中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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miR-126-3p在甲状腺癌中的表达及其功能研究
目的:探讨微小分子核糖核酸(miR)-126-3p在甲状腺癌中的表达,探讨其生物学功能.方法:RT-PCR检测35例甲状腺癌、癌旁组织以及三种甲状腺癌细胞系(TPC-1、FTC-133、8505C)中miR-126-3p表达量;将甲状腺癌细胞分为类似物组(mimic)和对照组(NC),分别转染miR-126-3p mimic及阴性对照质粒.两组细胞增殖、凋亡分别采用Brdu-ELISA法和流式细胞术检测, Transwell小室法检测两组细胞迁移和侵袭.结果:35例癌组织中miR-126-3p相对表达量显著低于癌旁组织(0.384±0.028 vs 0.981±0.039,t=10.291,P<0.05);在三种甲状腺癌细胞中,TPC-1细胞中miR-126-3p相对表达量低;与NC组比较,mimic组甲状腺癌细胞TPC-1增殖受到显著的抑制,第3天两组间开始表现出统计学差异(P<0.05);与NC组比较,mimic组甲状腺癌细胞TPC-1凋亡显著增加[(15.32±3.20)% vs (8.12±1.17)%,t=4.623,P<0.05],迁移受到抑制(26.68±4.48 vs 82.21±3.65,t=17.789,P<0.05),侵袭受到抑制(12.28±1.03 vs 34.43±2.10,t=8.103,P<0.05).结论:甲状腺癌组织中miR-126-3p表达降低,上调miR-126-3p表达可以显著抑制甲状腺癌细胞增殖、促进凋亡、抑制迁移和侵袭,miR-126-3p可能作为一种抑癌基因在甲状腺癌中发挥重要的生物学功能.
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TNF-α拮抗剂临床试验注册现状
目的:总结和分析TNF-α拮抗剂临床试验注册现状.方法:在美国国家卫生研究院(NIH)临床试验登记注册网站上检索2016年8月2日前登记的TNF-α拮抗剂临床试验项目,使用SPSS17.0软件对研究项目数据作统计分析.结果:全球共开展306项TNF临床试验,中国19项,数量均呈逐年增长趋势.主要的研究疾病为骨关节疾病、自身免疫性疾病、感染、血液肿瘤等.TNF-α拮抗剂临床试验以干预性研究为主,其中,干预性研究241项,Ⅱ、Ⅱ/Ⅲ、Ⅲ、Ⅳ期分别有56、7、55、60项,共178项,占73.9%,主要目的为上市后实际应用过程中进一步验证和评价药品的有效性和安全性.结论:TNF-α拮抗剂品种繁多,临床适应症广泛,临床注册试验的设计多样且发展成熟、迅速.
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姜黄素对2型糖尿病肾病大鼠保护作用及机制研究
目的:探讨姜黄素对2型糖尿病肾病(DN)大鼠保护作用及可能的作用机制.方法:30只Wistar大鼠随机分为对照组、DN组和姜黄素组,每组10只.DN组和姜黄素组采用高脂饲料喂养后注射链脲佐菌素建立DN模型,造模成功后姜黄素组以200 mg/kg姜黄素灌胃,每天1次,对照组和DN组给予等量羧甲基纤维素钠灌胃,连续给药12周.末次给药后收集24 h尿量,称重,腹腔麻醉后心脏取血,检测血糖(Blood glucose,BG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triacylglyceride,TG)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(Serum creatinine,Scr)、尿微量白蛋白(Vrine microalbumin,mAlb),计算尿蛋白排泄率(Urinary protein excretion rate,UAER);处死大鼠,摘取双肾除去包膜后称重(KM),计算肾重指数(KI);多聚甲酚固定肾皮质用于苏木素-伊红(HE)染色,肾皮质制成匀浆检测MDA和SOD活性,Western blot检测肾组织中核因子相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达.结果:DN组和姜黄素组BG、TC、TG、KI、BUN、Scr、UAER、MDA显著高于对照组,BM、KM、SOD显著低于对照组,且姜黄素组上述指标升高或降低幅度小于DN组,差异均有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,与DN组比较,姜黄素组肾小管变性明显减轻,炎性细胞浸润明显减少;Western blot结果显示对照组Nrf2和HO-1蛋白表达显著低于DN组和姜黄素组,而姜黄素组显著高于DN组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:姜黄素可能通过激活Nrf2/ARE信号通路,降低糖尿病肾病大鼠氧化应激、发挥肾脏保护作用.
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Ⅰ型干扰素通路IRF5基因多态性与系统性红斑狼疮的关联性研究
目的:研究Ⅰ型干扰素通路IRF5基因rs2004640、 rs10954213、rs4728142位点的单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮易感性之间的关联.方法:运用Taqman荧光定量PCR检测218例SLE患者及200例健康对照者IRF5基因 rs10954213、rs4728142、rs2004640位点基因型,计算等位基因频率,分析其与SLE的关系;用IIF法和LIA法测定218例SLE患者血浆中抗核抗体、抗双链DNA抗体和特异性抗体,并分析其与IRF5 rs2004640、rs10954213位点基因频率的关系.结果:IRF5 rs2004640位点等位基因T频率分布SLE组高于对照组,差异有统计学意义(χ2=6.809,P=0.009),基因型GG/TT分布在两组差异有统计学意义(χ2=5.111,P=0.024,);IRF5 rs10954213位点等位基因G频率分布在SLE组高于对照组,差异有统计学意义(χ2=4.332,P=0.037);基因型GG在两组的分布差异有统计学意义(χ2=5.805,P=0.016);IRF5 rs4728142位点等位基因频率及基因型,两组比较差异无统计学意义.SLE组IRF5 rs2004640位点等位基因T和抗Sm抗体、抗Rib-P抗体相关(χ2=8.512、4.057;P=0.005、0.048).218例SLE患者中活动期患者特异性抗体主要以Anti-NUC、Anti-His、Anti-Rib-P为主,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:IRF5基因rs2004640、rs10954213基因位点单核苷酸多态性与SLE 易感性相关,rs4728142基因位点单核苷酸多态与SLE易感性不相关;IRF5 rs2004640 T等位基因和抗Sm抗体、Anti-Rib-P抗体相关,SLE活动期患者特异性抗体主要以抗ds-DNA抗体、抗NUC抗体、抗His抗体、抗Rib-P抗体为主.
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支气管哮喘患者外周血Th17与Th9细胞的变化及临床意义
目的:探讨Th17、Th9细胞水平在支气管哮喘患者中的表达及其临床意义.方法:选取67例哮喘患者为研究对象,30例健康体检者为对照组,根据全球哮喘防治倡议(GINA)将哮喘患者分为间歇与轻度持续组20例,中度持续组25例和重度持续组22例.收集患者临床资料,完成哮喘控制测试(ACT)评分、肺功能和呼出气一氧化氮(FeNO)值测定,流式细胞仪检测外周血PBMC中CD3+CD8-IL-17+、CD3+CD8-IL-9+细胞水平.结果:与健康对照组相比,哮喘患者Th17、Th9细胞水平均明显升高(P<0.05);中重度哮喘患者Th17及Th9细胞水平显著高于间歇与轻度哮喘组(P<0.05),而间歇与轻度哮喘组患者与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).哮喘患者外周血Th17及Th9细胞的表达均与FeNO值正相关(r值依次为0.501、0.438;P<0.05),与ACT评分、肺功能FEV1、FEV1/FVC及PEF负相关(r值依次为-0.441、-0.362;-0.307、-0.377;-0.419、-0.411;-0.428、-0.324;P<0.05),同时Th17与Th9细胞在哮喘患者外周血中的表达率正相关(r值为0.443,P<0.05).结论:Th17、Th9细胞在哮喘患者中高表达,具有协同致炎作用,且与症状严重程度相关,提示Th17及Th9细胞对哮喘患者病情评估有潜在的参考价值.
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Graves病发病机制新进展
Graves病(Graves disease,GD)又称毒性弥漫性甲状腺肿,是针对甲状腺滤泡细胞膜上促甲状腺激素受体( Thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)产生的抗体(TRAb)所引起的一种自身免疫性疾病,是引起甲亢常见的原因,每年发病率约为20~30/1 000 000,约有3%的女性和0郾5%的男性患病,一般集中在30 ~60年龄段[1].
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免疫检查点抑制剂治疗中免疫相关不良反应的临床表现及处理
免疫检查点阻断治疗是当今备受瞩目的新兴肿瘤治疗方式.不同于以往其他治疗方式,免疫检查点抑制剂靶向机体免疫系统而非肿瘤细胞,旨在恢复并促进效应T细胞特异性识别和杀伤肿瘤细胞的功能,系统性增强全身的抗肿瘤免疫反应,因而代表了当前肿瘤治疗模式的转变.
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Th17/Treg细胞失衡在变应性鼻炎中的作用研究进展
变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR),又称过敏性鼻炎,是机体接触变应原后主要由IgE 介导的鼻黏膜非感染性疾病[1].目前变应性鼻炎的发病率呈明显上升趋势,已经严重影响到人类的生活质量、工作效率、精神状态及睡眠等。近年来,对变应性鼻炎的发病机制的研究也逐渐增多.
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营养与免疫干预的非酒精性脂肪性肝病动物模型研究进展
随着人们生活水平的不断提高,生活习惯和环境等多种因素的改变,非酒精性脂肪性肝病(Nonal-coholic fatty liver disease,NAFLD) 的发病率逐年升高,发病年龄也越来越年轻化,除中老年人以外,年轻人也成为发病的高危人群;非酒精性脂肪肝已严重威胁着人类的公共健康.
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肠道菌群调控炎症微环境在结肠癌中的作用及机制研究进展
近几年大量研究表明肠道菌群失调与结肠癌(Colon cancer)发生发展有着密切联系.正常机体结肠中寄生的大量微生物,参与结肠内环境稳态的维持,然而一旦这种稳态遭到破坏,会导致肠道菌群失调,进而诱发结肠癌的发生。但是其中的机制并不是很清楚,现已报道的主要有:诱发慢性炎症,合成生物毒素阻碍肠上皮细胞周期调节,产生有毒代谢产物,激活致癌化合物例如杂环胺等.
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BMP和IL-6信号分子在类风湿关节炎中研究进展
类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一类以关节滑膜炎为主的慢性自身免疫性疾病,在疾病早期阶段,关节损伤通过影像学观察并不明显,但不断的全身性及关节性炎症将导致骨和软骨的侵蚀破坏,造成关节畸形,导致严重残疾,甚至死亡.
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类风湿关节炎表观遗传学研究进展
类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫性疾病,以慢性滑膜炎为主要病理改变,临床表现为关节疼痛肿胀、关节损伤和活动受限,终会导致关节破坏和残疾。以抗瓜氨酸化抗体(Citrullinated peptide antigens,ACPA)是否阳性来划分,RA 可以被划分为ACPA+ 和ACPA- 两大类[1].
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杨树花粉过敏BALB/c小鼠动物模型的建立
目的:建立杨树花粉粗提物致敏激发的小鼠过敏模型.方法:将60只BALB/c小鼠随机均分为正常组、卵清蛋白(OVA)阳性对照组和模型组,每隔5 d经腹腔注射致敏1次,共4次,末次致敏后第5天滴鼻激发.观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞变化情况;PAS染色观察气道黏液分泌情况;HE染色观察鼻黏膜、肺炎症情况;免疫组化法检测肺组织中IL-4及IFN-γ阳性细胞平均光密度值;酶联免疫吸附试验检测血清中的总IgE水平.结果:与正常组比较,模型组诱导鼻黏膜、肺组织出现明显的变应性炎症且气道黏液分泌明显增加;BALF涂片显示明显的炎症细胞(嗜酸性粒细胞、中性粒细胞)增多;肺组织中IL-4阳性细胞平均光密度值均高于正常组,IFN-γ阳性细胞平均光密度值均低于正常组;血清中总IgE高于正常组.结论:杨树花粉粗提物能够成功建立小鼠过敏模型.该模型的建立有利于过敏性疾病机制的研究.
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靶向EGFR免疫毒素BI7D12-PE38KDEL的制备及其体外活性测定
目的:构建基于EGFR纳米抗体的免疫毒素BI7D12-PE38KDEL,并检测其对EGFR肿瘤细胞的细胞毒作用.方法:采用分子克隆技术,将靶向EGFR的纳米抗体7D12以二价的形式,通过柔性连接肽(G4S)4与铜绿假单胞菌外毒素的截断形式PE38KDEL连接,构建原核表达载体pET28a-BI7D12-PE38KDEL.然后将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达.通过镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,并经Western blot验证.通过流式细胞技术检测该免疫毒素与EGFR阳性细胞A549、HT29、MCF-7和EGFR阴性细胞CEM、Jurkat的结合能力后,将其按照一定的浓度梯度进行细胞毒实验研究,72 h后,使用WST-1试剂检测BI7D12-PE38KDEL对上述细胞的杀伤效果.结果:通过SDS-PAGE和Western blot实验验证,成功的制备了重组免疫毒素BI7D12-PE38KDEL,该毒素大部分以可溶性的方式表达.BI7D12-PE38KDEL能够与EGFR阳性的A549、HT29、MCF-7肿瘤细胞特异性的结合,并且对上述细胞的细胞毒作用与阴性对照组CEM和Jurkat相比具有极其显著性差异(P<0.01).结论:成功地构建了基于EGFR纳米抗体的重组免疫毒素BI7D12-PE38KDEL,该免疫毒素能特异性的结合并杀伤EGFR阳性的肿瘤细胞.
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HCoV-OC43逃避人树突状细胞免疫清除机制的初步研究
目的:了解人冠状病毒OC43(Human coronavirus OC43,HCoV-OC43)逃避人树突状细胞(Dendritic cell,DC)免疫监视作用的初步机制.方法:利用HCoV-OC43阳性病人的标本感染BSC-1细胞分离OC43病毒,相差显微镜观察细胞病变(Cytopathic effect,CPE),实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)进行鉴定;利用人细胞因子GM-CSF和IL-4联合体外诱导DC分化,于诱导7 d后用HCoV-OC43病毒感染DC.采用透射电镜观察DC感染后的形态,Real-time PCR检测DC功能相关细胞因子的表达水平;流式细胞术检测DC比例及其功能相关共刺激分子的表达.结果:成功建立HCoV-OC43体外感染DC的体系.HCoV-OC43能感染DC并刺激其产生免疫应答,但培养上清中不能检测到病毒核酸;HCoV-OC43感染会导致DC细胞表达IFN-α、IFN-β、CCL3和CCL5的量显著下调,但其共刺激分子HLA-DR、CD1c和CD86的表达不受抑制. 结论:HCoV-OC43可感染人DC细胞并刺激其产生免疫应答,但不能产生活的子代病毒;HCoV-OC43可通过抑制宿主DC细胞IFN-α等相关炎症因子和趋化因子的分泌,来实现免疫逃逸.
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IFN-α通过IFI16抑制人脑血管外膜成纤维细胞增殖并促进细胞凋亡
目的:探讨干扰素-α(IFN-α)是否通过诱导干扰素诱导蛋白16(IFI16)表达抑制人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖与促进细胞凋亡.方法:应用转染针对IFI16基因的小干扰RNA(siRNA)和/或IFN-α瞬时干预体外培养的HBVAFs.通过蛋白免疫印迹(Western blot)法和Real-time PCR法测定细胞中IFI16、P53、P21蛋白和mRNA表达水平的变化.用MTT法检测细胞活力,流式细胞术测定细胞周期及凋亡.结果:与未干预组比较,IFN-α(2 000~5 000 kU/L)干预HBVAFs后,IFI16蛋白表达水平明显上调,但不同浓度IFN-α组之间无统计学差异.使用2 000 kU/L IFN-α可诱导HBVAFs中P53及P21蛋白和mRNA表达水平上调,同时抑制细胞增殖与促进细胞凋亡.但在转染了IFI16 siRNA的HBVAFs中IFN-α的上述作用受到了抑制.结论:IFN-α抑制HBVAFs增殖与促进其凋亡的作用可能部分与其诱导IFI16表达有关.
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I-Ad/IgG2b Fc二聚体融合蛋白的构建表达及鉴定
目的:构建I-Ad/IgG2b Fc杆状病毒表达载体,使其在Sf9昆虫细胞内表达.方法:利用RT-PCR从BALB/c小鼠淋巴细胞中扩增出I-Ad α、I-Ad β和IgG2b Fc目的基因序列,运用重叠PCR将I-Ad α和I-Ad β分别与Fos和Jun的亮氨酸拉链序列相连,形成I-Ad α-Fos和I-Ad β-Jun;利用酶切位点XbaⅠ将I-Ad α-Fos与IgG2b Fc段相连,形成I-Ad α-Fos-IgG2b Fc重组序列;分别将I-Ad α-Fos-IgG2b Fc和I-Ad β-Jun插入杆状病毒表达载体pFastBacTMDual的PPH和PP10两个启动子的下游,构建出重组载体pFastBacTMDual+[I-Ad/IgG2b Fc];采用PCR及限制性内切酶对所构建的载体进行鉴定并测序;将pFastBacTMDual+[I-Ad/IgG2b Fc]转入DH10Bac感受态,使其在转座子的作用下形成重组杆粒病毒Bacmid+[I-Ad/IgG2b Fc],利用脂质体转染试剂将重组表达载体转染至Sf9昆虫细胞,P4后大量感染Sf9昆虫细胞,收集上清通过PEG20000浓缩可得到I-Ad/IgG2b Fc二聚体融合蛋白,通过双抗体夹心ELISA及Western blot对表达的蛋白进行检测.结果:PCR及酶切鉴定以及测序结果证实所构建的pFastBacTMDual+[I-Ad/IgG2b Fc]重组载体具有正确的序列;双抗体夹心 ELISA和Western blot结果表明重组杆粒能成功感染Sf9昆虫细胞,并且表达的融合蛋白具有正确构象.结论:成功构建pFastBacTMDual+[I-Ad/IgG2b Fc]杆状病毒表达载体,并在Sf9昆虫细胞中表达,为研究I-Ad限制性的T细胞奠定了基础.
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IL-22经Wnt/β-catenin通路抑制肝星状细胞致纤维化作用
目的:研究IL-22抑制HSC致肝纤维化的作用和机制,探索Wnt/β-catenin通路在肝星状细胞(HSC)激活过程中的作用.方法:采用TGF-β1激活HSC,荧光定量PCR和Western blot检测细胞激活过程中β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达变化情况.应用不同浓度和不同时间的重组大鼠IL-22刺激大鼠HSC,CCK8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率.采用TGF-β1预处理HSC,再用适浓度IL-22干预,对比干预前后HSC增殖情况,并检测β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达变化情况.结果:TGF-β1激活HSC后,β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05).IL-22以浓度依赖性和时间依赖性抑制HSC增殖(P<0.05),并降低β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),但对HSC凋亡率无显著影响(P>0.05).IL-22可以显著抑制TGF-β1诱导的HSC激活,并显著降低β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05).结论:Wnt/β-catenin参与了HSC激活和分泌α-SMA过程, IL-22以浓度依赖性和时间依赖性抑制HSC活性,这种作用可能是通过抑制Wnt/β-catenin通路实现的.
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中性粒细胞与淋巴细胞比值联合检测纤维蛋白原对结直肠癌预后的判断价值
目的: 探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和纤维蛋白原(Fibrinogen,FIB)联合形成指标FIB-NLR在结直肠癌预后中的临床意义.方法:回顾性分析我院2010年6月至2011年6月接受手术治疗的250例结直肠癌患者的临床资料,分别分析NLR和FIB与结直肠癌的病理特征的关系,将NLR与FIB进行联合形成一个指标(FIB-NLR).将250名结直肠癌患者分为3组,患者NLR≥2.95及FIB≥348 mg/dl定为FIB-NLR 2分组,NLR≥2.95及FIB<348 mg/dl或者NLR<2.95及FIB≥348 mg/dl定为1分组,NLR<2.95及FIB<348 mg/dl为0分组,并分析3组患者在结直肠癌的浸润深度、分期、淋巴结转移、神经浸润、远处转移、组织学分级中是否具有差异性.并将3组患者按生存时间做生存分析,并对3组患者的生存率进行比较. 结果:中晚期及有淋巴结转移结直肠癌患者NLR值明显高于分期较早及无淋巴结转移患者的NLR,差异具有统计学意义(P<0.001),肿瘤浸润深度较深、有神经浸润、有远处转移的患者其NLR值明显高于浸润深度较浅、无神经浸润、无远处转移患者的NLR值,差异具有统计学意义(P=0.006、P=0.002、P=0.007).中晚期、有淋巴结转移、有远处转移的结直肠癌患者其FIB值明显高于早期及无淋巴结转移、无远处转移的结直肠癌患者的FIB值,差异具有统计学意义(P<0.001),浸润深度越深及有神经浸润的结直肠癌患者FIB值明显高于浸润深度浅及无神经浸润患者的FIB值,差异具有统计学意义(P=0.015、P=0.012).NLR与FIB均在肿瘤的组织学分级、年龄大小、性别肿瘤部位无明显关联(P>0.05). 结直肠癌的临床分期越晚、浸润深度越深、有淋巴结转移、有远处转移、有神经浸润的患者其FIB-NLR评分较早期、浸润深度浅、无淋巴结转移及无远处转移、无神经浸润患者高,差异具有统计学意义(P<0.001).生存分析发现,评分越高组其5年生存率越低,差异具有统计学意义(P=0.001).结论:FIB-NLR可能是一个潜在的判断结直肠癌进展及预后的有效指标.
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miR-148a通过DNMT1调控MSCs向心肌分化的内在作用机制研究
目的:验证DNA甲基转移酶1(DNMT1)是miR-148a直接调控的靶基因,探究miR-148a通过靶向DNMT1调控骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌分化的作用机制.方法:MSCs细胞经5′-氮胞苷(5′-aza)诱导向心肌分化后,使用miRNA芯片筛选出诱导前后表达差异的miRNAs.Targetscan软件分析异常表达的miR-148a的靶基因,将野生型或突变型DNMT1的3′-UTR区域克隆到荧光素酶报告基因的下游(DNMT1-wt或DNMT1-mut)并分别与miR-148a mimics(miR-148a模拟物)或scramble(miR-148a阴性对照)共转染,荧光素酶报告基因实验验证所预测的靶基因DNMT1,qRT-PCR和Western blot分别检测转染miR-638 mimics和scramble后,对DNMT1的mRNA和蛋白表达的影响.构建miR-148a慢病毒质粒,分别在转染到MSCs后的第1、7、14和28天后检测miR-148a对GATA结合因子4(Gata-4)基因上游DNA调控序列CpG甲基化水平的影响、qRT-PCR和Western blot分别检测转染miR-148a慢病毒质粒后对心肌特异蛋白:球蛋白重链(MHC)和心脏肌钙蛋白T(cTnT)、MSCs分化特征蛋白CD90和CD29表达的影响,以及对心肌特异转录因子心脏特异性同源盒基因(Nkx2.5)和Gata-4表达的影响.结果:miRNA芯片筛选5′-aza诱导MSCs向心肌分化后表达异常的miRNAs,包括miR-146a-5p、miR-148a、miR-539等,其中miR-148a表达明显上调.Targetscan、荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证DNMT1是miR-148a直接调控的靶基因.miR-148a慢病毒感染MSCs细胞,证实在转染的不同时间,Gata-4上游基因甲基化水平发生改变,且随着转染时间延长,Gata-4甲基化水平呈不断降低趋势,MSCs细胞内MHC和cTnT表达提高,CD90和CD29表达降低,Nkx2.5和Gata-4表达提高,MSCs细胞出现向心肌分化.结论:miR-148a可通过靶向调控DNMT1而调控MSCs细胞的向心肌分化.
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PSMA7对A549细胞中RB途径的影响
目的:探究高表达和干扰PSMA7对A549细胞周期以及RB途径中Cyclin D1、CDK4、P16、Rb蛋白水平的影响.方法:将pcDNA3.1-PSMA7高表达和pGPU6/Hygro-PSMA7-265干扰载体分别瞬时转染A549细胞,然后用流式细胞仪检测PSMA7对细胞周期的影响,再通过Western blot 实验检测Cyclin D1、CDK4、P16、Rb的蛋白水平.结果:和对照组相比,PSMA7高表达时周期时相分布无明显差异,但Cyclin D1、CDK4的蛋白表达水平明显降低,P16、Rb的表达明显增高;和对照组相比,干扰PSMA7后细胞的G0/G1、G2/M期比例均降低,而S期的值增高,均具有差异,而Cyclin D1、CDK4的蛋白表达水平明显增加,P16、Rb的表达明显降低,以上结果与对照组相比差异均有统计学意义.结论:PSMA7在A549肺腺癌细胞中能够影响RB途径中Cyclin D1、CDK4、P16、Rb的蛋白水平的表达,干扰PSMA7使A549细胞较早进入S期.
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MCP-1对LPS致炎小鼠子宫巨噬细胞迁移和功能活性的调节
目的:探讨LPS诱导的炎症小鼠子宫巨噬细胞迁移和功能活性的调节因素.方法:将150只雌性昆明种小鼠随机分为对照组(A组)、LPS模型组(B组)、MCP-1阻断组(C组),于末次注射后的1、3、6、12、24 h取子宫.运用免疫组织化学方法检测CD14+巨噬细胞数量与CD14表达的变化,ELISA方法检测TNF-α、MCP-1的表达量.结果:①与 A 组相比,B 组内膜、肌层、外膜的CD14+巨噬细胞数目及CD14表达量在各时间点均极显著增加(P<0.01),C 组内膜和肌层在1、3、6 h时恢复至正常水平;与B组相比,C组外膜在1、3、6 h时以及C组的内膜和肌层在各时间点时CD14+巨噬细胞数目及CD14表达量均极显著减少(P<0.01).②与A组相比,B组在各时间点以及C组在12、24 h时TNF-α和MCP-1的含量极显著增多(P<0.01);与B组相比,C组各时间点的TNF-α和MCP-1的含量极显著减少(P<0.01).结论:LPS诱导的小鼠子宫炎症反应中巨噬细胞的迁移及CD14、TNF-α等关键分子的表达均受MCP-1的调节.
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基于PI3K/AKT/mTOR通路、HIF-1α、ES观察新风胶囊对佐剂关节炎大鼠滑膜血管新生的影响
目的:观察新风胶囊(XFC)对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜PI3K/AKT/mTOR通路的影响.方法:将大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、甲氨蝶呤组、雷公藤多苷组、XFC组.采用免疫组化法检测滑膜微血管密度(MVD)表达,酶联免疫吸附法检测白介素(IL)-6、IL-10、HIF-1α、VEGF-A表达,免疫印迹法检测PI3K、AKT1、p-AKT1、mTOR、ES蛋白在滑膜血管中表达.结果:模型对照组滑膜组织MVD计数升高,血清IL-6、VEGF、HIF-1α和滑膜PI3K、AKT1、p-AKT1、mTOR、ES表达显著升高,血清IL-10表达量降低;治疗后,XFC组MVD呈高计数量,HIF-1α、 IL-6、VEGF-A表达降低,滑膜PI3K、p-AKT1、mTOR、ES蛋白表达降低,血清IL-10升高.结论:XFC通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路、HIF-1α、ES表达改善AA滑膜血管新生.
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扶正解毒通络方对人肝癌HepG2细胞MMP-2、MMP-9表达及细胞侵袭作用的影响
目的:探讨扶正解毒通络方对肝癌HepG2细胞侵袭作用和基质金属蛋白酶(Matrix metallo proteinases,MMP)-2、MMP-9表达水平的影响及可能的作用机制.方法:CCK8实验检测扶正解毒通络方对HepG2细胞活性影响;Transwell侵袭实验检测扶正解毒通络方对HepG2侵袭能力的影响;ELISA法检测扶正解毒通络方干预HepG2细胞后 MMP-2和MMP-9的表达水平.结果:CCK8实验结果显示,扶正解毒通络方对HepG2细胞意志呈剂量时间相关性.Transwell 侵袭实验显示,2.65 mg/ml扶正解毒通络方对HepG2细胞侵袭力抑制率为52.45% (P<0.05).ELISA检测结果显示,扶正解毒通络方干预后 HepG2 细胞上清液中MMP-2 和 MMP-9表达水平下降(P<0.05).结论:扶正解毒通络方可以抑制肝癌HepG2细胞的生长和侵袭,其机制可能是通过下调MMP-2、MMP-9在肝癌细胞HepG2的表达.
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雷公藤多苷抑制二肽肽酶I活性及其调节机制的研究
目的:二肽肽酶I(DPPI)是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶,高表达于颗粒免疫细胞包括肥大细胞,有激活炎症介质丝氨酸蛋白酶的功能.本研究用胶原诱导类风湿关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型,探讨雷公藤多苷对DPPI的作用以揭示其治疗类风湿的药理机制.方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和雷公藤多苷治疗组(低剂量组2.5 mg/100 g 体重,高剂量组5 mg/100 g体重);用牛Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂诱导大鼠类风湿关节炎,两次免疫后第12天开始灌胃给药,连续2周后处死,收集血液和滑膜.关节切片HE染色和细胞计数,荧光底物法检测DPPI在大鼠血清和滑膜中的表达和活性,明胶酶谱法检测滑膜液中MMP-2/9表达水平,BCA法测定样品总蛋白含量.结果:和模型组相比,雷公藤多苷能降低CIA大鼠关节滑膜组织中肥大细胞的数量,并抑制滑膜液和血清DPPI的活性;滑膜总蛋白和MMP-2/9活性也有所降低.结论:雷公藤多苷对DPPI活性的抑制作用可能是其治疗类风湿药理学机制之一.
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应用rmIL-18诱导肿瘤特异性CTL治疗肝癌的实验研究
目的:研究rmIL-18在体外培养系统(Coculture system in vitro,CCs)诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)及在小鼠体内发挥的抗肝癌效果.方法:采用Stem SepTM免疫磁性细胞分离方法分离培养小鼠脾脏NK细胞、T细胞及DCs,建立体外培养系统;采用不同途径,不同剂量CTL免疫肝细胞癌荷瘤小鼠,研究CTL对荷瘤小鼠肿瘤生长速度和生存时间的影响.结果:rmIL-18能够在体外培养系统中诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应;CTL能够明显抑制荷肝癌小鼠的肿瘤生长速度(P<0.01)及明显延长荷瘤小鼠生存时间(P<0.01),并且这种作用随rmIL-18浓度的增加而增强(P<0.01),且肿瘤内注射均优于腹腔内注射(P<0.01).结论:rmIL-18可以在体外诱导肿瘤特异性CTL并在小鼠体内发挥抗肝癌作用.
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小分子干扰RNA沉默RhoGDI2基因表达对结肠癌细胞增殖侵袭的影响及其机制
目的:应用小分子干扰RNA(siRNA)沉默RhoGDI2基因的表达,初步探讨其对结肠癌细胞增殖、迁移能力的影响及可能的机制.方法:分别运用Western blot和RT-qPCR检测结肠癌细胞株RKO、HT29、SW620、SW480、HCT116基因RhoGDI2的表达情况.设计并合成RhoGDI2 siRNA干扰序列,按照LipofectamineTM2000转染方法将siRNA干扰序列转染到目的细胞,设置实验干扰组、空白对照和阴性对照组;CCK-8实验检测细胞增殖能力,细胞划痕试验和Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力.结果:人结肠癌细胞株RhoGDI2表达量由高到低依次是RKO、HT29、SW620、SW480、HCT116;RKO细胞siRNA干扰后RhoGDI2表达抑制率大于70%:实验干扰组、阴性对照组、空白对照组细胞增殖率分别是(0.683±0.013)、(0.866±0.088)、(0.905±0.008),P<0.05;实验干扰组细胞迁移、侵袭速率较对照组均减慢.沉默RhoGDI2基因的表达,实验组细胞E-Cadherin较对照组表达量高,Vimentin蛋白表达下降.结论:结肠癌RhoGDI2基因沉默可能通过抑制EMT进程阻止肿瘤恶性生物学行为.
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Toll样受体的科研成果引入课堂教学的改革探索
本科细胞生物学、免疫学及生物化学与分子生物学综合实验课程是生命科学领域专业的基础课程和交叉课程,面向生物学等相关专业的学生开设.它们是兼理论性和实验性的课程,着重培养学生的分析问题能力、动手能力、科学研究能力等,这些能力的培养符合实践型和创新型人才的培养目标.为适应我国经济和国防建设的高速发展,作为新型人才,学生对知识的需求已远远超越课本教材,对科技发展的新动态与趋势充满好奇,也对教师的科研成果产生浓厚的兴趣.
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翻转课堂在动物免疫学教学中的应用研究
免疫学是研究生物体对抗原物质免疫应答性及其方法的生物鄄医学科学.动物免疫学与医学免疫学的研究内容基本一致,只是动物免疫学侧重于免疫血清学诊断与免疫防治,而医学免疫学侧重于临床免疫学方面.
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CD8+T细胞活化与分化的分子机制
CD8+ T细胞识别由MHCⅠ分子递呈的抗原肽,由于大多数有核细胞都表达MHCⅠ分子,因此CD8+ T细胞在清除被病毒、胞内菌、寄生虫等感染的细胞或突变的肿瘤细胞中发挥着重要作用.识别病原微生物等抗原后,CD8+ T细胞活化并分化形成多种类型的效应和记忆细胞,不仅能及时清除被感染的细胞,也能形成长期保护.各亚群CD8+ T细胞的表面分子、功能和定位不同,细胞存活的时间、再次感染时的增殖能力和效应功能也有所差别.本文主要讨论CD8+ T细胞如何受到多条信号通路和转录因子调控,活化和分化成不同类型的效应和记忆细胞,并对临床应用T细胞抵御肿瘤和病原微生物的进展作一简单概述.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
