中国中药杂志
China Journal of Chinese Materia Medica 중국중약잡지
- 主管单位： 中药通报
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2272/R
- 国内刊号： 李禾
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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梓醇对高糖致大鼠脑微血管内皮细胞间连接破坏的保护作用研究
梓醇为地黄的主要有效成分,具有缓解脑微血管内皮细胞水肿,促进内皮细胞存活与增殖作用.而其是否对高血糖引发的脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)间紧密连接损伤具保护作用还未知.该文评价了梓醇对高糖致大鼠BMECs紧密连接破坏的保护作用,并对其机制进行了初步研究.原代分离7～15 d SD大鼠BMECs,经30 mmol·L-1高糖损伤后,观察梓醇对其存活率、内皮素-1分泌、跨膜电阻、紧密连接超微结构、骨架蛋白F-actin重构、紧密连接蛋白和黏附连接蛋白表达的影响.结果表明梓醇(0.3,3.0,30.1 μmol·L-1)呈剂量依赖性提高BMECs存活率、降低内皮素-1的分泌、提高BMECs间跨膜电阻;透射电镜结果显示其还能增强BMECs间紧密连接;免疫荧光染色证实梓醇上调紧密连接蛋白claudin-5,ZO-1的表达,逆转高糖所致F-actin细胞骨架重排;q-PCR结果也进一步证实梓醇呈剂量依赖性上调紧密连接蛋白claudin-5,occludin,ZO-1,ZO-2,ZO-3和黏附连接蛋白α-actintin,vinculin,cateinins的mRNA表达(P＜0.05).该研究表明梓醇对高糖致BMECs的损伤具有保护作用,其机制可能与上调细胞间紧密连接与黏附连接表达,逆转细胞骨架蛋白F-actin重构有关.
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何首乌6种成分对人孕烷X受体介导的CYP3A4的调控作用
该文探讨何首乌中6种化学成分(没食子酸、槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素)对人孕烷X受体(human-pregnant X receptor,PXR)介导的CYP3 A4的转录调控作用.利用前期建立的PXR介导的CYP3A4药物诱导快速筛选技术,采用MTS细胞检测方法考察化学成分对细胞活性的影响,计算IC50;利用双荧光素酶报告基因系统,将PXR表达载体和含CYP3A4转录调控区的报告基因载体共转染HepG2细胞,10 μmol·L-1利福平为阳性对照,10 μmol·L-1酮康唑为阴性对照,用何首乌中6种成分——没食子酸、槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素(5,10,20 μmol·L-1)分别处理24h,进行双荧光素酶活性检测.结果表明,空载质粒pcDNA3.1与pGL4.17-CYP3A4共转染时没食子酸、白藜芦醇对CYP3A4的调控为抑制效应,槲皮素、山柰酚、木犀草素对CYP3 A4产生诱导作用;pcDNA3.14-PXR与pGL4.17-CYP3A4共转染时,槲皮素、山柰酚、木犀草素、白藜芦醇、芹黄素均产生诱导效应.综上所述,6种成分对CYP3A4产生抑制或激活效应,PXR参与后,5种成分对CYP3A4产生诱导效应,其中3种成分的诱导效应具有显著性差异.该研究提示,在与何首乌联合用药时应注意潜在的药物相互作用,提高安全性和有效性.
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黄芩苷、小檗碱和葛根素体外胰岛素抵抗细胞差异化降糖作用研究
探讨中药成分黄芩苷、小檗碱、葛根素和甘草苷对肝胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)细胞糖代谢的改善作用.采用胰岛素和地塞米松联合诱导建立IR-HepG2细胞模型,给药24 h测定不同剂量黄芩苷、小檗碱、葛根素和甘草苷对葡萄糖消耗量、糖原含量和细胞活性的影响.结果显示,与IR模型组相比,除甘草苷和1μmol· L-1黄芩苷组外,各给药组均显著升高葡萄糖消耗量;黄芩苷组(10,20,50 μmol·L-1)、小檗碱组(5,10,20,50 μmol·L-1)和葛根素组(40,80,160 μmol·L-1)显著增加细胞内肝糖原含量;而甘草苷降糖作用不明显.在此基础上,重点研究黄芩苷、小檗碱和葛根素对IR-HepG2细胞葡萄糖转运蛋白(GLUTs)表达水平的影响.qPCR结果显示IR-HepG2细胞GLUT1和GLUT4基因mRNA表达比正常组低.5,20 μmol·L-1小檗碱下调IR-HepG2细胞GLUT1基因mRNA水平;20,40,80 μmol· L-1葛根素上调GLUT1基因mRNA水平.10,20,50μmol· L-1黄芩苷和20 μmol·L-1小檗碱上调GLUT4基因mRNA水平,40,80 μmol·L-1葛根素下调GLUT4基因mRNA水平.Western blot法检测结果显示,与正常组相比,IR-HepG2细胞GLUT1和GLUT4蛋白表达降低,GLUT2表达升高.10,20,50μmol·L-1黄芩苷上调GLUT2和GLUT4蛋白表达;20 μmol·L-1小檗碱升高GLUT2蛋白表达,10,20μmol· L-1小檗碱增加GLUT4蛋白表达;20,40,80μmol·L-1葛根素上调GLUT1和GLUT2蛋白表达.以上成分体外差异化影响GLUT1/2/4表达,可以有效调节葡萄糖转运的瞬时响应和长期响应.降糖途径分析显示黄芩苷和葛根素与油酸诱导IR-HepG2细胞降糖作用途径环节及效应强弱存在一定程度差异,而小檗碱和甘草苷在2种不同诱因的IR-HepG2细胞中无明显差异.体外研究初步表明黄芩苷、小檗碱和葛根素具有体外差异化降糖作用,可加速糖转运增加糖原合成调节糖代谢改善肝IR.
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不同水分处理垂盆草对CCl4致HepG2细胞损伤的保护作用
目前探讨栽培措施对垂盆草药材药理活性影响的研究尚不多见.为了探索不同水分处理垂盆草的保肝效果差异,以不同水分梯度[田间持水量的15％ ～ 20％ (S1),35％ ～40％ (S2),55％～60％ (S3),75％ ～80％ (S4),95％～100％(S5)]处理60d后垂盆草的水提物为研究材料,探索其对四氯化碳(CCl4)诱导HepG2细胞氧化损伤的预防效果.MTT法检测HepG2细胞存活率,PI单染法检测细胞周期,Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡,比色法测定细胞上清液中转氨酶及抗氧化指标.结果表明,与模型组相比,垂盆草水提物能显著减轻CCl4导致的HepG2细胞损伤,提高HepG2细胞存活率.5个垂盆草组处理的保肝作用有显著差异,以75％～80％田间持水量(S4)处理垂盆草水提液的HepG2细胞存活率、SOD和GSH水平高,细胞凋亡率,ALT,AST,MDA水平低;而95％～ 100％田间持水量(S5)处理的HepG2细胞存活率低,凋亡率和转氨酶活性高,SOD,GSH,GSH-Px水平低.综上所述,不同水分处理对垂盆草的保肝活性有较大影响,75％～ 80％田间持水量条件下处理60d的垂盆草保肝作用佳.
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整合药理学视角下的骨碎补治疗骨质疏松症作用机制研究
骨碎补在补充替代治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)的临床实践中具有重要意义.该研究基于整合药理学视角,探索骨碎补治疗OP的作用机制.测得6个骨碎补所含活性化合物成分,主要包括苷类和甾醇类;通过网络药理学分析模块,以“节点连接度”的2倍中位数为卡值,选取中药靶标-疾病基因互作网络的核心节点;在此基础上,计算“节点连接度”“节点紧密度”和“节点介度”等3个拓扑结构特征值,从而筛选出骨碎补治疗OP的4个核心靶标,包括甲状旁腺素1受体(PTH1R)、甲状旁腺素2受体(PTH2R)、降钙素受体基因(CALCR)和SPTBN1基因(SPTBN1);基于基因本体数据库GO和KEGG通路数据库,确定药物靶标基因所编码蛋白质的分子功能、细胞内定位及其所参与的生物学反应和通路.结合富集计算,预测骨碎补治疗OP可能通过循环系统、神经系统、能量代谢、催乳素信号通路、GnRH信号通路、神经营养因子信号通路等生物合成过程及作用通路发挥作用.该研究结论与现有研究结果有一定呼应,探索出的新靶点、新通路也可为骨碎补治疗OP进一步验证性研究提供理论依据.
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3种银杏内酯成分的质谱裂解途径研究
该文利用高分辨的四极杆串联飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS)的高分辨率及高质量准确度特点,在负离子模式下,对3种银杏内酯(银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C)的质谱裂解规律进行研究.结果表明,3种银杏内酯有相似的裂解途径,包括4条共同的裂解途径和1个共同的特征性离子.在高质量区,三种银杏内酯的主要裂解途径是内酯环开环并连续丢失CO,C02,以及母核不断失去H20.在低质量区,碎片离子m/z 72.993 6是3种银杏内酯共有的特征性碎片离子,推测可能是C环开裂形成的碎片离子.碎片离子m/z 141.018 8,125.023 8,113.024 0,97.029 1是银杏内酯B、银杏内酯C的共有的特征性碎片离子,推测可能是母核A环开环或连续碎裂形成的碎片离子.上述质谱裂解途径可为银杏内酯类化合物的结构鉴定提供依据.
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麦冬与山麦冬中多元指标成分的比较分析
建立超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定麦冬类药材中甾体皂苷、高异黄酮、氨基酸与核苷类共33种指标成分含量测定的方法,并结合多元统计分析对麦冬类商品药材进行比较分析.采用Syn-ergiTM Hydro-RP 100(A)(2.0 mm×100 mm,2.5μm)色谱柱,以0.1％甲酸水-0.1％甲酸乙腈为流动相,流速0.4 mL· min-,梯度洗脱,多反应监测模式检测(MRM);用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏小二乘判别分析(PLS-DA)进行数据处理和分析.结果显示,33种目标成分在一定浓度范围内线性关系良好(r ＞0.999 0);加样回收率为96.23％～102.0％,RSD均小于5.0％.麦冬与山麦冬化学成分差异明显,找出7种差异显著的化学成分.该研究为麦冬类药材内在质量的综合评价和全面控制提供依据,同时为麦冬与山麦冬的药材鉴别提供新的方法参考.
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藏药假秦艽中的1个新苯并异呋喃酮及其抗菌活性研究
对藏药假秦艽的化学成分进行研究.运用硅胶、凝胶、MCI-gel反相树脂及RP-HPLC等多种色谱技术从假秦艽95％乙醇提取物中分离鉴定到1个新苯并异呋喃酮类化合物,该化合物通过核磁共振谱、质谱、红外光谱和紫外光谱鉴定为5-(3-羟丙基)-2,2-甲基-2H-呋喃[3,4-h]色烯-7(9H)-酮(1).对该化合物进行了抗菌活性筛选,发现其对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株的MIC9o为(58.4±4.2)mg·L-1,接近对照左氧氟沙星的MIC90(52.8±4.6) mg·L-1.
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青钱柳叶中16个成分的UPLC-QE-Orbitrap-MS定量分析
青钱柳叶为胡桃科植物青钱柳Cyclocarya paliurus的干燥叶,现代研究表明,其化学成分复杂,具有多种生物活性.目前对青钱柳叶质量控制方面的研究主要集中于青钱柳叶中多糖及黄酮类成分含量测定,萜类和酚酸类成分含量测定研究较少.该文对青钱柳叶中3类16个活性成分进行含量测定研究,建立了青钱柳叶UPLC-QE-Orbitrap-MS定量分析方法,结果显示,16个成分在进样质量浓度范围内呈现良好的线性关系(R2＞0.996),精密度RSD＜ 3.0％,重复性RSD＜ 3.0％,平均回收率为95.20％～ 104.4％.说明该方法简便准确,可用于青钱柳叶药材质量的综合评价.采用所建立的方法对不同产地12个批次青钱柳叶进行了含量测定,测定的16个成分在12个批次青钱柳叶中的含量相差数倍至数10倍,说明不同产地青钱柳叶内在质量差异显著.
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铁死亡通路与中药干预机制研究进展
铁死亡是一种新的细胞调节性死亡方式,与凋亡、坏死、自噬的死亡不同,表现为铁离子依赖的脂质过氧化物超限蓄积.目前发现,铁死亡与肿瘤增殖、动脉硬化、神经元性退化、糖尿病、抗病毒免疫反应、急性肾损伤和肝及心脏的缺血-再灌注损伤等多种生理和病理过程有关,已经引起越来越多的学者关注.一方面,可寻找相应药物促进铁死亡,来清除癌细胞、病毒感染的细胞等;另一方面,可抑制铁死亡,来保护健康细胞.我国具有丰富的中药资源,其中含有多种活性成分对铁死亡具有调节作用.现就铁死亡通路进行整理,对已发现的铁死亡诱导剂和抑制剂靶点进行归纳,并以已发现的中药及其活性成分对铁死亡的调节作用做一简述,以期为铁死亡相关的中药研发提供参考.
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降血脂多糖活性机制及构效关系研究进展
降血脂多糖活性显著、来源众多且安全性高,应用前景广阔.该文根据降血脂活性多糖的结构特征将其分为多糖硫酸酯、氨基多糖、同多糖和杂多糖4类,简要综述了近年关于4类多糖的降血脂活性机制研究和构效关系假设,以期为降血脂多糖的研究及产品开发提供参考.
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升麻属植物环菠萝蜜烷型三萜化合物研究进展
升麻属植物在我国分布广泛,资源丰富,环菠萝蜜烷型三萜类成分是该属植物的特征性成分.根据结构特征分为升麻醇、氢化升麻醇、shengmanol、cimiacerogenin、阿克特醇、16,23-二酮、绿升麻醇及兴安升麻醇等类型.现代药理研究表明其具有细胞毒、抗骨质疏松、抗病毒、抗炎、抑制核苷转运、神经保护、抗氧化及抑菌等多种药理作用.该文对升麻属植物的资源分布、环菠萝蜜烷型三萜类化合物的骨架结构及生物活性进行了归纳,以期为该类化合物的研究开发利用提供参考.
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天然倍半萜类化合物抗炎作用机制的研究进展
倍半萜是自然界中分布较广的一类化合物,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节等广泛的生物活性.该文对倍半萜化合物抗炎作用机制进行了综述,其作用机制主要是通过抑制NF-κB,MAPKs和STAT等信号通路相关因子的活化,下调TNF-α,PGE2,NO,IL-1,IL-6,IL-8等炎性因子的蛋白表达,进而减少炎症因子的产生与释放而发挥作用.该文旨在为相关研究提供借鉴和参考.
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环境因子对紫苏籽粒产量及品质性状影响研究
为了探明不同环境因子对紫苏籽粒产量及品质性状的影响,寻找影响紫苏生长发育的环境因子及内在规律.该研究收集了贵州省6个生态区域中紫苏生育期内主要环境因子数据,与15个紫苏品系的产量及品质性状进行相关性分析.结果表明,供试栽培环境对各紫苏品系的产量及品质影响显著.栽培环境对产量构成因素中主穗果数,单株穗数,株高,主穗长度,生育期及千粒重的影响作用依次递减.各环境因子中,纬度与紫苏产量,生育期,株高及单株穗数呈现正相关,与主穗长度及主穗果数呈现负相关.海拔与紫苏生育期呈负相关.紫苏产量随海拔增加先升高后降低,在海拔为800 m,产量达到高值.经度除与紫苏株高呈正相关,与主穗长度呈现负相关,对其他产量指标影响趋势不一致.日照长度,积温均温及降雨量3个主要的气相因子对不同紫苏品系产量影响趋势不一致.其对产量构成因素的影响,主要表现为日照时间与株高成负相关,积温与均温与株高呈正相关,与主穗长度呈负相关,降雨量与生育期,株高,单株穗数呈负相关.栽培环境对油脂成分影响作用以油酸,硬脂酸,亚油酸,α-亚麻酸,棕榈酸及含油量依次递减.相关性分析表明含油量与棕榈酸含量及亚油酸含量呈现显著的负相关,与亚麻酸含量间呈现正相关.脂肪酸成分间,紫苏种子中α-亚麻酸含量与其他脂肪酸成分均呈现显著负相关,而棕榈酸,硬脂酸,油酸,亚油酸之间均呈现显著正相关.不同环境因子对紫苏品质的影响如下:含油量与海拔及日照时间表现为正相关.α-亚麻酸含量与经度,纬度,积温及均温呈现负相关,与海拔,日照时间及降雨量呈现正相关,而棕榈酸,硬脂酸,油酸,亚油酸含量与这些环境因子的相关性与α-亚麻酸含量的情况相反.该研究详细探讨了环境因子对紫苏产量及品质的影响,为紫苏生态种植技术及道地性研究提供依据.
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石菖蒲挥发油自纳米乳的制备与质量评价
为增加石菖蒲挥发油的溶解度,该研究拟将其制成自纳米乳制剂.通过相容性研究、辅料配伍试验、伪三元相图的绘制初步筛选处方,以粒径、载药量为指标,采用Box-Behnken效应面法优化处方,并对优处方的自纳米乳制剂进行表征、体外溶出评价.结果显示,石菖蒲挥发油自纳米乳的优处方为:41.7％石菖蒲挥发油、46.8％聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯、11.5％ PEG-400;所制得的自纳米乳澄清透明,载药量为(192.77 ±1.64) mg·g-1,粒径为(53.20±0.94) nm,PDI为0.230±0.013,Zeta电位为(-12.2±0.7)mV;在体外溶出度实验中,石菖蒲挥发油自纳米乳明显高于石菖蒲挥发油.该研究中石菖蒲挥发油直接作为自纳米乳中的油相,处方更简单且载药量更高,制得的自纳米乳符合相关的质量要求,为挥发油的制剂研究提供了一定的参考.
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双氢青蒿素原料药及其片剂中杂质diketo aldehyde的含量测定
双氢青蒿素与无水溴化亚铁在氮气保护的条件下合成双氢青蒿素中杂质diketo aldehyde (DKA),并建立HPLC测定双氢青蒿素原料药及其片剂中DKA含量的方法.该研究采用双氢青蒿素原料与无水溴化亚铁反应制得DKA,含量测定时采用的色谱柱为Agilent Eclise XDB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(37∶ 63),流速1.0 mL·miR-,柱温15℃,检测波长216 nm,进样体积40 μL.所建立的方法分离度良好,线性关系、稳定性、精密度、重复性、加样回收试验均符合《药品质量标准分析方法验证指导原则》要求.结果显示,13批双氢青蒿素原料药中DKA质量分数为0.086 7％～2.622 9％,10批双氢青蒿素片剂中DKA质量分数为0.068 3％ ～0.615 1％.
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苦碟子注射液治疗冠心病心绞痛的有效性和安全性研究:随机对照试验的系统评价和Meta分析
为评价苦碟子注射液治疗冠心病心绞痛的有效性和安全性.该研究系统全面地检索四大中文数据库(CNKI,VIP,WanFang,SinoMed)和三大英文数据库(Cochrane Library,Medline,ClinicalTrail.gov),检索时间为各数据库建库至2018年3月,按照预先制定的遴选标准筛选出苦碟子注射液治疗冠心病心绞痛的随机对照试验.用Cochrane协作网制定的ROB工具对纳入研究进行质量评价,RevManS.3软件进行Meta分析.结果共检索出712篇文献,终纳入38个研究,总样本量为3 812例,试验组为1 945例,对照组为1 867例,所纳入研究总体质量普遍偏低.Meta分析结果显示:分型不明确的心绞痛和不稳定型心绞痛在心绞痛疗效、心电图疗效方面苦碟子联合常规治疗或西药治疗优于常规治疗或西药治疗,稳定型心绞痛在心电图疗效方面苦碟子+常规治疗组优于常规治疗组;描述性分析结果显示:分型不明确的心绞痛和不稳定型心绞痛在心绞痛发作相关指标方面苦碟子组+常规治疗组优于常规治疗组;其他结局指标受各方面因素的影响(如结局指标间异质性太大等)而无法得出结论.纳入研究报告的均为轻微不良反应,不影响治疗.基于此结果,表明苦碟子注射液治疗冠心病心绞痛有一定的疗效,尤其在改善心绞痛疗效和心电图疗效方面有显著的积极作用,未见严重不良反应发生.但由于受到纳入研究数量少,且纳入的研究质量普遍偏低、存在发表性偏倚等诸多局限性,致使该研究结果证据质量较低,故在运用该结论时需谨慎.苦碟子注射液治疗冠心病心绞痛的疗效和安全性还有待今后开展设计合理、实施严谨、报告规范的,大样本、多中心、随访时间足够的随机对照试验来证实.
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基于数据挖掘陈宝贵教授治疗痞满的处方规律研究
总结研究全国名老中医陈宝贵教授治疗痞满的处方规律.收集并整理陈宝贵教授临床治疗痞满的医案,录入中医传承辅助系统(V2.5)软件,对筛选出的医案进行数据挖掘,分析其处方规律.通过筛选得到214个医案处方,统计分析陈宝贵教授接诊的痞满治疗经验,发现陈教授在治疗痞满时以调整脏腑气机升降为主.药物四气五味体现了陈教授“寒温并用”“辛开苦降”的配伍用药特点.遣方用药多以具有舒肝理气、健脾和胃功效的药物为基础方,根据兼症,酌情配以具有消食导滞、活血化瘀、益气养阴、安神定志、强筋健骨等功效的药物.客观地总结出陈宝贵教授治疗痞满的临证经验,对名老中医学术思想和经验传承具有重要意义.
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基于Meta分析文献的5种中药注射剂治疗心力衰竭的临床使用特点
该研究基于Meta分析类文献分析5种中药注射剂治疗心力衰竭的临床使用特点.共纳入24篇Meta分析类文献,涉及参附注射液、参麦注射液、生脉注射液、丹红注射液、黄芪注射液5个注射剂品种,其中参附注射液、参麦注射液和生脉注射液文献数量较多,以上注射剂联合西药常规治疗较西药单独治疗有效率显著提高、对6 min步行实验、射血分数、脑肽钠等指标显著改善.参附注射液还可以改善患者生存质量、调节心率等指标.参附注射液可用于偏阳虚证患者,参麦注射液可用于偏阴虚患者,生脉注射液可用于气阴两虚证患者.可见西医常规治疗联合中药注射剂治疗心衰可以提高疗效,其中参附注射液、参麦注射液、生脉注射液临床使用较多,临床使用时需要对症治疗.目前中药注射剂的临床研究文献水平较低,对于药物的有效性、安全性评价仍需高水平的临床证据.
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舒胸方在Caco-2细胞单层模型的转运研究
舒胸方(三七、川芎和红花)具有活血化瘀、通络止痛功效,该文研究舒胸方在Caco-2细胞单层模型的转运特征.采用MTT法确定舒胸方对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;采用Caco-2细胞单层模型探讨舒胸方对地高辛吸收转运的影响;采用HPLC测定并计算地高辛表观渗透系数Papp.结果显示,从顶侧(AP)到底侧(BL) (AP→BL),三七提取液、红花提取液、川芎提取液、(川芎+红花)混合提取液及舒胸方复方提取液表观渗透系数(Papp)分别为(3.12±0.73)×10-6,(2.58±0.41)×10-6,(4.97±0.64)×10-6,(4.63±0.57)×10-6,(5.79±0.68)×10-6 cm·s-1,表明地高辛在Caco-2单层细胞膜转运中主要以主动吸收为主,且需要P-gp蛋白参与;川芎的加入能显著降低地高辛BL→AP方向的转运(P＜0.01),且能显著增加地高辛AP→BL方向的转运(P＜0.05);舒胸方提取液加入后,BL→AP方向地高辛转运受到显著抑制(P＜0.01).研究结果提示,红花提取液不影响P-gp蛋白转运也未对地高辛自主扩散产生影响;川芎提取液和舒胸方提取液均显著降低了地高辛BL→AP方向的转运;三七对地高辛自主扩散并无影响;川芎红花混合提取液与川芎提取液实验结果类似.
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基于DNA条形码分析的霍山石斛及其常见混伪品的初步研究
该研究选择叶绿体基因rbcL,matK及核基因组ITS2序列初步探讨石斛属植物的系统发育关系,筛选可用于石斛属药用植物鉴定的DNA条形码通用序列,分析应用DNA条形码对霍山石斛及伪品进行品种鉴定的可能性.使用ITS2,rbcL,matK序列的通用引物对石斛属植物进行扩增测序,通过比较各序列的扩增和测序成功率,种内和种间的变异等指标,运用Bi-oEdit,MEGA 5.0等软件分析序列,构建NJ分子系统树,进而评价不同序列的鉴定能力.结果表明ITS2序列不仅在石斛属种内变异和种间变异大,而且有明显的条形码间隙,种内变异和种间变异重合较少,ITS2序列不同石斛种形成单系分支的百分比也高,能较好地区分不同种类的石斛.rbcL和matK序列扩增成功率低、NJ系统树可靠性不高,rbcL和matK序列构建的系统树中形成单系的物种支持百分比例均较低.因此ITS2序列可以作为DNA条形码用来鉴别霍山石斛和铜皮石斛、铁皮石斛.
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茉莉酸甲酯对颠茄托品烷类生物碱代谢及相关基因表达的影响
莨菪碱和东莨菪碱是颠茄中重要的托品烷类生物碱次生代谢产物,具有多方面药理价值.该研究采用土培法种植颠茄实生苗,设置不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)处理,分析不同浓度MeJA对颠茄莨菪碱和东莨菪碱的含量、生物碱合成的上游物质以及关键酶基因表达量的影响.结果表明,MeJA浓度为200 μmol·L-时更有利于颠茄生物碱的积累;对腐胺(Put)及其合成的关键酶活性的测定发现,Put的含量与其合成的关键酶活性的变化基本一致,都随MeJA浓度升高先增加后降低,Put含量在MeJA浓度为200 μmol·L-1时达到高;对PMT,TRⅠ,H6H表达量的检测发现,200 μmol· L-MeJA处理下叶片和根部TRⅠ,H6H基因均有较高的表达水平,PMT基因表达量无明显变化趋势.以上结果说明,MeJA对颠茄莨菪碱和东莨菪碱合成的调控主要依靠影响关键酶基因的表达量发挥效用,适宜浓度茉莉酸甲酯提高了颠茄叶片TR Ⅰ和根部TR Ⅰ与H6H表达量,从而促进莨菪碱的合成和莨菪碱向东莨菪碱的转化,提高颠茄体内莨菪碱和东莨菪碱的积累.
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西洋参实时荧光定量PCR快速鉴别方法的建立
基于ITS2片段序列特征,该研究设计了西洋参的特异性引物、探针,通过条件的优化建立了西洋参的实时荧光定量PCR快速鉴别方法.利用该方法对43个中药材样本进行了验证,结果能准确地鉴别出43个药材样本中的22个西洋参,并且灵敏度高,检测限可达到1 × 10-4 ng.该方法具有准确、快捷、灵敏的特点,可对西洋参及其加工产品进行准确的鉴别和检测,应用前景广阔.
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高温促进黄花蒿中青蒿素生物合成的机制研究
黄花蒿Artemisia annua又名青蒿,是中国传统中药,其有效成分青蒿素是一种含过氧桥基团结构的倍半萜内酯类化合物,是一种能有效抗疟的药物.很多理化因子例如盐分、水分、光照、植物激素等均能诱导黄花蒿中次生代谢产物青蒿素的合成,温度作为一种重要的生长因素对青蒿素的合成也有极大地影响.该文旨在研究高温诱导对黄花蒿中青蒿素生物合成的影响.将黄花蒿幼苗放置在25,40℃条件下,分别在0,3,12,36 h后取样,利用液相色谱-质谱联用法测定各个样品中的青蒿素含量;提取样品的总RNA,进行转录组测序并且利用实时荧光定量PCR技术定量分析青蒿素合成途径及竞争途经关键酶基因的表达.结果显示40℃处理3,12,36 h后,青蒿素质量分数分别提高20％,42％,68％;FDS,ALDH1,CYP71AV1和ADS的表达量分别上调4.3,3.3,2.5,1.9倍,SQS和BPS的表达量下调了37％和90％.综上,高温可以通过促进青蒿素合成途径合成酶基因表达量,并且抑制青蒿素竞争途径合成酶基因的表达量从而促进青蒿素的生物合成.
