中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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allo-HSCT受者细胞因子基因多态性与急性移植物抗宿主病的关系
目的：：探讨在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、干扰素γ(IFN-γ)等多种疾病相关细胞因子基因多态性与急性移植物抗宿主病( aGVHD)的相互关系。方法：选取2014年1月至2015年12月进行allo-HSCT的受者32例及正常人群36例作为研究对象,采用聚合酶链式反应( PCR)联合基因测序对目的基因特殊SNP位点基因分型进行检测,观察受者术后出现aGVHD的不同情况,分析细胞因子基因多态性对allo-HSCT预后的影响,探讨疾病相关细胞因子特殊SNP点突变与aGVHD发病严重程度的潜在相关性。结果：在全部allo-HSCT受者中,TNF-α-308(G/A)、IL-6-174(G/C)、IL-10-1082(A/G)、TGF-β1+915(G/C)、IFN-γ+874(T/A)等细胞因子的基因多态性分布与重度aGVHD的发生率未见有显著性的差异(P>0.05)。在TGF-β1+869SNP位点上,C/T型allo-HSCT患者中重度aGVHD发病率显著高于C/C、T/T两个基因型患者组(P<0.01)。结论：在allo-HSCT患者中TGF-β1+869(C/T)基因多态性与aGVHD发病的严重程度具有密切联系。 C/T型allo-HSCT患者更容易发生重度aGVHD,是诱发严重aGVHD出现的潜在危险因素。因此,在allo-HSCT患者中针对TGF-β1+869(C/T)进行基因多态性检测,制定合理的aGVHD预防方案,可能有助于减少减轻aGVHD的发生。
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未治疗HIV感染者NKT样细胞活化、凋亡和增殖的相关研究
目的：：研究HIV感染后NKT样细胞活化、凋亡和增殖的变化情况。方法：选取47名未治疗的HIV感染者和31名健康对照者,提取外周血细胞,用荧光标记抗体进行染色,利用流式细胞仪检测 HIV 感染者 NKT 样细胞 HLA-DR、Annexin-V、Ki-67等表面分子的表达。结果：未治疗HIV感染者NKT样细胞百分数为(3.03±1.61)%,正常人NKT样细胞百分数为(8.30±7.42)%,HIV感染者NKT样细胞百分数显著低于健康对照组(P<0.05)；未治疗HIV感染者HLA-DR表达为(5.40±4.10)%,健康对照组HLA-DR表达为(0.89±0.83)%,HIV感染者活化程度明显高于健康对照组(P<0.001),且活化程度与CD4+T细胞计数呈负相关(r=-0.8857,P<0.05)；未治疗HIV感染者Annexin-V表达为(30.21±13.15)%,凋亡程度明显高于健康对照组(5.40±8.05)%,(P<0.01)；未治疗HIV感染者Ki-67的表达为(11.15±4.76)%,增殖能力明显低于健康对照组(27.63±18.31)%,(P<0.05)。结论：HIV感染可明显降低NKT样细胞数量及增殖能力,而其活化及凋亡能力增加。
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过敏性紫癜患儿Th17、Treg细胞及IL-17、IL-23水平的测定
目的：：观察过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)患儿急性期及恢复期Th17、Treg细胞及IL-17、IL-23水平变化,以便更好地认识HSP的免疫学发病机制,为HSP的治疗提供帮助。方法：采用流式细胞术( Flow cytometry,FCM)检测HSP患儿65例和健康对照组儿童30例外周血中Th17细胞和Treg细胞比例；采用双抗体夹心酶联免疫吸附( ELISA)法测定其血浆中IL-17、IL-23水平。结果：HSP急性期组Th17、Th17/Treg细胞及IL-17、IL-23水平高于正常对照组( P<0.05),恢复期组较急性期组降低(P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.05)。 HSP急性期组Treg水平低于正常对照组(P<0.01),恢复期组较急性期组升高(P<0.01),但是仍低于正常对照组(P<0.01)。单纯型、腹型和其他类型HSP患儿Th17、Treg、Th17/Treg及IL-17、IL-23水平相同(P>0.05)。 HSP急性期患儿Th17细胞比例与IL-17水平呈正相关(r=0.880,P<0.01)；HSP急性期患儿IL-23水平与Th17细胞比例、IL-17水平呈正相关(r=0.838或r=0.877,P<0.01)。结论：Th17、Treg、Th17/Treg、IL-17和IL-23共同参与HSP的发病,但在单纯型、腹型和其他类型中的水平无明显差异,值得深入研究。
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SREBP1在阿托伐他汀抑制NLRP1炎性体表达中的作用
目的：：探讨固醇调节元件结合蛋白1( SREBP1)在阿托伐他汀抑制核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎性体表达中的作用。方法：160 nmol/L佛波酯孵育THP-1细胞12 h,使其分化为巨噬细胞,更换无血清培养基,加入脂多糖和(或)阿托伐他汀进行处理。 Real-time PCR检测细胞中NLRP1、SREBP1 mRNA的表达；Western blot检测细胞中NLRP1、SREBP1蛋白的表达；检测SREBP1 siRNA预处理细胞后对阿托伐他汀抑制NLRP1表达的影响。结果：阿托伐他汀能抑制THP-1巨噬细胞NLRP1和SREBP1的mRNA和蛋白的表达；单独使用SREBP1 siRNA处理细胞可有效抑制NLRP1的表达,且与单独使用阿托伐他汀无明显差异；同时使用SREBP1 siRNA和阿托伐他汀处理细胞比单独使用一种对NLRP1的抑制作用更为显著。结论：阿托伐他汀可能通过SREBP1途径抑制NLRP1的表达,进而发挥抗炎效应。
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AML1-ETO阳性急性髓系白血病CD19的表达及其预后的意义
目的：：探讨CD19在AML1-ETO阳性急性髓系白血病( Acute myelogenous leukemia with AML1-ETO positive , AML with AML1-ETO positive)患者中的表达及对预后的影响。方法：收集我中心2010年1月至2015年12月共66例初治AML1-ETO阳性AML患者资料,回顾性分析CD19表达与一般临床特征的关系及对生存期的影响。结果：AML1-ETO阳性AML患者初诊时CD19的表达率为50.0%。 CD19阳性与阴性患者在年龄、性别、初诊时血红蛋白、血小板、骨髓原始细胞比例、染色体核型、基因突变无统计学差异( P>0.05)。 CD19阳性患者初诊时白细胞计数低于阴性患者,有统计学差异( P=0.027)。 CD19阳性患者总体生存率明显优于CD19阴性患者(P=0.030),CD19阳性患者无复发生存率较阴性患者高,但差异无统计学意义(P=0.105)。多因素分析结果提示CD19阳性是AML1-ETO阳性AML患者OS的独立预后良好因素。结论：CD19阳性可能是AML1-ETO阳性AML患者预后良好的标志。
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25羟维生素D在原发性胆汁性肝硬化中的诊断价值
目的：：初步探讨25-羟维生素D[25-(OH)D]在原发性胆汁性肝硬化(PBC)中的诊断价值。方法：收集宁夏医科大学总院2013年12月到2015年6月期间住院的44例确诊为PBC的患者,随机收集确诊为乙肝肝硬化患者41例及我院体检健康人群110例作为对照组,分析患者组和对照组的生化指标及血清25-羟维生素D含量,并对PBC患者血清中25-羟维生素D绘制ROC曲线进行统计分析。结果：生化指标TBIL、DBIL、IBIL、GLB、AST、ALT、ALP、γ-GT在PBC组中均显著高于正常对照组和乙肝肝硬化组,差异有统计学意义。25-羟维生素D含量在PBC患者中显著低于正常对照组和乙肝肝硬化组,差异有统计学意义。 PBC患者血清中25-羟维生素D绘制 ROC曲线下的面积( AUC)为0.926,筛选其佳截断点：当25-( OH) D=17.275 ng/ml时,敏感性为92.8%,特异性为84.1%。结论：25羟维生素D在PBC患者血清中的含量明显下降,对PBC的诊断具有一定的价值,25-( OH) D=17.275 ng/ml可能是一个诊断的界值。
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COPD患者Th17细胞和 Treg细胞介导的免疫应答变化及免疫失衡与肺功能的关系研究
目的：：探讨慢性阻塞性肺疾病( COPD)患者外周血Th17细胞和调节性T细胞( Treg)及其介导的免疫应答变化与患者肺功能的关系。方法：选取本院呼吸内科收治的90例COPD患者( COPD组)和同期年龄、性别基本匹配的45例健康体检对象作为对照组,并根据COPD病情进行亚组分析,分别测定各组研究对象肺功能指标、Th17细胞、Treg细胞及血清炎症因子水平。结果：在COPD患者间,随着病情加重,FEV1%、FVC%、FEV1/FVC比值中度COPD组<重度COPD组<极重度组(P<0.05)；在COPD患者间,随着病情加重,外周血中Th17细胞、Th17/Treg比值中度COPD组<重度COPD组<极重度组(P<0.05),外周血Treg细胞比值中度COPD组>重度COPD组>极重度组(P<0.05),且外周血Th17细胞、Treg细胞相关细胞因子变化具有一致性；COPD患者的肺功能指标FEV1%、FVC%、FEV1/FVC与外周血中Th17细胞、Th17/Treg比值呈显著的负相关关系(P<0.05),肺功能指标FEV1%、FVC%、FEV1/FVC与外周血Treg比值呈显著的正相关关系(P<0.05)。结论：COPD外周血Th17/Treg比值与患者肺功能下降具有显著的相关性。
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急性冠脉综合征患者多种免疫细胞超活化的特征研究
目的：：心肌梗死发生过程常伴随宿主免疫细胞的激活和炎症反应的发生。目前尚不清楚心肌梗死发生、进展过程中哪些免疫细胞被激活并参与其中。本研究旨在探讨心肌梗死发生、进展过程中免疫细胞激活及其作用。方法：系统分析12例健康个体和55例心肌缺血患者,包括稳定性心绞痛患者(SA,n=13)、不稳定性心绞痛患者(UA,n=25)以及急性心肌梗死患者(AMI,n=17)外周静脉血CD3 T细胞、CD4 T细胞、CD8 T细胞、NK细胞、CD4+ NKT细胞、CD4- NKT细胞、CD3-CD56+ NK细胞以及B细胞亚群的频率及其活化标志CD38的表达情况。结果：研究发现,上述细胞亚群频率在各组之间无显著变化,但急性冠脉综合征患者( ACS,包括UA和AMI患者)外周CD8 T细胞、NKT细胞以及NK细胞表达CD38水平显著高于SA组患者及对照组,提示ACS患者多种免疫细胞被明显激活,可能参与了ACS的病理过程。结论：ACS患者体内多种免疫细胞激活,可能与疾病的进展和转归密切相关。也为发现新的可能预测ACS进展的免疫标志物提供了一定的依据。
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G-CSF动员干细胞对淋巴细胞的影响
目前,利用粒细胞集落刺激因子( Granuloctye colony stimulating factor , G-CSF )动员的造血干细胞作为移植物应用于外周血造血干细胞移植已经被广泛用于治疗恶性血液病,已有的研究证实G-CSF作为动员剂是安全、有效的[1]。移植物抗宿主病( Graft-versus-host disease,GVHD)是指供着来源的淋巴细胞攻击患者的器官引起的临床病理综合征,它是异基因造血干细胞移植后的主要并发症之一。与骨髓移植相比,外周血干细胞移植物中含有更多的淋巴细胞,但急性GVHD(acute GVHD,aGVHD)发生率和严重程度并不明显高于骨髓移植,而慢性GVHD ( chronic GVHD,cGVHD)发生率则有升高。提示作为动员剂的G-CSF能对淋巴细胞产生影响,进而改变GVHD的发生情况。随着研究的逐渐深入,G-CSF动员对供者淋巴细胞的影响和其对造血干/祖细胞的动员效果一样受到了重视,本文就此方面做一综述。
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TAM受体信号转导通路与肿瘤发生发展关系研究进展
TAM 初是由LOREN C. SKOW 发现,其定位于小鼠7号性染色体上,与哺乳动物的性功能有关。在1991年发现了TAM 受体亚家族的第一个成员 AXL,随后在1994年先后发现了Tyro3和Mer 有相同的结构域。TAM 受体广泛表达于多种血液系统及上皮细胞中,是RTKs 家族中唯一一个需要跨膜脂蛋白复合物激活的亚家族,通过GAS6与凋亡细胞膜表面的PtdSer 结合来激活巨噬细胞上的 MERTK。在肿瘤中,自分泌和旁分泌的配体和凋亡细胞为肿瘤细胞提供了一个增殖信号及抗炎症反应和免疫抑制的微环境,因此,TAM 受体具有促进肿瘤细胞的增殖、化学抵抗和迁移的潜力。
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肠道菌群与抗肿瘤治疗
人体肠道微生物菌群大约重1000 g,种类大约30个属,300~500多种。细菌数量达到了1014个,是人体细胞总数的10倍。肠道菌群主要由厌氧菌、兼性厌氧菌和需氧菌组成,其中专性厌氧菌占99%以上。被认为是人类的“第二基因组”[1]。肠道菌群的生物学功能可以从三方面来阐述：即维持肠道的正常结构和生理功能,拮抗病原微生物的定植、感染和刺激,调控人体的免疫功能。这些功能相互关联、互相促进。一般情况下,肠道菌群与人体和外部环境保持着一个平衡状态,对人体的健康起着重要作用。大量研究表明,肠道菌群对抗肿瘤治疗有一定的疗效。本文就肠道菌群在抗肿瘤治疗中的作用做一综述。
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减毒单增李斯特菌载体在肿瘤疫苗中的应用
单核细胞增生性李斯特菌( Listeria monocyto-genes,LM)是一种宿主谱广泛的兼性胞内菌。 LM具有进入抗原提呈细胞( APCs)如巨噬细胞、树突状细胞( Dendritic cell,DC)等细胞胞质的特性,使其运送外源抗原进入MHCⅠ分子和MHCⅡ分子抗原提呈途径,从而诱导强烈的CD8+和CD4+T细胞免疫应答[1]。因此,减毒LM已被公认为是一类理想的肿瘤疫苗载体[2]。
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树突状细胞在肠道黏膜免疫稳态中的作用
树突状细胞( Dendritic cells,DCs)是抗原提呈作用强的专职抗原提呈细胞,被认为是连接特异性免疫应答和非特异性免疫应答的桥梁,并且可决定机体特异性免疫应答的类型,在肠道黏膜稳态中扮演着极其重要的角色。肠道DCs具有多种类型,不同类型的DCs功能不同。 DCs与周围环境中的多种细胞因子相互作用影响肠道的免疫应答和免疫耐受。 DCs在肠道疾病中起关键作用,影响肠道疾病的发生和发展,临床上DCs已成为多种疾病的治疗靶点。本文对DCs的生物学特性、在肠道免疫耐受和免疫应答中的作用及在临床上的应用进行综述。
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在骨组织愈合中炎症反应联合血管生成的研究进展
延迟愈合与骨不连仍然是骨科临床工作中较为棘手的问题。延迟愈合发生后，甚至需要重新显露手术，进而延长了患者在院时间，推迟了复健周期，增加治疗经费负担[1]。骨组织在愈合过程中不产生疤痕组织，这可能与骨组织独特的愈合过程有关[2]。对骨组织愈合过程中炎症反应、血管生成与组织重建之间关系的交叉研究将有助于揭示骨组织修复过程的调控机理。
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长链非编码RNA对免疫应答调节的研究进展
lncRNA是由RNA聚合酶Ⅱ转录生成,长度大于200个核苷酸的长链非编码RNA,它没有开放读码框,不能翻译成蛋白质,曾被认为是基因组中的“暗物质”。目前科学家们还没有精确掌握其功能信息以及全部的二维和三维结构,所以很难对lncRNA进行分类,现在是通过lncRNA和蛋白编码基因的相对位置对其进行分类的。 lncRNA可以分成5类[1,2]：①位于蛋白编码基因内含子的内含子lncRNA。②从蛋白编码基因区转录出的长链基因间非编码RNA( lincRNA)。③直接和蛋白编码基因的启动子作用的可以双向转录的lncRNA。④从蛋白编码基因外显子转录出的反义lncRNA。⑤从不能翻译出蛋白的基因区转录出的假基因 lncRNA。研究表明lncRNA通过与靶基因的启动子和增强子结合来调节基因表达。虽然 lncRNA 没有编码功能,但它可以利用RNA-RNA、RNA-DNA、RNA-蛋白相互作用,通过剪切、降解核酸、捕获RNA和干扰翻译等方式对转录过程进行调节。在细胞质中, lncRNA不仅可以和靶mRNA直接作用控制其表达和翻译,而且可以和特殊信号蛋白作用调节特殊基因的表达。细胞核内的lncRNA也在表观遗传调控上扮演重要角色[3,4]。 lncRNA可以通过信号传导、指引或引诱其他分子等方式来调节基因表达。lncRNA还可以和蛋白质、转录因子、调节因子相互作用,改变表观遗传修饰(例如Gas5和Lethe )。它们也可以作为“分子海绵”捕获 miRNA 和剪切因子。 lncRNA可以通过顺式作用募集染色质修饰或通过反式因子作用到目标DNA上。 lncRNA作为中间体使多种蛋白和核酸建立联系,通过组蛋白修饰与稳定核结构或作为信号复合物从而改变染色质功能。 lncRNA调节基因的机制是错综复杂的,它具有不同的序列结构以及结构域,可以利用这些特点去调节生物的功能和完整性。在时空上激活或抑制转录活动。很多证据表明lncRNA在基因转录和转录后调节等很多生物学过程中发挥了重要作用。例如X染色体的失活(Xist/Tsix)[5]、基因印记(H19和Air)[6]、干细胞多能性[7]、癌转移( HOTAIR)[8]、和动脉粥样硬化( Anril)[9]。近来lncRNA在控制免疫系统基因表达的功能也开始被关注。 lncRNA广泛表达在包括单核细胞、树突状细胞、中性粒细胞、T细胞、B细胞等免疫细胞中；与它们的发育、分化、激活密切相关。
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非专职淋巴组织部位T细胞亚群研究进展
近年来随着免疫学基础研究和临床多学科合作的进展，以及细胞、分子研究领域多项技术的革新，越来越多的临床研究和基础实验结果发现，在肝脏、肺脏、小肠组织、扁桃体、皮肤、肿瘤部位等非专职淋巴组织中存在着独特的T 细胞亚群和相关分子，其来源、分化、克隆/寡克隆增殖等生物学特性同机体“专职免疫组织/器官”的全身循环免疫系统之间，既有着显著的区别，又保持一定的联系。“专职免疫组织/器官”即传统的免疫系统，主要指骨髓、胸腺、脾脏、淋巴结，其在机体免疫应答中发挥了关键作用。非专职淋巴组织指肝脏、肺、肠、扁桃体、皮肤以及一些独特的结构和微环境等组织部位，这些组织部位中不同的T细胞亚群是受到所在的“免疫微环境”中特定的免疫原(抗原)的诱导/趋化而表现出不同的表型和功能。免疫微环境一般是指人或动物免疫系统中免疫细胞、间质细胞及所分泌的活性介质等共同构成的内环境，可直接或间接地影响多种疾病及肿瘤的发生发展；免疫原又称作抗原，具有免疫原性和免疫反应性，是免疫系统识别、耐受的靶标；它们在T细胞亚群参与免疫应答、免疫耐受过程中起到重要作用[1-3]。本文分为两方面将目前非专职淋巴组织部位 T 细胞亚群的研究进展综述如下。
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肝干细胞移植治疗肝损伤的研究进展
肝脏是人体重要的器官，执行合成代谢、解毒和免疫防御等许多重要的功能。近年来，由于病毒性感染、毒性损伤、遗传缺陷及长期接触代谢金属铁和铜等造成肝功能紊乱和急、慢性肝损伤和肝硬化[1]，使得肝脏相关疾病的发病率和死亡率不断上升。原位肝移植被认为是治疗终末期肝损伤有效的方法之一，但由于缺乏合适的肝供体、手术风险、免疫排斥、高成本及长期并发症等问题严重限制其临床应用[2]。近年来，将干细胞或由其分化产生的功能细胞植入病变部位的细胞疗法逐渐受到人们的关注。然而，人类原代肝细胞的数量和增殖能力有限，并且在体外培养时存在快速去分化的缺陷，使得分离后的肝细胞需要持续不断的提供大量的氧和营养物质来维持它们的表型和特定的肝功能，为了解决这个问题，依赖肝干细胞的疗法越来越受到人们的重视[3]。
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巨噬细胞与肾脏损伤的研究进展
巨噬细胞在肾脏炎症损伤与纤维化过程中发挥重要作用。巨噬细胞具有高度异质性，肾病类型不同，肾内局部微环境不同，巨噬细胞的表型与功能也不同。肾脏坏死组织、炎症损伤或病原相关模式分子诱导的促炎型巨噬细胞可加重肾脏的炎症损伤和纤维化；而炎症组织中的凋亡细胞和抗炎因素则可诱导抗炎型巨噬细胞产生，调节肾脏的修复与再生。本文论述了几种急性和慢性肾病中，不同表型的巨噬细胞在肾脏炎症损伤和纤维化过程中的作用。了解肾脏局部微环境的改变及决定巨噬细胞表型和功能改变的因素，可为肾病患者提供一条新的以细胞或细胞因子治疗为基础的生物替代疗法。
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点免疫金渗滤法筛选胶体金标记抗人IgG的研究
目的：：应用点免疫金渗滤法筛选适宜胶体金标记的抗人IgG(以下简称二抗),并运用多个评价指标进行比较和分析。方法：选择三个不同公司的二抗用胶体金标记,根据棋盘滴定法确定佳标记条件；运用点免疫金渗滤法对三种二抗的胶体金标记后检测效能进行比较,采用包虫病人和健康对照血清,用包虫病特异性抗原检测包虫病患者血清中的特异性抗体,评价优的二抗,并与酶联免疫吸附测定法进行比较。结果：A、B、C三种二抗标记的佳标记条件为：pH均为8.5,加入量分别为38.4、24、19.2μg/ml,综合评价二抗B检测效能优。将其与酶联免疫吸附测定法检测效能进行比较,两种方法检测结果的Kappa=0.895(P<0.05),吻合度较强。结论：应用点免疫金渗滤法,以及本文提出的评价指标,能够筛选出佳二抗,对检测试剂盒中二抗的选择具有重要的参考价值。
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在制备尖吻蝮蛇毒出血毒素抗血清中不同凝胶染色方法的比较
目的：：寻找在制备出血毒素抗血清中电泳后染色凝胶的好方法。方法：按照前人的方法从皖南产尖吻蝮蛇毒中初步分离3种出血毒素：AaHⅠ、AaHⅡ和AaHⅣ并获得3种粗提取的出血毒素,用制备电泳的方法进一步纯化AaHⅠ、AaH Ⅱ和AaH Ⅳ,对每种出血毒素,配制6块制备电泳板并进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,用6种不同的染色方法分别染色,将含出血毒素的凝胶切下,磨细后直接免疫注射小鼠并获得抗血清,用ELISA检测和中和出血毒素出血活性两种方法检测抗血清的质量。结果：不同染色方法制备的抗血清中有效IgG浓度不同,用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色制备的抗血清有效IgG浓度高。结论：用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色是制备抗血清好的染色方法。
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抗人蔗糖酶卵黄抗体的制备及其稳定性和体外活性研究
目的：：制备抗人蔗糖酶( Sucrase,SUC)卵黄抗体( egg yolk immunoglobulin Y,IgY)并对其稳定性、体外活性进行研究。方法：采用人SUC蛋白为抗原,免疫海兰灰蛋鸡,水稀释和盐析法提取纯化IgY；间接ELISA法监测抗体效价变化并评价其稳定性；SDS-PAGE和Western blot分析IgY的纯度和特异性；PNPG法测IgY对α-葡萄糖苷酶的体外抑制效果。结果：初次免疫10 d后检测到IgY,40 d后效价高达到1：12800；提取的IgY重链和轻链分别在65 kD和25 kD处,且能够与抗原蛋白特异性结合；29~69℃范围内水浴15 min和pH 4~7之间37℃水浴4 h,抗体效价无变化；胰蛋白酶与胃蛋白酶作用IgY 2 h,抗体效价降至一半,延长作用时间,IgY对胃蛋白酶耐受力较胰蛋白酶耐受力更强；IgY对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,呈现剂量相关性,半抑制浓度(IC50)值为0.540 mg/ml。结论：抗人蔗糖酶卵黄抗体(S-IgY)的成功制备为后续用于2型糖尿病大鼠模型体内实验研究奠定基础。
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盐酸吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织 TOLL受体4/MAPKs信号通路的影响
目的：：探讨吡格列酮对糖尿病肾病大鼠肾组织中TOLL受体4/MAPKs信号通路的影响。方法：将雄性SD随机分为对照组(n=8)和试验组(n=32)。试验组SD鼠造模成功后随机分为3组进行干预，应用Western blot检测对照组和干预组大鼠肾组织中丝裂原活化蛋白激酶ERK1/2及p38MAPK磷酸化水平。结果：与对照组比较，各组大鼠肾组织中TOLL受体4表达增强，其中ERK1/2与JNK磷酸化水平明显升高(P<0.05)，但p38MAPK水平变化不明显(P>0.05)；与模型组比较，吡咯列酮干预组大鼠肾组织中ERK1/2与p38MAPK磷酸化水平降低(P<0.05)。结论：吡格列酮通过TOLL受体4/MAPKs/ERK1/2与TOLL受体4/MAPKs/JNK信号通路来完成，延缓糖尿病肾病的发生与发展。
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BALB/c小鼠免疫重组蓖麻毒素B链蛋白的免疫机制研究
目的：：探讨重组蓖麻毒素B链蛋白( rRTB)免疫雌性BALB/c小鼠的免疫机制。方法：雌性BALB/c小鼠分为rRTB组和PBS组，间隔14 d皮下多点注射，共4次。间接ELISA分析小鼠血清抗体效价和抗体分型，采用流式细胞仪检测脾细胞因子IFN-γ和IL-4。结果：血清IgG效价达到1：107以上，且攻毒后产生二次免疫应答，与PBS对照组差别有统计学意义(P<0.05)；IgG1达到1：105以上，与PBS对照组差别有统计学意义(P<0.05)；IgG2a未发生明显变化。细胞因子检测结果表明IFN-γ的表达量与PBS组差异无统计学意义，而IL-4的表达量显著提高( P<0.05)。结论：rRTB蛋白免疫可刺激小鼠产生高水平的特异性抗体和细胞因子，诱导以IgG1为主的抗体和Th2优势应答，为候选疫苗的研制奠定基础。
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ICOS在健康人外周血调节性T细胞上的生物学特征初探
目的：：研究ICOS在健康人外周血Treg离体培养中的作用,了解mTOR对离体培养Treg ICOS表达的调控。方法：MACS分选Treg后经anti-CD3+anti-CD28磁珠刺激后第3、7天流式检测Treg表面ICOS表达情况；anti-CD3+anti-CD28抗体或anti-CD3+ICOSL-Fc刺激3 d,流式检测Treg ICOS表达情况；雷帕霉素处理离体培养Treg,流式分析其对Treg ICOS表达作用。 CFSE标记人PBMC细胞,并与离体培养Treg混合培养,流式检测Treg的接触抑制活性。结果：anti-CD3+anti-CD28磁珠刺激Treg 3 d,ICOS+ Treg中活、死细胞的比例分别为(92.00±2.69)%和(2.20±0.56)%,在ICOS-Treg中比例为(90.30±3.53)%和(1.77±0.78)%,两者无显著差异；培养第7天,ICOS+ Treg 细胞比例从第3天(40.20±1.83)%降至(11.60±1.10)%；anti-CD3+ICOSL-FC刺激Treg 3 d后,ICOS MFI为(403.30±74.42),anti-CD3+anti-CD28刺激组为(2410.0±746.4), anti-CD3+ICOSL-FC刺激后Treg ICOS表达相比anti-CD3+anti-CD28组显著下降；雷帕霉素处理离体培养Treg细胞3 d后, ICOS表达下调。此外,雷帕霉素处理的离体培养Treg均能有效抑制PBMC中Tcon的分裂增殖。结论：ICOS表达高低对人外周血Treg存活率影响无显著差异,mTOR信号并非调控人Treg离体培养ICOS表达的唯一因素,CD28协同信号对调控离体培养人Treg 。表达比ICOSL信号更为重要,雷帕霉素处理的离体培养人Treg 仍具有细胞接触抑制活性。
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γ-促分泌酶抑制剂对毛细支气管炎模型大鼠体内 Th17细胞分化的影响
目的：：研究γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对毛细支气管炎(简称毛支)模型大鼠Th17细胞发育和分化的影响,为毛支治疗寻找新的药物提供理论基础。方法：按随机对照原则将SD大鼠分为正常组、毛支组和γ-促分泌酶抑制剂组,滴鼻法成功建立毛支模型,而后尾静脉注射γ-促分泌酶抑制剂MW167,通过HE染色观察肺组织病理改变,ELISA检测血浆中白介素17(IL-17)的水平,实时荧光定量PCR检测肺组织和外周血单个核细胞中RORγt mRNA的表达,Western blot检测肺组织中Notch信号、RORγt的蛋白表达。结果：与毛支组相比,MW167组肺组织病理学改变减轻；血浆IL-17水平也较毛支组降低；肺组织及外周血单个核细胞RORγt mRNA在MW167注射组表达均减弱；MW167组肺组织Notch信号和RORγt蛋白的表达也显著降低。结论：静脉注射γ-促分泌酶抑制剂能够通过阻断Notch信号通路抑制Th17细胞的分化,缓解毛支模型大鼠的气道炎症,对毛支有潜在的治疗价值。
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不同乳腺癌细胞系中TLR5和NLRC4受体的表达和定位
目的：：探究TLR5和NLRC4受体在不同乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435中的表达和定位情况,并探讨重组鞭毛素蛋白对乳腺癌细胞TLR5受体的激活情况。方法：利用Real-time PCR法检测MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435细胞TLR5和NLRC4 mRNA表达水平,用流式细胞仪检测MDA-MB-231、MCF-7细胞TLR5受体的表达和定位。纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白FliC(同时激活TLR5和NLRC4两条通路)、FliC△90-97(不能激活TLR5通路)、FliC-L3A(不能激活NLRC4通路)、FliC△90-97：L3A(两条通路都不激活)。用1μg/ml重组鞭毛素蛋白刺激MCF-7细胞,12 h后, ELISA法检测IL-8的分泌。结果：MCF-7细胞TLR5 mRNA表达水平高,约是MDA-MB-435细胞的1700倍,MDA-MB-231细胞TLR5表达水平是MDA-MB-435的约200倍。 TLR5在MCF-7细胞浆和胞膜上均有表达,而MDA-MB-231细胞只在胞浆中表达。激活TLR5通路的FliC和FliC-L3A能够刺激MCF-7细胞分泌IL-8,而不激活TLR5通路的FliC△90-97和FliC△90-97：L3A则不能。结论：不同乳腺癌细胞系都表达 TLR5和 NLRC4,但是表达部位和表达水平不同。 MCF-7细胞 TLR5和NLRC4表达高于其他乳腺癌细胞系。乳腺癌细胞系表面的TLR5受体可以被鞭毛素蛋白激活,为进一步探讨TLR5通路的激活在乳腺癌细胞增殖中的作用提供实验基础。
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高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠血浆 microRNA表达谱及其与 TLR4的关系
目的：：筛选高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠,以及应用Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)抑制剂TAK-242干预的胰岛素抵抗小鼠血浆差异表达的微小RNA( microRNA,miRNA),探讨胰岛素抵抗、TLR4和差异表达miRNAs的关系。方法：血浆标本来自前期实验的3组小鼠,即以普通基础饲料喂养( Low fat diet,LFD)的正常对照组、给予TAK-242的高脂饮食组( Treated high fat diet,HFD-T)和单纯高脂饮食组HFD-C,应用小鼠miRNA芯片检测血浆miRNA表达谱,筛选差异表达的miRNAs；采用实时荧光定量PCR方法验证芯片结果。应用生物信息学方法,以TLR4及其信号传导通路为中心,预测差异表达miRNAs的靶基因,并对靶基因分别进行GO和KEGG富集分析,以判定差异miRNAs主要影响的生物学功能或者通路。结果：miRNA基因芯片筛查结果显示,单纯高脂饮食组与正常饮食组比对,筛选出差异显著的miRNAs共计185种,其中6种miRNAs表达上调,179种miRANs表达下调；给予TAK-242的高脂饮食组与正常饮食组比对,筛选出差异显著的miRANs共计171种,均表达下调；给予TAK-242的高脂饮食组与单纯高脂饮食组比对,筛选出差异表达的miRNAs共计13种,均为下调。生物信息学分析结果显示,以TLR4为中心挖掘与其互作的蛋白质,共发现有10种蛋白；在TAK-242给予的高脂饮食组与单纯高脂饮食组中差异表达倍数均在1000以上的4种miRNAs ( mmu-miR-3095-3p、mmu-miR-5113、mmu-miR-709和mmu-miR-335-3p),可在TLR4的互作蛋白质或Toll样受体信号通路中找到其作用的靶基因,发现这些靶基因74%属于生物过程基因,其中转录调控因子占82%。实时荧光定量PCR检测mmu-miR-3095-3p、mmu-miR-5113、mmu-miR-709和mmu-miR-335-3p水平,变化趋势与芯片结果一致。结论：胰岛素抵抗发生时,血浆miRNAs表达谱存在改变,此变化与TLR4及其信号通路相关。该研究结果丰富了胰岛素抵抗发生的机制,为寻找胰岛素抵抗血浆miRNAs诊断标志物提供了实验依据。
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LPS刺激诱导大鼠原代枯否细胞基因表达谱变化分析
目的：：研究脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激原代大鼠枯否细胞(Kupffer cell,KC)基因表达谱的变化情况。方法：胶原酶灌注消化和不连续密度梯度离心分离培养大鼠原代肝脏KC,采用LPS刺激细胞。 OneArray基因表达谱芯片检测LPS刺激后,细胞内基因表达谱的变化。采用实时荧光定量PCR法对表达上调显著的基因进行验证。结果：基因芯片结果显示LPS刺激后,原代KC内基因表达谱发生了明显变化。与正常对照组相比, LPS刺激组基因表达上调27个(包括Ces1f、Slc17a3、Slc21a4、Hsd17b2、Sorbs2、Ccdc116、Mgam、Myo5b、Etl4、Fabp1、Kif4b、Fosl1、Cyp4a1、Penk、Tmem221、Rpl5、Nr2f1、Hoxb1、Gpr165、Fam90a13p、Kpna6、Irak1bp1、Kcnh1和4个尚未命名基因),表达下调4个(包括Oc90、Tagln、Arxes2和Olr830)。其中Ces1f为上调显著的基因。实时荧光定量PCR验证结果显示,LPS刺激诱导KC对Ces1f基因表达水平上调达23.88倍。结论：LPS刺激可诱导大鼠原代KC基因表达谱发生变化。其中,Ces1f基因的上调表达为显著。
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胚胎干细胞来源神经干细胞调控巨噬细胞的实验研究
目的：：观察胚胎干细胞( Embryonic stem cell,ESC)来源的神经干细胞( Neural stem cells,NSCs)对骨髓巨噬细胞的增殖、吞噬及分泌细胞因子的影响,为探讨NSCs免疫调节及在重大疾病中的应用做铺垫。方法：培养骨髓巨噬细胞,收集胚胎干细胞来源NSCs(ESC-NSCs)的上清液处理巨噬细胞,然后利用磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)法检测增殖情况；利用红荧光beads检测吞噬能力；ELISA法检各组TNF-α和IL-1β表达情况。结果：成功从ESC获得具有NSCs特征的细胞。对照组、NSC组巨噬细胞增殖率分别为100%、(126.29±5.41)%, beads 吞噬率分别为(70.23±2.57)%、(90.32±8.49)%。相比对照组,NSC组巨噬细胞TNF-α和IL-1β含量下降(P<0.05)。结论：ESC来源的NSCs具有促进骨髓巨噬细胞增殖及增强其吞噬能力,并抑制其炎性因子分泌,为NSCs免疫调节作用提供新的依据。
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β-arrestin1激活 STAT3信号通路影响白血病细胞 K562体外迁移侵袭能力
目的：：探讨β-arrestin1对白血病细胞生物学功能的影响及相关机制的研究。方法：特异性的β-Arrestin1-siRNA和阴性对照siRNA转染K562细胞,形成β-Arrestin1-siRNA组、阴性对照siRNA组和空白组对照组。以此为实验分组,应用transwell小室法检测各组细胞的迁移侵袭能力变化,Western blot检测pSTAT3蛋白的表达。结果：β-Arrestin1-siRNA处理组细胞的迁移和侵袭能力较对照组分别下降43%及52%( P<0.05)；且pSTAT3蛋白表达减少；STAT3抑制剂能抑制K562细胞体外迁移侵袭能力。结论：白血病细胞K562中β-arrestin1蛋白高表达激活STAT3信号通路,从而促进细胞的迁移侵袭能力。
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氧化苦参碱联合5-FU对人胃癌 SGC-7901细胞生长的协同抑制作用及其机制研究
目的：：氧化苦参碱联合5-FU对人胃癌SGC-7901细胞生长的协同抑制作用及相关机制研究。方法：通过不同浓度的氧化苦参碱单独及联合应用5-FU作用于SGC-7901细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞活力,HOECHST染色法检测细胞凋亡,免疫细胞法检测胃癌 SGC-7901细胞内血管内皮生长因子( VEGF)蛋白的表达,以逆转录聚合酶链式反应RT-PCR法观察SGC-7901细胞VEGF mRNA的转录情况。结果：与空白组比,氧化苦参碱中剂量、高剂量组及其联合5-FU组均能显著抑制人胃癌SGC-7901细胞生长,并诱导其凋亡(P<0.01)；与单独使用5-FU组相比,联合用药组细胞增殖抑制率和凋亡率均显著增高(P<0.05)；氧化苦参碱及联合5-FU组中人胃癌SGC-7901细胞的VEGF mRNA转录及其蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论：氧化苦参碱对5-FU的胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和诱导凋亡具有协同作用；促进氧化苦参碱对VEGF的基因和蛋白表达抑制作用可能是其机制之一。
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雷公藤红素经过TRAIL途径增强γδT细胞对骨肉瘤细胞株HOS的杀伤作用
目的：：探讨雷公藤红素经过TRAIL途径增强γδT细胞对骨肉瘤细胞株HOS的杀伤作用。方法：Western blot检测骨肉瘤细胞株HOS死亡受体( DR)的表达。使用唑来膦酸( ZOL)联合IL-2体外扩增人γδT细胞,LDH法检测γδT细胞对HOS细胞株的杀伤活性。结果：雷公藤红素可促进骨肉瘤细胞株HOS死亡受体DR4和DR5的表达( P<0.05)。健康人来源的γδ T细胞具有杀伤HOS细胞株的能力(P<0.05),经过雷公藤红素(1μmol/L)24 h预处理HOS细胞株,γδ T细胞杀伤HOS细胞株的能力增强(P<0.05),TRAIL中和抗体可阻断雷公藤红素增强γδ T细胞杀伤HOS细胞株的能力(P<0.01)。结论：雷公藤红素经过TRAIL途径增强γδ T细胞对骨肉瘤细胞株HOS的杀伤作用。
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CBL与PBL教学模式在动物传染病学教学中的应用
《动物传染病学》是一门理论性和实践性很强的临床课程,疾病种类多,涉及的知识面广。传统的教学模式多以理论教学为主,学生学习的主动性较差,教学效果难以令人满意,因此逐渐不能适应快速发展的形势需要,教育改革势在必行。如何在动物传染病的教学中充分调动学生的积极性和培养学生的临床技能,使学生把理论知识和临床实践结合起来,是承担动物传染病教学工作者的重要任务。本教研室顺应改革的趋势,根据学科特点和教学大纲要求,在理论课教学活动中,先后开展案例教学法( Case-based learning,CBL)和以问题为基础的教学法( Problem-based learned, PBL),以提高教学效果。
关键词：
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
