中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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七氟烷麻醉抑制急性创伤性颅脑损伤患者围手术期炎症介质的表达
目的:探讨七氟烷麻醉对急性创伤性颅脑损伤患者围手术期炎症介质表达、神经功能损害及患者预后的影响.方法:收集2015年7月至2016年12月急诊开颅手术的创伤性颅脑损伤患者80例,随机分为试验组(七氟烷处理组)和对照组,各40例.围手术期抽取外周血,利用酶联免疫吸附测定法检测血清中TNF-α、IL-6、CRP蛋白和NSE浓度,比较两组患者GCS评分、APACHEⅡ评分和预后.结果:与对照组比较,试验组在术中1 h、术毕和术后第1天血清炎症介质(CRP、TNF-α、IL-6)表达明显降低(P<0.05或0.01),神经元特异性烯醇化酶NSE蛋白在术毕及术后第1天表达降低(P<0.05或0.01);七氟烷处理有效改善患者病情,在第14天GCS评分[(10.82±1.40)比(8.29±1.02),P=0.03],APACHEⅡ评分[(14.42±1.97)比(18.03±2.15),P=0.02].结论:七氟烷处理可通过抑制创伤性颅脑损伤患者围手术期伤后炎症反应,减少神经元细胞损害,起到神经保护作用和改善患者预后.
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血清CXCL12和IL-33在急性缺血性脑卒中预后评估中的价值
目的:探讨血清CXCL12和IL-33在急性缺血性脑卒中预后评估中的价值.方法:选取2014年12月至2016年6月到本院就诊的急性缺血性脑卒中患者作为病例组(122例),同时选取本院同期健康体检人群作为正常组(59名),采用ELISA法检测研究对象入组时血清CXCL12和IL-33的水平.参照mRS评分将患者分为预后良好组(86例)和预后不良组(36例),并通过受试者工作特征曲线(ROC)和曲线下面积(AUC)评价血清CXCL12和IL-33在急性缺血性脑卒中患者预后评估中的作用.结果:急性缺血性脑卒中患者血清CXCL12水平明显高于对照组[8.0 ng/ml(IQR,6.7-8.9)VS 3.0 ng/ml(IQR,2.3-3.8),P<0.001],IL-33水平明显高于对照组[65.25 ng/L(IQR,56.05-71.08)VS 35.30 ng/L(IQR,26.73-42.55),P<0.001];急性缺血性脑卒中预后良好组患者血清CXCL12水平明显低于预后不良组[7.4 ng/ml(IQR,6.3-8.3)VS 9.3 ng/mL(IQR,8.3-11.1),P<0.001],预后良好组患者IL-33水平明显高于预后不良组[66.81 ng/L(IQR,61.12-73.29)VS.55.38 ng/L(IQR,46.75-64.71),P<0.001].经Pearson相关性分析显示血清CXCL12和IL-33水平与mRS评分分别呈正相关和负相关(r=0.524,P<0.001;r=-0.443,P<0.001).血清CXCL12、IL-33评估急性缺血性脑卒中预后的曲线下面积分别为0.835、0.784,灵敏度分别为77.8%、83.4%,特异度分别为73.3%、66.7%.结论:血清CXCL12和IL-33可能作为急性缺血性脑卒中患者预后评估的标志物.
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在MRSA系统性感染模型中Pam3 CSK4预处理降低小鼠肾组织的炎症反应
目的:在耐甲氧西林金葡菌(MRSA)系统性感染模型中,观察低剂量TLR2激动剂Pam3CSK4预处理对小鼠肾组织中炎症反应的影响并初步探讨其机制.方法:于感染前48 h、24 h对BALB/c小鼠行尾静脉注射Pam3CSK4(10μg/100μl/只);2×107 CFU/只MRSA经静脉感染小鼠,ELISA和荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测细胞因子水平,Q-PCR检测TLR2、IRAKs等相对表达量,Western blot检测NF-κB p65磷酸化、IRAK-M及A20表达.结果:与对照组相比,预处理组在感染6 h后肾组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、CCL3和IFN-γ含量显著减少,iNOS表达量降低,IL-10和TGF-β表达量增高,TLR2表达下降;处理组肾组织在感染12 h后IRAK-1表达无明显增加,而IRAK-M表达量显著增加;Western blot结果显示Pam3CSK4预处理组NF-κBp65磷酸化降低,IRAK-M表达明显增高.结论:Pam3CSK4预处理降低MRSA系统性感染小鼠肾组织的炎症反应,这可能与诱导IRAK-M表达相关.
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反义缺氧诱导因子-1α对人膀胱癌细胞生长的影响
膀胱癌是泌尿系统发病率和病死率均居首位的恶性实体肿瘤. 近年研究发现人类绝大多数恶性实体肿瘤,其内存在低氧微环境,肿瘤细胞会激活一系列相关分子信号传导途径以适应缺氧微环境,同时增强肿瘤细胞自身的侵袭性和对放化疗的抗拒性,致使疗效降低,其中缺氧诱导因子-1α( Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)起到了更为关键的枢纽作用. 近期有关HIF-1α作为癌基因在人体多种恶性实体肿瘤中过表达和针对其用药治疗的有效性报道较多[1,2]. 但在以 HIF-1α 为靶点的膀胱癌研究治疗却鲜见报道. 为此我们通过反义寡核苷酸技术,抑制膀胱癌细胞中HIF-1α表达,观察反义HIF-1α( AS-HIF-1α)对癌细胞生长的影响,探讨其作为癌基因用于人膀胱癌靶向分子治疗的可能性和有效性.
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外周血甲基化Septin-9检测对结直肠癌诊断价值的Meta分析
目的:Meta系统性评价Septin-9在结直肠癌中的诊断价值.方法:检索PubMed、生物医学外文全文服务系统、Ovid、中国学术期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普中文科技期刊数据库、万方数据库,日期截止至2017年1月.严格按照纳入和排除标准筛选文献,并依据QUADAS标准对文献进行质量评估.使用双变量Meta模型合并检验效能分析,通过Q检验、I2检验检测研究异质性,通过亚组分析、敏感性分析探讨异质性来源,通过Deek's漏斗图评估发表偏移.结果:共纳入11篇文献;Septin-9诊断结直肠癌的合并敏感度为0.70(95%CI:0.67~0.72),合并特异度为0.91(95%CI:0.90~0.92),诊断比值比为28.76(95%CI:17.70~46.75),SROC的曲线下面积(AUC)为0.9221.异质性检验提示不存在阈值效应,但存在其他因素引起的异质性.通过敏感性分析发现纳入文献中有一个离群值.亚组分析结果显示,根据1/3判为阳性和2/3判为阳性分组:AUC为0.9397比0.8265.根据亚洲人种和欧美人种分组:AUC为0.9368比0.9210.Deek's漏斗图评估纳入文献不存在发表偏倚.结论:外周血甲基化Septin-9诊断结直肠癌的整体准确性较高,可作为一项很好的指标用于结直肠癌诊断.
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强直性脊柱炎患者检测骨代谢指标潜在的临床价值
目的:探讨骨代谢指标和人类白细胞抗原B27(HLA-B27)在检测强直性脊柱炎(AS)患者的临床意义,并分析其诊断价值.方法:研究对象为94例AS患者、239例其他病种对照和80例健康对照组,并对其结果进行回顾性分析.结果:AS组β-胶原特殊序列(β-CTX)高于对照组,而骨钙素(OC)、25羟基维生素D〔25-(OH)D〕和甲状旁腺素(PTH)低于对照组(P<0.05);AS组C反应蛋白(CRP)和β-CTX呈明显的正相关(P<0.01),25-(OH)D呈负相关(P<0.05),其他骨代谢指标和CRP无相关性;AS组HLA-B27阳性率明显高于其他组(P<0.05),且HLA-B27在诊断AS时具有很高的敏感性和特异性;AS组25-(OH)D检测的敏感性高于β-CTX,但特异性低于β-CTX.结论:骨代谢指标对AS早期筛查,临床诊断有着重要价值,尤其是β-CTX和25-(OH)D的诊断价值更为明显.
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5-LOX和12/15-LOX在炎症中的功能研究进展
脂氧合酶(Lipoxygenase,LOX),又名脂肪氧化酶、脂肪加氧酶或类胡萝卜素氧化酶,早发现于高等植物中,与植物的生长密切相关,随后,在真菌、细菌与动物组织中均发现了脂氧合酶[1,2] ,它们不仅能参与细胞代谢调节,调控基因的表达与细胞的增殖、分化和衰老,还能影响氧化还原平衡进而影响细胞的功能[3,4].
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白细胞介素36的研究进展
白细胞介素1家族( Interleukin-1 family,IL-1F)是一组结构相似、功能相关的细胞因子,近年来的研究发现其在人类的很多疾病的发生发展中起着重要的作用. IL-1 F主要有IL-1α、IL-1β、IL-1 Ra、IL-18、IL-33、IL-36α、IL-36β、IL-36 Ra、IL-33、IL-37 和 IL-38[1]. 按照分子在体内发挥的免疫学作用进行分类,大体可分为:7 个激活型配体成员(如 IL-1α、IL-1β、IL-18、IL-33、IL-36α、IL-36β 和 IL-36γ) ,3 个受体拮抗性成员(如 IL-38、IL-1Ra和IL-36Ra)和1 个抗炎症因子(IL-37)[2](图1). 初,白细胞介素36细胞因子( Interleukin-36 , IL-36 )亚家族是通过一系列对人类基因组序列编码IL-1 的同系物的分析时发现的[3-7]. 在2010 年前分别被称为 IL-1F6、IL-1F8、IL-1F9、IL-1F10 和IL-1F5[8]. 后来,通过多种构建的动物模型,体外细胞实验发现, IL-1 F6、IL-1 F8、IL-1 F9、IL-1 F5这四个细胞因子有着相同的受体IL-36R,因此将其分别重新命名为:IL-36α( IL-1 F6 )、IL-36β( IL-1 F8 )、IL-36γ( IL-1 F9 )和 IL-36 Ra (IL-1F5)[9],统称为 IL-36. IL-1F10 则命名为 IL-38. IL-36中IL-36α、β、γ是受体激动剂,IL-36Ra是天然的受体拮抗剂. 它们的共受体,由 IL-36 受体(IL-36 receptor,IL-36R也被称为IL-1Rrp2 或者IL-1RL2)和IL-1RAcP[10]组成. 相关研究发现IL-36主要表达在角质形成细胞、支气管上皮细胞、单核-巨噬细胞和T淋巴细胞中. 它们是一些具有多种生物活性的分子,主要在人体的炎症过程、免疫反应等生理或病理进程中发挥作用[4].
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转录因子Bach2在免疫细胞中的作用研究进展
Bach2 ( BTB and CNC homolog 2 )是一个具有碱性亮氨酸拉链结构( bZIP domain )的转录因子. 它能与小Maf蛋白形成异二聚体并与其DNA上的特异性序列 Maf 识别元件( Maf recognition elements, MARE)结合,抑制其表达,起到转录抑制作用,参与细胞转录调控过程[1]. Bach1和Bach2共同构成了Bach家族,其中Bach1在全身各处广泛存在且在造血细胞中高表达,而Bach2 主要在T细胞、B细胞、肺泡巨噬细胞及神经细胞表达. 近年来的研究发现Bach2在多发性硬化症、炎性肠病、类风湿性关节炎、Graves病等多种免疫相关性疾病的发生发展中起重要作用.
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呼吸道合胞病毒融合蛋白(F蛋白)结构及中和表位的研究进展
呼吸道合胞病毒( Respiratory syncytial virus, RSV) ,是造成全世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的主要原因之一,2 岁前的幼儿几乎全部感染过RSV[1] ,造成肺炎及毛细支气管炎等呼吸道疾病[2].0~2 个月的婴儿在感染 RSV 后易出现严重的病症[ 3 ]. 而在新的全球疾病死亡率分析中,1月到1周岁的儿童死亡中约有6. 7%是由RSV 感染造成的[4]. 青壮年人群感染后病症较轻,但在老年人群中会出现严重病症及死亡病例[5]. 人体被RSV感染后会激发出中和抗体并引发T细胞应答,但免疫能力会随着时间衰退,进而造成终身的反复感染[6]. 至今没有安全有效的疫苗上市,唯一获准上市的 RSV 特异性药物是中和单抗 Palivizumab ( Synagis? ) ,但由于其价格高昂,中和效价不足致免疫剂量大等原因,目前仅用于降低免疫缺陷和先心病等高危新生儿的患病风险. 结构生物学解析显示Palivizumab能够与一种稳定构象的F蛋白结合,提示F蛋白作为中和抗体靶向蛋白的重要性.
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CD13调控肿瘤免疫应答的研究进展
CD13又称氨肽酶N( APN) ,是一种锌离子依赖的膜结合Ⅱ型金属蛋白酶,可以与寡肽N末端切除氨基酸的糖蛋白结合. 早在1989 年, CD13 作为髓系细胞表面标志被人们熟知. 后来发现, CD13 在上皮细胞、神经细胞、成纤维细胞及内皮细胞等多种细胞类型均有表达[1]. 引起人们关注的是, CD13在急性髓性白血病细胞和多种实体瘤组织中过度表达[2] ,包括头颈部的鳞状细胞癌、乳腺癌、肺癌、结肠癌、卵巢癌等. 研究证明,CD13通过多种机制影响肿瘤进程,包括促进肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞凋亡,增强细胞侵袭性,促进肿瘤新生血管的形成,维持肿瘤干细胞微环境等[3]. 因此, CD13 又被称作肿瘤标记物或肿瘤细胞表面抗原. 近年来研究发现,CD13不仅影响髓系细胞的发育分化,还参与肿瘤微环境中免疫应答过程,导致肿瘤细胞发生免疫逃逸. CD13对免疫应答的调控成为研究热点之一.
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胰高血糖素样肽-1的免疫调节作用及机制
肠促胰素是一种肠道分泌的降血糖激素,可作用于胰岛β细胞促进胰岛素分泌,降低血糖. 胰高血糖素样肽-1 ( Glucagon-like peptide-1 , GLP-1 )是首先在小肠黏膜L细胞发现的一种肠促胰素,在进食等血糖升高情况下其释放增加. 由于GLP-1的血糖依赖性降血糖特性,糖尿病患者服用后不易发生低血糖事件,因此作为一种新型降血糖药物GLP-1 类胰泌素在临床得到广泛应用[1]. 天然 GLP-1 在体内极易被二肽基肽酶Ⅳ( Dipeptidyl peptidase Ⅳ, DPP-Ⅳ)广泛快速降解,临床上主要使用GLP-1 受体( GLP-1 receptor, GLP-1R )激动剂 Exendin-4 和DPP-Ⅳ活性抑制剂 Liraglutide. 近几年研究发现, GLP-1除具有降血糖作用外,还有心血管保护、神经保护和免疫调节作用,其强大的免疫功能一方面有利于对糖尿病的治疗,另一方面可能引起一定的副作用. 本文重点阐述 GLP-1 的免疫功能及其调节机制,为扩展肠促胰素类药物的临床应用范围,以及规避其免疫学风险方面提供了一定的参考.
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调节性B细胞在肿瘤免疫中的作用
早在20世纪50年代就有学者开始关注B细胞及其分泌的抗体在肿瘤进展过程中的作用[1]. 这些早期研究指出,在移植性肿瘤模型和化学诱导性肿瘤模型中,肿瘤特异性抗体的传递可以促进肿瘤的生长[1,2] ,而B细胞缺失则会限制肿瘤的形成[3].1996年Wolf等发现,在小鼠实验性自身免疫性脊髓炎 ( experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)模型中,B细胞缺陷小鼠的急性EAE 情况要比野生型小鼠严重得多,因此推测有一群B细胞在其中起免疫调节功能[4]. 1997 年, Mizoguchi 等[5]首次提出了"调节性 B 细胞"( B regulatory cells, Bregs ) 这一概念. 他们在小鼠炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)模型中发现,B细胞和自身抗体在抑制肠炎过程中发挥重要的调节作用,并猜想其作用机制可能是影响了凋亡细胞的正常清除. 到了2002 年, Fillatreau 等[6]和 Mizoguchi等[7]几乎同时证实,在慢性炎症环境下,有一群 B细胞亚群可分泌IL-10 ,可以抑制由上调IL-1 和激活STAT3引起的炎性级联反应.
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免疫衰老在艾滋病发病中的作用及治疗策略研究进展
由于HIV感染引起的病理特征同免疫系统的衰老之间具有众多相似性,近年来免疫衰老( Immu-nosenescence)成为了 HIV 研究领域的前沿. 一方面免疫系统的衰老会减弱免疫反应和免疫监视能力,造成机体对感染性疾病更加敏感和丧失疫苗响应能力[1,2]. 另一方面HIV持续复制及其引发的慢性免疫活化( Immune activation )与炎症( Inflamm-ation)又会进一步加速免疫衰老,即使长期的抗逆转录病毒治疗也难以遏制这一过程,终增加感染者罹患老年病和发展为艾滋病的风险[3]. 因此,研究免疫衰老可能将成为探索艾滋病发病机制和治疗方案的关键.
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抗主要组织相容性相关蛋白MICA/B的单克隆抗体制备及应用
目的:制备抗主要组织相容性相关蛋白A/B(MICA/B)的单克隆抗体并对其特异性进行验证.方法:以重组MICA?012蛋白免疫小鼠后将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合和筛选得杂交瘤细胞株,并用ELISA对其中9B10细胞株产生的单克隆抗体进行效价检测以及通过Western blot、Luminex、免疫荧光对其特异性进行检测.结果:获得6株杂交瘤细胞株,其中9B10细胞株产生单克隆抗体(mAb)9B10的低反应浓度为0.02 ng/μl,且mAb 9B10可应用于Western blot、Luminex和免疫组化荧光试验对MICA和MICB分子的检测.结论:成功获得可同时检测MICA和MICB表达的单克隆抗体9B10.
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减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsseK1Δasd宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究
目的:为构建减毒鼠伤寒沙门菌分泌性蛋白K1缺失株平衡致死系统,并将其开发为能够稳定携带外源基因的活疫苗载体.方法:利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的等位基因交换技术,以减毒鼠伤寒沙门菌株SL1344ΔsseK1为亲本株,运用二步法筛选asd基因缺失株SL1344ΔsseK1Δasd.将携带有asd基因的无抗性pYA3493质粒电转至上述缺失菌株SL1344ΔsseK1Δasd,构建SL1344ΔsseK1Δasd(pYA3493)重组菌株.结果:PCR及测序结果表明SL1344ΔsseK1Δasd(pYA3493)构建成功.进一步研究表明重组菌株SL1344ΔsseK1Δasd(pYA3493)血清型和强毒株SL1344及亲本株SL1344ΔsseK1相同,且能稳定遗传缺失后的asd基因;其生化特性和生长速度与强毒株SL1344及亲本株SL1344ΔsseK1相比均无明显差异.小鼠毒力试验表明,SL1344ΔsseK1Δasd(pYA3493)口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为5.24×108 CFU,毒力较强毒株SL1344约下降至0.048%;免疫保护效力试验显示,运用鼠伤寒沙门菌野生毒株对免疫后第17天的小鼠攻毒有62.5%的保护率,与亲本株SL1344ΔsseK1基本一致.结论:以上结果表明,鼠伤寒沙门菌分泌性蛋白K1缺失株宿主-载体平衡致死系统构建成功,且遗传稳定,毒力明显降低,具有较好的免疫原性,为深入研究以鼠伤寒沙门菌为载体的口服多价疫苗奠定基础.
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PCR-荧光探针法检测庆阳地区丙型肝炎病毒基因型
目的:应用PCR-荧光探针法分析庆阳地区丙型肝炎患者基因型,并对PCR-荧光探针法的各种性能进行评价.方法:收集庆阳地区289例各种丙型肝炎患者的临床资料和外周静脉血,采用PCR-荧光探针法检测其基因型,并和PCR-反向点杂交法、测序法进行比较.结果:289份HCV RNA阳性血清标本中,PCR-荧光探针法基因型及亚型检出率为99.3%(287/289),其中1b型139例(48.1%),2a型136例(47.1%),3a型7例(2.4%),3b型5例(1.7%),未分出型2例(0.7%).PCR-荧光探针法的特异度和准确度为100%,重复性良好,并与PCR-反向点杂交法、巢式PCR测序法分型结果均一致,三种方法的一致率为98.2%(56/57),差异无统计学意义(P>0.05).1b基因型患者ALT、AST、PLT和HCVRNA(lg)水平均高于2a基因型患者,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:庆阳地区HCV基因型呈现多基因型分布特点,主要为1b型和2a型,且2a型和1b型的比例相当,呈现出2a型比例升高,1b型下降的趋势;PCR-荧光探针法HCV基因分型敏感度和特异度高,方法简单,适合临床实验中应用.
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HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞实验研究
目的:构建携带增强型绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的HIV-1假病毒;通过HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞(immatural dendritic cell,iDC)实验探讨病毒与细胞的相互作用.方法:利用慢病毒包装系统构建携带EGFP基因的HIV-1假病毒,通过RT-PCR扩增HIV-1假病毒中的EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC,对HIV-1假病毒感染iDC后的基因组整合和转录水平进行检测,观察被感染iDC中EGFP基因的表达.结果:构建的HIV-1假病毒通过RT-PCR结果显示扩增得到EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC后,在基因组整合和转录水平检测中都扩增得到了EGFP基因,荧光显微镜观察被HIV-1假病毒感染的iDC,观察到iDC表达绿色荧光蛋白.结论:成功构建携带EGFP基因的HIV-1假病毒;HIV-1假病毒可以感染iDC,并将其遗传物质整合到iDC基因组中,并经过转录和翻译使iDC表达EGFP.
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MIC基因多态性与解脲脲原体感染的易感关联性研究
目的:研究MIC等位基因多态性与解脲脲原体感染易感性之间的关联性.方法:采用PCR-SSP和PCR-SBT方法对样本MIC等位基因的多态性进行检测.结果:解脲脲原体患者中检出12种MICA、5种MICA-STR和14种MICB等位基因;和对照组相比较,解脲脲原体患者组中MICA?010和MICB?009N等位基因分布频率更高(MICA?010:OR=3.85,95%CI:2.12-6.99,Pc<0.05;MICB?009N:OR=3.22,95%CI:1.33-7.80,Pc<0.05),MICA-A5.1和MICB?00502等位基因分布频率更低(MICA-A5.1:OR=0.61,95%CI:0.40-0.94,Pc<0.05;MICB?00502:OR=0.58,95%CI:0.40-0.83,Pc<0.05),差异均具有统计学意义;基因型方面,MICA?010/010、MICA?01201/01201纯合子分布频率更高(MICA?010/010:OR=14.84,95%CI:1.90-115.9,Pc<0.05;MICA?01201/01201:OR=10.83,95%CI:1.35-86.79,Pc<0.05),差异均具有统计学意义;解脲脲原体患者中MICB?00502/00502纯合子分布频率较高,但差异不具有统计学意义(Pc>0.05).结论:MIC等位基因多态性与解脲脲原体的易感性间存在关联性.
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BCYRN1调控miR-503通过Notch1信号通路对肺癌迁移和侵袭的影响
目的:探讨BCYRN1调控miR-503通过Notch1信号通路对肺癌迁移和侵袭的影响机制.方法:qPCR检测不同肺癌细胞株中BCYRN1和miR-503的表达情况;免疫荧光和qPCR检测慢病毒BCYRN1+siRNA转染肺癌细胞的转染效率;双荧光素酶报告基因检测BCYRN1与miR-503的相互作用;Transwell侵袭实验和划痕实验检测沉默BCYRN1后肺癌细胞侵袭和迁移能力的变化;Western blot检测沉默BCYRN1后Notch1信号通路蛋白的表达情况;裸鼠皮下成瘤检测沉默BCYRN1后肺癌细胞裸鼠体内成瘤能力的影响.结果:在肺癌细胞H1299中BCYRN1表达水平高,miR-503的表达水平相对较高;免疫荧光及mRNA水平证明BCYRN1+siRNA慢病毒可以有效转染进入H1299细胞内;BCYRN19能与miR-503的3′-UTR特异性结合;沉默BCYRN1可以抑制肺癌H1299细胞的侵袭和迁移能力;沉默BCYRN1后Notch1通路蛋白表达情况相应下调;与NC组相比,BCYRN1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小.结论:BCYRN1可以靶向调节miR-503通过Notch1信号通路影响肺癌H1299细胞的侵袭和迁移能力.
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IL-37抑制IL-18在大鼠肺纤维化模型中的表达及意义的探讨
目的:初步研究博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中IL-37、IL-18的表达水平,探讨其在PF发生、发展中的表达及意义.方法:将45只清洁级Wistar大鼠按随机数字表法分为健康对照组(N组)、博来霉素组(B组)、地塞米松治疗组(D组),每组大鼠各15只,B组及D组大鼠给予气管内注射博来霉素4 mg/kg制作肺纤维化模型,N组给予相同体积生理盐水作为对照,D组大鼠于肺纤维化造模基础上第2天每日腹腔注射地塞米3 mg/kg,N、B组大鼠腹腔注射生理盐水作为对照.各组大鼠分别于造模后第7、14、28天处死,HE染色评价肺组织病理形态学变化,碱水解法及酶联免疫吸附法分别测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)、IL-37含量,RT-PCR法测定肺组织中IL-18mRNA表达量.结果:①HE染色显示B、D组大鼠肺组织病理学改变由肺泡炎症逐渐发展为纤维化,B、D组HYP含量随时间推移逐渐升高,以第28天为著(P<0.05);②B、D组IL-37、IL-18mRNA表达于第7天升高至高点,后逐渐降低,至第28天均高于N组,差异有统计学意义(P<0.05);③D组IL-37、IL-18mRNA表达在同一时间均低于B组(P<0.05).结论:IL-37、IL-18在大鼠肺纤维化发病早期起重要作用,可能参与了肺纤维化发生与发展.
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miR-210调控Mex3 B蛋白对肺癌细胞侵袭和增殖的影响
目的:探讨miR-210和Mex3B蛋白对肺癌细胞侵袭和增殖能力的影响.方法:运用qPCR检测miR-210在正常肺组织和癌旁组织中的表达情况;运用qPCR检测Mex3B在肺癌组织、癌旁组织中的表达;qPCR检测miR-210在不同肺癌细胞株中(A549、H1299、H1650和H358)的表达水平;双荧光素酶报告基因系统检测miR-210对Mex3B转录的影响;细胞活性实验检测miR-210的表达对肺癌细胞活性的影响;平板克隆实验检测miR-210的表达对肺癌细胞A549的增殖能力的影响;Transwell侵袭实验检测miR-210的表达对肺癌细胞株A549的侵袭能力的影响.结果:和癌旁组织比较,miR-210在肺癌组织中表达明显增高,和癌旁组织比较,Mex3B在肺癌中表达较低,双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-210可以直接调控Mex3B的转录活性,抑制miR-210的表达活性后,A549肺癌细胞的细胞活性受到一定的抑制;抑制miR-210后,肺癌细胞株A549的侵袭和增殖能力明显降低.结论:miR-210可以靶向调控肺癌细胞的侵袭和增殖能力.
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过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞改善异位移植心脏存活
目的:探讨过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)改善大鼠腹腔异位移植心脏的存活机制.方法:通过慢病毒载体GV308携带IDO基因转染大鼠骨髓间充质干细胞构建过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞.建立大鼠腹腔异位移植心脏模型,经尾静脉给予相应细胞处理:①利用超声心动图检测移植心脏心功能变化.②采用小动物活体成像系统评估移植心脏局部荧光强度.③再取各组受体大鼠的脾脏,采用流式细胞技术检测CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、Treg细胞的表达情况.④取各组移植心脏,采用HE染色评估炎性细胞浸润情况.⑤利用液相芯片检测各组血清IL-1ɑ、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-18、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3因子的变化情况.结果:①给予相应细胞处理,可见过表达IDO-BMSCs处理后2 d移植心脏的EF、FS较其余各组有提高.②采用小动物活体评估可见过表达IDO-BMSCs组移植心脏局部荧光强度强.③给予干预措施后2 d可见过表达IDO-BMSCs组脾脏细胞CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD45RA、CD45RA+CD45RB表达降低,而CD274、Treg细胞的表达增高.④采用液相芯片检测各组提取血清可见在2 d时,过表达IDO-BMSCs组血清中IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IFN-γ、IL-18是降低的;IL-10、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3表达量是升高的.HE染色证实过表达IDO-BMSCs组炎性细胞浸润少于其他组.结论:过表达IDO的BMSCs可以通过有效调节免疫DC、T细胞及细胞因子,从多个免疫层面改善移植心脏存活.
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SAMHD1对HBV DNA形成的抑制作用及其机制研究
目的:研究不同肝细胞SAMHD1表达水平及其对HBV DNA形成的抑制作用和相关机制.方法:通过实时荧光定量PCR和Western blot法检测Jurkat、THP-1、HepG2、HepG2.2.15和Huh7细胞等细胞SAMHD1 mRNA和蛋白表达水平;通过对HepG2.2.15细胞转染过表达质粒和shRNA,升高或者降低SAMHD1的表达水平,观察不同SAMHD1表达水平对HBV DNA水平的影响;补充不同浓度的dNTP,比较不同dNTP浓度对HBV DNA水平的影响.结果:肝癌细胞系有较高的SAMHD1表达水平;降低SAMHD1可以使HBV DNA水平升高2.3~2.8倍,升高SAMHD1可以使HBV DNA降低至33%左右(P<0.01);升高dNTP浓度可以促进HBV DNA的合成水平,抵消SAMHD1的抑制作用.结论:SAMHD1可以抑制肝癌细胞内HBV DNA的生成,可能是通过降低细胞内dNTP浓度实现的.
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小檗碱对人卵巢癌细胞SKOV3增殖及凋亡机制的研究
目的:探讨小檗碱对人卵巢癌细胞(SKOV3)增殖及凋亡的影响.方法:MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪Annexin V/PI双染色法和透射电子显微镜检测细胞凋亡情况;甲基化特异性PCR分析hMLH1基因启动子区CpG岛的甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Survivin和hMLH1 mRNA基因的表达.结果:小檗碱对卵巢癌SKOV3细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05),呈剂量和时间依赖性.当与顺铂联用时,小檗碱对卵巢癌细胞有协同抗癌作用.小檗碱可明显诱导SKOV3细胞凋亡,并下调Bcl-2、Survivin基因及上调Bax基因的表达.此外,小檗碱能恢复hMLH1启动子的甲基化状态及增强hMLH1 mRNA的表达.结论:小檗碱可抑制卵巢癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,小檗碱可协同增强抗癌药物顺铂的抗肿瘤作用.
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百令胶囊对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化及TGF-β1-MAPK/ERK通路的影响
目的:探讨百令胶囊(BL)对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌纤维化及TGF-β1-MAPK/ERK通路的影响.方法:200只健康雄性BALB/c小鼠中的180只采用间断多次腹腔注射组织培养半数感染量(TCID50)100 TCID50/0.1 ml的柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒稀释液,建立VMC心肌纤维化模型,另外20只注射不含病毒的Eagle′s液作为正常对照组.两个月后模型制作成功.存活的小鼠随机分为4组,模型组、BL高、中、低剂量组.分别给予不同剂量BL进行治疗,每日灌胃给药一次,60 d后结束.心脏超声检测左室舒张末期内径(LVEDd)和左室收缩末期内径(LVEDs),并计算左室射血分数缩短率(FS);采用免疫组化法检测心肌组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原;Masson染色计算心肌胶原容积分数(CVF);测定采用半定量Western blot法检测心肌TGFβ1及p-ERK1/2蛋白的表达.结果:①与对照组比较,模型组小鼠心肌CVF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原明显增高,心脏LVEDd,LVEDs升高,FS下降,差异有统计学意义(P<0.05).②与对照组比较,模型组心肌TGF-β1及p-ERK1/2蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05).③与模型组比较,BL大、中剂量组CVF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原下降,心脏LVEDd,LVEDs下降,FS升高,差异有统计学意义(P<0.05).④与模型组比较,BL大剂量组心肌TGF-β1及p-ERK1/2蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)结论:①百令胶囊可以改善病毒性心肌炎小鼠减轻心肌纤维化,改善心功能.②在病毒性心肌炎中,TGF-β1-MAPK/ERK通路激活可能起促心肌纤维化作用.③百令胶囊抗心肌纤维化作用机制可能是通过抑制TGF-β1-MAPK/ERK通路的活化实现的.
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山仙颗粒对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及外周血中IFN-γ、TNF-β、IL-10的影响
目的:观察山仙颗粒对Lewis肺癌细胞增殖的影响及对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及免疫微环境的影响,以探究山仙颗粒抑瘤及提高机体抗肿瘤免疫力的分子机制,为其临床应用提供深层次的理论依据.方法:腋下皮肤移植Lewis肺癌细胞建立小鼠荷瘤模型,分为空白组、模型组、化疗组和山仙颗粒组;通过对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织称重并计算抑瘤率,采用免疫组织化学法检测脾脏组织中淋巴细胞CD、CD8表达情况,采用CCK-8法检测淋巴细胞对Lewis肺癌细胞增殖的影响,采用ELISA法检测外周血中IFN-γ、TNF-β 与IL-10的变化.结果:①山仙颗粒组对Lewis肺癌的抑瘤率为45.99%,显著高于化疗组(P<0.05);②小鼠淋巴细胞可抑制Lewis肺癌细胞的增殖,并与淋巴细胞浓度和作用时间呈正相关;且脾脏组织中CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值及淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的抑制率,模型组和化疗组显著低于空白组(P<0.05),山仙颗粒组显著高于模型组和化疗组(P<0.05),而山仙颗粒组与空白组比较无显著差异(P>0.05);③模型组和化疗组小鼠外周血中的IFN-γ和TNF-β显著低于空白组(P<0.05)、而IL-10显著高于空白组(P<0.05),山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β显著高于模型组和化疗组(P<0.05),而IL-10显著低于模型组与化疗组(P<0.05);山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β、IL-10与空白组比较无明显差异(P>0.05).结论:山仙颗粒能明显抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的生长,并具有提高小鼠脾脏指数、增强T淋巴细胞活性、使外周血中的IFN-γ、TNF-β上调而IL-10下调,提示山仙颗粒的抗肿瘤作用可能通过调节CD4+T淋巴细胞含量、CD4+/CD8+、Th1/Th2比值,恢复肿瘤患者免疫功能稳态,提高机体免疫力、加强免疫监视功能有关.
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mB7 H4-Ig融合蛋白对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损的干预作用
目的:探讨mB7H4-Ig融合蛋白对咪喹莫特诱导小鼠银屑病的干预作用.方法:ELISA法测定高压注射重组质粒在体内的表达水平;用咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型,治疗组高压注射mB7H4-Ig质粒而对照组注射Flag-Ig质粒,HE染色检测皮损改变,流式细胞术测定外周血免疫细胞亚群比例.结果:高压注射后小鼠体内可表达mB7H4-Ig融合蛋白;与对照组小鼠相比,治疗组小鼠皮肤的银屑病皮损炎症症状及病理改变相对较轻,PASI分数降低,外周血中的中性粒细胞比例明显降低而CD4+T细胞比例上调.结论:mB7H4-Ig融合蛋白通过抑制炎症反应因而改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病皮损病变,有望成为治疗银屑病新策略.
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B群脑膜炎球菌外膜蛋白0315不同形式疫苗免疫效果比较
目的:初步探讨和评价NMB0315核酸疫苗、重组蛋白疫苗及核酸疫苗+重组蛋白疫苗联合免疫诱导小鼠产生的特异性体液/细胞免疫应答水平及其免疫保护效果,为进一步探索NMB0315疫苗有效的免疫方法和途径提供实验依据.方法:大量制备核酸疫苗[pcDNA3.1(+)/NMB0315]和重组蛋白疫苗(pET-30a/NMB0315),采用核酸初免-蛋白加强的方法联合免疫或分别免疫雌性BALB/c小鼠,测定特异性体液/细胞免疫应答水平、免疫血清体外杀菌效价,观察疫苗对感染B群脑膜炎球菌小鼠的免疫保护效果.结果:NMB0315核酸疫苗组(pNMB0315-CpG)、蛋白疫苗组(rNMB0315-FA)及联合免疫疫苗组(pNMB0315-CpG+rNMB0315-FA)诱导的血清特异性IgG、IgG1、IgG2a及生殖道灌洗液中特异性sIgA水平在第八周达到峰值,A450值分别为(0.505±0.042、0.513±0.022、0.342±0.017、0.250±0.015)、(0.823±0.061、0.807±0.045、0.596±0.027、0.450±0.028)和(0.694±0.053、0.711±0.032、0.455±0.021、0.386±0.024),明显高于PBS对照组(P<0.01);其中,蛋白疫苗组的抗体水平明显高于联合免疫疫苗组和核酸疫苗组(P<0.05).小鼠脾淋巴细胞刺激指数及IFN-γ水平,联合免疫疫苗组明显高于蛋白疫苗组和核酸疫苗组(P<0.05);核酸疫苗组、蛋白疫苗组和联合免疫疫苗组免疫血清在补体介导下的体外杀菌抗体效价分别为1:64、1:128和1:128,对实验小鼠的免疫保护率分别为70%、95%和80%.免疫2、4、6、8周时,核酸疫苗组、重组蛋白疫苗组和联合免疫疫苗组IgG2a/IgG1比值均小于1.结论:NMB0315疫苗诱导的体液免疫(包括黏膜免疫)效果从高到低为:重组蛋白疫苗组、联合免疫疫苗组、核酸疫苗组;诱导细胞免疫的效果从高到低为:联合免疫疫苗组、核酸疫苗组、重组蛋白疫苗组;NMB0315疫苗对实验小鼠的免疫保护效果从高到低为:重组蛋白疫苗组、联合免疫疫苗组、核酸疫苗组.
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新型教学模式与传统教学模式在动物免疫学教学中的比较研究
物免疫学是一门综合性和实践性都很强的基础学科,是兽医专业重要主干课,其原理已经广泛应用于临床诊断、疾病治疗[1]. 随着生命科学的快速发展,动物免疫学已成为当今生命科学的前沿学科和现代医学的支撑学科之一[2]. 既往授课多以传统的理论教学为主,学生主要是听课,由于概念繁多,内容抽象,逻辑推理严谨,学生在理解与掌握方面难度很大. 进而学习主动性差,热情不高,缺乏兴趣,这种状况日渐积累使得教学效果很不理想. 为了应付考试,学生只能考试前突击记忆,使得学生在临床实践中处理实际问题能力缺乏. 因此要寻找一种突破传统教学模式,能够激发学生学习兴趣的教学方法势在必行. 笔者在教学实践中引入两种新型教学模式,借此进行教学改革的尝试和探索,来调动学生学习的积极性,变被动学习为主动学习,从而提高了学习效率,取得了令人满意的教学效果.
关键词： -
成果导向教育模式在动物免疫学实验教学中的应用
成果导向教育( Outcome-based education,OBE)源于20世纪80年代北美基础教育改革运动,其创始人斯派蒂( B. Spady)提出:"基于结果的教育明确地意味着关注和组织教育系统中的每件事物围绕着一个根本的目标,让所有的学生在完成他们的学习经历后都能获得成功"[1,2]. 这种模式强调学生个人的进步和学业成就,要求教师清楚学生毕业时应达到的结果,然后设计适宜有效的教学手段使他们达到这些结果[3]. 该方法重视学生个性发展,扩展成功学习机会,培养学生适应未来、适应社会的综合能力等. 动物免疫学是兽医专业的重要专业基础课程,侧重免疫学诊断和免疫防治,任务是运用免疫学技术诊断、预防和控制动物传染病,其内容分散、知识抽象,缺乏直观性,学生常感觉学习困难[4,5]. 因此,将OBE教育模式引入动物免疫学实验教学中,学生明确了学习目的,提高学习效率,对培养应用型兽医人才具有重要意义.
关键词：
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
