细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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敲低TRAIL-DR5抑制辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导的MCF-7乳腺癌细胞自噬
目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-死亡受体5(TRAIL-DR5)在辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬过程中的调控作用.方法 对数生长期MCF-7细胞分为空白对照组、SAHA处理组、TRAIL-DR5 siRNA处理组及SAHA联合TRAIL-DR5 siRNA处理组.Western blot法验证TRAIL-DR5的沉默效果,定量PCR阵列检测细胞自噬相关基因9B(ATG9B)、微管相关蛋白1轻链3A(LC3A)及LC3B的mRNA水平;Western blot法检测MCF-7细胞自噬相关蛋白beclin-1、ATG3、ATG5、ATG7、ATG12、ATG16、ATC4A、ATG4B、ATG9B及LC3Ⅱ和组织蛋白酶B(CTSB)的蛋白水平;ELISA分析乳腺癌细胞培养上清液CTSB水平;免疫荧光细胞化学染色检测乳腺癌细胞LC3Ⅱ表达和分布.结果 TRAIL-DR5 siRNA转染后明显敲低MCF-7细胞的TRAIL-DR5水平.敲低TRAIL-DR5受体可抑制上述自噬相关基因及蛋白的表达水平,抑制乳腺癌细胞中CTSB蛋白的表达;SAHA处理MCF-7细胞后,LC3Ⅱ含量增加,当敲低TRAIL-DR5受体后,LC3Ⅱ水平明显弱于单独SAHA处理的细胞.结论 敲低TRAIL-DR5受体抑制SAHA诱导的MCF-7乳腺癌细胞自噬作用.
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KAT6B通过增强IL-6基因启动子区H3K23ac募集促进IL-6的产生
目的 探索赖氨酸乙酰基转移酶6B(KAT6B)在巨噬细胞中对脂多糖(LPS)诱导的白细胞介素6(IL-6)分泌的调控作用及机制.方法 体外培养小鼠原代腹腔巨噬细胞与RAW264.7巨噬细胞并以100 ng/mL LPS刺激0、2、4、6h,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测KAT6B mRNA表达水平;利用RNA干扰技术敲低小鼠腹腔巨噬细胞KAT6B的表达,qRT-PCR检测LPS诱导的小鼠原代巨噬细胞IL-6 mRNA水平,ELISA检测IL-6蛋白水平;同时在RAW264.7细胞中过表达KAT6B,qRT-PCR检测其产生IL-6 mRNA的水平,ELISA检测分泌IL-6蛋白的水平.Western blot法检测对LPS诱发的核因子κB(NF-κB)与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,通过双荧光素酶报告基因试验检测KAT6B对IL-6基因的启动子区的影响;利用染色质免疫沉淀技术(ChIP)检测KAT6B对IL-6基因启动子区第23位赖氨酸乙酰化的组蛋白3(H3K23ac)募集的影响.结果 LPS上调小鼠腹腔巨噬细胞与RAW264.7细胞中KAT6B mRNA的表达;敲低KAT6B水平后,抑制腹腔巨噬细胞IL-6的分泌;过表达V5-KAT6B促进RAW264.7细胞IL-6的分泌;NF-κB与MAPK相关分子活化无差异;KAT6B在NF-κBp65下游发挥对IL-6的调控作用;KAT6B增强IL-6启动子区H3K23ac的募集促进IL-6的转录.结论 KAT6B通过增强IL-6基因启动子区H3K23的乙酰化修饰促进LPS诱导的IL-6的产生.
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托法替尼抑制外周血中T细胞细胞因子的分泌及机制
目的 研究托法替尼对人外周血中T细胞分泌的细胞因子的抑制作用及其机制.方法 用抗CD3抗体联合CD28抗体刺激培养外周血单个核细胞(PBMC)和纯化T细胞,在加入或不加入0.5μmol/L托法替尼的情况下,ELISA检测培养细胞上清液中y干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素2 (IL-2)的水平;流式细胞术检测T细胞的活化分子CD69和CD25的表达情况及信号转导子与转录激活子1(STAT1)、STAT3和STAT4的磷酸化程度;羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色观察T细胞的增殖情况,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 托法替尼能够抑制外周血T细胞的IFN-γ、TNF-α的产生和CD25的表达,并抑制T细胞的增殖以及STAT1、STAT3和STAT4的磷酸化,但不影响IL-2的分泌、CD69分子的表达及细胞凋亡.结论 托法替尼能抑制外周血中的T细胞分泌IFN--γ、TNF-α,其机制可能是托法替尼可抑制T细胞的活化、增殖及转录因子的表达.
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体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化
目的 探讨体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化.方法 取孕19日SD胎鼠分离心肌细胞进行原代培养,采用0.8 g/L胰蛋白酶和0.4 g/L2型胶原蛋白酶联合消化后,以多次差速分离,不同种类的动物血清(胎牛血清组、马血清组)改良心肌细胞培养条件.倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态及搏动频率、免疫荧光细胞化学染色分别检测α-横纹肌辅肌动蛋白(α-SA)与心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)鉴定胎鼠心肌细胞及培养24、48、72、96 h的心肌细胞纯度.结果 心肌细胞接种24h,可见大部分贴壁细胞和少量的悬浮细胞,亦见少许搏动的心肌细胞;48、72、96 h,马血清组心肌细胞α-肌动蛋白及cTnⅠ阳性率明显高于胎牛血清组.结论 采用胰蛋白酶和2型胶原蛋白酶联合消化和马血清更易培养出胎鼠心肌细胞.
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肌肉注射含内皮PAS结构域蛋白1(EPAS1)基因的慢病毒改善外周动脉血管病模型大鼠后肢缺血及其机制
目的 研究内皮PAS结构域蛋白1(EPAS1)过表达对外周动脉病大鼠模型的保护作用.方法 利用单侧髂外动脉结扎法制备大鼠外周动脉血管病模型,将带有EPAS1基因的慢病毒注射到大鼠右侧大收肌.利用步态分析仪检测大鼠步态改变,激光多普勒检测大鼠后肢血流量变化,实时定量PCR检测EPAS1和促血管生长的肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的mRNA水平,免疫组织化学染色检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)水平.结果 成功制备了大鼠后肢缺血模型,与注射对照病毒lenti-EGFP组相比,从手术后7d开始,lenti-EPAS1注射组大鼠步态障碍得到明显缓解,后肢血流量明显恢复;缺血大鼠大收肌中HGF、bFGF、VEGF的mRNA水平增加,肌组织中αSMA表达明显增多.结论 过表达EPAS1能改善大鼠缺血部位血流量,促进相关细胞因子表达和新生血管生成.
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脂连蛋白(adiponectin)对动脉粥样硬化小鼠的治疗作用及其机制
目的 研究脂连蛋白(APN)对载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)的动脉粥样硬化(AS)小鼠的治疗作用及可能机制.方法 选取20只雄性ApoE-/-小鼠通过高脂饮食建立AS模型,小鼠随机分为APN处理组及对照组.APN处理组给予腹腔注射重组小鼠APN(25 μg/d),对照组给予腹腔注射等量生理盐水,共处理4周.采用HE染色和免疫组织化学染色、ELISA、免疫荧光标记技术、反转录PCR和Western blot分析其治疗作用和机制.结果 与对照组相比,APN处理组动脉粥样硬化斑块面积、血管内白细胞介素8(IL-8)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平均显著降低,血管周围脂肪组织炎症细胞浸润比例显著降低.APN处理组小鼠血管周围脂肪组织M1巨噬细胞标志物CD86及M1巨噬细胞下游促炎介质IL-1β表达均显著小于对照组,而M2巨噬细胞标志物CD206及M2巨噬细胞下游抗炎介质IL-10的水平均显著高于对照组.血管周围脂肪组织磷酸化的信号转导子与转录激活子6(p-STAT6)水平显著高于对照组.结论 APN对AS小鼠具有明确治疗效果,可能是通过激活STAT6信号诱导脂肪组织巨噬细胞M2巨噬细胞极化.
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APOBEC3A-HBc融合蛋白的表达及活性鉴定
目的 构建载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽3A(APOBEC3A)与不同长度和序列的乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)的融合蛋白真核表达载体,研究其表达能力及融合蛋白的细胞内定位及胞嘧啶脱氨基活性.方法 采用In-Fusion重组克隆方法,将含有APOBEC3A的PCR产物分别和含有全长HBc、四种C端截短体HBc的PCR扩增片段连接克隆入真核表达载体pcDNA3.0.将重组载体分别转染HEK293T细胞,用免疫荧光细胞化学染色法检测融合蛋白在HEK293T细胞中的定位,Western blot法检测融合蛋白的表达水平;尿素变性PAGE法分析融合蛋白的胞嘧啶脱氨基活性.结果 构建的五种融合蛋白表达载体,可在HEK293T细胞中表达五种融合蛋白,4种含HBc截短体编码的融合蛋白表达载体比含全长HBc编码的融合蛋白载体的表达能力强;含全长HBc的融合蛋白APOBEC3A-HBc主要定位于细胞质,而含HBc截短体的融合蛋白APOBEC3A-HBc144S、APOBEC3A-HBc144E、APOBEC3A-HBc144AAA和APOBEC3A-HBc144A均主要定位于细胞核中;HBc截短体融合蛋白的胞嘧啶脱氨基活性高于全长HBc融合蛋白.结论 成功构建APOBEC3A与不同长度和序列HBc的融合蛋白真核表达载体,APOBEC3A与全长HBc及截短体HBc的融合蛋白在表达能力、细胞内定位以及胞嘧啶脱氨基活性具有明显差异.
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盐酸戊乙奎醚减轻脂多糖诱导的大鼠肺损伤
目的 探讨盐酸戊乙奎醚(PHCD)对脓毒症休克大鼠肺脏的保护作用.方法 36只健康SD大鼠随机分为正常对照组、脂多糖(LPS)处理组和PHCD处理组.利用大鼠腹腔注射LPS(5 mg/kg)制备休克模型,然后通过尾静脉注射PHCD(1.0 mg/kg)治疗,注射6h后进行大鼠血气分析,处死大鼠后检测每组大鼠肺的干湿质量比(W/D),ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素8(IL-8)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,HE染色观察肺组织炎症反应,实时定量PCR检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA水平,Western blot法检测肺组织iNOS蛋白水平.结果 与对照组相比,LPS处理组肺W/D和血乳酸(LAC)显著升高,pH值和动脉氧分压(PaO2)显著下降,BALF中TNF-α、IL-8和IL-6水平均明显增加,肺组织中iNOS表达明显上调;LPS处理组大鼠肺部明显水肿、充血、白细胞渗出增加.经过PHCD治疗的大鼠,肺W/D和LAC降低,pH值和PaO2上升,BALF中TNF-α、IL-8、IL-6含量均有明显降低,肺组织中iNOS水平明显下降,肺部炎症反应减轻.结论 PHCD可抑制LPS诱发的肺部炎症、减轻肺损伤.
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近红外荧光蛋白和荧光素酶双标记肝细胞癌移植裸鼠模型的建立
目的 建立一种基因稳定表达,可实时监测肿瘤生长的肝癌移植瘤裸鼠模型.方法 构建带有荧光素酶(Luc)和近红外荧光蛋白(iRFP)和嘌呤霉素抗性基因的慢病毒,并感染HepG2肝癌细胞系,筛选得到稳定表达Luc和iRFP基因的细胞系;将细胞接种到裸鼠皮下,建立肝癌HepG2细胞移植瘤模型.利用小鼠活体成像系统检测肿瘤的生长情况,并通过HE染色及免疫组织化学染色评估肿瘤组织病理特征及成瘤能力.结果 成功构建稳定表达iRFP和Luc的HepG2肝癌细胞系并建立移植瘤动物模型;模型生长周期适中,成瘤率较高;HE染色及免疫组织化学染色表现出典型的肿瘤组织病理特征.结论 成功建立了稳定、可实时监测的HepG2-iRFP-Luc肝癌细胞裸鼠模型.
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Y-27632通过抑制自噬减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤
目的 探讨Rho激酶抑制剂Y-27632预处理对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及其机制.方法 将培养的心肌细胞分成正常组、H/R组、Y-27632组和Y-27632联合3-MA组(Y-27632/3-MA组).正常组在950mL/L空气、50 mL/L CO2 37℃培养箱中孵育6h;H/R组先用940 mL/L N2、10 mL/L O2、50 mL/L CO2的混合气培养3h,再转入950 mL/L空气、50 mL/L CO2培养箱孵育3 h;Y-27632组先给予10 μnol/L Rho激酶抑制剂Y-27632孵育1h,之后行H/R处理.Y-27632/3-MA组先给予10 μmol/LY-27632和5 mmol/L自噬抑制剂3-MA孵育1h,再H/R处理.采用CCK-8比色法测定各组细胞的存活率;试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;Western blot法检测磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)及自噬基因beclin 1蛋白水平.结果 Y-27632预处理明显改善H/R介导的H9c2心肌细胞存活率,降低LDH活性,减少细胞凋亡,降低p-MLC蛋白水平,增加beclin 1蛋白表达;而Y-27632/3-MA组抵消了Y-27632对H9c2细胞的抗凋亡作用,并增高p-MLC和降低beclin 1蛋白表达.结论 Y-27632预处理通过抑制Rho激酶诱导自噬的发生减轻心肌细胞H/R损伤.
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AMPK过表达抑制姥鲛烷诱导的狼疮鼠中肾小球系膜细胞增生和基质合成及炎症反应
目的 探索姥鲛烷诱导的系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠肾小球系膜细胞过表达AMP激活蛋白激酶(AMPK)对系膜细胞增生、基质合成和炎性因子分泌的影响.方法 小鼠分为对照组和模型组,姥鲛烷诱导建立小鼠SLE模型.ELISA检测血清自身抗体水平;分离培养对照组和模型组小鼠原代肾小球系膜细胞,模型组小鼠原代肾小球系膜细胞分为模型组、空载体组和过表达组.pEGFP-C1-vector和pEGFP-C1-AMPK分别转染空载组和过表达组细胞.Western blot法检测AMPK证明其过表达情况.AMPK过表达后,采用流式细胞术检测系膜细胞的凋亡情况,Western blot法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、P21、P27、纤连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原蛋白(CoB)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β蛋白水平.结果 模型组小鼠血清抗dsDNA IgG、抗dsDNA IgM、抗Sm IgG、抗Sm IgM水平明显增加,说明建模成功.在SLE模型小鼠肾小球系膜细胞过表达AMPK后,系膜细胞凋亡率明显增加、cyclin D1、PCNA和P21蛋白水平降低、P27蛋白水平增加.FN和Col4及IL-6和IL-1β蛋白水平明显降低.结论 过表达AMPK抑制姥鲛烷诱导的狼疮鼠中肾小球系膜细胞增生,基质合成和炎症反应.
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雷公藤多苷抑制糖尿病大鼠肾组织MBL及MASP2的表达并减轻肾损伤
目的 研究雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾组织甘露糖结合凝集素(MBL)及甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2(MASP2)表达的影响,探讨雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾脏损伤的保护机制.方法 45只雄性SD大鼠随机分为实验组(n=35)和正常对照组(n=10).实验组喂以高糖高脂饲料6周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病肾病大鼠模型.实验组有33只大鼠造模成功,将33只大鼠随机分为糖尿病肾病模型组(n=16)和雷公藤多苷治疗组(n=17),治疗组以雷公藤多苷[10 mg/(kg·d)]灌胃8周.第14周末,比较模型组和治疗组24h尿蛋白定量及血清生化指标;过碘酸希夫反应(PAS)观察肾组织形态学改变;荧光定量PCR检测肾组织MBL1、MASP2、核因子κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1) mRNA水平,Western blot法检测肾组织MBL-A、MASP2、NF-κB、MCP-1的蛋白水平,免疫组织化学染色检测MBL-A、MASP2蛋白在肾组织的表达和分布.结果 与治疗组相比,模型组大鼠24h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮增高,肾组织MBL、MASP2、NF-κB及MCP-1表达明显增加;相关性分析显示,MBL与MASP2、NF-κB、MCP-1表达及24h尿蛋白定量呈显著正相关.结论 雷公藤多苷能抑制糖尿病模型大鼠肾组织MBL及MASP2的表达,减轻糖尿病大鼠肾损伤.
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芍药苷通过抑制NF-κB通路减轻MRL/lpr狼疮小鼠肝损伤
目的 探讨芍药苷对MRL/lpr小鼠肝脏损伤的影响及其机制.方法 MRL/lpr狼疮小鼠随机分为MRL/lpr组、1.5 mg/kg地塞米松处理组、20 mg/kg芍药苷处理组、40 mg/kg芍药苷处理组,每组10只;正常对照组C57BL/6小鼠10只.微板法检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)与天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,ELISA检测各组小鼠血清及肝脏组织中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;HE染色检测肝组织病变情况,Western blot法检测各组小鼠肝脏受体相互作用蛋白140(RIP140)、Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κBp65(p-NF-κBp65)、核因子κBp65(NF-κBp65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、IκBα蛋白的表达水平.结果 与正常对照小鼠相比,MRL/lpr狼疮小鼠血清中ALT与AST含量明显增加,MRL/lpr狼疮小鼠血清及肝脏组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量显著增加.肝组织中有炎症细胞浸润,MRL/lpr狼疮小鼠肝脏组织中RIP140、TLR4、NF-κB蛋白水平显著增加.芍药苷和地塞米松一样能显著降低MRI/lpr狼疮小鼠血清中ALT和AST含量,减少MRL/lpr狼疮小鼠血清及肝脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,减轻肝组织炎细胞浸润;并能显著降低MRL/lpr狼疮小鼠肝组织中RIP140、TLR4、p-NF-κBp65、NF-κBp65蛋白水平.结论 芍药苷通过抑制NF-κB信号通路,从而对MRL/lpr狼疮小鼠肝脏损伤起到保护作用.
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佛波酯联合脂多糖诱导THP-1炎症细胞模型的优化及评价
目的 优化条件建立人急性单核白血病细胞THP-1炎症细胞模型,评价其对磷酸二酯酶抑制剂类抗炎剂咯利普兰的响应.方法 THP-1细胞经佛波酯(PMA)诱导分化、脂多糖(LPS)刺激,ELISA检测细胞上清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平.考察PMA和LPS剂量及其作用时间获得较优模型;于LPS同时加入咯利普兰考察此THP-1炎症细胞模型对抗炎作用的响应.结果 THP-1单核细胞经PMA诱导分化24h呈巨噬细胞形态,延长至48 h细胞形态不变,诱导的细胞经LPS刺激产生显著升高的TNF-α和IL-6.PMA在100 ng/mL较50 ng/mL诱导分化THP-1经LPS刺激所产生TNF-α水平显著升高,且随LPS剂量增加而增加并在LPS达0.2 μg/mL后趋于恒定;IL-6在PMA 100 ng/mL及LPS≥1 μg/mL时释放明显.100 ng/mL PMA联合0.5 μg/mL LPS相较于0.1 μg/mL LPS刺激THP-1产生TNF-α被咯利普兰抑制更显著.结论 100 ng/mLPMA诱导分化的THP-1细胞在LPS刺激下炎性因子水平显著升高;100ng/mL PMA联合不低于0.2 μg/mL LPS刺激THP-1细胞可获较优炎症细胞模型,此模型对抗炎剂作用更敏感.
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27位氨基酸三甲基化的组蛋白3(H3K27me3)及其修饰酶在小鼠不同组织中分布
目的 研究出生后7日龄和2月龄小鼠各组织器官中27位氨基酸三甲基化的组蛋白3(H3K27me3)的水平及其修饰酶Zeste基因增强子同源物2(EZH2)、赖氨酸特异性脱甲基酶6B(Kdm6B/JMJD3)和赖氨酸特异性脱甲基酶6A (Kdm6A/UTX)的表达.方法 免疫组织化学染色法检测7日龄和2月龄小鼠脑、涎腺、背部脂肪、胸腺、肺、心脏、胃、肠、肝、睾丸、皮肤组织中H3K27me3、EZH2、JMJD3和UTX表达,实时定量PCR验证,统计分析H3 K27 me3水平与EZH2、JMJD3和UTX表达之间的关系.结果 H3K27me3在7日龄和2月龄小鼠被检测组织中均持续存在;EZH2在7日龄和2月龄小鼠脑、心肌、肝及皮肤中表达,但仅在2月龄小鼠涎腺、肠、睾丸、肺、脂肪组织、胸腺中持续表达;JMJD3在7日龄小鼠脑、皮肤、涎腺、心肌、肠、睾丸、肺、脂肪组织、胃中表达,但在2月龄小鼠的肺、脂肪组织、胃中不再表达;UTX在7日龄小鼠的脑、皮肤、涎腺、心肌、睾丸、肺及脂肪组织中表达,但仅在2月龄小鼠睾丸中表达;大部分免疫组织化学染色阳性的H3K27甲基调节酶相应的mRNA呈中等或较高水平表达.结论 H3K27me3在小鼠不同时期各组织中均持续存在;EZH2多存在于2月龄小鼠脑、皮肤、涎腺、心肌、肠、睾丸、肺、脂肪组织、肝、胸腺;JMJD3、UTX多存在于7日龄小鼠脑、皮肤、涎腺、心肌、睾丸、肺、脂肪组织;H3 K27 me3分布与EZH2的表达之间无明显一致关系,与JMJD3或UTX不存在明显反向分布关系,EZH2与JMJD3或UTX的表达分布也不存在反向关系.提示EZH2、JMJD3和UTX在小鼠出生后多种组织中可能起重要作用;在体内H3K27me3水平及其修饰酶可能受多因素控制,以完成复杂的生理功能.
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大黄酸对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响及其机制
肾病综合征严重影响人类的身体健康,主要临床表现为肾小球病变使大量蛋白质从血液中进入尿液中,出现周围组织水肿、大量蛋白尿、低白蛋白血症及高脂血症等症状[1-3].肾病综合征是全世界范围内亟待解决的重大健康问题[4-6].目前治疗肾病综合征的主要药物为糖皮质激素,烷基化剂和环孢霉素等免疫抑制剂,但这些药物都具有较大的副作用[7].寻找治疗肾病综合征的安全有效的药物迫在眉睫.大黄酸是一种来源于大黄、决明子、何首乌及芦荟等植物中的蒽醌类物质[8].据报道大黄酸具有一定的抑制肿瘤细胞生长的功能[9].此外,大黄酸还具有保肝、保肾、抗炎、抗氧化及抗菌等活性[10].本研究主要探讨大黄酸对转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)诱导的HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞增殖和基质合成蛋白表达的影响,并在阿霉素诱导的肾病大鼠模型中分析大黄酸对肾功能及肾组织系膜细胞增生的影响及其可能分子机制.
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miR-139通过沉默B细胞转位基因3(BTG3)抑制肝细胞癌细胞的增殖
目的 初步阐明miR-139在肝细胞癌(HCC)发展过程中的作用及其介导的信号通路.方法 通过CCK-8实验验证miR-139对HCC增殖的影响;运用TargetScan、MiRanda、Clip-seq和miRDB四组数据库对miR-139下游可能存在的通路进行预测,结合文献回顾,寻找出miR-139在HCC中可能存在的靶点.Western blot法验证靶点受miR-139调节的情况,双荧光素酶报告基因分析验证miR-139与靶点的相关性.结果 通过CCK-8实验证明,miR-139具有抑制肝癌细胞增殖的作用;利用4个数据库交叉比对和文献回顾,筛选得到5个感兴趣的潜在基因,包括细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(ICK)、B细胞异位基因3(BTG3)、含CUB和LCCL结构域盘状蛋白2(DCBLD2)、真核起始因子4F(EIF4G2)和核不均一核糖核蛋白F(HNRNPE).Western blot实验和双荧光素报告分析发现miR-139在肝细胞肝癌中具有直接抑制BTG3基因表达的作用.结论 miR-139可以直接调控BTG3基因的表达,影响肝癌细胞增殖.
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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的机制
目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白L/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用.方法 用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、LPS分组刺激HUVEC,收集总RNA和蛋白,利用实时定量PCR和Western blot法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管黏附分子1(VCAM-1)和冯·维勒布兰德因子(vWF)的mRNA和蛋白水平;采用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)阻断剂SB203580(10 μmol/L)预处理的方式,探索阻断TLR4通路后,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附分子表达的影响,通过THP-1细胞黏附实验检测oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附能力的影响.结果 与培养基对照组相比,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够显著提高HUVEC的ICAM-1、VCAM-1和vWF表达,并且能够增强HUVEC对THP-1细胞的黏附,TAK-242或SB203580处理能够抑制该过程.结论 oxLDLβ2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够增强HUVEC的黏附分子表达和对THP-1细胞的黏附,TLR4和p38MAPK与该过程密切相关.
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39例骨髓增生异常综合征患者输血相容性检测结果分析
目的 了解骨髓增生异常综合征(MDS)患者输血相容性检测中的异常结果及其处理方法.方法 采用血型血清学检测方法对患者血标本进行ABO血型正反定型、RhD抗原检测、不规则抗体筛选及特异性鉴定与交叉配血试验等输血相容性检测,观察血型抗原及抗体的变化情况.结果 在39例MDS患者输血相容性检测异常结果中,单项ABO血型抗原减弱25例(64.1％),其中A抗原减弱15例(60.0％),B抗原减弱10例(40.0％),抗原减弱同时伴抗体效价降低2例(5.1％),单项血型抗体效价降低4例(10.3％),冷自身抗体5例(12.8％),不规则抗体阳性3例(7.7％),其中抗E抗体2例,抗M抗体1例.39例MDS患者血标本在ABO血型鉴定中均引起正反定型不相符,同时伴交叉配血不合者8例(20.5％).结论 MDS患者可出现ABO血型抗原抗体减弱、冷自身抗体或不规则抗体,引起正反定型不相符或交叉配血不合.采用高效价定型血清和抗原性强的试剂红细胞对患者血标本进行正反定型,结合吸收放散试验可准确鉴定ABO血型,确保临床输血安全.
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分化型甲状腺癌组织XRCC1和血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)的表达及临床意义
目的 研究X线修复交叉互补基因1 (XRCC1)与分化型甲状腺癌发生发展的关系,探讨XRCC1基因蛋白与血管新生的相关性.方法 收集40例分化型甲状腺癌患者癌组织及对应癌旁组织,采用Western blot法检测癌组织及对应癌旁组织中XRCC1基因蛋白水平,采用免疫组织化学染色法分别检测XRCC1蛋白及血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)蛋白的表达情况,采用Pearson相关分析法分析XRCC1蛋白表达与分化型甲状腺癌患者临床病理特征的关系及VEGF-C表达的相关性,同时比较XRCC1蛋白阳性表达病例甲状腺癌组织与正常甲状腺组织中微血管密度(MVD)之间的差异.结果 在分化型甲状腺癌患者癌组织XRCC1、VEGF-C蛋白高表达,Pearson相关分析显示分化型甲状腺癌患者癌组织中XRCC1蛋白的表达与VEGF-C表达呈正相关(r =0.728),分化型甲状腺癌患者癌组织中XRCC1、VEGF-C蛋白表达阳性率均与淋巴结转移以及TNM分期正相关.XRCC1阳性表达癌组织的MVD值高于癌旁正常组织、XRCC1阴性表达癌组织.结论 在分化型甲状腺癌XRCC1、VEGF-C高表达且呈正相关,可能参与分化型甲状腺癌的转移.
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胃泌素及线粒体途径凋亡相关蛋白在胃癌组织中的表达及意义
目的 研究胃泌素及线粒体途径凋亡相关蛋白在胃癌组织中的表达,探讨其相关性及临床意义.方法 通过组织芯片技术和免疫组织化学染色法,检测胃癌组织及癌旁组织内胃泌素及线粒体途径凋亡相关蛋白Bcl2、胱天蛋白酶9(caspase-9)及caspase-3的表达,采用Spearman等级相关分析及卡方检验分析它们之间的相关性及其与临床病理特征的关系.结果 胃泌素及Bcl2在胃癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织;caspase-9及caspase-3在胃癌组织中的阳性表达率均显著低于癌旁组织.其中,胃泌素与Bcl2在胃癌组织中的表达呈显著正相关(r=0.237).胃泌素的表达与肿瘤部位相关,Bcl2的表达与肿瘤大小、TNM分期及淋巴结转移有关.结论 胃癌组织胃泌素与Bcl2高表达且与临床病理特征有一定相关性.
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含锌指和BTB结构域7B(ZBTB7B/ThPOK)及其相关因子在T细胞分化及功能中的作用
含锌指和BTB结构域7B(ZBTB7 B/ThPOK)是CD4谱系分化中的关键转录因子,并抑制CD8谱系生成.ThPOK蛋白表达促进CD4谱系分化,维持CD4谱系稳定性,并抑制CD8谱系分化.首先在胸腺内,ThPOK基因表达受T细胞受体(TCR)信号、基因增强子、基因沉默子等调节,且ThPOK表达受GATA结合蛋白3(GATA3)、Runt相关转录因子3(Runx3)、白血病/淋巴瘤相关因子(LRF)、胸腺细胞选择相关性高迁移率族盒基因(TOX)、Myc关联的锌指蛋白相关因子(MAZR)、E1A结合蛋白p300(P300)等转录因子影响,进而影响CD4、CD8谱系分化.而在外周T细胞中,ThPOK影响CD4+T细胞亚群、CD8+T细胞分化及功能.在此基础上,正逐步展开针对外周疾病中ThPOK作用的研究.
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嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫疗法在慢性病毒感染及其相关肿瘤中的研究进展
慢性持续性病毒感染与多种肿瘤的发生、发展密切相关.病毒感染可导致慢性持续性炎症反应及继发性的组织损伤,病毒蛋白的表达将造成宿主细胞生存、生长状态持续性的紊乱,诱导DNA损伤反应,从而增加宿主基因组的不稳定性,利于细胞的癌变.嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫疗法以病毒蛋白为识别靶点,赋予T细胞特异性识别病毒抗原的能力,从而杀伤因病毒感染所致的肿瘤细胞,可较大程度缓解靶向/非肿瘤毒性.我们针对近年来病毒相关肿瘤的CAR-T细胞免疫疗法的相关进展进行总结和评述.
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自身免疫性疾病中长链非编码RNA的研究进展
长链非编码RNA (lncRNA)是由基因组中非编码序列转录生成的、长度大于200个核苷酸、不具有翻译成蛋白质能力的转录本,可在表观遗传水平、转录水平、翻译水平、蛋白修饰过程中发挥重要的调控作用.lncRNA广泛表达于单核细胞、树突状细胞、中性粒细胞、T细胞、B细胞等免疫细胞中,与它们的发育、分化、激活密切相关,参与免疫炎症相关疾病的发生和发展.我们主要总结了lncRNA在类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、骨关节炎、干燥综合症、强直性脊柱炎等自身免疫性疾病中的研究进展.
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以GPC3为靶点的抗体治疗策略在肝癌治疗中的研究进展
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)是硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)家族的成员,其羧基端通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定在细胞膜上.GPC3可与多种细胞表面受体相互作用,参与调节细胞的形态和黏附、增殖分化、侵袭迁移等生物学行为.GPC3在肝癌中的表达明显高于正常肝组织,且与肝癌的恶性程度、临床分期及预后密切相关.因此,GPC3被认为是肝癌靶向治疗的理想靶分子.近年来,基于抗体的肿瘤免疫治疗策略发展迅速,以GPC3为靶点的抗体治疗策略,如全抗体、单域抗体及嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗等取得了突破性的进展.我们总结了GPC3的功能及以GPC3为靶点的抗体治疗策略在肝癌中的研究进展.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
