中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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CCL5在胃癌患者肿瘤组织和血清中的表达及临床意义
目的:检测胃癌患者组织及血清中的CCL5的表达并探讨血清中CCL5表达的临床意义.方法:选择临床病理资料齐全的胃癌蜡块标本48例,取癌组织和癌旁组织(对照组),采用SP免疫组化法检测CCL5在胃癌组织及癌旁组织中的表达.抽取新诊断胃癌患者50例(均未行手术及放化疗)及健康志愿者16例(对照组)的血清标本,采用ELISA检测CCL5在胃癌患者及健康志愿者血清中的表达,研究血清中CCL5的表达水平与胃癌的病理因素及生物学行为之间的关系.结果:CCL5在胃癌患者组织及血清中呈高表达,与对照组相比,明显升高,具有统计学差异(P＜0.001),胃癌患者血清中CCL5的表达水平与胃癌组织浸润深度、淋巴结转移情况、TNM分期情况及肿瘤分化程度均具有相关性(P＜0.001),与患者的性别及年龄无相关性.结论:CCL5可能成为胃癌患者肿瘤分期及疾病进展的重要分子标志.
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宫颈癌组织中硒结合蛋白1表达与肿瘤微环境中抗氧化酶活性有关
目的:探讨官颈癌患者血清和组织中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)活性和宮颈组织中硒结合蛋白l (Selenium Binding Protein l,SBP1,SELENBPl)表达之间的相互关系,为SELENBP1在宫颈癌发生发展中的作用机制提供理论基础.方法:收集临床住院病人血清样本检测GPx活性,收集相应官颈组织样本检测GPx活性及采用Western blot方法检测组织内SELENBP1蛋白表达水平,用Spearman等级相关来分析其相关性.结果:官颈癌病人血清中GPx活性明显降低;与正常宫颈、CINⅢ级组织和相应癌旁组织相比,癌组织中GPx活性增强,SELENBP1蛋白表达也降低.结论:官颈癌组织中SELENBP1表达水平与肿瘤组织微环境中GPx活性呈负相关,而与病人血清中GPx活性无关,提示SELENBP1可能是通过肿瘤微环境中GPx来发挥抗肿瘤作用.
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MTHFR基因多态性与非综合征性唇腭裂的相关性研究
目的:探讨5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与非综合征性唇腭裂(NSCLP)遗传易感性的相关性.方法:选取2014年6月至2015年5月在我院治疗的NSCLP患者100例(病例组A),其中单纯性腭裂(CPO组)23例,唇裂伴或不伴腭裂(CL/P组)77例;同时选取100名正常儿童(对照组A)、100名生育过NSCLP患儿母亲(病例组B)和100名正常出生儿母亲(对照组B),采用聚合酶联式反应-限制性片段长度多态性基因分型技术检测各组MTHFR基因C677T突变.结果:病例组A中,CL/P组C、T等位基因频率为55.84％和44.16％,CPO组分别为54.35％和45.65％,对照组A分别为75.00％和25.00％,CL/P组和CPO组T等位基因频率明显高于对照组A,差异有统计学意义(P＜0.05);CT基因型个体患CL/P的风险是CC基因型个体的2.39倍,患CPO的风险是CC基因型个体的2.98倍;Tr基因型个体患CL/P的风险是CC基因型个体的6.70倍,患CPO的风险是CC基因型个体的7.33倍;病例组B和对照组B的等位基因频率和基因型构成情况比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:MTHFR基因C677T突变可能是NSCLP发生的遗传危险因素之一,但母亲MTHFR基因C677T突变可能与子代发生NSCLP无关.
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模式识别受体TLR3、RIG-I和MDA5在慢性乙肝患者外周血的表达水平
目的:观察慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中单个核细胞胞膜和胞质模式识别受体mRNA的表达表达水平.方法:54例慢性乙型肝炎患者为实验组,40例健康体检者为对照组.采集实验组和对照组的新鲜空腹抗凝血,分离单个核细胞,提取单个核细胞中RNA,并反转录为cDNA,应用实时定量PCR技术检测Toll样受体3(TLR3)、维甲酸诱导基因-I(RIG-I)、黑色素瘤分化相关分子5(MDA5)、I型干扰素(IFN-α、IFN-β)、转录因子3(IRF-3) mRNA表达水平.结果:与正常对照组比较,实验组的TLR3、RIG-I、MDA5、IFN-α、IFN-β、IRF-3 mRNA表达水平均明显降低,具有显著性差异(P＜0.05).高病毒载量组中的各分子表达水平与低病毒载量组和健康对照组比较降低更明显,且TLR3、RIG-I、MDA5、IFN-α、IFN-β、IRF-3mRNA水平分别与HBV-DNA的含量呈负相关(r=-0.697、-0.738、-0.867、-0.618、-0.415、-0.573).结论:细胞胞膜(TLR3)和胞质(RIG-1、MDA5)模式识别受体、IFN-a、IFN-β、IRF-3 mRNA水平在慢性乙型肝炎患者的外周血单个核细胞中的表达降低,可能与HBV感染的慢性化状态有关.
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维生素D对慢性乙型肝炎患者免疫功能及抗病毒疗效的影响
目的:探讨25羟维生素D3对慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞免疫功能及抗病毒疗效的影响.方法:收集慢性乙型肝炎患者70例.采用电化学发光法测定血清25羟维生素D、荧光定量聚合酶链反应技术检测乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)血清标志物,采用免疫荧光标记法测定外周血T淋巴细胞亚群数目.根据血清维生素D水平将患者分为维生素D低水平组、中水平组和高水平组,分别对3组患者给予长效干扰素治疗6个月,并于相应时间检测T淋巴细胞亚群数目、肝功能、病毒学指标.结果:3组患者在性别、年龄两两比较上无统计学差异.随着血清维生素D水平的升高,C D3+、CD4+、CD4+/CD8+显著性升高,而CD8+逐渐降低,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).干扰素的治疗能明显改善T细胞各亚群,并且高水平组改善更明显.干扰素的治疗能明显改善患者的病毒学指标,高水平组患者能获得较好的病毒学应答.随着血清维生素D水平的升高,HBeAg、HBsAg阳性率以及HBV DNA的含量逐渐降低,低水平组与中等水平组、高水平两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).然而不同水平维生素D组,患者的肝功能无明显差异.结论:维生素D可能参与慢性乙型病毒性肝炎免疫功能的调节并与免疫耐受的形成有关,高水平的维生素D可以获得持续的病毒学应答,这可能为慢性乙型病毒性肝炎发病机制的研究和治疗提供新的思路.
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类风湿关节炎患者嗜碱性粒细胞与疾病活动度和Th1应答失衡的关系
目的:探讨RA患者外周嗜碱性粒细胞的活化情况和活化机制,以及与疾病活动度和Th1/Th2应答失衡的关系.方法:本研究运用流式细胞术检测类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(Peripheral bloodmononuclear cells,PBMC)中Th1/Th2细胞的比值和嗜碱性粒细胞数量及活化水平,用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4水平,用Western blot法检测血清中循环的IgE型免疫复合物(IgE-CIC)的水平.结果:Th1/Th2细胞比值与DAS28评分呈低度线性正相关关系;RA患者血清IFN-γ水平较对照组显著升高,且和疾病活动度相关,但IL-4的水平则无差异;RA患者嗜碱性粒细胞数量较对照组显著降低,且高度活化(高表达CD203c和CD62L);RA患者外周血存在高水平的IgE-CIC,而对照组则无.结论:RA患者外周血嗜碱性粒细胞高度活化、数量显著减少,可能会迁徙至次级淋巴组织和炎症部位,对抗外周Th1应答失衡,有望为RA的防治提供新的线索.
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联合检测外周血游离LUNXmRNA、SCC和β2-MG对非小细胞肺癌的早期诊断价值
目的:探讨一种联合检测外周血游离LUNXmRNA、鳞状细胞癌相关抗原(SCC)和β2-微球蛋白(β2-MG)对非小细胞肺癌(NSCLC)的早期诊断方法.方法:收集69例非小细胞肺癌患者的血浆和血清,分别检测外周血游离LUNXmRNA、SCC和β2-MG值,统计分析整理数据.结果:69例非小细胞肺癌患者联合检测外周血游离LUNXmRNA、SCC和β2-MG,其阳性率为82.6％,敏感度为89.8％.结论:联合检测对非小细胞肺癌的检测的阳性率和敏感度都大大提高,有助于提高非小细胞肺癌的早期诊断价值.
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视神经脊髓炎患者NMOIgG抗体阳性与阴性患者临床症状对比及预后分析
目的:对NMOIgG抗体表达阳性的视神经脊髓炎患者与其表达阴性患者的不同临床症状与其治疗后预后的情况进行分析与探究.方法:收集在我院接受治疗的100例视神经脊髓炎患者,采集患者的血清学标本,并且对其血清标本进行NMOIgG抗体检测,根据检测的结果将其分为抗体阳性组与抗体阴性组,每组患者50例,对比分析两组患者的临床症状以及治疗的效果与预后的情况.结果:抗体阳性组患者的病程(3.8±0.8)年、脑脊液克隆带数(37.1±6.9)个以及脊髓病灶节段数(67.2±10.8)个与抗体阴性组患者的病程(1.9士0.5)年、脑脊液克隆带数(28.3±5.7)个以及脊髓病灶节段数(34.6±9.5)个相比明显较高,结果有统计学意义(P＜0.05).两组患者经治疗后,病程、脑脊液克隆带数以及脊髓病灶节段数等临床症状中,抗体阳性组患者的EDSS评分与抗体阴性组患者的EDSS评分相比明显较高,结果有统计学意义(P＜0.05).结论:NMOIgG抗体在视神经脊髓炎患者体内表达阳性时,其病程、脑脊液克隆数等临床症状相对较为显著,且其治疗的预后效果较差,可以用于临床上对该疾病病情变化的判断与研究等.
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表观遗传机制和哮喘的发生
支气管哮喘是由多种细胞,特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的常见的慢性气道炎症疾病[1],易感者表现为反复发作性咳嗽、喘鸣和呼吸困难,并伴有气道高反应性的可逆性、梗阻性呼吸道疾病[2].
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环孢素A造成免疫功能低下小鼠模型的研究进展
免疫系统是机体的重要组成部分,对维持体内环境平衡和稳定发挥着重要作用.免疫功能低下是许多重大疾病共有的病理过程,为了研究药物对机体免疫功能的影响,常需要通过一定的方法建立免疫失衡动物模型.环孢素A(CsA)是一种新型的免疫抑制剂,它能选择性的抑制CD4+T细胞的生成,导致受试动物细胞免疫功能低下.本文主要通过对CsA造模方法及存在问题进行综述,以期为利用该模型进行相关实验或应用类试方法进行模型制造提供参考.
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抑郁症发病机制的免疫学研究进展
抑郁症是由多种因素综合作用引发具有遗传倾向的慢性心理疾病,全球患病率12％～17％[1],复发率较高,严重妨碍人们的日常生活.抑郁症主要表现为抑郁心境、兴趣丧失、负罪感或无价值感、睡眠紊乱和食欲下降、活动减少、注意力下降等;根据不同的分类标准,抑郁症有内源性、外源性、原发性、继发性等众多亚型,据联合国世界卫生组织预测,2020年抑郁症将成为导致人类残疾和死亡的第二大类疾病[2].
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桥本脑病的研究进展
1 桥本脑病的简介1880年由Savage[1]提出的黏液水肿相关性神经症状为第一例报道的甲状腺相关性神经系统病变.1966年Lord Brain[2]等再次描述自身免疫性甲状腺炎相关类固醇反应性脑病(steroid-responsive encephalo-pathy associated with autoimmune thyroiditis,SREAT),也称桥本氏脑病(Hashimoto's encephalopathy,HE).流行病学表示该病发病率为2.1/100 000多见于中年女性[3].
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树突状细胞参与免疫性血小板减少症发病机制的研究讲展
免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia,ITP)是一种免疫异常介导的出血性疾病,主要表现为外周血中血小板减少,皮肤、黏膜及内脏出血,其发病机制复杂,尚未完全明了.ITP是临床上常见的自身免疫性出血性疾病,故有必要对其发病机制深入研究,以便指导临床治疗.
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炎症小体和细胞死亡通路相互关系的研究进展
当细胞受到微生物感染、外界压力、损伤或化学药物治疗后,可能导致细胞死亡的发生.细胞死亡包括细胞凋亡(Apoptosis)、程序性坏死(Necroptosis)、细胞自噬(Autophagy)以及近发现的炎性坏死(Pyroptosis)等四种方式.将要死亡或已经死亡的细胞可释放出细胞质、细胞核、内质网和线粒体等生物分子及化学成分.这些成分可能作为炎症小体(Inflammasome)的激活物,活化炎症小体进而介导炎症反应.反之,近研究提示炎症小体通路也可能参与调控某种细胞死亡过程(即炎性坏死Pyroptosis).炎症小体和细胞死亡通路之间的相互作用可能与机体多种疾病的炎症病理过程有密切的关系.本文拟对四种细胞死亡通路与炎症小体通路之间相互作用机制进行一个简要综述.
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肿瘤雌激素受体信号通路及其与肿瘤免疫应答间的交互作用
癌症对人类健康造成严重威胁.肿瘤的发生发展与多种因素密切相关,除了年龄、种族及地理等因素外,临床研究中还发现乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、肝癌、前列腺癌及结肠癌等多种肿瘤在男性与女性中的发生率存在显著性差异,认为性激素可能会影响激素靶向性癌症的发生与发展,其中雌激素及其信号通路近年来成为广受关注的热点.
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Toll样受体4与乙型肝炎病毒感染研究进展
乙型肝炎病毒(HBV)感染是严重威胁人类健康问题之一,全球约3.5亿慢性HBV携带者,每年大约有60万人死于急性、慢性HBV感染[1].我国慢性HBV感染者主要来自围产期和婴幼儿时期的感染,由于免疫系统不健全,多数发展为慢性感染,是引起肝硬化、肝癌的主要原因之一[2].HBV感染后,机体通过细胞毒性T淋巴细胞反应杀死或抑制感染细胞内的病毒复制,控制HBV感染[3].
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ALEX1基因过表达慢病毒载体的构建和鉴定
目的:探讨构建Arm重复蛋白1(ALEX1)基因过表达慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞系SK-BR3后观察ALEXI的表达,为研究ALEX1在乳腺癌中的作用及机制奠定基础.方法:利用DNA重组技术将ALEX1基因插入到慢病毒穿梭质粒LV5中,获得重组慢病毒质粒V-ALEX1,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,用Lipofectamine 2000将重组质粒和慢病毒包装质粒系统(pGag/Pol、pRev、pVSV-G)转染293T细胞中包装成重组慢病毒颗粒,经流式细胞术测定重组慢病毒滴度.将成功包装的ALEX1过表达慢病毒载体(LV5-ALEX1)和阴性对照载体(LV5-NC),感染SK-BR3细胞(MOI为10)48～72 h,Realtime PCR和Western blot法分析ALEX1表达情况.结果:酶切鉴定结果显示:产生约1 500 bp的片段,片段大小与ALEX1基因cDNA大小一致.DNA测序比对说明测序结果与预期ALEX1基因序列完全一致,证实ALEX1基因正确插入载体中,成功构建ALEX1基因过表达载体.经293T细胞包装后,成功获得病毒滴度为4.25x108 TU/ml的重组慢病毒LV5-ALEX1.Realtime PCR和western blot结果显示:与感染LV5-NC的SK-BR3细胞相比,LV5-ALEX1感染可明显增加ALEX1 mRNA及蛋白的表达水平.结论:成功构建ALEX1基因过表达慢病毒载体,ALEX1基因过表达慢病毒能够感染乳腺癌SK-BR3细胞,可使外源基因获得稳定过表达.
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抗结核分枝杆菌DNA疫苗的构建及免疫原性研究
目的:构建抗结核分枝杆菌(TB) DNA疫苗并进行体内外的鉴定.方法:采用PCR技术分别扩增TB(H37Rv)抗原单基因Ag85a、Ag85b以及融合基因Ag85a-Esat6和Ag85b-Esat6融合基因,其5’端均含人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)信号肽,将目的基因分别亚克隆于pVAX1真核表达载体,得到Ag85a/pVAX1、Ag85b/pVAX1、Ag85a-Esat6/pVAX1和Ag85 b-Esat6/pVAX1四种质粒;经酶切和测序鉴定正确后,质粒转染COS-7细胞48 h,取上清液检测目的蛋白表达情况;利用在体电脉冲技术(EP)将质粒注射BALB/c小鼠双侧胫前肌,检测特异性的体液和细胞免疫应答.结果:四种质粒基因片段方向、序列正确;Western blot检测COS-7细胞转染48 h后的上清,均有清晰特异性的目的蛋白条带,并定量检测到Esat6蛋白的表达水平可达10 ng/ml;小鼠免疫实验结果表明,仅质粒Ag85b/pVAX1和Ag85 a-Esat6/pVAX1可诱导针对结核抗原分泌高水平IFN-γ的Th1型免疫应答和特异性杀伤应答,其中通过ELISA检测小鼠血清的lgG和ELISPOT检测脾细胞分泌IFN-γ的实验结果阳性率均为100％,且Ag85 a-Esat6/pVAX1的效果较好些,与卡介苗具有显著性差异.结论:成功构建了抗TB的DNA疫苗,其中Ag85 a-Esat6/pVAX1质粒DNA疫苗的免疫效果较好,为进一步研发治疗性的TBDNA疫苗奠定基础.
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早期卵清蛋白诱导的兔类风湿性关节炎模型的建立与评估
目的:探索鸡卵蛋白诱导性兔类风湿性关节炎模型在早期关节中的应用,并评估超声引导下AIA模型关节腔穿刺活检,在活体中连续动态地获取病理标本的可行性、安全性.方法:将25只新西兰大白兔卵蛋白诱导的类风湿性关节炎组(AIA组)20只,对照组5只.在造模后高频超声分别观察超声影像特点.以ELISA法检测VEGF和TNF-α水平.在4、8、12、15周,超声引导下活检,获取滑膜病理,制作病理切片,镜下观察病理改变.结果:(1)模型各时间观测点测量的AIA组滑膜厚度、VEGF、TNF-α均高于对照组基线水平,具有显著性差异(P＜0.05).(2)关节炎模型4周至8周期间,以病理学评分作为金标准,滑膜厚度、VEGF、TNF-α结果与病理学评分具有相关性.(3)超声引导下滑膜活检成功率为95％,术后无感染、出血、关节骨质损伤的情况.结论:(1)卵清蛋白诱导的兔类风湿关节炎模型可作为观察早期(8周前)关节炎病理生理改变的研究模型.(2)超声引导下的滑膜活检,可有效安全地获取病理标本.
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叔丁基对苯二酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究
目的:探讨叔丁基对苯二酚在大鼠脑缺血再灌注中的神经保护作用及可能机制.方法:将SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血再灌注加溶剂治疗组、缺血再灌注加叔丁基对苯二酚治疗组,分别于再灌注后24h对大鼠进行行为学评分,采用免疫印迹法检测叔丁基对苯二酚对Nrf2蛋白表达的影响,TUNEL法检测神经细胞的凋亡,酶联免疫吸附法检测炎性因子TNF-α和IL-1β的表达,同时检测超氧化物歧化酶和丙二醛的含量.结果:与假手术组相比,叔丁基对苯二酚可以显著上调Nri2蛋白的表达(P＜0.05)和SOD的活性(P＜0.05),显著减少MDA的表达量(P＜0.05),抑制TNF-α和IL-1β的表达量(P＜0.05).结论:叔丁基对苯二酚可以在大鼠脑缺血再灌注损伤中发挥显著地神经保护作用,其机制可能与上调Nrf2信号通路相关.
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HSP60口服耐受诱导调节T细胞Foxp3去甲基化抑制动脉粥样硬化
目的:探讨Foxp3去甲基化在HSP60口服耐受抑制动脉粥样硬化中的作用.方法:8周龄载脂蛋白E-/-小鼠分别口服重组鼠热休克蛋白60-PBS溶液和单纯PBS溶液,连续5天后高脂饲养12周,监测期间两组脾细胞CI4+ CD25+调节性T细胞内DNA甲基化转移酶表达,Foxp3启动子甲基化水平,细胞因子分泌程度,脾细胞中CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞百分比,斑块面积.结果:与对照组比较,口服热休克蛋白60组脾细胞CD4+ CD25+调节性T细胞内DNA甲基化转移酶表达显著降低,Foxp3启动子甲基化水平显著降低,抑炎因子IL-10和TGF-β分泌显著增加,而促炎因子IFN-γ分泌显著降低,脾细胞中CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞比例明显提高,斑块面积显著减小.结论:HSP60口服耐受通过诱导调节T细胞Foxp3基因去甲基化导致调节T细胞功能增强,分化增加,抑制动脉粥样硬化.
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p21蛋白激活激酶4在三阴乳腺癌增殖中的作用及机制研究
目的:探讨p21蛋白激活激酶4(PAK4)在三阴乳腺癌细胞增殖存活中的作用机制.方法:在三阴乳腺癌BT549和MDA-MB-231细胞中转染PAK4干扰载体,荧光定量法和免疫印迹分析检测PAK4 mRNA和蛋白质表达量变化;MTT法检测转染PAK4干扰载体对三阴乳腺癌细胞存活率的影响;细胞周期分析检测,转染PAK4干扰载体对三阴乳腺癌细胞细胞周期的影响;免疫印迹分析,转染PAK4干扰载体对三阴乳腺癌细胞对细胞信号通路的影响.结果:干扰内源PAK4表达后,三阴乳腺癌BT549和MDA-MB-231细胞的增殖率分别下降(36.514.24)％和(38.54±5.43)％,G0/G1期细胞所占比例显著增加到(66.40±2.82)％和(72.01±3.13)％,ERK1/2磷酸化显著降低;ERK通路抑制剂PD98059处理后,三阴乳腺癌BT549细胞的增殖率显著下降(46.41±7.16)％.结论:PAK4在三阴乳腺癌增殖中发挥关键作用,其促增殖作用是通过ERK通路实现的.
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烟草烟雾通过TGF-β1/Smad2通路诱导RLE-6TN发生上皮间质转化
目的:探讨烟草烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)在诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及机制.方法:以不同浓度(0.25％,0.5％及1％)CSE刺激RLE-6TN细胞株;TGF-β1受体抑制子(SB431542)预处理后,加入1％ CSE共培养.实时定量PCR (RT-PCR)检测E-cadherin和Vimentin RNA表达;印迹法(Western blot)检测TGF-β1、Smad2、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达量.结果:经不同浓度的CSE作用,E-cadherin无论是在RNA还是在蛋白水平表达均下调,而Vimentin表达均上调;同时,TGF-β1、p-Smad2和N-cadherin蛋白表达量增加;TGF-β1受体抑制子(SB43542)干预后,p-Smad2表达量明显降低(P＜0.05),E-cadherin蛋白表达量较对照组明显增加(P＜0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量较对照组明显降低(P＜0.05).结论:CSE可能通过激活TGF-β1/Smad2信号通路,参与调节E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,从而诱导RLE-6TN发生EMT.
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缝隙连接蛋白Cx43介导高糖诱导的气道上皮结构受损
目的:探讨缝隙连接蛋白(Connexin43,Cx43)在高糖(High glucose,HG)诱导气道上皮结构受损的相关调节机制.方法:构建突变的Cx43磷酸化载体pEGFP-N1-Cx43279-MU、pEGFP-N1-Cx43365-MU和pEGFP-N1-Cx43368-MU,转染正常人支气管上皮细胞16HBE,给予高糖刺激,Western blot法、Real-time PCR法测定Cx43的蛋白及mRNA水平,Western blot法测定紧密连接蛋白(Zonula occludens-1,ZO-1)及黏附连接蛋白(E-cadherin)的表达,激光共聚焦检测ZO-1的表达及定位.结果:与对照组相比,HG刺激后Cx43 mRNA表达及蛋白含量均降低,ZO-1及E-cadherin的表达亦明显降低,均低于对照组(P＜0.05).转染Cx43磷酸化突变载体pEGFP-N1-Cx43279-MU、pEGFP-N1-Cx43365-MU和pEGFP-N1-Cx43368-MU的细胞经HG刺激后,Cx43表达明显增强,显著高于单纯HG组(P＜0.05),同时伴随ZO-1及E-cadherin的表达的增强(P＜0.05).结论:缝隙连接蛋白Cx43参与了HG诱导的气道上皮结构受损,是气道上皮机械防御屏障的重要调控分子.
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Smad4基因条件性敲除对T细胞发育的影响
目的:探讨特异性地在T细胞中敲除Smad4基因后,对T细胞发育的影响.方法:制备小鼠胸腺单细胞悬液,通过流式细胞术检测表面标记分子CD4、CD8、TCRβ、NKl.1、γδT CR和核因子Foxp3的表达情况.结果:Smad4在T细胞中的缺失不影响CD4-CD8-、CD4+ CD8+、CD4+ SP、CD8+ SP、TCRβhi、NKl.1+ TCRβ-、NKl.1+ TCRβ+、CD8-γδT+、CD8+ γδT+、CD4+Foxp3+ nTreg等细胞亚群在胸腺细胞中的比例与绝对数.结论:Smad4基因在T细胞中的条件性敲除不影响T细胞的发育.
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microRNA-130b在结肠癌中的表达及生物学意义研究
目的:研究微小RNA 130b(microRNA-130b,miR-130b)在结肠癌(Colonic carcinoma,CRC)中的表达情况及生物学意义.方法:收集2013年1月至2015年3月于我院普通外科行手术切除的CRC组织及对应癌旁组织共60例,运用qRT-PCR技术检测miR-130b在CRC组织及癌旁组织中的表达水平,统计分析miR-130b表达水平与患者临床病理资料间的相关性;采用人工合成的miR-130b模拟物转染人结肠癌SW480细胞,分别采用CCK-8分析、BrdU检测转染后细胞增殖变化,流式细胞仪及Caspase3/7活性分析检测转染后细胞凋亡变化.结果:miR-130b在CRC组织中表达水平显著高于对应癌旁组织(P＜0.05);miR-130b高表达与肿瘤体积增大(≥5 cm,P＜0.05)及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期,P＜0.05)显著相关;在人结肠癌SW480细胞中过表达miR-130b可显著抑制细胞增殖并促进细胞凋亡(P＜0.05).结论:miR-130b在结肠癌组织中表达下调并与肿瘤恶性临床病理特征有关,miR-130b可能通过抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡来抑制结肠癌的生长及发展.
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重组hIL-10联合MTX对AA大鼠IL-1β、TNF-α含量变化和影像学变化研究
目的:以重组人白细胞介素-10(human interleukin-10,hIL-10)及其联合甲氨碟呤(MTX)作用佐剂性关节炎大鼠模型,检测血清IL-1β、TNF-α含量的变化情况,研究重组hIL-10联合MTX治疗佐剂性关节炎大鼠的效果.方法:AA大鼠造模后,用测量体重、足肿胀度、关节炎指数及组织病理学来评价造模是否成功,各药物处理AA大鼠模型后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IL-1β、TNF-α的含量.用放射学检查来评估AA大鼠后足关节损伤的程度.结果:各治疗组IL-1β、TNF-α含量比模型组水平明显下降,各治疗组与模型组比较有显著性差异(P＜0.05),联合用药组对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α有明显的抑制作用,影像学检查提示IL-1β、TNF-α水平与大鼠足骨关节的损伤程度成正相关,联合用药组治疗后骨侵蚀评分低.结论:各治疗组对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α有抑制作用,这种抑制作用与骨关节影像学改变显著相关.联合用药组能有效降低AA大鼠的IL-1β、TNF-α水平,改善AA大鼠足关节损伤的治疗作用.
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DHA激活NADPH氧化酶/ROS/Nrf2通路诱导ARPE-19细胞表达HO-1
目的:观察二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)诱导人视网膜色素上皮细胞表达血红素氧合酶(Heine oxygenase,HO)-1的分子机制.方法:培养人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19,加入30 ～ 100 μmol/L DHA作用4～24 h.Western blot检测HO-1的表达及NADPH氧化酶p47 ph“亚基的磷酸化;荧光探针H2DCFDA检测活性氧(Reactive oxygenspecies,ROS)的产生;免疫荧光分析Nrf2在细胞核及胞浆中的表达;后采用NADPH氧化酶抑制剂DPI,ROS抑制剂NAC或采用siRNA干扰Nrf2表达,检测其对HO-1表达的影响.结果:100 μmol/L DHA作用ARPE-19细胞30 min即可诱导p47phox亚基的磷酸化,同时能增加细胞内ROS的含量;采用NADPH氧化酶抑制剂DPI处理后,ROS水平显著降低;免疫荧光实验显示DHA作用细胞2h后,可诱导Nrf2核转位,采用DPI或NAC处理后,Nrf2核转位水平明显减少;采用Nrf2 siRNA沉默其表达,或采用DPI或NAC处理后,可抑制DHA诱导ARPE-19细胞表达HO-1.结论:DHA可能通过NADPH氧化酶/ROS/Nrf2通路途径诱导视网膜色素上皮细胞表达HO-1,从而发挥对细胞的保护作用.
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全蝎水提物对巨噬细胞活化作用研究
目的:观察全蝎水提物(Buthus martensii water extract,BMWE)在体外对小鼠巨噬细胞株RAW264.7的活化作用.方法:MTT法测定细胞活性;采用FITC标记的酵母测定吞噬活性;利用Griess试剂和ELISA方法测定细胞上清NO、TNF-α和IL-6释放量.结果:BMWE在不影响细胞活力的剂量范围内可增强正常及免疫抑制的RAW264.7细胞吞噬荧光酵母能力(P＜0.01),增加RAW264.7细胞NO释放量(P＜0.01),促进RAW264.7细胞TNF-α和IL-6产生(P＜0.01),均具有良好的量效关系.结论:BMWE可明显提高巨噬细胞吞噬功能与分泌能力,活化巨噬细胞,此作用与全蝎传统用于治疗疮疡、瘰疬,现代用于肿瘤的临床应用相关.
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冬虫夏草菌丝体提取物抑制顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤
目的:探讨冬虫夏草菌丝体(Hirsutella sinensis mycelium,HSM)提取物对顺铂(CDDP)诱导的小鼠肾小管上皮细胞(RTEC)损伤的影响及可能的调控机制.方法:体外实验分5组:正常对照组、顺铂诱导的损伤模型组及低、中、高剂量的HSM干预组.RTEC经HSM预处理2h后加CDDP刺激,24h后收取细胞,分别采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡、Real-time PCR检测凋亡相关基因、炎性因子及模式识别受体的相对表达量.体内实验分3组:对照组、CDDP诱导的小鼠急性肾损伤模型组及HSM治疗组,分别取肾组织进行HE染色及提取RNA和相关基因mRNA水平的检测.结果:HSM预处理可缓解CDDP诱导的凋亡,促进抗凋亡基因Bcl-2的表达,并抑制BAX与Caspase-9;同时降低TNF-α和TLR4的表达.体内实验则显示HSM可有效缓解CDDP诱导的小鼠肾小管损伤.结论:HSM可以降低RTEC凋亡、减轻炎症以改善CDDP诱导的RTEC损伤.
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羧甲基茯苓多糖对肿瘤坏死因子-α调控体外Caco-2细胞系生物学特性的影响
目的:体外实验研究羧甲基茯苓多糖(Carboxytmethylpachymaran,CMP)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)调控体外Caco-2细胞系生物学特性的影响,并初步探讨其机理.方法:TNF-α诱导Caco-2细胞建立损伤模型,100 μg/ml CMP干预上述模型,分别从细胞单层跨膜电阻(TER)、酚红透过率、紧密连接蛋白Claudin-1表达量以及分布方面评价造模情况和CMP干预情况.结果:TNF-α诱导Caco-2细胞TER明显下降(P＜0.01),酚红透过率明显升高(P＜ 0.01),Claudin-1蛋白表达降低、Claudin-1蛋白分布毛糙、锯齿样改变、荧光强度变弱,提示造模成功;CMP干预后,TER明显升高(P＜0.01),酚红透过率明显降低(P＜0.01),Claudin-1蛋白的表达量升高,Caudin蛋白的分布变得光滑、荧光强度增强.结论:CMP能够有效的逆转TNF-α调控的体外Caco-2细胞系生物学特性,可能与恢复Claudin-1蛋白表达和分布有关,CMP可能是治疗炎症性肠病的潜在有效药物.
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Smad7修饰的骨髓间充质干细胞对肝硬化大鼠治疗及其机制研究
目的:探讨Smad7修饰的骨髓间充质干细胞对肝硬化大鼠的治疗作用,并对相关机制进行研究,为临床治疗方法提供理论依据.方法:选取80只健康雄性Wistar大鼠,随机分为4组,对照组(C):不采取任何干预措施;肝硬化组(LC):行大鼠肝硬化模型制备;空载体转染组(Ad-eGFP-LC):行大鼠肝硬化模型制备后给予Ad-eGFP空载体修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗;治疗组(Ad-Smad7-eGFP-LC):行大鼠肝硬化模型制备后给予Ad-Smad7-eGFP修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗.取各组大鼠的肝脏组织,行HE染色.检测各组大鼠体重和肝湿重,血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)含量以及肝组织TGFβ1、Smad3以及Smad7 mRNA表达量.结果:BMSCs移植入大鼠体内后,Ad-Smad7-eGFP-LC组大鼠肝脏组织病理学有明显改善,肝脏纤维化和干细胞变性坏死的程度明显降低;Ad-Smad7-eGFP-LC组大鼠体重低于C组(P＜0.05),均高于Ad-eGFP-LC及LC组(P＜0.05);Ad-Smad7-eGFP-LC组大鼠肝湿重高于C组(P＜0.05),均低于Ad-eGFP-LC及LC组(P＜0.05);Ad-SmadT-eGFP-LC组大鼠体内ALT、AST表达均高于C组(P＜0.05),均低于Ad-eGFP-LC及LC组(P＜0.05);Ad-Smad7-eGFP-LC组大鼠体内Alb及TP表达量低于C组(P＜0.05),均高于Ad-eGFP-LC及LC组(P＜0.05);Ad-Smad7-eGFP-LC组大鼠体内TGFβ1、Smad3 mRNA表达均高于C组(P＜0.05),均低于Ad-eGFP-LC及LC组;Ad-Smad7-eGFP-LC组大鼠体内Smad7 mRNA表达量均高于C组,Ad-eGFP-LC及LC组(P＜0.05).结论:Smad7修饰的骨髓间充质干细胞移植入肝硬化大鼠体内可减轻疾病的发生,其机制可能与减弱TGFβ-Smad信号转导通路相关.
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雷帕霉素对RAW264.7细胞6种miRNAs表达的影响及miR-20a对ATG16L1的靶向调控作用
目的:探讨雷帕霉素对miR-17-92簇中的6种miRNAs表达的影响,及miR-20a对ATG16L1基因的靶向调控作用.方法:利用qRT-PCR检测雷帕霉素对RAW264.7细胞miR-17-92簇中的miR-20a等6种miRNAs的表达水平;通过双荧光素酶报告系统、Western blot,验证miR-20a对ATG16L1的靶向调控关系.结果:与正常组相比,雷帕霉素组RAW264.7细胞的miR-17、miR-18a、miR-20a表达水平显著上调(P＜0.05);3-MA组RAW264.7细胞的miR-20a表达水平显著下调(P＜0.05).双荧光素酶报告系统结果显示,miR-20a可靶向ATG16L1-3’-UTR,抑制其表达;Western blot结果显示,miR-20a能明显抑制ATG16L1蛋白的表达,说明miR-20a可靶向抑制ATG16L1的表达,参与调控细胞自噬过程.结论:miR-20可靶向抑制Atgl6L1的表达,参与调控RAW264.7细胞自噬过程.
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免疫学技术开设综合性实验的教学改革初探
免疫学是研究免疫系统结构与功能的学科[1],近年来,这门既古老又年轻的学科正蓬勃发展,成为当今生命科学的前沿学科和现代医学的支撑学科之一[2],并以其研究的深度和应用的广度成为沟通生物学基础和临床研究的重要桥梁[3],其理论及技术已经辐射、渗透到生命科学的各个学科.免疫学不但已成为高等医学院校的重要基础医学课程,也成为综合类高校生命科学相关专业本科生的主干课程之一[4].
关键词： -
NK细胞受体群谱偏移与肿瘤免疫逃逸及逆转
NK细胞功能的发挥取决于其表面活化受体和抑制性受体识别靶细胞表面相应配体后所传递信号的平衡状态.肿瘤在发生发展的过程中进化出许多机制,调控NK细胞活化受体和抑制性受体的表达及肿瘤细胞NK细胞识别的配体表达的平衡状态,通常表现为活化受体/配体表达受到抑制而抑制性受体/配体表达增强的群谱偏移现象,成为肿瘤细胞削弱肿瘤微环境中NK细胞功能、诱导NK细胞免疫耐受甚至功能耗竭,终导致肿瘤免疫逃逸的重要机制.本文就肿瘤发生发展过程中NK细胞受体/配体表达的失衡与肿瘤免疫逃逸的关系及基于逆转NK受体及其配体失衡的免疫治疗策略(尤其是抑制性受体的Checkpoint阻断疗法和CAR修饰的NK细胞治疗)等方面的研究进展做一综述.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
