抗幽门螺杆菌治疗防治消化道肿瘤化疗致吐临床研究

目的 幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,HP)感染与多种消化道疾病密切相关,临床发现合并HP感染的消化道肿瘤患者化疗引起的恶心、呕吐发生率高.本研究探讨抗HP治疗在防治消化道肿瘤化疗导致恶心、呕吐中的意义.方法 选取2015-12-01-2016-12-01安徽省立医院进行化疗的消化道恶性肿瘤患者88例,经14C-尿素呼气试验检查后筛选的88例患者均为HP阳性,采用随机数字表法分为试验组(n=45)和对照组(n=43).在化疗间期试验组予以正规四联抗HP治疗(泮托拉唑20 mg+克拉霉素0.5 g+阿莫西林1.0 g+枸橼酸铋钾220 mg),2次/d,连续服用2周.试验组抗HP治疗结束后4周复查14C-尿素呼气试验,获得HP根治的患者纳入统计学分析.通过MASCC止吐工具(MASCC antiemesis tool,MAT)、呕吐生活功能指数量表(functional living index-emesis,FLIE)记录化疗0～120 h患者恶心呕吐发生情况及对患者生活功能的影响,对比试验组与观察组化疗期间恶心、呕吐情况.在化疗期间两组均予以5-羟色胺3(5-HT3)受体的拮抗剂托烷司琼6 mg、胃复安20 mg和地塞米松10 mg进行预防性止吐治疗.结果 试验组共有40例患者获得HP根治并纳入统计学分析,根治率为88.9％.化疗期间试验组和对照组恶心缓解率急性期分别为85·0％和53.5％(P=0.002),延迟期分别为65.0％和37.2％(P=0.011),总体分别为67.5％和39.5％(P=0.010).试验组和对照组呕吐缓解率急性期分别为87.5％ 和62.8％(P=0.009),延迟期分别为72.5％和48.8％(P=0.028),总体分别为72.5％和51.2％(P=0.046).采用FLIE问卷评估患者化疗5 d内CINV对生活功能的影响.试验组和对照组在恶心部分中生活质量影响甚微(no impact to daily life,NIDL)患者比例分别为72.5％ 和48.8％(P=0.028).呕吐部分中NIDL患者比例分别为77.5％和53.5％(P=0.022).FLIE问卷总分显示,试验组和对照组NIDL患者所占比例分别为75.0％和48.8％(P=0.014).结论 抗HP治疗可以改善消化道肿瘤患者化疗所致的恶心、呕吐.

Ⅲ期非小细胞肺癌手术治疗患者预后因素分析

目的 肺癌是目前全球发病率和死亡率高的恶性肿瘤之一.其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占绝大多数,部分患者在诊断时已处于Ⅲ期.肺癌的预后较差,本研究拟探讨手术治疗的Ⅲ期NSCLC患者的预后因素.方法 回顾性分析2010-01-01-2013-12-31中国医科大学附属第一医院胸外科118例手术治疗的Ⅲ期NSCLC患者临床资料,将可能对患者术后5年生存率产生影响的预后因素进行统计学分析.结果 单因素生存分析显示,术后化疗与否(P=0.006)、淋巴结转移总数(P=0.038)、淋巴结总转移率(P=0.009)、N1淋巴结转移数(P=0·009)、N1淋巴结转移率(P=0.011)、N2淋巴结转移数(P=0.011)、N2淋巴结转移组数(P=0.034)、N2淋巴结转移率(P=0.036)、第7组淋巴结转移与否(P=0.001)与患者术后5年生存率相关;多因素生存分析显示,N2淋巴结转移数(P=0.002,RR值2.588,RR值95％CI为1.420～4.718)、第7组淋巴结转移与否(P=0.008,RR值0.467,RR值95％CI为0.267～0.818)是影响患者术后5年生存率的独立预后因素.N2淋巴结转移数>3枚的患者,其死亡风险是≤3枚的2.588倍;第7组淋巴结转移患者的死亡风险是未转移的2.141倍.结论 对于手术治疗的Ⅲ期NSCLC患者,如果其淋巴结转移总数>4枚、淋巴结总转移率>50％、N1淋巴结转移数>2枚、N1淋巴结转移率>50％、N2淋巴结转移>3枚以及>3组、N2淋巴结转移率>45％、第7组淋巴结转移、术后未辅以化疗,预后可能不佳.

宫颈癌组织Irisin表达临床意义研究

目的 鸢尾素(Irisin)是新发现的一种蛋白因子,表达于多种肿瘤,但在宫颈鳞癌血清及组织中鲜见报道.本研究旨在探讨Irisin在宫颈鳞癌患者血清和组织中的表达及其与临床病理参数的相关性,并通过体外实验进一步验证Irisin对宫颈鳞癌细胞的作用.方法 应用酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测2015-07-01-2017-05-20青岛市立医院120名健康志愿者和102例宫颈鳞癌患者血清中Irisin表达;蛋白质印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR,RT-PCR)法检测50例正常宫颈组织(对照组)和48例宫颈鳞癌组织(肿瘤组)中Irisin蛋白和Irisin mRNA表达,分析Irisin mRNA与宫颈鳞癌临床病理参数的关系;通过CCK-8和划痕实验探讨Irisin对宫颈鳞癌细胞系Hela和Siha的作用.结果 ELISA法检测结果显示,宫颈鳞癌患者血清中Irisin水平为(7.39±0·78)μg/mL,明显高于健康志愿者的(5.31±1.83)μg/mL,t=14.97,P<0.05,且临床分期越晚,Irisin表达水平越高;蛋白质印迹法检测结果显示,肿瘤组组织中Irisin蛋白相对表达量为(1.715±0.359),高于对照组组织的1,t=34.48,P=0.0008;RT-PCR结果显示,在正常宫颈组织中相对表达量为1,宫颈鳞癌组织为3.29±0.724,t=25.49,P<0.0001,且组织中Irisin mRNA表达水平与宫颈鳞癌的临床分期及病理分级有关,P<0.05;CCK-8法检测结果显示,Hela细胞中,0.625、1.25、2.5、5和10 nmol/L组分别与对照组比较,差异有统计学意义,F=3.089,P<0.05;Siha细胞中,0·625、1.25、2.5、5和10 nmol/L组分别与对照组比较,差异有统计学意义,F=7.198,P<0.001;且随着时间的延长,Irisin的促增殖能力越明显.划痕实验结果显示,在12 h时,Hela细胞2.5 nmol/L组的愈合率为(41.19±1.41)％,高于对照组的(8.55±0.48)％,t=66.87,P<0.0001;Siha细胞2.5 nmol/L组的愈合率为(18.75±1.05)％,高于对照组的(6.34±0.34)％,t=28.95,P<0.0001;在24 h时,Hela细胞2.5 nmol/L组的愈合率为(73.95±4.53),高于对照组的(37.71±2.15)％,t=32.44,P<0.0001;Siha细胞2.5 nmol/L组的愈合率为(37.71±2.15)％,高于对照组的(6·80±0·49)％,t=40.82,P<0.0001,差异均有统计学意义.结论 宫颈鳞癌患者血清和组织中Irisin表达水平明显高于健康志愿者,且Irisin mRNA表达水平与宫颈鳞癌的临床分期及病理分级有关,其过表达预示宫颈鳞癌预后不良;且Irisin能促进宫颈鳞癌细胞系Hela和Siha细胞的增殖和迁移.

胃癌组织高迁移率族蛋白1表达临床意义

目的 高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)可参与多种肿瘤的发生发展、浸润转移.本研究分析胃癌组织及血清中HMGB1表达水平,探讨其临床意义.方法 采用免疫组化方法和酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测2012-01-01-2013-05-30山东省肿瘤医院52例初治胃癌患者的术前血清、术后胃癌组织及术后3个月后血清中HMGB1表达水平,收集临床资料进行统计学分析,另取21例胃癌患者正常胃黏膜组织(距癌组织5 cm)及21名健康体检人群血清作对照.结果 52例胃癌患者中HMGB1阳性表达率为75.0％(39/52),高于21例正常胃黏膜组织的9.5％(2/21),差异有统计学意义,P<0.001;胃癌组织HMGB1表达与肿瘤大小、临床分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及与远处转移有关(均P<0.05),与性别、年龄、组织学类型及肿瘤位置无关,均P>0.05;血清HMGB1含量高低与肿瘤大小、临床分期、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(均P<0.05),与性别、年龄、分化程度、组织学类型及肿瘤位置无关,均P>0.05;52例胃癌手术患者术后3个月血清HMGB1含量明显低于术前HMGB1含量,P<0.05.结论 HMGB1在胃癌患者组织及血清中均可高表达,在胃癌的发生发展及侵袭转移中发挥重要作用,HMGB1有望成为胃癌诊断与治疗的分子靶向标志物.

原发性肝细胞肝癌组织SALL4与LncRNA表达相关性研究

目的 原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发病机制目前尚不清楚,研究发现人类婆罗双树样基因-4(spalt like transcription factor 4,SALL4)在多种肿瘤中表达上调并可能在肿瘤的诊断及预后方面起着重要的作用.但是关于SALL4调控机制方面的研究很少,包括长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)的调节,本研究旨在探讨SALL4与LncRNA在肝癌组织中的表达及相关性研究.方法 利用cBioPortal数据库筛选原发性HCC中SALL4的表达及哪些LncRNA与原发性HCC的不良预后相关,选择2015-01-01-2015-12-30山东省千佛山医院病理科20例临床标本应用RT-PCR方法进行验证.结果 首次应用cBioPortal数据库检索发现190个肝癌样本中SALL4 mRNA、HCG18 mRNA和LINC00654 mRNA表达上调与原发性HCC不良预后有关,P<0.05.肝癌数据库样本增多至371例后再次检索发现,SALL4 mRNA和LINC00654 mRNA表达上调仍与原发性HCC的不良预后(OS)有关,P<0.05.HCG18 mRNA表达上调与肝癌不良预后差异无统计学意义.cBioPortal肝癌数据库中以高加索患者及亚裔患者为主,亚裔患者SALL4 mRNA和LINC00654 mRNA表达上调略多于高加索患者.进一步应用RT-PCR进行验证原发性HCC术后组织标本中HCG18 mRNA表达低于癌旁正常组织(P=0.038),SALL4 mRNA和LINC00654 mRNA表达显著增高.结论 SALL4 mRNA在原发性HCC组织中表达增高,其表达上调与原发性HCC的不良预后是否相关需要进一步验证.LINC00654 mRNA表达与肝癌的不良预后(OS)有关,并可能为SALL4的调控元素.

急性髓细胞白血病IDH基因突变临床特征及预后意义

目的 基因突变在急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia,AML)患者预后判断方面具有重要意义,其中异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)基因突变与AML的临床特征和预后密切相关.本研究探讨AML患者IDH基因突变的发生率、临床特征及预后意义.方法 选取滨州医学院附属医院2015-01-01-2017-01-31经MICM分型确诊的120例初治AML患者,采用骨髓单个核细胞基因组DNA,PCR方法扩增IDHl、IDH2基因4号外显子,基因测序检测IDHl及IDH2基因突变,分析患者临床特征并评估其疗效.结果 120例AML患者中16例检测到IDH基因突变,突变率为13.33％,其中IDHl突变5例(4.17％),IDH2突变11例(9.17％).未发现有患者同时获得IDHl和IDH2突变.突变组中位年龄55岁,未突变组中位年龄40岁,差异有统计学意义,P=0·0004;初诊外周血血小板计数为77×109 L-1,明显高于未突变组的33×109 L-1,差异有统计学意义,P=0.0002.IDH突变均发生在AML-M4/M5中,未见其他AML亚型.IDH基因突变与正常核型、NPMl基因突变,尤其是NPMl基因突变未伴FLT3-ITD基因突变的基因型相关.突变组的化疗完全缓解率为50·00％,低于未突变组的79.59％,差异有统计学意义,P<0.01.不伴NPM1基因突变的患者中,IDH基因突变组1年总生存率为50.00％,低于未突变组的86.42％,差异有统计学意义,P<0.01.所有患者中,IDH基因突变组1年总生存率为71.43％,低于未突变组的86.73％,但差异无统计学意义,P>0.05;在正常核型和伴NPM1突变患者中,IDH基因突变组与未突变组1年总生存率差异均无统计学意义,均P>0.05.结论 IDH基因突变更多见于正常核型的AML患者,常与NPMl基因突变相伴随,与患者治疗疗效具有一定相关性,提示是预后不良的分子标志.

Beclin 1基因过表达对人乳腺癌细胞BT-549裸鼠皮下成瘤生长影响研究

目的 人乳腺癌BT549细胞缺失自噬基因Beclin 1是一种抑癌基因,过表达Beclin 1诱导自噬可抑制肿瘤的形成和发展.本研究预通过重组慢病毒载体转染Beclin 1基因,以观察过表达Beclin 1对裸鼠人乳腺癌BT549细胞皮下成瘤生长情况的影响.方法 以重组慢病毒载体pLenO-GTP-Beclin 1感染BT549细胞为实验组(6只),以对照慢病毒颗粒(pLenO-GTP-Vecto)感染BT549细胞为阴性对照组(6只),不做处理BT549细胞(缺失Beclin 1基因)为空白对照组(6只).3组转染细胞分别接种至裸鼠皮下,构建人乳腺癌BT549细胞裸鼠皮下成瘤模型.观察记录裸鼠成瘤情况并绘制肿瘤生长曲线.裸鼠饲养28 d后脱臼法处理,剥离瘤体,测定肿瘤体积和质量.用RT-PCR法、蛋白质印迹法及免疫组化法检测皮下成瘤中Beclin 1基因表达情况.结果 慢病毒载体构建成功,裸鼠接种各组细胞后在第7天均有肿瘤形成,实验组的瘤体平均体积为(79.66±42.52)mm3,肿瘤生长速度明显慢于阴性对照组的(358.62±58.83)mm3和空白对照组的(400.40±121.45)mm3,差异有统计学意义,F=27.34,P<0.05;实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均重量分别为(0.16±0.06)、(0.81±0.32)和(0.93±0.37)g,差异有统计学意义,F=12.749,P<0·05.RT-PCR法检测显示,实验组Beclin 1 mRNA的相对表达量为31.11±12.77,明显高于阴性对照组的0.66±0·02和空白组的1.00±0.07,差异有统计学意义,F=16.86,P<0.05;实验组Beclin 1蛋白表达量为0.212±0.078,明显高于阴性对照组的0.044±0.006和空白对照组的0.043±0.009,差异有统计学意义,F=27.418,P<0.05.实验组中Beclin 1蛋白的阳性表达率为46.7％,明显高于阴性对照组的10.0％和空白对照组的16.7％,差异有统计学意义,χ2=12·34,P<0.01.结论 Beclin 1基因过表达能够明显抑制裸鼠人乳腺癌BT549细胞皮下成瘤的生长,Beclin 1的表达量与肿瘤成长呈负相关.

抑制CCDC12基因对结直肠癌细胞HCT116凋亡影响机制研究

目的 卷曲螺旋结构域(coiled-coil domain containing,CCDC)结构基因家族与一部分肿瘤关系密切,但CCDC12与结直肠癌的关系还不明确.本研究探讨CCDC12基因对结直肠癌细胞HCT116凋亡的影响及其可能机制.方法 clone-67小干扰RNA(clone-67-siRNA)转染结肠癌细胞系HCT116抑制CCDC12表达;通过细胞计数法CCK-8检测细胞增殖情况;通过流式细胞术检测凋亡率;RT-qPCR和蛋白质印迹法检测对照组、con-siRNA组及转染组HCT116细胞CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR基因和蛋白表达.采用SPSS 17.0进行统计分析,分别采用t检验或单因素方差分析来比较各组间统计学差异.结果 clone-67-siRNA能有效沉默HCT116细胞CCDC12基因的表达,clone-67-siRNA沉默细胞中CCDC12基因后24 h检测到CCDC12基因表达为(35.68±2.97)％,48 h表达为(76.25±3·03)％,72 h表达为(54.33±1.51)％.抑制HCT116细胞中CCDC12表达后,转染组细胞活性(74.52±11.46)％明显低于对照组(100±14.33)％和con-siRNA组(95.97±13.53)％,F=10.825,P<0.001;凋亡率clone-67-siRNA组为(26.30±3.57)％,明显高于对照组的(13.10±2.15)％和con-siRNA组的(11.66±1.77)％,F=28.640,P<0.001.clone-67-siRNA转染HCT116后细胞中CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR的表达均降低,RT-qPCR结果(FCCDC12=38·796,PCCDC12<0.001;FPI3K=25.538,PPI3K=0.001;FPI3K=23.074,PPI3K=0.002;FPI3K=29.372,PPI3K=0.001)和蛋白质印迹结果(FPI3K=12.077,PPI3K=0.008;FPI3K=16.470,PPI3K=0.004;FPI3K=25.455,PPI3K=0.001)符合.结论 利用clone-67-siRNA抑制结直肠癌HCT116细胞CCDC12基因后可以显著抑制细胞活性,并增加细胞凋亡,其机制可能通过PI3K-AKT-mTOR信号通路途径影响.

BDNF基因表达水平对肝癌细胞97-H增殖和迁移影响机制探讨

目的 脑源性神经营养因子(brain-dervived neurotrophic factor,BDNF)促进肿瘤细胞的生长和转移,反义BD-NF(antisense BDNF)是BDNF基因的内源性反义长链非编码RNA,对BDNF表达水平具有调控作用.本研究旨在探讨BDNF AS对肝癌细胞97-H增殖和迁移的作用,以及对BDNF表达水平的影响.方法 采用BDNF AS质粒瞬时转染肝癌细胞系97-H,采用qPCR方法检测肝癌细胞中BDNF AS和BDNF mRNA水平,采用蛋白质印迹法检测BDNF蛋白表达水平,采用EdU掺入、划痕实验和Transwell小室研究转染BDNF AS对肝癌细胞增殖和迁移的影响.结果 转染BDNF AS质粒的细胞中,BDNF AS水平显著上调,是对照组细胞的(136.97±7.92)倍(F=880.301,P<0.001),而BDNF mRNA和蛋白水平显著降低,分别是对照组细胞的(0.50±0.08)倍和(0.275±0.050)倍,F=59.435,P<0.001;F=566.528,P<0.001.转染BDNF AS细胞的EdU阳性率为(36.1±2.3)％,显著低于对照组细胞(F=40.833,P<0·001),而过表达BDNF AS的细胞经rhBDNF刺激后,细胞增殖百分比增加,P=0.001.BDNF AS转染组细胞的划痕愈合率以及迁移细胞数分别为(6.23±0.30)％和31.0±2.6,均低于对照组细胞(F=25.975,P=0.001;F=15.851,P=0.001),而过表达BDNF AS的细胞经rhBDNF刺激后,迁移细胞数增加,P=0.002.结论 肝癌细胞97-H中BD-NF AS可能通过下调BDNF mRNA和蛋白水平,实现对肝癌细胞生长、迁移的负性调控作用.

子宫内膜癌腹腔镜术后腹壁穿刺口转移一例报告并文献分析

1 病例报告患者女,64 岁.因"绝经 14 年,不规则阴道流液1 个月",于2012-02-14入大连医科大学附属大连市妇产医院.绝经后无激素类药物使用史.既往病史:24岁时患过敏性哮喘,46 岁患高血压,偶有情绪波动时胸闷、晕厥史,无糖尿病史,无手术史.入院查体:T 36.5 ℃,P 80 次/min,R 18 次/min,BP 103/76 mm Hg,心肺听诊无异常,腹平软,无压痛,肝脾未及肿大.妇科检查:外阴萎缩,阴道少量似淘米水样液体,宫颈炎,子宫前位、常大、质中、活动度可、无压痛,双附件区未及异常.三合诊:主骶韧带无增粗,子宫周围无增厚,退出指套无血染.辅助检查:CA-125:1.04 × 103 U/L.超声示,子宫内膜基底部向宫腔内凸 2 个强光团,大小分别为 2.0 cm× 1.1 cm 和 1.8 cm× 1 .0 cm,光团内见血流信号,以静脉为主.宫腔镜检查示,宫腔内近宫底部可见范围约 3.0 cm×3.0 cm× 2 .0 cm珊瑚状组织,表面血管丰富,活检后送病理组织学检查,结果为子宫内膜样腺癌.多层螺旋 CT示,子宫大小、位置、形态未见确切异常,宫内未见明确异常密度影;双附件区未见明显膨大,周围脂肪间隙清晰,未见确切肿大淋巴结.膀胱壁较规整.综合分析入院诊断:子宫内膜癌;高血压.于 2012-02-20 在全麻下行腹腔镜下筋膜外全子宫、双附件切除术及盆腔淋巴结清除术.腹壁穿刺口分别位于脐孔上缘10 mm、麦氏点 5 mm、反麦氏点、脐孔左侧 5 mm.CO2 气腹,维持腹腔内压力在 12 mm Hg.

《中华肿瘤防治杂志》稿约

Hras12V转基因小鼠肝癌发生的性别差异性蛋白质组学研究

目的 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生具有显著的性别差异,但其分子机制尚不清楚.本研究通过检测Hras12V转基因小鼠雌雄肝肿瘤组织的蛋白质组学表达差异,探讨肝肿瘤发生的性别差异机制.方法 采用双向荧光差异凝胶电泳(two dimension difference gel electrophoresis,2D-DIGE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术检测Hras12V雌雄小鼠肝肿瘤组织的蛋白质组学差异表达谱,分离并鉴定差异表达蛋白,应用蛋白质印迹法验证2 D-DIGE结果,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析,包括蛋白功能注释、分类(gene ontology,GO)分析、京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析.结果 经双向荧光差异凝胶电泳-图像分析得到1313个蛋白点,其中差异倍数≥1.5(P<0.05)的蛋白点553个.从中选择94个差异蛋白点进行MALDI-TOF-MS鉴定,得到56种差异性表达的蛋白质.其中,与雌鼠相比,雄鼠肝肿瘤组织中高表达的蛋白有43种,低表达的蛋白有13种.选取4个差异蛋白FABP1、Albumin、Prdx6和CALR进行了蛋白质印迹法验证,其中FABP1在雄鼠肝癌中显著上调,Albumin和Prdx6在雄鼠肝癌中显著下调,CALR在雌雄小鼠肝癌中差异无统计学意义,结果与质谱数据基本一致,证明了2D-DIGE结果的可靠性.对雌雄鼠肝肿瘤组织中的差异蛋白进行GO分析,细胞组分分析显示,差异蛋白主要分布在细胞质、细胞溶质、线粒体和细胞核中;分子功能分析显示,差异蛋白主要承担poly(A)RNA结合、ATP结合和酶结合等功能;生物过程分析显示,差异蛋白主要参与运输、脂代谢过程和凋亡过程的负调控等.KEGG通路分析结果表明,差异蛋白涉及9条信号通路,主要通路包括代谢途径、内质网加工过程和细胞色素P450的异物代谢等通路.结论 Hras12V转基因小鼠雌雄肝肿瘤组织的差异性蛋白表达的检测,为研究性别差异性肝癌发生分子机制提供了基础生物学信息和有益的线索.