细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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乙醇诱导的肝癌细胞 HCC-9204凋亡及其与 Bax和 Bcl-2蛋白的关系
目的探讨乙醇对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其与凋亡相关基因 bax和 bcl-2表达的关系。方法用噻唑蓝 (MTT)法检测浓度分别为 20～ 100 mL/ L的乙醇对肝癌细胞系 HCC-9204的杀伤作用。然后，用 60 mL/ L乙醇作用 6 h诱导 HCC -9204细胞凋亡。以 May-Grunwald- Giemsa (MGG)染色法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP缺口末端标记 (TUNEL)法和流式细胞术分别分析凋亡细胞的形态学变化、 DNA断裂情况和不同细胞周期的 DNA含量变化。用免疫细胞化学染色图象分析法，检测诱导凋亡前、后 Bax和 Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果随着乙醇浓度的增加，其对 HCC 9204细胞的杀伤作用逐渐增强。 60 mL/ L乙醇可使 HCC- 9204细胞发生明显的细胞凋亡的形态学变化，并且大部分细胞为 TUNEL阳性着色。流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰。诱导凋亡后的 HCC-9204细胞 Bax蛋白的表达水平明显增高，而 Bcl- 2在诱导凋亡前、后的 HCC- 9204细胞中均未见表达。结论低浓度乙醇对肝癌细胞 HCC- 9204具有明显的凋亡诱导作用，其凋亡的发生与 Bax蛋白表达水平的增高有关。
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从噬菌体 15肽库中筛选乙脑病毒糖蛋白模拟肽
目的用抗 JEV E蛋白的 mAb 2H4筛选噬菌体 15肽库，以研究 JEV E蛋白模拟肽。方法用生物素标记的 mAb 2H4，对噬菌体随机 15肽库进行 3轮筛选。经 ELISA鉴定后，随机挑取 10个阳性噬菌体克隆测序，并与 JEV E蛋白进行同源性比较。结果筛选到的噬菌体能与 mAb 2H4特异地结合，并且这种结合可被天然 JEV抗原所抑制。 10个阳性噬菌体克隆的氨基酸序列相同，均为 RQDPQWPYANSTIAR。同源分析表明，在 JEV E蛋白不同区域有两个同源性较高的序列： STXAR和 WXXAXST。阳性噬菌体展示肽也能与抗天然 JEV抗原的鼠血清产生特异性反应。结论筛选的该噬菌体克隆展示肽可模拟 JEV E 蛋白的部分抗原性。
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CD226在 TPO诱导胎肝 Lin－细胞增殖分化过程中的表达
目的研究 CD226在造血干 /祖细胞上的表达分布。 TPO诱导胎肝造血干 /祖细胞增殖分化过程中， CD226表达的变化及可能的信号调控途径。方法采用鸡尾酒单抗阴性分离富集 Lin－造血干 /祖细胞，培养于含 TPO的无血清培养体系中，用 PD98059阻断 MAPK信号转导途径，流式细胞仪双荧光分析 CD226、 CD34、 CD41a和 CD61的表达。结果 CD226在 Lin－ CD34＋细胞和 Lin－ CD34－细胞上均有表达。 TPO可诱导 Lin－ CD41a－ CD226－细胞先分化为 CD41a＋ CD226－细胞，再进一步分化为 CD41a＋ CD226＋细胞， TPO也可诱导 Lin－ CD226＋细胞表达 CD41a和 CD61。在培养的早期， PD98059可抑制 CD34＋ CD226＋细胞的减少，在晚期则可抑制 CD41a＋ CD226＋细胞的增多。结论 CD226与造血干 /祖细胞和巨核细胞的增殖分化可能具有密切的关系。
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噬菌体展示法筛选抗人 PTA1单克隆抗体结合肽
目的从噬菌体展示文库中筛选能与抗人 PTA1单克隆抗体 (mAbs)特异性结合的短肽。方法采用 protein-A亲和层析法纯化系列抗人 PTA1mAbs，通过流式细胞术检测筛选出能够阻断 PTA1-Fc融合蛋白与其天然配体结合的 mAb，经过三轮亲和筛选，从噬菌体随机 12肽库中筛选可特异性结合 mAb的重组噬菌体阳性克隆，进而对这些克隆的短肽序列进行测定和分析。结果确定了能够阻断 PTA1-Fc融合蛋白与其天然配体结合的 mAb为 LeoA1，得到了 13个具有特异性结合 LeoA1的重组噬菌体阳性克隆，序列测定结果发现，这些可结合 LeoA1的短肽，有较保守而集中的模式序列，即 WPXHHX序列。结论这些具有保守模式序列的短肽，有可能模拟 PTA1分子的功能表位，成为其天然配体拮抗剂的候选肽段。此外， PTA1分子与其配体结合的功能表位的确定，也为今后寻找天然配体和进一步深入研究 PTA1分子的结构和功能提供了实验依据。
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丙型肝炎病毒 H株包膜糖蛋白在昆虫细胞中的表达
目的利用杆状病毒表达系统，在昆虫细胞中表达了丙型肝炎病毒 (HCV)H株的包膜糖蛋白 E，并应用表达产物对 HCV感染患者血清中抗膜蛋白抗体进行检测。方法将 HCV H株 E基因片段克隆到杆状病毒转移载体上，转染昆虫细胞，表达包膜糖蛋白，经免疫杂交法鉴定表达产物，并用细胞间接免疫荧光法检测患者血清抗膜蛋白抗体的水平。结果 Western blot显示，表达产物中有多条分子量不同、可与 HCV RNA阳性血清反应的蛋白。细胞免疫荧光染色表明， HCV包膜糖蛋白在细胞浆中表达。用表达产物分别检测 HCV患者血清，发现仅 11.4％血清中含有膜抗体。结论成功利用昆虫细胞表达了 HCV包膜糖蛋白，为 HCV疫苗的研究奠定了基础。
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桥式生物素－亲合素标记提高藻胆蛋白免疫荧光法灵敏度的研究
目的提高藻胆蛋白免疫荧光法检测的灵敏度。方法在藻胆蛋白免疫荧光法 (PBPIFA)的检测流程中，引入桥式亲合素－生物素系统 (BRAB)，称为 BRAB-PBPIFA,用 ELISA法与藻胆蛋白免疫荧光直接法和桥式 BAS法，对定值的标准质控抗原 HBsAg样品及 500份血清样品同时进行测定。结果 BRAB应用于藻胆蛋白免疫荧光法中，能显著提高该法对低抗原含量样品的检出，对弱阳性血清的检出率可提高 1.5倍。无蛋白封闭试剂 Tween 20在 BRAB-PBPIFA中具有较好的封闭效果。结论 BRAB标记可提高藻胆蛋白免疫荧光法检测的灵敏度。
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宫内注射胎肝细胞对大鼠移植免疫反应的影响
目的研究宫内注射胎肝细胞对大鼠移植免疫反应状态的影响。方法将 LOU/CN大鼠的胎肝细胞注射于宫内 CHN胎鼠的腹腔。以分娩 7～ 9 wk龄时的 CHN雌性大鼠作为受体， LOU/CN雌性大鼠作为供体，进行皮片移植。观察大鼠皮片移植物的存活时间，并以混合淋巴细胞培养检查移植排斥反应。结果与对照组相比较，宫内注射组大鼠皮片移植物的存活时间明显延长。混合淋巴细胞培养显示，移植排斥反应被明显抑制 (P< 0.01)。结论胎肝细胞宫内注射于胎鼠可延长大鼠皮片移植物的存活期，对移植排斥反应产生明显的抑制作用。
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B7.1及 SEA基因共转染肝癌细胞的初步研究
目的获得可表达共刺激分子 B7.1和超抗原分子 SEA的肝癌细胞株，检测其表达。方法用免疫组织化学方法，筛选表达 B7.1及 SEA的肝癌细胞阳性克隆。用流式细胞仪检测 B7.1表达的阳性率， ELISA检测上清中 SEA的含量。结果获得表达 B7.1和 SEA的肝癌细胞株，培养上清中 SEA的含量达 10～ 14× 10-8g/L。结论建立了免疫细胞在肝癌细胞上的 SEA和 B7.1联合识别效应系统。
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诱导活化的外周血单个核细胞 THANK表达的初步研究
目的分析不同刺激下外周血单个核细胞 (PBMC)中 THANK基因的表达，并克隆全长的人 THANK基因。方法采用将常规方法分离的外周血单个核细胞 (PBMC)培养于含 100ml/L FCS的 RPMI 1640中，并以不同浓度的 LPS、 TNFα、 IL 2、 IFNγ、 PHA及 PMA刺激不同时间。以 RT PCR法，分析 PMBC中 THANK基因的转录表达，并克隆相应的全长人 THANK基因。结果 RT PCR分析表明，当用 IFNγ刺激 PMBC 72h后，可诱导 THANK基因明显表达 ;而 IL 2、 LPS、 TNFα、 PHA和 PMA则不能诱导其表达。采用 PCR产物克隆的方法，克隆了人 THANK基因，并经 DNA序列测定证实。结论克隆得到了人 THANK基因，为进一步研究 THANK的功能打下了基础。
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人β-NGF基因在 COS-7细胞中的表达及其生物学活性的研究
目的研究人β-神经生长因子 (β-NGF)cDNA在真核细胞中的表达及其表达产物的活性。方法将质粒 pGEM-β-NGF进行酶切并回收β-NGF-cDNA片段，构建重组真核表达载体 pcDNA3-β-NGF。利用脂质体 Lipofectamine方法转染 COS-7细胞，对阳性克隆 COS-7细胞的 mRNA和培养上清分别进行 Northern blot分析和观察对 PC12细胞突起生长的作用。结果β NGF基因在 COS-7细胞中获得表达。阳性克隆 COS-7细胞培养上清能够促进 PC12细胞突起生长。结论目的基因在 COS-7细胞中成功表达β- NGF蛋白，并具有良好的生物学活性。
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接种 CEA重组痘苗病毒对小鼠 CEA＋肿瘤抑制作用的机制探讨
目的探讨 CEA重组痘苗病毒 (rV-CEA)治疗 CEA＋肿瘤的机制。方法以我室构建的 rV-CEA, 腹腔接种供体 C57/BL小鼠，取其脾细胞及腹腔巨噬细胞 (MΦ )，分别过继转移给荷 CEA＋ -HePa肝癌细胞的 C57/BL小鼠，检测该供体小鼠脾细胞、腹腔 MΦ及相应受体的脾细胞体外杀瘤细胞的效应。结果接种 rV-CEA的供体小鼠的脾细胞及腹腔 MΦ过继免疫给受体小鼠，具有明显抑制受体 CEA阳性肿瘤生长的作用。体外实验表明，该供体脾细胞及接种了供体 MΦ的受体脾细胞对同一靶细胞的杀伤活性明显增强，但供体 MΦ体外的细胞毒活性无明显增加。结论 rV-CEA对 CEA＋肿瘤的抑制作用，可能主要通过 CEA特异性免疫反应激活 T细胞而实现。 MΦ作为抗原提呈细胞可通过激活 T细胞而杀伤肿瘤细胞，具体机制值得进一步研究。
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次声作用后 mGluR1α、 mGluR5在 CA1区表达的改变及 MCPG的保护作用
目的探讨次声作用后鼠脑 CA1区 mGluR1α和 mGluR5表达改变的规律，并观察其拮抗剂 MCPG的作用。方法 160只 SD大鼠随机分为次声作用组及 MCPG治疗组。两组再分为对照组及次声作用 1次、 7次和 14次组。用 8Hz、 130dB的次声按规定次数，每次作用 2 h。用免疫组织化学染色和原位杂交的方法检测 mGluR1α和 mGluR5的表达，光镜下观察 MCPG治疗后神经元形态的改变。结果与对照组相比较，次声作用 1次后， mGluR1α与 mGluR5的阳性细胞数和吸光 (A)值即改变 ( P∨ 0.05)； 7次组改变显著 ( P∨ 0.01)； 14次组恢复至正常水平。形态学研究证实， MCPG对 CA1区神经元有明显的保护作用。结论次声作用可通过 mGluR1α和 mGluR5介导兴奋性神经毒作用 , 其活性的改变是导致次声性脑损害的因素之一， MCPG对次声性脑损伤具有保护作用。
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酶免疫荧光法检测血清 TSH、 T3和 T4的水平在诊断甲亢、甲减中的应用
正常情况下，由垂体细胞分泌的促甲状腺刺激激素 (TSH)刺激和调节甲状腺的功能。在 TSH的刺激下，可释放出与甲状腺球蛋白相结合的甲状腺激素 T3和 T4，并通过细胞基膜进入血液。 TSH又受 TSH释放激素 (TRH)的调节。血清 T3、 T4 的含量过高时，也可直接抑制甲状腺内的腺苷酸环化酶，阻滞甲状腺对 TSH的反应性 [1]。因此，测定血中 TSH、 T3和 T4的含量可反映甲状腺的功能。我们采用法国梅里埃公司的试剂，进行酶免疫荧光 (ELFA)染色法，测定了血中 TSH、 T3和 T4的含量，并与国内常用的酶联免疫吸附法 (ELISA)进行了比较。
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狼疮性肾炎患者外周血淋巴细胞亚群及活化状态的研究
目的探讨狼疮性肾炎(LN)患者淋巴细胞亚群的变化及所处的不同状态在 LN发病机制中的作用。方法采用双标染色技术结合流式细胞术，对 32例 LN进行研究。结果①LN患者 CD3+CD4+细胞的百分率明显下降,CD3+CD8+细胞的百分率明显增高,CD3+CD4+/CD3+CD8+的比例<1(与对照组相比较 ,P<0.05)。②LN患者 CD45RA+细胞、CD4+CD45RA+细胞、CD4+CD45RO+细胞和 CD4+HLA-DR+细胞的百分率下降(与对照组相比较 ,P<0.05或P<0.001),HLA-DR+细胞、CD3+HLA-DR+细胞、CD19+HLA-DR+细胞和 CD19+CD43+细胞的百分率明显增高(与对照组相比较,P<0.05或P<0.01)。结论 LN患者免疫功能的紊乱与淋巴细胞活化状态及其亚群之间的平衡失调密切相关。
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抗重组 GST单克隆抗体的制备及其在融合蛋白纯化中的应用
目的制备抗重组 GST的单克隆抗体 (mAb), 并用来纯化重组 GST融合蛋白。方法用含重组 GST融合蛋白基因的 pGEX4T -1质粒转化 E.coli BL21， IPTG诱导 GST融合蛋白表达，亲和层析和凝胶过滤法分离表达的重组 GST融合蛋白。以此蛋白作为抗原，免疫 Balb/c小鼠，按传统的杂交瘤技术制备 mAb。将抗 GST mAb经 Protein A纯化后，与 Sepharose 4B偶联。结果经 3次亚克隆后，获得两株分泌抗 GST载体特异性 mAb的杂交瘤。采用该 mAb对两种不同的 GST融合蛋白进行亲和层析纯化后，经 SDS-PAGE鉴定达到了商品化 Glutathione-Resin的亲和层析纯化效果。结论用抗 GST蛋白特异性 mAb亲和层析纯化融合蛋白是一种经济、实用的方法，且可用于 Glutathione-Resin亲和层析纯化后的二次纯化。
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淋巴细胞性乳腺炎临床病理学及发病机制的研究
目的探讨一种特殊类型的乳腺疾病——淋巴细胞性乳腺炎的临床病理学特点及发病机制。方法分析了 7例淋巴细胞性乳腺炎患者的临床资料，采用常规 HE染色观察该病的形态学特点并采用免疫组织化学 EnVision法检测浸润于乳腺小叶内的淋巴细胞中 CD20和 CD45RO的表达，对其进行分类。并按体视学要求对浸润于乳腺小叶内的淋巴细胞进行定量分析。并检测了浸润细胞中 CD68和葡萄糖调节蛋白 94(grp94)/糖蛋白 96(gp96)的表达。结果 7例淋巴细胞性乳腺炎有 4例是发生于有长期糖尿病病史的妇女，均为胰岛素依赖型糖尿病， 1例无糖尿病病史， 2例病史不清。组织学上 7例均有不同程度的乳腺小叶炎、小叶周围炎及导管周围炎，即数量不等的淋巴细胞浸润于乳腺小叶内、小叶周边及导管周围；基质纤维结缔组织不同程度的增生，伴乳腺小叶萎缩及均匀一致的纤维化。免疫组织化学显示浸润于乳腺小叶内、小叶周边及导管周围的淋巴细胞主要是 CD20阳性的 B淋巴细胞，同时也有部分 CD45RO阳性的 T淋巴细胞。对浸润于乳腺小叶内的淋巴细胞进行形态学定量分析的结果表明，浸润的淋巴细胞主要是 B淋巴细胞，且差异有显著性 (P< 0.01)。部分浸润于乳腺小叶和小叶周围的淋巴细胞表达葡萄糖调节蛋白 94(grp 94)/糖蛋白 96(gp96)，乳腺小叶导管和腺泡上皮细胞的胞浆也呈葡萄糖调节蛋白 94(grp 94)/糖蛋白 96(gp96)阳性。浸润于乳腺内的部分细胞也表达 CD68。结论淋巴细胞性乳腺炎是一种不常见的乳腺良性疾病，部分与胰岛素依赖型糖尿病密切相关 (糖尿病型腺病 )，其发病机制可能与 T、 B淋巴细胞介导的双重自身免疫反应有关。由于淋巴细胞性乳腺炎具有特征性的临床病理学改变应将其作为一种独力的乳腺疾病而诊断。
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自体角质形成细胞在混合皮肤移植中诱导免疫抑制
目的探索混合皮肤移植中，自体皮岛诱发移植免疫耐受的免疫机制。方法在体外建立混合表皮淋巴细胞 (MELC)培养体系，以反映移植受者对皮肤移植物的免疫排斥反应。同时，将自体表皮细胞引入已建立的混合表皮淋巴细胞培养体系，以模仿混合皮肤移植中的自体皮岛效应 ,并分析发挥抑制效应的细胞来源。结果自体角质形成细胞可抑制淋巴细胞对同种异体抗原的增殖。结论自体皮岛中的角质形成细胞参与对同种异体抗原的提呈而诱导移植物耐受。
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类风湿关节炎患者血清和关节液细胞因子水平的变化及临床意义
目的探讨幼年类风湿关节炎 (JRA)及类风湿关节炎 (RA)患者 IL-6、 IL-8、 sIL-2R和 TNF-α等细胞因子 (CK)水平的变化 ,及其与风湿活动的传统指标血沉 (ESR)和 C-反应蛋白 (CRP)的相关性。方法采用夹心 ELISA法，对 30例 JRA 和 34例 RA患者的血清中， 4例 JRA、 7例 RA、 6例骨性关节炎 (OA)和 9例半月板损伤 (MT)患者的关节液中 IL-6、 IL-8、 sIL-2R和 TNF-α的水平进行检测。结果① 30例 JRA 、 34例 RA患者血清 IL-6和 sIL-2R的水平与对照组相差非常显著 (P〈 0.01)； 30例 JRA 患者血清 IL-8水平与对照组比较相差显著 (P〈 0.05)。② JRA全身型、少关节型患者血清 IL-8、 sIL-2R的水平和 JRA多关节型患者血清 IL-6的水平与对照组相差非常显著 (P〈 0.01)。③ 4例 JRA及 7例 RA患者关节液 sIL-2R的水平和 RA患者关节液的 IL-6水平与对照组相差显著 (P〈 0.05)。④ JRA患者血清 IL-6和 sIL-2R的水平与 ESR和 CRP的变化呈明显的相关关系 (r值分别为 0.532和 0.621)。结论① IL-6、 sIL-2R的水平与 JRA、 RA病的活动性有关，是类风湿活动性的主要指标。② sIL-2R 不仅参与 JRA和 RA的全身病理损伤 ,而且是引起关节局部损伤的主要 CK,IL-6也参与 JRA 关节局部的病理损伤 ,在 RA关节局部损伤似乎更为重要。③ IL-8主要参与 JRA的全身病理损伤 ,对关节局部病理损伤似乎并不重要。
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睾丸 Sertoli细胞对共移植同种异体肾细胞的保护作用及受体性别的影响
目的探讨表达 FasL的睾丸 Sertoli细胞对不同性别受体大鼠中移植肾细胞的保护作用。方法用酶消化法制备 Sertoli 细胞及肾细胞。流式细胞仪检测细胞表面 FasL及 Fas的表达。将约 106个细胞 (注入的细胞因分组不同而异 ,见 1.2.3)注入异体肾包膜下，用 SABC法测定肾细胞的存活状况，并以 TUNEL法观察移植物中的淋巴细胞凋亡。结果移植后 20d，用组织学分析移植细胞的存活率。单纯肾细胞移植，移植物无一例存活；混合细胞移植，移植物的存活率为 87.5％。以抗 FasL抗体处理过的 Sertoli细胞与肾细胞共移植，肾细胞的存活率仅为 30.0％，雌性受体移植物的存活率为 77.8％。移植物中可见凋亡的淋巴细胞。结论同种异体移植中， Sertoli细胞对移植的肾细胞具有保护作用，其机制与 Fas/FasL系统介导的淋巴细胞凋亡有关。
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脑胶质瘤细胞优势表达 Th2类细胞因子的研究
细胞因子在调节肿瘤生长及肿瘤免疫之间起着重要的作用，它们可以促进或抑制肿瘤细胞的生长 [1,2]。近年来，许多脑肿瘤研究者从培养人脑胶质瘤细胞株和胚胎脑胶质细胞入手观察到细胞因子的持续表达和分泌，推测脑胶质瘤的发生、发展可能与一些细胞因子基因的异常表达和分泌有关。我们采用 RT-PCR法，对 10株人脑胶质瘤细胞进行了 IL-4、 IL-6、 IL-10和 TNF-α的检测。
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bcl-x、 bax基因表达与肝细胞癌临床病理特征的关系
目的研究凋亡相关基因 bcl-x及 bax在肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达与 HCC临床病理学特征的关系及其意义。方法采用免疫组织化学方法，检测石蜡包埋的 HCC标本中凋亡相关基因 bcl-x及 bax的表达。结果在 40例 HCC中， bcl-x和 bax阳性者分别为 20 例和 19例； 14例肝硬变 bcl-x和 bax 阳性者分别为 12例和 11例。 bcl-x和 bax 在 HCC细胞中的表达均低于肝硬变 (均 P＜ 0.05)； bcl-x和 bax在高中分化型 HCC细胞中的表达均高于低分化型。 AFP≤ 400μ g/L的患者二者的表达均高于 AFP＞ 400μ g/L的患者。在临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的 HCC细胞中的表达均高于Ⅲ期 , 彼此间均有显著性差异；而在男性与女性患者间 , 在年龄＞ 60岁与＜ 60岁患者间，均无显著性差异 (均为 P＞ 0.05)。凋亡相关基因 bcl-x及 bax在 HCC细胞的表达呈正相关 (r=0.5602, P＜ 0.001)。结论凋亡相关基因 bcl-x和 bax在 HCC细胞中的表达，对肝癌细胞的凋亡具有调节作用 , 并与 HCC的分化程度、临床分期和 AFP的水平有关。
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血管内皮生长因子及其受体在肝癌细胞中的表达及意义
目的探讨人肝癌细胞株血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体的表达，进一步认识 VEGF在肝癌血管形成中的作用机制。方法以人脐静脉血管内皮细胞系 ECV304和小鼠成纤维细胞系 L929作为对照，采用免疫组化染色及 RT-PCR，检测体外培养的人肝细胞肝癌细胞系 SMMC7721、 HHCC和 HepG2中 VEGF及其受体的表达。结果 SMMC7721、 HHCC和 HepG2细胞均有 VEGF的表达，同时 VEGF受体 1(Flt-1)在 SMMC7721细胞中也有表达；而 HHCC和 HepG2细胞则表达 VEGF受体 2(KDR)。结论在肝癌的血管形成中可能存在 VEGF的自分泌机制。
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抗成骨肉瘤 mAb的制备、鉴定及其细胞毒效应
目的建立抗人成骨肉瘤 mAb杂交瘤细胞系并对其抗体特性进行研究。方法利用我室自建的骨肉瘤细胞系 (OS— 9607)免疫 Balb/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 Sp2/0进行融合，经筛选和克隆化后，建立杂交瘤细胞系。以免疫组化和 Western Blot等方法研究抗体特性，以 MTT法研究细胞毒作用。结果得到 1株能够稳定分泌抗体，效价高的杂交瘤细胞系 3D9，免疫组化结果显示着色区主要分布在细胞核上，相应抗原在成骨肉瘤标本和成骨肉瘤细胞系高度表达 (83％ )，正常组织未见表达， Western Blot 显示 3D9相应分子量为 Mr 54 000。 MTT法示该抗体对成骨肉瘤细胞的杀伤率明显高于对照组。结论得到的杂交瘤细胞系分泌的 mAb体具有成骨肉瘤细胞特异亲和性，并有一定的细胞毒效应，可能成为新的成骨肉瘤生化标志，在肿瘤的免疫治疗方面有广阔的应用前景。
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PTD-bcr/abl融合癌蛋白片段的表达及其跨膜转运
目的探讨蛋白转导结构域 (PTD)介导的转导 bcr/abl癌蛋白片段的方法，为进行免疫治疗提供实验依据。方法合成编码 PTD的基因片段，并与 PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白 bcr/abl基因片段融合 ,在大肠杆菌中表达。将纯化的融合蛋白 PTD-bcr/abl与 HL-60 细胞共孵育，用 Western blot分析融合蛋白的跨膜转运。结果 PTD基序可介导 bcr/abl蛋白由细胞外跨膜转导进入细胞内。结论这一结果可能为应用外源蛋白负载 (loading)抗原提呈细胞 (APC)提供新的途径。
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鼠抗人 CD28分子单克隆抗体的研制及生物学特性研究
目的制备鼠抗人 CD28分子的单克隆抗体 (mAb)，研究其在 T细胞的活化、增殖及信号传导中的作用。方法以小鼠淋巴瘤细胞转染人 CD28基因的细胞株 (CD28-T)为免疫原，采用 B淋巴细胞杂交瘤技术，获取分泌特异性 mAb的杂交瘤细胞株。以体内诱生法生产腹水，并以免疫亲和层析法对其纯化。以快速定性试纸法鉴定 mAb的 Ig亚类，竞争抑制法分析 mAb识别的抗原表位， 3H-TdR掺入法研究 mAb对 T细胞的刺激效应。结果成功地获得了 5株分泌特异性抗人 CD28 mAb的杂交瘤细胞株，鉴定的 1株 (克隆 18G8)属 IgG2a，腹水效价 (流式细胞仪分析 )达 1:2 400以上。该 mAb能 60％阻断标准鼠抗人 CD28抗体与相应抗原的结合，提示其识别的抗原表位与标准 mAb不完全相同。 mAb 18G8可取代 B7-1分子介导的协同刺激信号，促进人外周血 T细胞增殖 (SI=7)。结论 18G8是 1株功能性 mAb，具有重要的研究和应用价值。
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血清层粘连蛋白检测对恶性肿瘤诊断的临床价值
层粘连蛋白 (laminin,LN)是一种非胶原糖蛋白的主要成分，广泛分布基底膜的透明层中，健康人群血清中也可存在一定量的 LN。近年研究表明， LN与肿瘤的病理机制密切相关，尤其与肿瘤浸润、转移之间的关系，引起人们的高度注视 [1]。正常人血清 LN含量较低，但肿瘤患者血清中 LN的值多可升高。为此，我们采用放射免疫法检测了 157例恶性肿瘤患者和 113例正常对照人血清 LN的水平，并探讨了其临床意义。
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家兔抗角蛋白自身抗体独特型抗体的产生及临床意义
目的观察长期注射大剂量同种异体抗角蛋白自身抗体 (AK auto Ab)后，家兔血清中针对抗角蛋白自身抗体 (AK auto Ab)独特型抗体的产生。方法肌肉注射亲和层析纯化的 AK auto Ab(5 mg/kg)，隔日 1次，连续 90 d，用 ELISA检测血清中的抗独特型抗体。结果注射 AK auto Ab的家兔产生了针对 AK auto Ab F(ab′ )2片段的抗独特型抗体，于给药 4 wk血清抗体滴度达高峰，以后逐渐降低。结论长期注射大剂量同种异体 AK auto Ab的家兔可产生免疫耐受性。
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抗胶质瘤单链抗体－人肿瘤坏死因子α融合基因的构建及表达
目的制备单链抗体－人肿瘤坏死因子α (hTNF-α )融合蛋白。方法将 hTNF-α的成熟肽 cDNA以重组 PCR技术融合于胶质瘤单链抗体基因的 3′端，构建 39ScFv-hTNF-α融合基因，克隆入大肠杆菌分泌型表达载体 pET-20b(＋ ) ，并诱导表达。结果融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 20％。还原 SDS-PAGE和 Western blot显示，其相对分子质量 (Mr)为 44 000,具有识别胶质瘤相关抗原的活性及 TNF-α的抑瘤活性。结论完成了 39ScFv-hTNF-α融合基因的构建，并于大肠杆菌中表达了双功能融合蛋白，为胶质瘤的临床治疗提供了新的高效免疫导向药物。
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人β 2m基因的克隆及表达
β 2m是含有 99个氨基酸的血清蛋白，也是构成 MHC-I类分子的亚单位。初从肾脏患者的尿液中分离得到 [1]，其表达异常与多种肿瘤及肝、肾疾病有密切关系。 HLA-A2的晶体结构已证实 ,α 3和β 2m折叠起来形成 Ig样功能区 [2],并表明β 2m对维持 I类分子的天然构型的稳定性及其表达起关键作用 [3， 4]。 MHC-I类分子在免疫系统中占有极其重要的地位，目前已趋向利用基因工程技术构建 MHC-I类分子复合物以克服从体内获得的困难 [5,6]。本研究成功地构建了其轻链β 2m的融合表达载体，并在大肠杆菌中获得高效表达。
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人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因的构建及空间构象分析
目的构建人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因，并进行空间构象的分析。方法利用递归 PCR法，扩增人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因，并在融合基因 5′端和 3′端引入 Sal I与 Hind Ⅲ酶切位点。将融合基因克隆入 pUC19载体中，经酶切鉴定及序列测定证实后，利用计算机软件进行空间构象分析。结果人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因，经酶切鉴定及测序证实，其大小及核苷酸序列正确，与设计完全一致。计算机软件分析显示，融合基因表达产物可自动装配成四聚体，并具有 4条柔性好的长多肽，可确保与其融合的其他基因片段空间构象的独立性。结论人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因的成功构建，为进一步研制多价抗体奠定了基础。
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尖锐湿疣和寻常疣患者外周血 T细胞亚群及细胞因子水平的检测
近年研究发现 ,人类乳头瘤病毒 (HPV)的感染与机体的细胞免疫功能异常有关 [1]。由于尖锐湿疣和寻常疣与 HPV的感染有关 ,因此 ,我们检测这两种患者外周血 T细胞亚群 (CD3＋、 CD4＋ T细胞和 CD4＋ /CD8＋ T细胞的比值 )和 3种细胞因子 sIL-2R、 IL-2及 TNF-α水平的变化，探讨尖锐湿疣和寻常疣患者的细胞免疫状态。
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单核细胞趋化蛋白－ 1对胃癌荷瘤鼠作用的研究
肿瘤相关巨噬细胞对恶性肿瘤的生长、转移和预后，可能有着相当程度的影响。巨噬细胞在肿瘤局部的浸润与其相关的趋化因子的关系十分密切。人单核细胞趋化蛋白 -1(MCP-1)为趋化因子超家族的成员之一 [1]。本实验利用原核表达的 MCP-1和胃癌细胞系 SGC7901建立的荷瘤裸鼠模型，对 MCP-1在胃癌的成瘤性及导致肿瘤相关巨噬细胞聚集的作用进行了观察和测定。
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玉屏风散对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用
玉屏风散、出自元·朱丹溪的《丹溪心法》，由黄芪、白术和防风等组成，具有益气固表、扶正止汗、祛风御风等功效。现代研究表明，方中的黄芪和白术对机体的部分免疫指标具有促进作用。我们观察了玉屏风散对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。
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CD58对山羊妊娠早期子宫 IEL的活化作用
妊娠期子宫内膜淋巴细胞 (intraepithelial lymphocyte,IEL)活性的调节及γδ＋ T细胞活化的机制 ,是生殖免疫学研究的焦点之一 [1]。动物妊娠后，子宫局部淋巴细胞变化的显著特点是“经典” (classical)的参与免疫应答的淋巴细胞数量减少，并发生功能“极化” (polarization)[2]， CD4＋ /CD8＋细胞的比例倒置，使免疫应答转向以分泌 Th2型细胞因子为主 [3]。 CD58能以非 MHC限制的方式 ,非特异地刺激淋巴细胞活化 [4]。在妊娠期，母胎间血液的接触为密切，而 CD58是否参与 IEL的活化，尚未见报道。为此，我们研究了 CD58对于山羊妊娠期早期子宫 IEL的刺激作用，并对 CD58在子宫局部免疫调节中的作用进行了分析。
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支气管哮喘患儿急性发作期血清 IL－ 1β和 IL－ 4水平的检测
支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞为主的多种炎性细胞在气道内浸润，并伴有气道上皮细胞脱落及气道高反应性为特征的慢性炎症疾病。我们测定了哮喘患者外周血 IL-1β和 IL-4的水平，并探讨了它们与哮喘发病的关系。
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自体血离体照射回输对大鼠 NK细胞杀伤活性和 T细胞亚群的影响
自体血离体照射回输 (refusion of autoblood after X-ray, irradiation,RAI)的动物实验和临床研究证实， RAI可以保护正常组织，减轻放射反应及提高机体免疫功能 [1－ 3]，但从 NK细胞杀伤活性和 T细胞亚群两方面探讨 RAI对照射大鼠免疫功能的影响，目前尚未见报道。为此，我们进行了初步研究。
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HSP90β蛋白低调对肿瘤细胞 GST活性的影响
谷胱甘肽 -S-转移酶 (glutathione -S-transferase， GST)是一组多基因家族蛋白，广泛分布于动物、植物和细菌中，可催化具有亲核位点的谷胱甘肽 (GSH)与多种亲电子物质、致癌物质及一些亲脂性抗癌药物的结合。 GST还可提高机体对致癌物的解毒作用，具有抗诱变、抗肿瘤作用，降低肿瘤的发生。近年来研究表明 , GST也可增加癌细胞对化疗药物的代谢能力，产生耐药性。我们已成功地建立了 HSP90 β低调细胞系 [1]，并表明该细胞系对化疗药物的敏感性提高 [2]。本实验拟研究 HSP90 β低调是否会影响 GST的活性，以探讨 HSP90β低调后肿瘤细胞对化疗药物的敏感性提高的机制。
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氧自由基对严重烧伤后红细胞免疫粘附功能的影响
目的探讨氧自由基对烧伤后红细胞免疫粘附功能的影响。方法于伤后 1 d、 3 d、 5 d、 7 d、 14 d、 21 d、 28 d和 35d，观察 RBC-C3b受体花环形成率 (RC3b RR)和 RBC-IC花环形成率 (RICR)，以及 SOD、 Lpo-MDA、 CAT、 GSH-px和 GSH水平的变化，并进行相关性分析。结果①伤后 RC3bRR显著下降， RICR显著升高 (P＜ 0.05～ 0.001)，但 4wk后逐渐恢复至正常。②伤后 SOD、 CAT、 GSH-px和 GSH的水平显著下降， Lpo-MDA的水平则显著上升 (P＜ 0.05～ 0.001)，至少伤后 3wk才恢复到正常水平。③ RC3bRR与 SOD、 CAT、 GSH-px和 GSH的水平呈显著的正相关 (r值依次分别为 :0.601， 0.799， 0.715和 0.597)，与 Lpo-MDA的水平呈显著的负相关 (r=-0.564)； RICR与 SOD、 CAT、 GSH-px和 GSH的水平也呈显著的负相关 (r值依次分别为 :-0.359、 -0.577、 -0.420和 -0.427)，与 Lpo-MDA的水平则呈显著的正相关 (r=0.433)。结论红细胞膜极易产生脂质过氧化作用，烧伤后自由基损伤的程度，可直接影响红细胞膜的功能，特别是红细胞免疫粘附功能。在烧伤治疗过程中，提示减少机体自由基的产生，提高患者红细胞免疫粘附功能是十分必要的。
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核仁组成区相关嗜银蛋白对良、恶性骨肿瘤检测的临床意义
核仁组成区相关嗜银蛋白 (Ag-NORs)是一种酸性非组蛋白 C23,在 rDNA转录活性中起重要调控作用。核仁组成区银染强度反映了 rDNA转录活性水平 ,与细胞增殖活性密切相关 [1],已被不少学者用于肿瘤的分级和癌前病变的诊断检测 ,对于良恶性病变的鉴别诊断价值很大 [2]，但其对良恶性骨肿瘤的鉴别诊断报道较少。我们采用 KL型全自动图像分析仪对 51例骨肿瘤患者外周血 T淋巴细胞核仁组成区银染面积 /细胞核面积比值 (I S％ )进行分析 ,探讨其在良恶性骨肿瘤中的应用价值。
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慢性肺心病患者红细胞免疫功能及 NK细胞活性的检测
肺心病为我国较常见的一种心脏病，平均患病率达 0.4％。本病除心、肺和血液动力学出现变化外，其他脏器也有损害，并与机体的免疫调节功能失调有着密切的关系。为此，我们对 87例慢性肺原性心脏病急性发作患者的红细胞免疫功能及 NK细胞的活性进行了检测。
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一种新的淋巴细胞类型—— NKT细胞
免疫系统中的淋巴细胞一般分为 3种类型 : ①在胸腺中分化的 T淋巴细胞；②产生抗体的 B淋巴细胞；③自然杀伤细胞。目前又发现第 4类淋巴细胞，即 NKT细胞〔 1〕。 NKT细胞是一群独立的细胞。它们既表达 T细胞的表面标志又表达 NK细胞的表面标志。大部分学者认为 NKT细胞的表面标志为 CD3int(intermediate)IL 2Rβ＋ NK1.1＋〔 2〕。本文从表面标志、抗原识别与生物学特征以及与疾病的关系三个方面对 NKT细胞作一综述。
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推荐一套免疫学及相关学科的参考丛书
英国科学出版社 (Academic press)出版了一套免疫学以及免疫学相关学科的丛书，不仅提供系统、翔实的资料 (FactsBook)，而且有高度概括的总论。该丛书目前有 17本，包括细胞因子 (Cytokine)， G蛋白连接受体 (G-protein linked receptor)，细胞外基质 (extracellular matrix),蛋白激酶 (Protein Kinase)、离子通道 I:细胞外配体门控的通道 (Ion Channel I:extracellular ligand-gated channels )，离子通道 II: 细胞内配体门控的通道 (Ion Channel II: intracellular ligand-gated channels)，离子通道 III：电压门控通道 (Ion channel III: Voltage-gated Channels), 趋化性细胞因子 (Chemokine),粘附分子 (adhesion molecules)，血型抗原 (Blood group antigen), 白细胞抗原 (Leucocyte antigen)，癌基因和抑癌基因 (oncogene and tumour suppressor gene)，运转蛋白 (transporter)，基因敲除 (Gene knockout)，补体 (complement)， HLA和白血病淋巴瘤细胞系 (Leukemia-lymphoma cell line)。出版社的网址是 www.hbuk.co.uk/ap. (金伯泉供稿 )
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
