMS)的干预作用.方法:90只Wistar大鼠随机分为6组,每组15只,分别为空白对照组、模型组、阳性药组(10 mg? kg -1氟西汀ig 21 d)、佛手挥发油低、中、高剂量(150,300,600mg?kg-1佛手挥发油ig21 d).除空白对照组外,其余5组大鼠经历21 d慢性应激造成抑郁模型,各组大鼠造模同时给予相应药物.21 d慢性应激后以糖水偏爱和旷场测试测定动物的行为变化,放免法测定大鼠血清中皮质酮(CORT)水平,蛋白免疫印迹法测定脑组织神经营养因子(BDNF)的蛋白表达水平.结果:与正常组大鼠比较,模型组经过慢性应激3周后大鼠糖水偏好由(88.1±13.3)%降至(60.5±9.8)%旷场水平评分及垂直评分分别由(123.5±21.3)和(38.2±5.9)降为(72.5±12.7)和(17.1±5.1),表明慢性应激导致大鼠产生抑郁样行为;同时,抑郁大鼠的血清CORT水平由(42.1±7.7) μg?L-1增加为(117.6±19.3) μg?L-1,海马BDNF表达水平由(0.22±0.04)降为(0.07±0.02).佛手挥发油干预治疗后能呈剂量依赖地改善由慢性应激所致的大鼠抑郁行为及生化指标改变.其中300,600 mg?kg-1佛手挥发油组糖水偏好分别为(70.7±10.2)%和(77.1±11.9)%,与抑郁组比较有显著的统计学差异(分别为P<0.05和P<0.01);150,300,600 mg?kg-1佛手挥发油组旷场水平评分分别为(87.7±15.4),(98.3±19.7),(110.3±28.9),与抑郁组比较有显著差异(P <0.05,P<0.01);300,600 mg?kg -1佛手挥发油组旷场垂直评分分别为(24.5±6.3),(29.2±7.2),与抑郁组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01);皮质酮浓度分别为(90.1±13.5),(77.5±10.7) μg?L-1,与抑郁组比较有显著差异(P <0.05,P<0.01);300,600 mg?kg-1佛手挥发油组海马BDNF相对含量为(0.15±0.03)和(0.18±0.03),与抑郁组比较有显著的统计学差异(分别为P<0.05和P<0.01).结论:佛手挥发油的抗抑郁作用机制可能与调节血清CORT水平和海马组织BDNF表达水平有关.
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猴头菌粉提取物对2型糖尿病小鼠降血糖作用研究
目的:研究猴头菌粉提取物的降血糖活性.方法:健康雄性昆明小鼠,以4周高脂饮食诱发胰岛素抵抗,并以ip链脲佐菌素(STZ) 170 mg?kg-1以诱发2型糖尿病.模型小鼠随机分组,ig给予猴头菌粉各部位提取物21 d,测定空腹血糖以筛选猴头菌粉降血糖活性部位,对筛选出的活性部位进行口服糖耐量实验.并于HE染色后,在光镜下观察其对糖尿病模型小鼠肝、肾、胰腺的组织形态学影响.结果:猴头菌粉多糖能对抗糖尿病小鼠体重减轻的症状,给予猴头菌粉多糖的14,21 d小鼠血糖值与模型组相比较均出现非常显著性下降(P<0.01).猴头菌粉多糖(400 mg?kg-1)能提高糖尿病模型小鼠的葡萄糖耐受量,并能对抗糖尿病导致的肝、肾、胰脏病变.结论:猴头菌粉多糖具有降血糖活性,且其提高糖耐量、保护脏器作用呈现一定的量效关系.
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柴朴汤对支气管哮喘大鼠气道重塑及肺组织中α-平滑肌肌动蛋白表达的影响
目的:观察支气管哮喘大鼠气道重塑和α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)在哮喘大鼠模型中的动态表达及柴朴汤的干预作用.方法:将70只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、柴朴汤干预组,用卵蛋白(OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型,采用HE染色的方法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学方法研究肺组织气道形态学参数的改变及α-SMA的表达.结果:①哮喘2,4,8周组总管壁面积( WAt/Pbm)、内壁面积(WAi/Pbm)及平滑肌面积(Wam/Pbm)均高于对照组(P<0.05),且随着激发天数的增加,上述指标有增加的趋势,哮喘4周组高于2周组,哮喘8周组高于4周组(均P <0.05);柴朴汤2,4,8周组,哮喘2,4周组WAt/Pbm,WAi/Pbm,Wam/Pbm均低于哮喘8周组(均P<0.05),但柴朴汤组高于对照组.②哮喘2,4,8周组的α-SMA的mRNA和蛋白水平明显高于柴朴汤2,4,8周组及对照组(均P<0.05);α-SMA的mRNA和蛋白水平随激发天数的增加而明显增加(均P <0.05);柴朴汤2周组的α-SMA的mRNA和蛋白水平与对照组相比,差异没有显著性;柴朴汤各周组与哮喘各相应周组比较,差异有显著性(P<0.05).结论:哮喘大鼠肺组织α-SMA呈动态过量表达.柴朴汤可通过下调α-SMA表达,抑制气道平滑肌收缩及增生抑制气道重构.
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复方脑康胶囊对D-半乳糖老化小鼠海马神经元凋亡级联反应的影响
目的:观察复方脑康胶囊水提液对D-半乳糖老化小鼠海马神经元凋亡级联反应的影响.方法:将小鼠随机分为5组:正常对照组(E组),D-半乳糖模型组(D组),复方脑康胶囊高、中、低剂量组(A,B,C组).每日sc D-半乳糖60 mg.kg-1造模,给模型小鼠复方脑康胶囊水提液(0.65,0.35,0.15g?kg-1 )ig,连续3个月.用免疫组织化学染色方法和Western blotting检测海马神经元凋亡诱导因子(AIF),Bax,细胞色素C(Cyt C)及Bcl-2的表达.结果:Western blotting结果显示,模型组Cyt c,Bax,Bcl-2表达量较正常对照组减少,而药物组表达量与正常对照组相似.免疫组织化学染色结果显示,模型小鼠海马神经元AIF,Bax,Cyt C的阳性细胞数分别比正常对照小鼠增加,而Bcl-2则比正常小鼠减少.与模型组相比,复方脑康胶囊水提液高、中、低3种不同剂量模型小鼠海马神经元AIF阳性细胞数从(24.7±6.1)个降低为(8.9±1.82),(12.6±4.51),(13.2±5.71)个;Bax阳性细胞数从(47.8±9.7)个降低为(11.2±3.2),(29.4±8.2),(31.1±6.3)个,Cyt C阳性细胞数从(36.7±9.1)个降低为(12.1±3.2),(20.2±6.8),(25.2±7.1)个,Bcl-2阳性细胞数从(10.4±6.4)个增加为(59.5±7.4)个,(48.6±9.2)个,(32.3±7.0)个.结论:复方脑康胶囊对D-半乳糖老化小鼠的海马神经元凋亡级联反应具有一定的改善作用.
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芦荟及其复方提取物对RAW264.7细胞炎症因子的影响
目的:观察芦荟及其复方提取物对小鼠巨噬细胞炎症因子的影响.方法:RAW264.7细胞按2×105/mL稀释,100μL/孔接种入96孔板,药物质量浓度为250,125,62.5 g?L-1下采用噻唑蓝比色法(MTT法)作用4h,检测芦荟及其复方提取物对小鼠巨噬细胞的毒性作用;药物质量浓度为50,25,12.5 g?L-1下采用硝酸还原酶法作用24 h,测定小鼠巨噬细胞一氧化氮(N0)含量,并用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定其在单纯药物及脂多糖(LPS)1 mg?L-1诱导情况下小鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)的含量.结果:芦荟及其复方提取物具有促进巨噬细胞释放NO的作用,并与药物浓度成正相关(P<0.01);芦荟有促进TNF-α分泌(P<0.01)和抑制IL-10分泌(P<0.05)的作用,其复方在LPS诱导下则对TNF-α和IL-10都有抑制作用(P<0.01).结论:芦荟在250~7.8 g?L-1下对臣噬细胞无细胞毒性,其复方则有一定毒性;芦荟及其复方对小鼠巨噬细胞炎症因子的释放有一定影响.
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大蒜3个有效部位配伍对3种人胃癌细胞的杀伤作用
目的:观察大蒜3个有效部位组合物对3种人胃癌细胞的杀伤作用,筛选有效部位组合物佳配伍比例.方法:以大蒜3个有效部位(大蒜油、大蒜总多糖、大蒜总皂苷)为研究对象,选用L16(45)正交表设计分组、给药,以胃癌细胞代谢MTT活力(抑瘤百分率)作为考察指标,采用SPSS软件对实验数据进行处理.结果:大蒜3个有效部位对MKN45细胞杀伤作用的主次顺序为大蒜油(1#)>大蒜总多糖(2#)>大蒜总皂苷(5#),其佳配比为1 #∶2#∶5#=1∶20∶10.大蒜3个有效部位对AGS细胞抑制率影响无明显差别,其佳配比为1#∶2#∶5#=1∶13.3∶3.3.大蒜总皂苷对人胃癌HGC-27细胞抑制率的影响显著(P<0.01),影响的主次顺序为大蒜总皂苷>大蒜油>大蒜总多糖,其佳配比为1#∶2#∶5#=1∶200∶50.结论:3种人胃癌细胞对大蒜3个有效部位组合物的杀伤作用的敏感性不同,3个有效部位组合对3种人胃癌细胞杀伤作用的佳配比浓度亦不相同.
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射干提取物含药血清对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响
目的:研究射干提取物含药血清对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响.方法:取豚鼠气管,在Kreb's液中制备气管平滑肌螺旋条,于恒温浴槽装置中,加入组胺(His)使其收缩,观察加入射干提取物含药血清后3,5,10 min的解痉率.结果:射干提取物含药血清对组胺引起的气管平滑肌收缩反应有一定拈抗作用,其中剂量(0.46 g?kg-1)3,5,10 min解痉率分别为44.29%,45.27%和48.30%;高剂量(0.92 g?kg-1)3,5 min解痉率分别为31.17%和31.83%,与空白对照组比较有显著性差异(P <0.05或P<0.01),药物与标本接触5 min效果好.结论:射干提取物含药血清对His引起的气管平滑肌收缩反应具有一定的拮抗作用.
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消渴丸中药成分对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究
目的:研究消渴丸中药成分对大鼠肠黏膜α-葡萄糖苷酶是否有抑制作用,以探讨消渴丸中药成分的降糖作用机制.方法:用大鼠小肠上段提取α-葡萄糖苷酶,1∶5稀释使酶反应速度达到试剂盒测定要求.以10 g?L-1蔗糖作为底物,1 g?L-1阿卡波糖为阳性对照,分别加入不同浓度的消渴丸全药、消渴丸中药和格列本脲,37℃反应40 min后,在550 nm波长下测定吸光度(A).通过测定反应体系中葡萄糖生成量并计算酶活性的抑制率来判断消渴丸中药成分对大鼠肠黏膜α-葡萄糖苷酶活性的影响.结果:阿卡波糖(1 g?L-1)对α-葡萄糖苷酶的抑制率为86.3%.消渴丸中药成分(2 -200 mg?L-1)对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用(抑制率18.8% -35.7%).结论:消渴丸中药成分对大鼠小肠黏膜α-葡萄糖苷酶具有一定抑制作用.
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清润方对糖尿病大鼠炎症反应及氧化应激的影响
目的:研究清润方对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠氧化应激及炎症反应的影响.方法:采用尾静脉注射链脲佐菌素( streptozotocin,STZ)加高糖高脂饲料饲养建立大鼠T2DM模型,将大鼠随机分为空白对照组、模型组、清润方大、中、小剂量组(0.5,1,2 g?kg-1?d-1)、二甲双胍组(150 mg?kg-1?d-1),各治疗组分别ig给予相应药物治疗.干预治疗4周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素水平;肝脏组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,观察清润方对糖尿病大鼠氧化应激及炎症反应的影响.结果:与模型组比较,清润方各剂量组TNF-α水平降低(P<0.05),中、小剂量组IL-6水平、肝脏MDA含量降低(P<0.05);中、大剂量组肝脏组织的SOD活性提高(P<0.05).结论:清润方对糖尿病大鼠的抗氧化应激及减轻炎症反应作用可能是其发挥治疗作用的机制.
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3组中药复方对肥胖大鼠糖脂代谢的影响
目的:考察以化湿、清热、温阳、活血4组药物按照不同比例组成的3组中药复方对肥胖大鼠血糖血脂的影响.方法:采用高糖高脂饲料饲喂12周的方法建立肥胖大鼠模型.造模成功后,随机分为5组,模型组(10 mL?kg-1蒸馏水),文迪雅组(0.3 mg? kg-1),化湿复方组(1.665 g?kg-1),清热复方组(1.565 g?kg-1),温阳复方组(1.665 g?kg-1),并设正常对照组(10 mL kg-1蒸馏水)连续ig 2个月.分别于给药前、给药4,8周后测定空腹血糖(FBG),并于给药8后周测定口服糖耐量(0GTT),计算血糖曲线下面积;测定血清甘油三酯(TG)和总胆同醇(TC).结果:给药8周后,各组大鼠FBG分别为:正常组(5.30 ±0.38)mmol?L-1,模型组(6.82±0.87)mmol?L-1,文迪雅组(5.92±0.29)mmol? L-1,化湿复方组(5.69±0.36) mmol?L-1,清热复方组(5.69 ±0.26) mmol?L-1,温阳复方组(5.35 ±0.35)mmol? L-1.各组大鼠TC分别为:正常组( 1.07±0.08) mmol?L-1,模型组(1.48 ±0.11)mmol?L-1,文迪雅组(1.08 ±0.19) mmol?L-1,化湿复方组(0.98±0.07)mmol?L-1,清热复方组(0.94 ±0.16) mmol?L-1,温阳复方组(0.95 ±0.09) mmol?L-1.3组中药复方能降低肥胖大鼠的FBG(P <0.05)、改善糖耐量、降低血清TG和TC(P <0.05).尤以温阳复方(P<0.01)效果佳.结论:3组中药复方对肥胖大鼠均有较好的治疗作用,其中温阳复方疗效好.
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冠脉通胶囊对大鼠实验性血栓的影响
目的:研究冠脉通胶囊对大鼠实验性血栓的影响.方法:取60只SPF级Wistar大鼠随机分为模型组、冠脉通胶囊低、中、高剂量组(0.67,1.34,2.68 g?kg-1)、冠心丹参胶囊组(0.24 g?kg-1)、吲哚布芬片组(0.04 g?kg-1),ig给药7d,末次给药30 min后麻醉剥离颈总动脉,采用直流电刺激法造成血栓模型,结扎血栓两侧,剪下称量血栓质量,统计平均阻塞率.结果:冠脉通胶囊低、中、高剂量组平均阻塞率( 40.25%,37.11%,39.05%)与模型组平均阻塞率(50.99%)比明显降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01),同时低、中、高剂量组血栓质量(0.001 9,0.001 7,0.001 5 g)与模型组血栓质量(0.002 6 g)比明显减少(P <0.05,P<0.05,P<0.01),并且具有量效关系.结论:冠脉通胶囊具有抵抗血栓生成的作用.
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复方莪术汤对子宫内膜异位症大鼠Th1/Th2平衡的调节作用
目的:观察复方莪术汤对子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠辅助性T细胞1(Th1)与辅助性T细胞2(Th2)的比值(Th1/Th2)平衡的调节作用.方法:采用自体移植法制作EMS大鼠模型,复方莪术汤14.58,29.16 g?kg-1ig,28 d后,肝素抗凝抽取腹主动脉血,应用流式细胞技术检测EMS大鼠外周血CD4、CD8及CD4/CD8及Th 1/Th2.结果:模型组外周血CD4/CD8( 1.42±0.22)较空白对照组下降(P<0.05),Th2型细胞较空白对照组显著升高,Th1/Th2(31.46±17.71)比值下降(P<0.05).复方莪术汤组与模型组比较,外周血CD3,CD4,CD4/CD8(高、低剂量分别为2.30±0.67,2.02±0.53)上升,CD4 IL-4下降,Th1/Th2(高、低剂量分别为65.75±29.33,60.86±25.56)上升,差异有统计学意义(P<0.05);复方莪术汤组与孕三烯酮组比较,各项指标无统计学差异.结论:EMS大鼠外周血呈Th2优势漂移现象,Th1/Th2失衡在EMS的发病机制中可能具有重要作用.复方莪术汤能有效调节EMS大鼠Th1/Th2失衡,在大鼠EMS治疗中参与了免疫调节.
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逍遥散对雷公藤致大鼠急性肝损伤的保护作用
目的:观察中医经典方剂逍遥散对雷公藤水煎剂致大鼠急性肝损伤的保护作用,并初步探讨相关机制.方法:60只大鼠随机分为空白对照组、模型组、甘利欣(0.056 g?kg-1)对照组、逍遥散低、中、高剂量组(3.38,6.75,13.50 g?kg-1).分别以相应剂量药物连续ig5 d,再以雷公藤水煎剂按生药量计3.2 mg?kg-1 ig 4 d造模.测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,并做肝脏病理学检查.结果:与空白组比较,模型组血清ALT,AST及MDA水平明显升高(P<0.05),SOD,GSH-Px水平明显降低(P<0.05);肝脏病理呈脂肪性病变,肝细胞浑浊.与模型组比较,逍遥散各组均可有效降低血清ALT,AST及MDA水平(P<0.05),提高GSH-Px水平(P<0.05),中、高剂量还可提高SOD水平(P<0.05);逍遥散各组肝脏病理损伤与模型组比较均有所减轻.结论:雷公藤所致急性肝损伤与其引起脂质过氧化反应有关;逍遥散对雷公藤所致急性肝损伤具有保护作用,其作用机制与抑制脂质过氧化反应有关.
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归脾汤含药血清对雷公藤醇提物致骨髓细胞凋亡的保护作用
目的:观察归脾汤含药血清对雷公藤醇提物致大鼠骨髓细胞凋亡的保护作用.方法:体外培养大鼠股骨骨髓细胞,经8mg?L-1的雷公藤醇提物作用后,加入5%,10%,15%,20%的归脾汤含药血清,采用MTT比色法检测对骨髓细胞增殖的影响;采用流式细胞仪PI单标法检测对骨髓细胞周期的影响;采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双标法检测对骨髓细胞凋亡率的影响.结果:与同等浓度的雷公藤醇提物组比较,15%,20%的归脾汤含药血清能显著升高骨髓细胞的存活率和增殖指数(P <0.05或P<0.01),10%,15%,20%的归脾汤含药血清显著降低骨髓细胞凋亡指数(P<0.05).结论:归脾汤含药血清能显著增加雷公藤醇提物作用后骨髓细胞的存活率,诱导骨髓细胞由相对静止期进入增殖活跃期,并减少细胞凋亡.
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大黄酚对铅中毒小鼠学习记忆能力的影响
目的:研究大黄酚对铅中毒小鼠学习记忆能力及组织内铅水平的改善作用,并探讨其可能的作用机制.方法:采用连续8 dip7 mg?kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠模型,采用跳台实验,观察ip大黄酚(10.0,1.0,0.1 mg? kg-1)对铅中毒模型小鼠记忆能力的改善作用,并于大黄酚治疗14 d后测定小鼠心、肝、脾、肾内铅水平,同时测定小鼠肝、肾组织内丙二醛(MDA)含量及超氧化酶歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果:连续8 dip7 mg?kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠模型学习记忆障碍,使小鼠心、肝、脾、肾内铅水平显著升高,小鼠肝、肾内SOD和GSH-Px活性显著降低,使MDA含量增加;而连续ip大黄酚14 d治疗后,可不同程度提高小鼠铅中毒后学习记忆能力,与模型组相比大黄酚治疗组均可显著降低心、肝、脾、肾铅含量(P<0.01);与模型组相比大黄酚10.0,1.0 mg?kg-1治疗组可显著升高肝、肾内SOD和GSH -Px的活性,降低MDA含量(P<0.01),而大黄酚0.1 mg?kg-1治疗组可显著升高肾内SOD和GSH-Px的活性,降低MDA含量(P<0.01),对肝内SOD,GSH-Px的活性及MDA含量无显著影响.结论:大黄酚可显著改善铅中毒小鼠学习记忆能力,降低铅中毒小鼠各组织的铅水平,提高小鼠肝、肾组织内抗氧化酶的活性,改善铅中毒造成的脂质过氧化.
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黄芪总提物及其有效成分改善阿霉素致心衰的研究
目的:探讨黄芪总提物及其有效成分(黄芪甲苷、黄芪多糖、黄芪总皂苷)对阿霉素致心衰(HF)大鼠心脏血流动力学的改善作用.方法:90只雄性SD大鼠随机分为对照(Control)组、HF组、地高辛(DG)组、黄芪甲苷(ASIV)组、黄芪多糖( APS)组、黄芪总皂苷(AST)组和黄芪混合提取物(AEM)组,除HF组18只,其余各组均12只.采用阿霉素隔日腹腔注射致慢性HF模型,治疗药物DG,ASIV,APS,AST剂量分别为0.05,50,1 000,1 00 mg? kg-1,AEM相当于生药8 g?kg-1,每天灌胃给药.实验采用Langendorff联合多道生理记录仪进行心功能指标观察,记录分析比较各组的动物存活率(SR),左心室收缩压(LVSP)、心率(HR)及左心室收缩大上升速率(+dp/dtmax)和左心室开始收缩至射血的间隔时间(T-dp/dtmax)的变化.结果:阿霉素所致HF模型与对照组进行比较各指标均明显下降(P<0.01);与HF组比较,AEM及其有效成分各组阿霉素致HF大鼠的SR,LVSP和+dp/dtmax均见明显提高,其中以AEM组在心脏收缩力学指标上的改善作用更为明显,APS组亦能显著提高LVSP及+dp/dtmax,能够增加心肌收缩力和改善左心室收缩大上升速率,对HF具有一定的治疗作用.结论:AEM及其有效成分均可以提高阿霉素致HF大鼠的存活率,明显增加实验性HF大鼠的心肌收缩力,APS也显示了明显的疗效.
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人参皂苷Re体外抗氧化能力及其对血清剥夺神经细胞作用的研究
目的:探讨三七中人参皂苷Re体外抗氧化能力和对血清剥夺损伤神经细胞的作用.方法:通过体外清除二苯代苦味酰肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-Diphenyi-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl,DPPH)自由基法、还原能力测定法测定人参皂苷Re体外抗氧化能力;通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)测定人参皂苷Re对神经细胞血清剥夺损伤的保护作用.结果:人参皂苷Re体外自由基清除率不足10%,还原能力不足12%,低于阳性对照维生素E,但对血清剥夺损伤的神经细胞保护作用非常显著(细胞存活率高78%),活性高于同浓度下的维生素E.结论:人参皂苷Re体外抗氧化能力微弱,不是通过提供电子来达到抗氧化作用,但可保护血清剥夺损伤的神经细胞,提高神经细胞成活率,抑制其损伤、凋亡的作用.
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甘松对动物行为绝望模型的影响
目的:观察甘松95%乙醇提取物及其不同极性部位对动物行为绝望模型的影响.方法:ICR小鼠,雌雄兼用,分为两批,每批均设正常组和5个治疗组.第1批,治疗组连续10 d,ig给予甘松95%乙醇提取物(14.7,29.3,48.8,146.5 mg?kg -1)和阳性药氢溴酸西酞普兰(10.0 mg?kg-1);第2批,治疗组连续10d,ig给予甘松的4个极性部位(均为48.8 mg?kg-1)和阳性药氢溴酸西酞普兰(10.0 mg?kg-1).末次给药后1h,用小鼠悬尾及强迫游泳实验进行行为学观察.结果:甘松95%乙醇提取物(29.3,48.8,146.5 mg?kg-1)能显著降低小鼠悬尾不动时间及强迫游泳不动时间(P<0.05).在甘松4个极性部位中,乙酸乙酯部位与正丁醇部位均能显著降低小鼠悬尾不动时间及强迫游泳不动时间(P<0.05).结论:甘松95%乙醇提取物有一定的抗实验性抑郁的作用,其活性部位可能为乙酸乙酯部位与正丁醇部位.
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牛蒡苷胶囊对阿霉素肾病大鼠的保护作用
目的:研究牛蒡苷胶囊对阿霉素肾病大鼠的保护作用.方法:采用一次性尾静脉注射(阿霉素ADR)复制微小病变型肾病模型,.SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药醋酸泼尼松片5 mg.kg-1组、牛蒡苷胶囊高、中、低剂量组( 767,383,192 mg?kg-1),ig给药6周.于每周末将大鼠放入代谢笼中,收集24 h尿液,用全自动生化仪测定尿蛋白含量.于末次给药后24h,眼眶静脉丛采血,于全自动生化仪测定白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)含量;采用酶联免疫法测定血清转化生长因子-β1( TGF-β1)水平;采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥法分别测定血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA);肾组织病理学检测.结果:与模型组比较,牛蒡苷胶囊高、中剂量能减少阿霉素肾病大鼠的尿蛋白含量,提高血清ALB含量;牛蒡苷胶囊3个剂量组能降低血清TG和TGF-β1含量;牛蒡苷高剂量(767 mg? kg -1)能提高血清SOD活性、降低血清MDA含量;牛蒡苷胶囊3个剂量组能够促进肾组织病理改变的修复.结论:牛蒡苷胶囊对阿霉素肾病大鼠的保护作用可能与其清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应、抑制肾小球纤维化等作用有关.
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翻白草水提液对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢的影响
目的:观察翻白草水提取物对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢的影响.方法:采用3周龄Wistar大鼠,高脂喂养16周加腹腔小剂量注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病胰岛素抵抗(IR)动物模型,随机分为4组:翻白草高、低剂量组(400,200 mg?kg-1)、吡格列酮组(4.05 mg?kg-1)及模型组,每组7只.另取标准饲料喂养大鼠7只为正常组.比较各药物干预4周后对2型糖尿病IR大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)及游离脂肪酸(FFA)影响.结果:翻白草提取物和西药组均可显著降低大鼠FBG,TG,TC,LDL,FFA水平,升高HDL水平(P<0.05).结论:翻白草对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠的空腹血糖及血脂水平有一定调节作用.
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桂枝加葛根汤抗炎镇痛作用研究
目的:研究桂枝加葛根汤(GGT)治疗颈椎病的作用机制.方法:分为5组:正常组(生理盐水组),阿司匹林0.2g?kg-1组,GGT 0.5,1.0,1.5 g?kg-1组.采用冰醋酸所致小鼠扭体反应、小鼠福尔马林致痛、兔神经根周围炎症因子等模型观察GGT抗炎镇痛作用.结果:GGT 3个剂量组能显著减少扭体反应次数(P<0.01),中、高剂量组与阿司匹林组相当;GGT 3个剂量组可明显抑制福尔马林致痛试验的第二时相的疼痛强度(P<0.01),高剂量组与阿司匹林组相当;灌胃后2周,GGT组前列腺素E2( PGE2)、6-酮-前列腺素F1a(6-K-PGF1a)水平高于正常对照组,但低于模型组(P<0.01),灌胃后4周,GGT组PGE2、6-K-PGF1a水平持续降低(P<0.01).结论:桂枝加葛根汤具有抗炎镇痛作用.
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ERK1/2在黄芪多糖促进HepG2细胞凋亡中的作用
目的:阐明黄芪多糖与ERK1/2通路在HepG2细胞凋亡中的作用.方法:实验分为4组:空白对照组(control);B组,20 mg?L-1黄芪多糖3个剂量处理组(AP,20,40,80 mg?L-1黄芪多糖处理组( AP,40,80 mg?L-1),药物处理24 h后检测各指标.应用Western blot,MTT,TUNEL,线粒体膜电势检测等方法检测黄芪多糖对HepG2细胞生存凋亡及细胞中ERK1/2表达量的影响.结果:MTT与TUNEL表明黄芪多糖对HepG2细胞的凋亡具有促进作用,增加HepG2细胞的caspase-3的活性,降低(HepG2)细胞线粒体的膜电位,降低Bcl-2表达;黄芪多糖可以降低ERK1/2的表达,表明黄芪多糖的凋亡促进作用可能通过ERK1/2途径.结论:黄芪多糖可以通过抑制ERK1/2信号通路促进HepG2细胞的凋亡.
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香附提取物的抗抑郁活性及其作用机制研究
目的:筛选香附抗抑郁活性部位并初步探讨其抗抑郁作用机制.方法:小鼠ig香附各提取物给药量均为10 g?kg -1,阳性对照药氟西汀(0.08 g?kg-1),连续给药15 d后进行测试,采用小鼠强迫游泳实验和小鼠尾悬挂实验对香附醇提物及其各极性部位进行抗抑郁活性筛选,继而采用反相高效液相色谱法测定大脑额叶皮质中单胺类神经递质含量变化,探讨香附抗抑郁作用机制.结果:香附醇提取物的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位与对照品氟西汀类似,均能显著缩短小鼠游泳和悬尾的不动时间,乙酸乙酯萃取部位活性强于正丁醇萃取部位.乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位可明显升高小鼠大脑额叶皮质5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)含量(P<0.01),去甲肾上腺素(NE)含量无明显改变.结论:香附醇提物乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位对“行为绝望”动物模型有较明显的抗抑郁作用,其作用机制可能与调节脑内单胺类神经递质5-HT和DA的含量有关.
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复方扶芳藤合剂对小鼠外周血干细胞动员作用的研究
目的:运用复方扶芳藤合剂对小鼠进行干预,观察复方扶芳藤合剂对小鼠外周血干细胞数量的影响,证明复方扶芳藤合剂对小鼠外周血干细胞具有从骨髓到外周血的动员作用.方法:取昆明种小鼠随机分为4组,分别为生理盐水组(空白组)皮下注射生理盐水15 mL?kg -1,同时生理盐水25 mL?kg-1ig;复方扶芳藤合剂组(药物干预组)复方扶芳藤合剂15mL? kg -1ig,同时sc生理盐水25 mL? kg -1;重组粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(阳性对照组)sc G-CSF 10 μg?kg-1,同时生理盐水25 mL?kg-1 ig; G-CSF加复方扶芳藤合剂组(联合用药组)复方扶芳藤合剂15 mL?kg-1?d-1 ig,同时sc G-CSF 10μg?kg -1.给药6d后,取静脉血检测外周血白细胞、单个核细胞数量,用甲基纤维素微量培养法培养进行混合细胞集落形成单位(CFU-Mix)集落计数,流式细胞术检测外周血干细胞抗原-1(Sca-1+)细胞数量和百分率.结果:药物干预组、阳性对照组和联合用药组的小鼠外周血白细胞数量明显高于空白组.药物干预组、阳性对照组和联合用药组经体外造血祖细胞培养CFU-Mix产率显著高于空白组,CFU-Mix分别为9,16,19个(P<0.05).同时药物干预组、阳性对照组和联合用药组外周血中Sca1+细胞百分率比空白组明显提高,分别为0.79%,1.15%,1.72% (P <0.05).结论:复方扶芳藤合剂对小鼠外周血造血干细胞有明显的动员作用,具有作为有效的干细胞动员剂的潜力;复方扶芳藤合剂和G-CSF联合动员的效果好于单用复方扶芳藤合剂或单用G-CSF的动员效果,这提示在今后的应用中可考虑G-CSF联合复方中药进行外周血干细胞的动员.
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补康灵对辐射损伤小鼠造血功能的影响
目的:探讨补康灵对辐射损伤小鼠造血功能的影响.方法:50只小鼠被随机分为5组:正常对照组、辐射对照组、补康灵低、中、高剂量组.实验组小鼠在60Coγ射线4 Gy照射后,补康灵组分别灌胃9,18,36 g.kg-1,其余2组给予生理盐水,连续给药10 d,照射后第5,10天检测血象.10d后处死小鼠,观察补康灵对骨髓DNA含量、骨髓有核细胞数、脾结节的影响.结果:60Co γ射线照射后小鼠外周白细胞、血小板数减少,补康灵给药后,中、高剂量组小鼠外周白细胞、血小板数升高,中、高剂量组骨髓DNA含量吸光度(A)为(1.05±0.27),(1.22± 0.26);骨髓有核细胞数为(5.12±1.22),(6.01 ±1.35)×106/L,脾结节(7.67±1.56),(8.52±2.12)个,均比辐射对照组明显增加(P<0.05).结论:补康灵照射后给药能促进辐射损伤小鼠造血功能的恢复.
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葛根芩连汤及其药效组分红外光谱表征分析
目的:研究葛根芩连汤及其药效组分的红外指纹表征,为建立复方组分指纹鉴定法提供科学依据.方法:应用傅里叶红外光谱(Foruier transform infrared,FT-IR)进行测定,采用复方汤剂和化学药效组分指纹表征表述质量特征.结果:葛根芩连汤的主要特征峰出现在1 727,1 614,1 509,1 448,1 362,1 272,1 031,838,767,582 cm -1等,安徽产区药材煎煮全方与道地药材煎煮全方的相似度高.葛根芩连汤药效组分主要指纹表征(1 800~400 cm-1)有1 726,1 607,1 509,1 451,1 364,1 238,1 037,891,834,591 cm-1等.结论:采用红外指纹表征鉴别法可评价葛根芩连汤的质量,可反映出本质的主要特征,具有明显的专属性.
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黄芩提取物有效成分的近红外光谱定量分析
目的:利用黄芩提取物样品的近红外漫反射光谱( NIRS)信息,建立能够快速分析其3种有效成分含量的校正模型.方法:共收集12个不同厂家的100批样品,其中80批样品作为校正集,20批样品作为验证集,结合偏小二乘法(PLS),建立了黄芩提取物中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素3种有效成分的近红外定量校正模型.结果:3个校正模型的建模效果均较好,交叉检验决定系数(R2CV)分别为o.994 8,0.998 7,0.994 8,校正均方差(RMSEC)分别为0.440,0.022 5,0.011 1,交互验证均方差(RMSECV)分别为2.259,0.055 3,0.048 3.用验证样品进行外部验证,预测相关系数(r2)分别为0.998 2,0.996 5,0.990 9,预测均方差(RMSEP)分别为0.486,0.027 1,0.011 0.结论:结果表明,近红外光谱技术可对黄芩提取物中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量进行简便、快速、准确分析.
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锦鸡儿脂溶性成分GC-MS分析
目的:对锦鸡儿的脂溶性成分进行研究.方法:冷浸法提取锦鸡儿中脂溶性成分,气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术检测.结果:在锦鸡儿中分离鉴定出18个化合物,占色谱总馏分出峰面积的82.36%.结论:锦鸡儿脂溶性成分主要为脂肪酸类(63.31%).
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HPLC同时测定火麻仁中α-亚麻酸、亚油酸和油酸含量
目的:建立同时测定火麻仁中的α-亚麻酸、亚油酸和油酸含量的HPLC方法.方法:色谱柱为Kromasil 100-5 C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-o.1%磷酸(80∶20)为流动相,流速1 mL? min-1,柱温30℃,检测波长203 nm.结果:α-亚麻酸在34.625~554 mg? L-1(r=0.999 9),亚油酸在56.375~902 mg?L -1(r=1),油酸在17.125 ~ 274 mg? L-1(r =0.999 9)呈良好的线性关系;平均回收率α-亚麻酸为96.38%,RSD0.93%(n=6);亚油酸为97.79%,RSD 0.92%(n=6);油酸为97.06%,RSD 1.51% (n =6).结论:本法简便准确,专属性强,重复性好,可作为火麻仁的质量控制的参考.
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黄连的化学成分研究
目的:研究毛茛科植物黄连Coptis chinensis的化学成分.方法:利用柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等各种色谱技术对黄连的95%进行分离,根据其所得化合物的理化性质与UV,IR,MS,NMR等光谱数据鉴定其结构.结果:从黄连的95%乙醇提取物的氯仿萃取部分分离得到7个已知成分,分别鉴定为香草酸(1),落叶松树脂醇(2),原儿茶酸乙酯(3),小檗碱(4),丹参素甲酯(5),反式阿魏酰基酪胺(6),氧化小檗碱(7).结论:其中,化合物(3),(5),(6)为首次从该属植物中分离得到.
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HPLC测定地锦草中没食子酸、槲皮素及山柰素含量
目的:建立同时测定地锦草药材中槲皮素、山柰素和没食子酸含量的高效液相色谱法.方法:采用Agilent TCC18(4.6 mm×150mm,5μm)柱分离,以甲醇和0.4%磷酸水溶液进行梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL?min -1.结果:没食子酸在0.051 8 ~0.621 6μg线性关系良好,平均回收率在102.17% (RSD2.83%),槲皮素在0.070 2 ~0.702 0 μg线性关系良好,平均回收率在97.80%( RSD 2.42%),山柰素在0.020 4~0.408 0μg线性关系良好,平均回收率在98.02%( RSD2.72%).结论:操作简便,准确度高,重复性好,可作为地锦草质量控制方法之一.
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HPLC测定葛根饮片中5个成分的含量
目的:建立HPLC测定葛根饮片中3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖-(1→6)葡萄糖苷和大豆苷5个成分含量的方法.方法:采用Zorbax C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5 μm),以甲醇-0.02%磷酸(25∶75)为流动相,检测波长250 nm.结果:方法学考察合格,并测定了12批葛根饮片中5个成分的含量.结论:该方法简便、快速、准确度高,可作为葛根饮片的质量标准.
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超临界CO2提取天茄子挥发油化学成分的分析
目的:研究天茄子挥发油的化学成分.方法:采用超临界CO2萃取法提取挥发油,用气相色谱-质谱联用法分析其化学成分,用面积归一化法确定各成分的相对含量.结果:从超临界CO2萃取法挥发油中分离鉴定46个化合物,占挥发油总量的92.80%,其中主要成分是亚油酸、棕榈酸、硬脂酸、早熟素Ⅱ.结论:天茄子挥发油化学成分以脂肪酸类为主,占72.32%.
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HPLC测定增液承气口服液中哈巴苷和哈巴俄苷含量
目的:建立增液承气口服液中哈巴苷和哈巴俄苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Eclipse XDB C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.03%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长210 nm,柱温30℃,流速1.0 mL? min-1.结果:哈巴苷和哈巴俄苷进样量分别在0.257 ~1.284 μg(r=0.999 8),0.092 ~0.460 μg(r=1.000 0)时,与峰面积值具有良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.74%( RSD 0.58%),97.15% (RSD 1.02%).结论:样品处理简便、结果准确、重复性好,可用于增液承气口服液内在质量的控制方法.
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HPLC测定呈味核苷酸二钠中IMP和GMP的含量
目的:建立呈味核苷酸二钠的含量测定方法.方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm),流动相乙腈-水(含0.005 mol?L -1四丁基溴化铵及0.05 mol?L -磷酸二氢钾)(2∶98),流速1.0 mL? min-1,检测波长250 nm,柱温常温.结果:5’-肌苷酸二钠(IMP)的线性范围为0.50 ~4.00 μg(r =0.999 9),平均加样回收率为99.12% (n =6),RSD 0.56%;5’-鸟苷酸二钠(GMP)的线性范围为0.50~4.00 μg(r =0.999 9),平均加样回收率99.18% (n=6),RSD 0.45%.结论:该方法灵敏度高、重复性好,可用于呈味核苷酸二钠的含量检测.
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不同批次枳壳中柚皮苷、新橙皮苷、总黄酮、挥发油的含量比较及质量评价
目的:比较不同批次枳壳中柚皮苷、新橙皮苷、总黄酮、挥发油的含量,并评价其质量.方法:高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(20∶ 80)(磷酸调pH至3.0);检测波长283 nm,流速1 mL?min -1,柱温30℃,测定柚皮苷和新橙皮苷;以柚皮苷为对照,采用紫外-可见分光光度法在283 nm处测定总黄酮;采用水蒸气蒸馏法提取测定挥发油含量;以柚皮苷含量、新橙皮苷含量、总黄酮含量、挥发油含量为综合评价指标,采用Topsis法评价其质量.结果:柚皮苷含量范围在0%~6.12%,新橙皮苷含量在0%~4.55%,总黄酮含量在6.96% ~18.99%,挥发油量在0.2% ~2.0% (mL?g-1);17个批次样品质量差异较大.结论:17批次枳壳中柚皮昔、新橙皮苷、总黄酮、挥发油的含量有较大差异;柚皮苷、新橙皮苷含量达到2010年版《中国药典》标准的仅6批,质量评价方法可行.
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江中牌健胃消食片快速鉴别法
目的:针对市场上“江中牌”健胃消食片假(冒)品按现行标准鉴别、含量测定均合格的情况下,建立其快速检验方法来鉴别该药品的真伪,以适用于药品检测车上的准确快速筛查.方法:根据“江中牌”健胃消食片的处方组成、质量标准的制法及市场上正品及假(冒)品的情况展开研究,采用显微鉴别法结合薄层色谱法同时鉴别中成药山药.结果与结论:该方法简便、快速、重复性好,且成本低,适用于药品检测车上“江中牌”健胃消食片的快速筛查,增加了山药的显微和薄层鉴别,补充了“江中牌”健胃消食片国家标准中的相关规定,具有较强的实用性.
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朝鲜淫羊藿不同部位不同采收期有效成分的含量测定
目的:测定朝鲜淫羊藿不同器官、不同采收期淫羊藿苷及总黄酮的含量变化规律,为合理采收、利用药材资源提供参考.方法:采用HPLC测定淫羊藿苷,UV测定总黄酮.结果:叶片和地下部分中淫羊藿苷、总黄酮的含量较高,叶柄及茎含量较低,在8月份成分含量高.结论:朝鲜淫羊藿叶片和根茎具有较大利用价值,8月分采收好,茎和叶柄应该弃去.
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生化丸质量标准研究
目的:建立一种生化丸的质量标准,为科学评价和有效控制其质量提供可靠的依据.方法:采用薄层色谱(TLC)对处方中药材进行鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC),以甲醇-1%冰醋酸溶液(25∶75)为流动相,色谱柱YMC-PackODS-A(4.6 mm × 250 mm,5μm),流速1.0 mL?min-1,检测波长322 nm,测定生化丸中阿魏酸的含量.结果:TLC图谱中可检出当归、川芎、甘草的特征图谱,阿魏酸进样量在52.0~520.0 ng线性关系良好,r=0.999 7.平均回收率为98.01%,RSD1.34%(n=6).结论:所建方法简单准确,重复性好,可用于生化丸的质量控制.
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HPLC-DAD-MSn联用技术表征大川芎方效应组分中主要化学成分
目的:采用HPLC-DAD-MSn联用技术研究大川芎方效应组分的主要化学成分,为其体内物质基础研究及质量标准的完善奠定基础.方法:通过建立大川芎方效应组分指纹图谱,将其复杂的化学成分表征出来,并采用HPLC-DAD-MSn联用技术对各化学成分进行结构鉴定和推测.结果:推断出川芎效应组分中的3个化学成分和天麻效应组分中的8个化学成分.结论:大川芎方效应组分的化学成分研究有助于阐明其效应物质基础并完善其质量标准.
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南方菟丝子不同炮制品多糖含量的比较研究
目的:测定南方菟丝子及其不同炮制品(清炒、酒炙、盐炙)多糖的含量,从多糖变化角度探究炮制原理.方法:以南方菟丝子精制多糖测得菟丝子粗多糖对甘露糖的换算因子,以苯酚-硫酸分光光度法测定南方菟丝子及其炮制品多糖的含量.结果:菟丝子多糖精制前后单糖组成无明显变化,多糖供试液在6h内显色稳定,重复性好,平均加样回收率为99.4%,RSD 3.02% (n =6).测得南方菟丝子生品及不同炮制品(清炒、酒炙、盐炙)多糖含量分别为6.71%,8.27%,8.54%,14.17%,RSD分别为0.59%,2.47%,1.40%,0.35%(n=3).结论:南方菟丝子经过炮制后多糖含量明显增加,以盐炙菟丝子含量为高,酒炙菟丝子和炒菟丝子次之.
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关于完善《中国药典》2010年版炒槐花质量标准的研究
目的:建立炒槐花中总黄酮、芦丁、槲皮素含量限度要求,为完善2010年版药典中该饮片的质量标准提供实验数据.方法:采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量.采用HPLC测定芦丁和槲皮素的含量,均以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;芦丁的流动相为甲醇-1%冰醋酸溶液(32∶68);槲皮素的流动相为甲醇-水-冰醋酸(44:56∶0.4);检测波长均为257 nm.结果:炒槐花(花)中总黄酮、芦丁、槲皮素含量均不得低于8%,6%,0.35%;炒槐花(花蕾)中总黄酮、芦丁、槲皮素含量均不得低于20%,16%,0.3%.结论:本文方法简便易行、重复性好、结果准确,所制定炒槐花的质量标准提高了该饮片的质控水平,为其临床应用的安全性和有效性提供了实验数据.
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人参生长季茎中几种水解酶的活力变化
目的:研究人参在生长季的不同时期茎中几种水解酶的活力变化.方法:以不同生长时期5年生人参茎为试验材料,采用中性磷酸缓冲溶液提取粗酶液,应用紫外分光光度法测定不同生长时期人参茎中淀粉酶(AMY)、酯酶(EST)、酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(ALP)和植酸酶(PHY)5种水解酶的活力.结果:人参茎中AMY活力在人参展叶期和开花期出现活力高峰,其他时期无明显变化;EST活力在人参展叶期、开花期和结果期出现活力高峰,果后参根生长期活力降低;ACP和ALP活力在人参生长季的每一时期均出现活力高峰;PHY活力在人参结果期出现活力高峰.结论:在人参不同生长时期茎中5种水解酶活力有其各自的变化特点,与人参的物质代谢、生长质量密切相关.
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HPLC测定山茱萸不同炮制品中5-羟甲基糠醛和没食子酸的含量
目的:测定山茱萸及其炮制品中5-羟甲基糠醛和没食子酸的含量.方法:色谱条件,Kromasi1@-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水(5∶95),流速1.0 mL?min-1,检测波长240 nm,柱温30℃.测定没食子酸的色谱条件,Kromasil(R)-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸(8∶92),流速1.0 mL? min-1,检测波长271 nm,柱温30℃.结果:与生品相比,炮制品中5-羟甲基糠醛为新增加成分,没食子酸含量明显增加;高压蒸制中两种成分含量高于常压蒸制,但没有显著性差异.结论:该方法稳定可靠、简便可行,可以为制定山茱萸的炮制工艺提供依据.
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HPLC测定明目地黄丸(浓缩丸)中马钱苷的含量
目的:建立HPLC测定明目地黄丸(浓缩丸)中马钱苷的含量.方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为[四氢呋喃-乙腈-甲醇(1∶8∶4)-0.05%磷酸溶液](8∶92),检测波长为236 nm,流速为1.0 mL? min-1,柱温为40℃,外标法计算含量.结果:马钱苷在40.43~1 213.02 ng有良好线性关系(r=1.000 0),平均回收率为98.2%,RSD0.4%(n=6).结论:此方法前处理简便,准确可靠,可作为该制剂的质控方法之一.
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HPLC测定四季三黄片中5种蒽醌类衍生物的含量
目的:建立四季三黄片中同时测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法.方法:色谱柱为Agela Venusil XBP-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长226nm.结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在0.040 ~0.800,0.040~0.800,0.040~0.800,0.040~0.800,0.020~0.400 μg呈良好的线性关系,平均回收率(n=6)分别为97.62%,99.48%,99.72%,96.23%,95.68%,RSD1.62%,1.24%,1.13%,1.19%,1.67%.结论:所建立的定量方法快速简单,方法可靠,可作为四季三黄片的质量控制方法.
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一测多评法同时测定干姜中4种姜酚类成分的含量
目的:建立于姜药材中4种姜酚类成分同时测定的一测多评含量测定方法.方法:以6-姜辣素为指标,建立药材中该成分与6-姜酚、8-姜辣素及10-姜辣素的相对校正因子,利用校正因子计算4种酚类成分的含量,实现一测多评,同时采用外标法测定4种酚类成分的含量,比较计算值与实测值的差异.结果:28批干姜中4种姜酚类成分的含量可以用一测多评法进行测定,其计算值与实测值间无显著差异.结论:以6-姜辣素、6-姜酚、8-姜辣素及10-姜辣素同步测定的一测多评法控制干姜的药材质量是可行的、准确的.
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中医药综合治疗腰椎小关节紊乱100例
目的:观察应用中药外擦按摩+电针治疗腰椎小关节紊乱的临床效果.方法:100例患者应用真龙正红花油进行外擦按摩,并配合以电针治疗,疗程7d,对比患者治疗前及治疗后不同时段的临床症状与体征积分,判定患者治愈率以及有效率.结果:患者经规律治疗7d后,82例治愈,14例显效,4例好转.结论:对腰椎出现小关节紊乱的患者应用中医药进行综合治疗,安全简便,疗效确切.
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冠心病患者血清超敏C反应蛋白、肌钙蛋白、血脂水平变化及临床意义
目的:研究冠心病患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肌钙蛋白I(cTnI)、血脂水平变化及临床意义.方法:对102例冠心病患者[稳定型心绞痛( SAP)组48例、不稳定型心绞痛(UAP)组33例、急性心肌梗死(AMI)组21例]血清hsCRP,cTnI,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)等生化指标水平进行检测,并与正常对照组的40例健康受试者进行比较分析.结果:SAP组血清hs-CRP水平显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);UAP组、AMI组血清hs-CRP,cTnI,TC,TG及LDL-C水平均显著高于正常对照组,HDL-C水平均显著低于正常对照组,差异均具有统计学意义(P <0.05);SAP组、UAP组血清hs-CRP,cTnI,TC,TG及LDL-C水平均显著低于AMI组,HDL-C水平均显著高于AMI组,差异均具有统计学意义(P <0.05);SAP组血清hs-CRP,cTnI水平显著低于UAP组,差异亦均具有统计学意义(P<0.05);hs-CRP与TC,TG,LDL-C均呈显著正相关(P<0.05),与HDL-C均呈显著负相关(P<0.05),hs-CRP与cTnI之间呈显著正相关(P<0.05).结论:检测冠心病患者血清hs-CRP,cTnI及血脂水平对患者疾病预测及治疗具有重要的临床意义.
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温胆颗粒干预抗逆转录治疗致消化道不良反应的研究
目的:观察温胆颗粒对高效抗逆转录病毒疗法(HAART)致消化道不良反应发病率及临床症状影响情况.方法:100例患者随机分两组,治疗组予温胆颗粒(15 g/次,2次/d),对照组予安慰剂(剂量为温胆颗粒的1/20),1月后观察发病率情况,对发生症状者记录症状积分情况.结果:温胆颗粒组消化道不良反应发病率为20.4%,对照组为48%,温胆颗粒组、对照组出现消化道不良反应患者症状总积分组间比较差异有统计学差异(P<0.05),治疗前后症状总积分组内比较差异有统计学差异(P<0.05).结论:温胆颗粒可以降低HAART致消化道不良反应症状的发生.对于发生轻、中度消化道不良反应的患者中药治疗可以明显减轻临床症状.
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清热化瘀汤对缺血性中风急性期患者血压、血脂、凝血功能、同型半胱氨酸、C反应蛋白水平及日常生活水平的影响
目的:探讨清热化瘀汤对中风患者的血压、血脂、凝血功能、同型半胱氨酸(Hcy)、C反应蛋白(CRP)是否存在积极的影响,能否改善中风患者的生活质量及水平.方法:选择符合病例入选中风患者,随机分为治疗组和对照组,治疗组采用常规治疗和清热化瘀汤治疗,对照组采用常规治疗.监测并记录血脂、凝血功能、Hcy、CRP、日常生活能力(ADL)、日常生活质量(QIL)等项目.结果:治疗组在减低患者血压方面显著优于对照组;对血脂的影响,治疗组在降低患者胆固醇和甘油三脂方面优于对照组,而在改善患者高、低密度脂蛋白及载脂蛋白A及B方面治疗组和对照组无显著差别;对凝血功能的影响,治疗组在降低纤维蛋白原、D-二聚体疗效方面优于对照组,其余3项虽然治疗后经比较均无统计学意义;治疗组在降低Hcy、CRP水平方面优于对照组;治疗组在改善患者日常生活能力及生活质量方面优于对照组(P<0.05).结论:目前常规治疗基础上,加用清热化瘀汤对缺血性中风急性期的瘀热阻窍证候的相关实验室指标及生活质量、生活能力等方面均有较好的改善作用.
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中药联合针灸治疗小儿夏季腹泻55例
目的:探讨中药联合针灸治疗小儿夏季腹泻的临床疗效.方法:将解放街道社区卫生服务中心门诊收治的夏季腹泻患儿105例随机分为观察组55例及对照组50例,观察组应用中医的治疗原则联合中药和针灸进行辨证施治;对照组予以西医治疗.两组均在治疗7d后予以疗效评价.结果:观察组治愈50例,有效4例,无效1例,总有效率为98.2%;对照治愈38例,有效6例,无效6例,总有效率为88%.两组总有效率比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:中药联合针灸治疗小儿夏季腹泻疗效肯定,副作用小,相比西医治疗具有明显优势.
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热敏灸疗配合中药内服治疗风寒湿型腰椎间盘突出症
目的:观察热敏灸配合中药独活寄生汤治疗风寒湿型腰椎间盘突出症外周血白细胞介素6(IL-6)的变化及临床症状改善情况.方法:将患者随机分成对照组51例和治疗组52例.治疗组采用热敏灸疗至阳、关元、委中等特定穴位,配合中药独活寄生汤治疗.对照组采用中药独活寄生汤治疗.通过检测外周血,并观察患者临床症状改变情况.结果:采用改良的Macnabt法评价临床疗效,治疗组疗效优于对照组(P<0.05),治疗后两组的IL-6含量均下降(P<0.05),且治疗组的降低作用优于对照组(P<0.05).结论:热敏灸疗配合内服中药独活寄生汤治疗风寒湿型腰椎间盘突出症的临床疗效,明显优于单纯中药内服治疗,这可能与艾灸刺激热敏反应点,激发经络感传,促进经气运行,激发机体内源性调控系统功能,使失调、紊乱的生理生化过程恢复正常有关.
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不同方案乙肝免疫球蛋白阻断血清乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒阳性孕妇宫内传播的研究
目的:探讨采用不同方案孕期使用乙肝免疫球蛋白(HBIG)阻断乙肝病毒宫内传播的效果,以便选择有效且经济的阻断方案.方法:选择血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg),乙肝病毒(HBV-DNA)阳性孕妇132例,随机分为A组27例于孕20,24,28,32,36,38周分别肌肉注射HBIG 200 U;B组38例于孕28,32,36周分别肌肉注射HBIG 400 U;C组45例于孕28,32,36周分别肌肉注射HBIG 200 U;对照组22例孕期不进行干预.所有132例新生儿进行HBIG和HBVac的联合免疫.观察7月龄时,婴儿的血清HBV-M和HBV-DNA,比较各组宫内感染率.结果:A组2例发生宫内感染,宫内感染率7.4%;B组3例发生宫内感染,宫内感染率7.9%;C组5例发生宫内感染,宫内感染率11.1%.对照组8例发生宫内感染,宫内感染率36.4%.A,B,C3组宫内感染率分别与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);3组间两两比较,差异无统计学意义.结论:孕期使用HBIG阻断HBV宫内感染安全有效,在血清HBsAg,HBV-DNA阳性孕妇群中,选择孕晚期每月注射200 IU可达到与同等剂量分6次注射和高剂量分3次注射相同的效果.从而推断,低剂量分3次注射有效且经济.
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正交试验优选盐炙续断炮制工艺
目的:研究盐炙工艺对川续断皂苷Ⅵ含量的影响,优选盐炙续断炮制工艺.方法:以HPLC测定川续断皂苷Ⅵ含量为评价指标,采用正交试验法筛选盐炙续断炮制工艺参数.结果:优选的盐炙续断炮制工艺为每500 g续断药材用10 g盐浸润45 min,150℃炒制8 min.结论:优选的盐炙续断炮制工艺可明显提高续断有效成分的溶出率,且工艺稳定、质量可控,为续断炮制规范的研究提供参考.
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八珍益智颗粒制备工艺优选
目的:优选八珍益智颗粒制备工艺.方法:以总多糖提取率和浸膏得率为评价指标,采用L9(34)正交设计试验法,对八珍益智颗粒制备过程中的水提取工艺条件进行优化,并进行制粒工艺研究.结果:该颗粒剂水提取佳工艺条件为分别加12,10倍水提取2次,每次2h,每次提取前先浸泡0.5h;制粒工艺为提取液减压浓缩后喷雾干燥得药粉,以90%乙醇作润湿剂,药粉-辅料1∶0.3,矫味剂用量为2.0%.结论:该工艺合理可行,适用于八珍益智颗粒的制备.
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鱼腥草总生物碱的大孔吸附树脂纯化工艺
目的:优选鱼腥草总生物碱大孔吸附树脂的分离纯化工艺.方法:以盐酸小檗碱、胡椒内酰胺及马兜铃内酰胺B含量为指标,比较不同型号树脂和不同工艺条件对鱼腥草总生物碱的分离纯化能力.结果:HPD-100型大孔树脂对鱼腥草总生物碱有良好的吸附分离性能,佳工艺条件为药液质量浓度20 g?L-1,pH 3,吸附流速0.5 mL? min -1,洗脱溶剂为氨水乙醇溶液(氨水浓度0.5 mol?L-1,乙醇体积分数80%),洗脱剂用量4 BV,洗脱速度3.0mL?min -1.结论:HPD-100型大孔树脂可用于鱼腥草总生物碱的提取纯化.
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龙胆中环烯醚萜苷的大孔吸附树脂纯化工艺
目的:优选大孔吸附树脂分离纯化龙胆中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和獐芽菜苷的工艺条件.方法:采用高效液相色谱法对龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和獐芽菜苷进行定量分析,通过考察静态和动态吸附、洗脱效果,筛选大孔吸附树脂分离纯化龙胆中环烯醚萜苷的佳工艺条件.结果:佳工艺为HPD300树脂,上样液质量浓度0.1 g?mL-1,吸附流速1.0 BV?h-1,上样量10 BV,吸附后的树脂柱先用2 BV蒸馏水洗脱,再用8 BV 30%乙醇以2 BV?h-1流速洗脱.结论:HPD300大孔树脂对龙胆中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和獐芽菜苷具有较好的分离纯化效果,优选工艺操作简单、稳定可行.
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延灯滴丸3种提取方法的对比
目的:对比不同提取方法对延灯滴丸中灯盏乙素的提取效果.方法:以灯盏乙素含量和出膏率为考察指标,分别采用L16(45)正交试验法,U10(106),U4(54)均匀试验法优化乙醇回流、超声波提取及闪式提取的佳工艺.并对比延灯滴丸中灯盏乙素的提取效果.结果:乙醇回流、超声波提取及闪式提取3种方法的灯盏乙素平均含量分别为3.26%,2.61%,2.15%;平均出膏率分别为26.23%,14.02%,19.2%.结论:采用乙醇回流法提取时灯盏乙素含量及出膏率高,为延灯滴丸的提取方法优化提供理论依据.
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甲基-β-环糊精对香叶木苷的增溶作用
目的:建立香叶木苷的紫外含量测定方法,考察甲基-β-环糊精(RM-β-CD)对香叶木苷的增溶作用.方法:绘制香叶木苷紫外含量测定的标准曲线,进行方法学考察,采用相溶解度法考察RM-β-CD对香叶木苷的增溶作用,计算包和稳定常数.结果:香叶木苷紫外测定波长372 nm,在8~32 mg?L-1线性关系良好,溶解度随着RM-β-CD浓度的增加而成线性增加,相溶解度曲线属于AL型,包合稳定常数111.09 mol? L-1.结论:RM-β-CD对香叶木苷具有良好的增溶作用.
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星点设计-效应面法优化天山雪莲传递体制备处方
目的:优化天山雪莲传递体的处方.方法:注入-高剪切分散法制备天山雪莲传递体,以绿原酸和芦丁包封率、载药量、传递体平均粒径及归一化值为评价指标,以磷脂浓度、药脂比(质量比)、油水相体积比为考察因素,星点设计-效应面法优化处方,实验结果进行多元线性和二项式非线性方程拟合,效应面法确定佳处方配比.结果:二项式是描述各指标与因素之间的佳模型.以绿原酸为指标的包封率83.44%,载药量4.65%;以芦丁为指标的包封率70.69%,载药量3.94%,载药传递体平均粒径154.6 nm,理论预测值与实测值偏差较小,模型具有良好的预测性.结论:星点设计-效应面优化法筛选天山雪莲传递体是一种简便、可行的实验设计方法.
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均匀试验设计法优选产妇康颗粒提取工艺
目的:优选产妇康颗粒提取工艺.方法:高效液相法测定提取液中阿魏酸的含量,结合正丁醇浸出物含量,采用均匀实验设计优选产妇康颗粒提取工艺.结果:佳提取工艺为加8倍量水,浸泡1h,提取3次,每次1h.结论:优化后的工艺合理、稳定、可行,适于产妇康颗粒中当归、炮姜等药味的提取.
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大蒜总多糖、总皂苷的提取纯化工艺
目的:优选大蒜总多糖、总皂苷的提取纯化工艺.方法:采用双提法提取大蒜油和大蒜总多糖,乙醇提取总皂苷,以大蒜总多糖、总皂苷收得率为考察指标,对料液比、提取时间、提取次数以及药液浓缩浓度等进行L9(34)正交试验和单因素考察.结果:优选大蒜总多糖提取工艺条件为加5倍量水,提取3次,每次1 h;纯化条件为药液浓缩至含生药1.0g?mL-1.85%乙醇沉淀;总皂苷提取工艺为加5倍量乙醇提取2次,每次1h;纯化条件为药液减压回收乙醇至无醇味(53℃相对密度1.065),加水至药材质量的0.8倍(1.25 g?mL-1).结论:该工艺稳定,利用一批大蒜原料,可同时得到大蒜油、大蒜总多糖和总皂苷,大蒜总多糖提取物出膏率为21.36%,含多糖51.36%,大蒜总皂苷提取物出膏率为6.04%,含总皂苷3.79%.
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当归四逆汤半仿生提取工艺
目的:优选当归四逆汤半仿生提取工艺.方法:采用U9(91 ×33)均匀设计优选当归四逆汤提取工艺,采用小鼠耳肿涨及扭体反应试验的药效学指标和干浸膏得率综合评价制备工艺.结果:当归四逆汤佳提取工艺为提取温度(60±0.5)℃,提取3次,加水量分别为10,8,8倍量;提取用水pH依次为3.0,7.5,8.5;煎煮时间依次为100,50,25 min.结论:以药效学指标结合化学指标综合评价和优选的当归四逆汤提取工艺方法简便易行,适于生产实践.
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散瘀软膏成型工艺优选
目的:优选散瘀软膏的成型工艺.方法:筛选不同配比乳剂型基质;以外观性状和稳定性为指标,采用正交试验对散瘀软膏的成型工艺进行优化.结果:佳成型工艺为药物浓缩液加入三乙醇胺、甘油及尼泊金乙酯85℃加热溶解为水相;硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、液体石蜡、白凡士林、羊毛脂85℃加热熔融为油相.将油相以细流状加至水相中,550 r?min-1速度搅拌至完全冷却.结论:优选的成型工艺合理可行,制剂稳定性好,适用于工业化生产.
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白花檵木中没食子酸和总酚提取工艺
目的:建立白花檵木中没食子酸和总酚的佳提取工艺.方法:以没食子酸和总酚含量为考察指标,筛选回流、渗漉、索氏、超声4种不同提取方法,正交试验优选溶媒、料液比、提取时间及提取次数4个工艺参数.结果:佳提取工艺为采用回流提取法,8倍量60%乙醇提取3次,每次2h.结论:采用该方法提取没食子酸和总酚,具有提取效率高、稳定性好等特点,适应于工业生产.
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中药有效成分治疗血管性痴呆的研究进展
作为中药复方的效应单元,单味中药及其有效成分在防治血管性痴呆(VD)方面具有选择性高、针对性强等特点,故单味中药的研究越来越受到重视.涉及补虚类(人参、何首乌、刺五加、黄芪、红景天)、活血化瘀类(银杏、丹参、川芎、姜黄、灯盏花)、清热类(黄芩、知母、地黄、栀子)及其他类(千层塔、葛根、丁香).其作用机制主要有:①增加ATP酶等活性物质含量,抑制氧化应激;②调节脑内胆碱能系统相关蛋白、基因、神经递质表达;③抑制肾素-血管紧张素系统、减少钙内流、防止自由基形成造成的神经元损伤等.补虚类和活血化瘀类中药治疗VD研究较多.中药有效成分作用多途径、多靶点,干预了VD病理生理过程的多个环节,为促进临床用药及中药新药研发提供方向,同时提出当前研究中存在的问题,期待深入研究.
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复杂网络在中医药方面的研究和应用
对近些年来国内外文献进行查阅,整理分析了复杂网络在中医药方面的研究和应用情况.利用复杂网络技术研究以生命系统为对象的中医药知识和其中规律已处于起步阶段,是具有开创性的尝试和探索.通过复杂网络在中医学基本规律构建生物-中药-方剂-疾病多靶点效应网络、针灸和穴位敷贴、具体临床治疗等方面的研究应用,可以预见这种基于复杂网络的分析理念,将对创新中医药理论,指导临床组方用药及中药新药研发等方面发挥重要作用.
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壮药百脉根的显微鉴别
目的:研究百脉根的显微结构特征,为鉴定、开发利用和制定其质量标准提供参考依据.方法:对百脉根的根、茎、叶横切面组织构造和粉末特征进行显微鉴别.结果:根韧皮部散有纤维束,具初生射线;茎射线宽广,髓部宽大或破裂成空洞状;叶栅栏组织过中脉;粉末中易见棕色块.结论:以上特征具有鉴别意义,可做为鉴别百脉根的参考依据.
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甘肃产党参种子质量研究
目的:通过对党参种子质量的研究,为党参生产管理规范提供一定参考.方法:采用常规方法对党参种子样品进行初步筛选,测定其大小、净度、千粒重、发芽率等基本品质.结果:党参种子经过测定相关项目后,初步得到一些数据,由此可知党参种子较小,筛选比较困难,净率不是很高,陈种子的发茅率低,生活力较低.结论:在党参的规范化生产管理中,应该对种子进行过筛去杂分级,提高净率,新种子应该及时用于生产,储藏时间不易过长.陈种子发芽率较低,生产中忌用.
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基于药物代谢酶探讨中药“十八反”配伍致毒/增毒机制
查阅国内外近年来有关中药“十八反”、药物代谢酶方面的文献37篇,对中药十八反配伍药物组合对细胞色素P450的影响研究现状进行分析归纳.提出中药十八反配伍对细胞色素P450影响的体内、体外研究方法与思路及现有研究方法的局限性,如体外实验不能全面反映体内实验和临床试验的结果,通过代谢酶mRNA浓度的测定不能全面反映其活性的变化等,并对今后的研究进行了展望,提出考察十八反药物对代谢酶的影响,应从体内、体外实验两方面来进行,还应结合毒性成分的代谢变化对毒性产生或增强的影响及其关联规律,进而从药物代谢酶的角度探讨十八反可能的致毒/增毒机制,为十八反配伍禁忌机制研究提供思考和借鉴.
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心宝丸治疗病态窦房结综合征的系统评价
系统评价心宝丸治疗病态窦房结综合征的临床疗效和安全性.通过计算机检索Cochrane图书馆临床对照试验资料库、MEDLINE、EMbase、中国生物医学文献数据库、美国科学引文索引数据库、中国学术期刊网络出版总库、数字化期刊全文数据库、中文科技期刊数据库,互联网检索在研试验,附加检索相关会议论文集及药厂资料.由2名研究人员独立阅读并交叉核对纳入研究及其资料.结局测量指标:起搏器安装率、动态心电图中的总心搏数、平均心率及治疗有效性、不良反应等.采用Cochrane协作网提供的RevMan 5.0软件进行定性分析.纳入4个随机对照试验(RCT),共包括222名患者.结果显示:3个RCT研究表明心宝丸组治疗后疗效优于对照组,1个RCT显示无明显差异.1个RCT显示holter的平均心率心宝丸组升高显著高于对照组.心宝丸可能对病态窦房结综合征患者的心率升高、症状改善等具有一定疗效,但还有待于设计严格的多中心、大样本随机对照试验来进一步证实.
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子宫内膜异位症中医证治用药规律
通过对子宫内膜异位症(EMs)相关文献研究,探索EMs的病因病机及中药用药规律,为临床处方用药提供依据.根据相关标准纳入文献86篇,对其所用中药进行分类,用统计软件SPSS进行描述性统计.结果表明治疗EMs使用率高的药物是当归、丹参、白术、柴胡、香附;使用率高的中药类别是活血化瘀药、补虚药以及清热药.结论认为:EMs患者病程较长,患者多表现为虚实夹杂,多与肝、肾、脾功能失调有关,在临床用药过程中应注意活血药与补虚药的结合使用才能取得更确切的临床疗效.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |