46,XX,t(13;22)伴习惯性流产一例

患者女,29岁,结婚7年,妊娠5次,均于孕两个月时自然流产.查体:身高160 cm,体重50.5 kg.表型、智力正常,妇科检查正常.实验室检查:肝功能、肾功能、电解质正常;甲状腺功能正常;性激素水平正常.细胞遗传学检查:取外周血常规培养,染色体制备,G显带分析,患者核型为:46,XX,t(13;22)(13pter→13q34∷22q11→22qter;22pter→22q11∷13q34→13qter),丈夫核型正常,其他家系成员拒绝做染色体检查.

嵌合型22三体一例

先证者男,10岁,足月顺产,第1胎,无窒息史,体格及智力发育差.两岁多会行走,行走困难呈鸭步.3岁前被叫名字时有反应,并能随母亲叫其父亲名字.其后,对外界无反应,不理解问话.平时好动,喜躺坐地上.好咬牙,咬鞋.查体:注意力不集中,目光涣散.情感反应差,被脱裤有害羞感,查体极不配合.身高116 cm,体重18.5 kg,头围51 cm.

两代人染色体罗伯逊易位

先证者女,第1胎第1产,足月顺产.出生时会哭,体重3kg.面容苍白,头颅无畸形,小眼裂,五官端正,鼻梁塌陷.肝、脾不大,心、肺正常.患儿现出生已40天仍人工喂养,不能抬头,因发烧抽搐来我院就诊.抽搐时表现双目上视,四肢抽动,双手半握拳,无口吐白沫,每日反复发作5～6次,每次持续约1分钟左右,抽后吃奶正常.住院时头颅CT、胸透、三大常规检查均正常.查血Ca++为1.5mmol/L.初步诊断为低钙血症,支气管炎.

染色体平衡易位二例

例1 男,出生当天,第1胎足月顺产,表型正常.其母孕期无患病服药史,父母非近亲婚配,身体健康,表型正常.细胞遗传学检查:常规抽取脐带血培养G显带分析,核型为46,XY,t(4;8)(4qter→4p16∷8q13→8qter;8pter→8q13∷4p16→4pter).患儿父母核型正常.

染色体异常核型五例

例1 女,27岁.结婚3年,怀孕2次,均于孕40天、50多天自然流产.夫妇表型、智力正常,非近亲结婚.患者否认孕期有不良因素接触史.细胞遗传学检查:患者核型为46,XX,t(5;7)(5qter→5p15∷7p15→7pter;7qter→7p15∷5p15→5pter).丈夫核型正常.家系调查:患者父母非近亲结婚,无不良生育史.3个姐姐均已正常生育,一兄婚后其妻自然流产1次后已正常生育.家系其他成员未做染色体检查.随访患者于1年后生育一正常儿.

X染色体末端重排一例

患者社会性别女,20岁.因原发闭经于2000年9月4日就诊.智力无异常.父母非近亲婚配.家族中否认遗传病和其他特殊病史.体查:身高145 cm,体重37 kg.面部多痣,眼距略宽,肘外翻.双乳房发育差、呈幼稚型,乳头直径0.8 cm,乳晕直径2.7 cm.

染色体平衡易位t(2;15)一家系

患者女,26岁,孕5产1.前2次妊娠均于孕2月左右自然流产,后2次分别于孕7月、4月B超诊断“脑积水”、“无脑儿”行中期引产术.夫妇表型、智力正常,非近亲结婚,无不良因素接触史.细胞遗传学检查:取患者夫妇外周血常规培养、制片,G显带,计数50个分裂相,镜下分析10个,患者核型为46,XX,t(2;15)(2pter→2q37∷15q22→15qter;15pter→15q22∷2q37→2qter).

t(7;8)平衡易位一家系三代四例

先证者女,2岁.第1胎,足月顺产.患儿智力低下,至今仍不会说话,只会傻笑.自出生后经常出现抽搐,发作时表现为面部抽动,双眼球上翻,身体呈角弓反张状,神智不清,持续约1～2分钟后能自行缓解,继而疲乏入睡.体格检查:神清,营养欠佳,发育迟缓,表情痴呆,全身瘫软,不能站立,皮肤干燥、弹性差.父母为姑表亲,均健在.先证者之妹,5月,表型未见异常.祖母,63岁,体健.对该家系及先证者进行了外周血淋巴细胞培养,G显带,每个成员镜下分析30个中期分裂相,结果为先证者、其妹及其父亲、祖母核型均为46,XX(XY),t(7;8)(7pter→cen→8pter;7qter→cen→8qter),见图1.其母染色体核型正常.

湖北地区汉族人群肿瘤坏死因子微卫星多态性研究

目的探讨中国湖北地区汉族人群肿瘤坏死因子 (tumor necrosis factor,TNF)微卫星遗传多态性分布.方法收集湖北地区164名无血缘关系健康个体的静脉血,提取DNA,应用PCR结合变性聚丙烯酰胺凝胶高压电泳和AgNO3染色,对TNF微卫星进行分型,并将PCR产物克隆及测序鉴定.结果 TNFa检测到13个等位基因,40种基因型;TNFc检测到2个等位基因,3种基因型.TNFa 和TNFc位点多态信息含量分别为0.80和0.28,两者基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律.统计分析显示,中国汉族人TNFa等位基因频率分布与欧洲白种人、日本人比较,差异具有显著性(P<0.01).测序发现相同TNFa等位基因包含的(AC)重复序列拷贝数与国外文献报道不一致.结论 TNFa等位基因频率分布具有种族的差异性,其等位基因定义内容尚需进一步确定.

肾素-血管紧张素系统基因多态性与2型糖尿病脑梗塞的关系

目的研究肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)中血管紧张素Ⅱ的1型受体(type 1 angiotensin Ⅱ receptor, AT1R)基因A1166C多态及血管紧张素Ⅰ转化酶(angiotensin 1-converting enzyme, ACE)基因插入/缺失(I/D)多态与中国汉族2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, DM2)患者合并脑梗塞的关系.方法分别用PCR及PCR-DdeⅠ酶切法,检测了74例DM2合并脑梗塞患者及78例DM2无脑梗塞患者的ACE及AT1R基因型.结果 DM2合并脑梗塞组与DM2无脑梗塞组AT1R基因型频率的差异无显著性(P＞0.05);脑梗塞组C型等位基因频率显著性升高(6.8% vs 1.9%, P＜0.05;OR=3.696,95% CI:0.977～13.704).DM2合并脑梗塞组与无脑梗塞组相比,ACE DD基因型频率(51.4% vs 33.3%)和D型等位基因频率(69.6%vs 54.5%)均升高(P＜0.05).携带AT1R C型等位基因的DM2个体患脑梗塞的风险增高与其同时携带ACE DD基因型有关(P＜0.05,OR=4.00,95% CI:0.733～21.838).Logistic回归分析显示:ACE DD基因型、收缩压及血清尿酸水平是DM2合并脑梗塞的独立性危险因素.结论 ACE基因I/D多态与DM2并发脑梗塞有关.AT1R基因A1166C多态参与DM2脑梗塞的发病,但其作用是微效的.ACE基因I/D多态与AT1R基因A1166C多态在中国人群DM2脑梗塞的发生、发展中可能存在一定的协同效应.

12个非综合征型遗传性耳聋家系mtDNA12S rRNA,tRNALeu(UUR),tRNASer(UCN)及16S rRNA基因序列分析

目的探讨mtDNA突变与遗传性耳聋的关系,以及突变家系对氨基糖甙类抗生素(aminoglycoside antibiotic, AmAn)耳毒敏感性差异的原因.方法调查了12个非综合征型耳聋家系;抽取外周血,提取DNA;PCR扩增线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)目的片段,分别以Alw26Ⅰ、ApaⅠ及XbaⅠ限制性内切酶检测1555G、3243G及7445G点突变;行mtDNA 12S rRNA、tRNALeu(UUR)、tRNASer(UCN)及16S rRNA基因序列测定.结果经酶切及测序证实12个家系具有mtDNA突变,形式为:1555G突变家系10个,7445G突变家系2个,未发现3243G突变家系.基因测序显示mtDNA 16S rRNA基因序列变化形式为:2230G点突变、2230AG插入、2243AG插入及2230AA插入突变,它们在家族性AmAn耳毒敏感性家系中被发现,且呈母系遗传;在AmAn不敏感家系中未被发现.结论单纯1555G或7445G突变家系表现为无诱因的渐进性遗传性耳聋或先天性聋;1555G或7445G突变合并16S rRNA基因突变者对AmAn高度敏感,表现为家族性敏感致聋.

结节性硬化症基因外显子4基因突变与多态性研究

目的探讨中国人结节性硬化症(tuberous sclerosis complex, TSC)基因(TSC1)外显子4的基因突变特征及多态现象.方法采用聚合酶链反应-单链构象多态(PCR-SSCP)技术结合DNA测序对来源于21个家系的25例TSC患者、23名父母及60名正常对照进行了TSC1基因外显子4检测. 结果正常对照SSCP均表现为一种相同的带型.在25例TSC患者中,有1例散发型患者的SSCP带型与正常对照不同,经DNA测序证实该患者在TSC1基因的外显子4发生了352 insA杂合突变.在无症状的23名父母中,有1例患者的母亲亦检测到不同于正常的SSCP带型, 经测序证实发生了347A→C碱基改变,由于编码的氨基酸未改变,均为缬氨酸(Val),考虑为一种多态现象.结论 352 insA是一种新型插入突变, 未呈热点分布.347A→C是一种罕见的新单核苷酸多态.

上海地区汉族群体HLA-E基因多态性分析

目的调查上海地区汉族人群HLA-E等位基因的分布情况及与HLA-A、-B抗原之间的连锁不平衡关系,为探讨HLA-E基因多态性与疾病的关联奠定基础.方法 HLA-A、-B抗原分型采用NIH标准微量细胞毒方法;HLA-E等位基因检测采用聚合酶链反应/序列特异的寡核苷酸探针杂交方法,对201名上海地区汉族正常人进行了调查.结果 HLA-E的5个等位基因在这一人群中共检测到3个,其中E*0101的频率高,为42.29%,其次为E*01032和E*01031,分别占32.84%和24.88%,E*0102和E*0104在所有标本中均未检出.检出的3个等位基因与HLA-A、-B进行两位点等位基因连锁不平衡分析,其观察值与理论值之间除B15/E*01032和A2/E*01032(P<0.05)之外均无显著性差异. 结论中国上海地区汉族人群HLA-E等位基因频率分别为E*0101占42.29%,E*01031和E*01032分别占24.88%和32.84%;HLA-E与HLA-A或-B位点等位基因之间不存在广泛的连锁不平衡.

原发性胃癌中19p部分微卫星多态位点杂合性缺失分析

目的筛选胃癌19p部分微卫星多态位点的杂合性缺失(loss of heterozygosite, LOH)频率,以初步确定19p上与胃癌相关基因连锁密切的微卫星多态位点.方法采用聚合酶链反应-单链长度多态(polymerase chain reaction-single strand length polymorphism, PCR-SSLP)-银染法选取19p上9对微卫星多态标记(D19S424,D19S216,D19S406,D19S413,D19S221,D19S226,D19S411,D19S883,D19S886),对43例原发性胃癌的杂合性缺失情况进行了分析.结果 43例中22例至少在1个位点发生LOH,总缺失率为48.88%,这9个位点的LOH频率分别为29.63%,11.53%,33.33%,8.57%,13.15%,8.00%,6.45%,6.89%,10.71%,在D19S886也同时出现微卫星不稳定性(microsatellite instability, MSI)17.85%.结论提示19p上的LOH缺失频发区域可能涉及与人类原发性胃癌发生发展相关基因的存在.

多巴胺突触前膜转运载体基因多态性与帕金森病

目的研究多巴胺突触前膜转运载体(dopamine transporter, DAT)的基因多态性与帕金森病(Parkinson's disease, PD)的关系.方法比较了85名健康对照和128例PD患者(包含发病年龄小于或等于50岁的早发型PD亚组和发病年龄大于50岁的晚发型PD亚组)的DAT基因串联重复可变数(variable number of tandem repeat, VNTR)多态性分布.结果该多态性位点的基因型和等位基因分布在对照组和PD患者之间差异有显著性;晚发型PD与7拷贝等位基因强相关,与11拷贝等位基因弱相关,早发型PD主要与9拷贝等位基因相关.结论该结果不仅支持DAT与PD相关的假说,而且提示了DAT基因VNTR多态性与PD发病年龄的可能关系.

中国男性雄激素受体基因(CAG)n重复多态性的初步研究

目的研究正常中国男性雄激素受体(androgen receptor, AR)基因(CAG)n重复序列的多态性.方法应用DNA测序基础上的[α-32P]dCTP掺入不对称PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)方法,对107名正常男性AR基因的(CAG)n重复数进行测定.结果 AR基因(CAG)n序列在正常男性人群中呈现重复多态性,其重复范围为11～29,集中于20～24,以22多.结论 AR基因(CAG)n序列在正常男性人群中呈现重复多态性,为今后进一步研究其病理学及遗传学意义打下基础.

外周血造血干细胞移植治疗3例重型β地中海贫血和1例特发性溶血性贫血

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(allogeneic peripheral blood stem cell transplantation, Allo-PBSCT)治疗遗传性溶血性贫血(hereditary haemolytic anemia, HHA)的可行性.方法用HLA相合或不全相合的Allo-PBSCT分别治疗重型β地中海贫血3例,特发性溶血性贫血1例.3名供者为同胞兄弟,1名为父亲.供给受者的有核细胞(4.7～14.4)×108/kg,CD34+CD38-细胞(4.8～32.9)×106/kg,粒巨噬细胞集落形成单位(3.22～9.8)×105/kg.移植的预处理方案由马利兰、环磷酰胺、马法兰、噻替派、抗胸腺淋巴细胞球蛋白或氟达拉宾组成.结果 4例植入均发生急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD),1例出现可被控制的慢性GVHD.脱贫血状态生存3例,血红蛋白一直维持正常,1例死于肝静脉阻塞综合征.结论 Allo-PBSCT可根治本病,为该病的治疗提供了新途径.

线粒体DNA11778突变所致Leber遗传性视神经病变外显率分析

目的分析携带线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)11778突变者视神经病变的外显率.方法对经基因诊断确定为mtDNA11778突变的Leber遗传性视神经病变(Leber hereditary optic neuropathy, LHON)家系进行分析,确定mtDNA11778突变携带者及患者.结果 16个家系中mtDNA11778突变携带者130人,其中男65人,女65人.130人突变携带者中43人患病,外显率33.1%.男性患者34人,男性外显率52.3%,女性患者9人,女性外显率13.8%.男女患病比率3.8∶1,患者中男性占79%.结论携带纯合性mtDNA11778位点突变的中国人,LHON外显率近1/3.

Calpain-10基因的SNP组合变异与2型糖尿病及其临床代谢性状的关系

目的观察NIDDM1位点calpain-10基因(CAPN-10)的单核苷酸多态性(SNP)组合与中国人2型糖尿病(type 2 diabetes, T2DM)及有关临床代谢性状的关系.方法 268名上海地区中国人,其中144人为正常糖耐量(NGT)者,124例为T2DM患者.予口服75 g葡萄糖后0、30、60、120及180分钟测血浆葡萄糖(PG)、胰岛素(INS)、C-肽(CP)及游离脂肪酸(FFA),并估测胰岛β细胞胰岛素分泌及组织胰岛素敏感性.检测CAPN-10 UCSNP44、-43、-19及-63基因型.结果 (1)中国人NGT者4个SNP的优势等位基因在UCSNP44为T(频率91%)、UCSNP43为G(89%)、UCSNP19为I(3次32 bp序列重复)(67%)及UCSNP63为C(79%).这些频率与文献报道的其他种群频率间差异有显著性.(2)中国人NGT者中上述4个SNP基因型组合类型共见14种.群体中69%由4种基因型组合构成.按UCSNP44-43-19-63排列,这4种主要组合分别为组合A∶TT-GG-DI-CC(单倍型组合1121/1111)(频率为10%)、组合B∶TT-GA-II-CC(1121/1221)(10%)、组合C∶TT-GG-II-CC(1121/1121)(26%)及组合D∶TT-GG-DI-CT(1121/1112)(22%).(3)CAPN-10上述单个SNP或4个SNP组合频率在NGT及T2DM者间差异均无显著性.(4)NGT者中主要基因型组合亚组间比较中可见临床代谢变量水平在组间呈从正常逐渐向糖耐量异常代谢情况移行的现象.组合A与组合D比较可见前者在糖兴奋后:①PG偏高且高峰后移;②FFA下降少且缓慢,后期无回升;③胰岛素偏高且高峰后移;④有胰岛素敏感性下降倾向.差异有显著性的比较者中半数以上经年龄、性别、体块指数及腰围校正后差异仍然存在.结论 CAPN-10变异与T2DM有关的临床代谢变量水平变异相关.此种相关有赖于CAPN-10基因各变异间形成的单倍型,且有赖于变异单倍型间的组合情况.

应用微卫星DNA基因分型技术进行双生子卵型鉴定

目的用微卫星DNA基因扫描和分型技术建立双生子卵型鉴定法. 方法选取69对同性别双生子、6对异性别双生子和17对同胞对,抽提基因组DNA.单盲设计,随机编号后,采用9对荧光标记的、在中国人群中具有高度杂合度的短串联重复序列(short tandem repeat, STR)引物,进行基因扫描和分型分析,根据这9个STR基因型的一致性来鉴别卵型.结果 9个STR基因型完全一致的63对受检者全部为同性别双生子.6对异性别双生子和17对同胞对的STR基因型均不完全一致.另有6对同性别双生子的STR基因型也不完全一致.经计算采用6个或5个STR位点判定同性别同卵双生的可信性分别大于99.6%和99%.采用全部9个位点判定同性别同卵双生的可信性大于99.95%.结论 STR基因扫描和分型技术为在基因组水平上直接判别双生子卵型,提供了一种准确、可靠的鉴定方法,它还有快速、简便等优点.

血链球菌ATCC10556中保守蛋白基因的克隆与分析

目的克隆并分析血链球菌ATCC10556菌株中一种保守蛋白完整基因.方法利用Southern印迹杂交分析法、分子克隆及斑点杂交技术获得含有特异DNA片段的目的克隆,对该目的克隆测序,并利用计算机软件和生物信息学技术对克隆的基因及编码蛋白进行分析.结果首次发现并克隆了血链球菌ATCC 10556菌株中完整的保守蛋白基因.将其命名为Sscp基因,该基因在Genbank的登录号:AY032739.该基因编码一种跨膜蛋白,含有两个AAA结构域.结论 Sscp基因编码蛋白的功能与大肠杆菌FtsK相似,参与血链球菌细胞分裂活动.

Fahr病一家系六例

先证者女,12岁.出生3个月无明显诱因出现抽搐,此后间断发作.查体及神经系统检查无阳性体征.实验室检查血钙、镁、磷生化指标正常,染色体无异常.脑电图示:双半球特高波幅2～3/s复形慢波.1岁半时脑CT检查表现基底节对称性钙化,皮层下散在少量斑点状钙化.诊断为Fahr病.

常染色体显性遗传性多囊肾病合并蛛网膜下腔出血一家系

先证者(Ⅱ2) 男,49岁.1984年7月因肝大做B超诊断为多囊肾、多囊肝.1985年5月9日因突然剧烈头痛住院,查体:意识清,Bp 160/100 mmHg(1mmHg=0.133 kPa),颈部抵抗(++),腰穿为血性脑脊液,诊断为蛛网膜下腔出血(SAH).6月3日排便时突然呼吸心跳停止死亡.

Marchesani综合征伴肝母细胞瘤一例

患儿男,13岁.因视物不清10年,发现上腹包块4天入院.患儿自幼视物不清、身材矮小.上小学二年级时发现近视,现已高度近视.智力发育正常.4天前其父发现患儿右上腹部明显隆起.精神、饮食好,无发热、面黄,无消瘦、纳差及体力下降.门诊以“肝脏肿瘤”收住院.父母非近亲婚配.其父身材矮小,指趾粗短,成锹样.其母表型正常.查体:身高136 cm,体重40 kg,面色红润,自动体位,全身皮肤、粘膜无色素沉着、皮疹、出血点及黄染.浅表淋巴结无肿大.颈粗短.双肺呼吸音略粗,心脏无异常.右中上腹部隆起,腹壁静脉显露,右肋下及剑突下可触及大而不规则的实性包块,质硬、不活动、表面不平,无触痛,肝脏边缘不清.脾脏肋下未触及.腹部移动性浊音阴性.肛门及外生殖器无畸形.指趾粗短,手足成锹样.

姐妹二人同患肢痛性癫痫

先证者女,9岁,发作性双下肢疼痛1年半.发作时突然出现双膝关节及以下疼痛难忍,持续10～20分钟后逐渐缓解并入睡,醒来一切正常.发作时间均在下午7～8点,每次发作后均入睡,间隔时间为5～15天,发作时不伴意识障碍,无四肢抽搐.先证者之妹 7岁半,发作性双下肢疼痛半年.发作的症状、时间与其姐相同.

结肠高分化腺癌一家系

先证者女,48岁,已婚.因腹痛、腹泻3年,加重伴鲜红色粘液样血便1月入院.查体:T 37.2℃,P 80次/分,R 18次/分,Bp 15.0/9.0 kPa(1 mmHg=0.133 kPa).肥胖体形,神清、痛苦病容.心、肺无异常,腹软,下腹轻压痛,无包块,无肠型和蠕动波,肝、脾肋下未扪及,无移动性浊音,肠鸣音正常.入院后行全结肠镜检查,结果:距肛缘30 cm处可见球形新生物突入肠腔,表面凹凸不平,周边见结节约5.5 cm×4.5 cm大小,填塞部分肠腔,窥镜下能通过.取部分新生物病理学检查示结肠高分化腺癌,转外科行结肠癌根治术.

营养不良性大疱性表皮松解症一家系

先证者(Ⅳ5) 女,14岁.出生时表型正常.出生后1个月足部发生水疱、大疱、糜烂,难以愈合.2～3岁时小腿发生皮损,后渐向上发展累及躯干,呈密集成簇的白色或近皮色丘疹,伴瘙痒,搔抓或磨擦可引起水疱、大疱、糜烂和红色疤痕.皮损持续存在难以愈合,一般夏季症状较重.严重时口腔粘膜可因喝开水或咀嚼引起大疱、糜烂.

兄妹同患尼曼-匹克病

患儿男,7岁,因腹痛、腹胀、食欲差于1996年6月入院.自5岁时家长发现患儿腹部膨隆,当地治疗情况不详.因腹胀渐加重伴面黄入院.查体:T36℃,发育营养差,贫血貌,皮肤巩膜无黄染.心、肺正常,腹部膨隆,肝右肋下5 cm,剑下7.7 cm,脾左肋下7.1 cm,质韧、边钝、表面光滑、有触痛,脊柱四肢正常,无骨压痛.辅助检查:X线胸片示双肺正常.

冠心病胰岛素抵抗与AGT基因M235T分子变异的相关性研究

目的探讨中国人冠心病(coronary heart disease, CHD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)与血管紧张素原(angiotensinogen, AGT)基因M235T分子变异的关系.方法选择119例CHD患者,用空腹胰岛素(FINS)与空腹血糖(FPG)乘积除以22.5作为IR指标.聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测AGT基因M235T分子变异.同期51名正常人作对照.结果 CHD组与正常对照组之间AGT基因M235T变异差异无显著性,CHD患者AGT M235T基因型与IR指标之间无明显相关性.结论 AGT基因M235T分子变异与CHD患者的IR没有明显相关性.

Kir6.2基因多态性与2型糖尿病的相关研究

目的研究安徽汉族人群Kir6.2基因E23K和I337V错义突变频率,并探讨两位点多态性与2型糖尿病的关系.方法采用PCR-RFLP技术对275例2型糖尿病(2DM)患者和105名糖耐量正常对照者的Kir6.2两个位点E23K和I337V进行基因型分析,了解本地区汉族人群有无这两个位点的多态性,比较两组基因型频率和等位基因频率有无异同.结果发现Kir6.2基因两位点E23K和I337V的多态,在正常组的突变频率分别为0.43和0.40;突变频率在2型糖尿病组和正常组之间相比差异无显著性(P＞0.05).结论安徽汉族人群Kir6.2基因存在E23K和I337V两位点的多态性,而且该人群中E23K位点等位基因K频率高于文献报道的高加索人群;在本组人群中,未发现Kir6.2两位点的多态性与2型糖尿病关联.

湖南汉族、土家族和苗族人群GSTM1基因多态性研究

目的了解湖南汉族、土家族、苗族人群的谷胱甘肽S转移酶M1(glutathione S-transferase M1, GSTM1)基因多态性分布规律.方法应用内参照PCR方法检测136名汉族,152名土家族,106名苗族正常人的GSTM1基因型.结果汉族GSTM1(-)基因型频率为45.6%(62/136),土家族为43.4%(66/152),苗族为39.6%(42/106),3个民族之间差异无显著性(P＞0.05),且同民族不同性别之间差异亦无显著性(P＞0.05).结论湖南汉族、土家族和苗族的GSTM1基因多态性分布相似,但与美国黑人及白人显著不同.

人类基因组多态数据库Go!Poly及其应用

数据库在遗传多态研究中有着十分重要的作用.为满足我国医药学界人类基因组多态性研究的需要,四川省疾病基因组学与法医学重点实验室和北京大学生命科学院国家生物信息中心合作,建成了国内第1个人类基因组多态数据库Go!Poly.该数据库为基因取向的数据库,并具有一系列的特点.

单核苷酸多态性及其数据库

随着人类基因组研究计划(human genome project, HGP)DNA序列测定工作的快速发展,研究人类基因组变异的重要性日益突出.将人类DNA变异的数据收集整理和建立起数据库,不仅可以用于研究人类的起源、进化以及现代人群遗传变异的发展机理,而且为检测与疾病、尤其是肿瘤和复杂性疾病如糖尿病、肥胖症、高血压和老年痴呆症等相关的基因提供了基础.基因组变异常见的一种形式是单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP).近两年来,美国、欧洲、日本和中国相继建立了SNP数据库.现就对SNP的研究近况和SNP数据库的建立与发展进行综述,对SNP数据库的应用价值和目前存在的问题加以讨论,并且在此基础上分析了研究中国人群基因组变异和发展具有中国特色的SNP数据库的必要性.中国是世界上人口多的国家,建立中国人群特有的SNP资料库,不仅可以为研究中国人群基因组变异及其与复杂性疾病的相关性提供迅速可靠的情报,同时还将为发展新的医药产品提供科学的依据,并为全人类基因组变异的研究提供近1/5的资料.

用间期核双标记荧光原位杂交技术检测BCL2原癌基因易位

目的建立一个准确易行的诊断非何杰金氏淋巴瘤的实验室指标.方法建立了以BCL2酵母人工染色体克隆yA153A6、以及免疫球蛋白重链基因(IgH)噬菌体克隆H24为探针的双标记荧光原位杂交技术,用以在间期核中检测BCL2原癌基因易位.结果在滤泡性淋巴瘤细胞系SU-DHL-6细胞中,BCL2和IgH的杂交信号呈非随机分布,与一个BCL2等位基因易位到14号染色体IgH基因之上相对应,一个BCL2和一个IgH杂交信号始终紧密相连.而在正常淋巴细胞中,这两种基因的杂交信号至少保持1/10核直径的距离.结论该方法客观明了,准确易行,不受标本中分裂相数量和质量的限制,可望成为临床诊断非何杰金氏淋巴瘤的常规手段.

电击介导的人凝血因子Ⅸ cDNA在肌肉中的转移和表达

目的探讨电击提高人凝血因子Ⅸ(human clotting factor Ⅸ,hFⅨ)cDNA肌肉转移和表达的可行性.方法采用高频脉冲电场促进Lac-Z编码质粒pCMVβ和hFⅨ表达质粒G1NaMCIX肌肉转移和表达,并观察了方波频率、宽度、电击持续时间对hFⅨ抗原活体表达的影响.结果电击可以明显提高pCMVβ肌肉转移和表达,电击组小鼠肌纤维的蓝染率是非电击组的2.1倍(P＜0.01);优化并获得了hFⅨ cDNA 肌肉转移和表达佳的电击条件,该条件下hFⅨ抗原在小鼠体内的表达量为(40±5.4)ng/ml,是非电击组小鼠(5.9±2.7)ng/ml的近7倍(P＜0.001).结论电击可以有效地促进hFⅨ cDNA的肌肉转移和表达.

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因的新变异

家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia, FH)的早报道见于1938年,其临床表现为:血胆固醇、尤其是低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)胆固醇明显增高,皮肤及跟腱黄色瘤和早发冠心病.1974年,Goldstein和Brown[1]发现了成纤维细胞表面的低密度脂蛋白受体,并由此阐明了FH的发病机理在于编码LDL受体的基因发生了突变,引起LDL受体功能异常.我们对1例FH纯合子进行了研究,发现了2个新的点突变.

ARTICLE TITLE INDEX OF CHINESE JOURNAL OF MEDICAL GENETICS(2001, Vol.18)

非同位素标记双向杂交法筛选差减文库

目前用于差减文库筛选的方法有多种,其共同的缺陷在于敏感性低,而且多数是运用同位素法进行的,具有一定的损伤性.我们运用DIG法标记双向差减文库探针进行差减文库筛选.1 材料与方法1.1 差减文库运用PCR SelectTM cDNA Subtraction Kit(Clontech公司)构建3个差减文库,即以腺瘤为检测cDNA、远端粘膜为驱赶cDNA的差减A-N文库;以腺癌为检测cDNA、远端粘膜为驱赶cDNA的差减T-N文库;以腺癌为检测cDNA、腺瘤为驱赶cDNA的差减T-A文库.所用载体为pGEM-T Easy Vector(Promega公司),分子量为3015 bp.插入片段的两端带有接头序列,其中含有PCR扩增的引物序列,包括NP1引物:5′-TCGAGCGGCCGCCCGGGCAGGT-3′;NP2R引物:5′-AGCGTGGTCGCGGCCGAGGT-3′.