淋巴管生成与胃肠道肿瘤转移关系的研究进展

淋巴管系统是恶性肿瘤转移的重要途径,但是人们对淋巴管生成在恶性肿瘤中的作用机制知之甚少.多种细胞因子参与了调节淋巴管生成的细胞信号传导通路,这些细胞因子包括:VEGF-C, VEGF-D, VEGFR-3, VEGF-A, FGF-2, Prox-1, Ang2和NP-2等;近年来发展起来的多种淋巴管内皮标志,如podoplanin、LYVE-1、Prox-1、VEGFR-3和LVEF等,为研究淋巴管生成在肿瘤中的作用提供了有力的工具;研究发现胃肠道肿瘤的淋巴管主要分布在肿瘤的周边区和正常区,肿瘤癌周组织的淋巴管密度明显高于正常组织的淋巴管密度;近的研究还表明胃肠道恶性肿瘤的淋巴管生成与肿瘤的复发、转移和总生存率有一定的相关性.

TFPI-2基因与消化道肿瘤关系的研究进展

组织因子途径抑制物 2(tissue factor pathway inhibitor 2, TFPI-2)是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)在内的多种蛋白酶,而MMPs参与了细胞外基质的重塑,在肿瘤细胞的浸润和转移、伤口愈合、血管新生、纤维蛋白溶解及动脉粥样硬化等生理和病理过程中发挥重要作用.TFPI-2可通过维持细胞外基质的完整、调节肿瘤血管生成、调控肿瘤细胞细胞凋亡及血液凝固等机制调节胰腺癌、食管癌及胃癌等消化道肿瘤细胞的侵袭转移.越来越多的研究表明,TFPI-2能明显抑制肿瘤中MMPs的活性与功能等从而抑制肿瘤的侵袭与转移,并成为肿瘤基因治疗的新靶点.

盆腔放疗中放射性直肠损伤的预防

放疗在盆腔肿瘤中的治疗作用日益受到重视,治疗的同时会发生不同程度的放射性直肠损伤,通过改进放射技术、照射剂量和优化分割剂量、使用辐射防护剂等可以减少和预防放射性直肠损伤.放疗技术的改进包括三维适形放疗(3D-CRT)和调强放疗(IMRT)等精确放疗技术,提高肿瘤靶区的剂量,并使肿瘤靶区剂量分布更均匀,能够较好地避开周围的重要器官和组织,减轻正常器官和组织的放射损伤.照射剂量和分割剂量的优化,其机制是根据不同组织的细胞增殖快慢不同,分别给予大剂量分割、超分割和加速超分割,提高肿瘤控制率.使用辐射防护剂保护正常组织的机制是通过阻止自由基的间接损伤和修复直接、间接损伤的DNA,促进损伤细胞的恢复,同时不保护肿瘤组织.

Survivin在胃癌发展中的作用机制及研究进展

Survivin是新发现的凋亡抑制蛋白(Inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的成员,正常胃黏膜中Survivin的表达呈缺失状态,胃癌细胞系中Survivin-mRNA阳性率为100%;凋亡对机体很重要,在正常情况下可消灭DNA受损或细胞循环周期失调的细胞,即有恶变潜能的细胞,凋亡机制受损则促进肿瘤的进展和转移,并使癌细胞能抗拒多种治疗方法.Survivin在胃癌中呈特异性高表达,并有抑制细胞凋亡,调控细胞周期,参与血管形成的作用;胃癌中Survivin的过表达在mRNA和蛋白水平,它可能在癌的侵袭和转移中起作用,是检测胃癌微转移的一个潜在的分子学指标;Survivin与癌细胞的化疗抗药性密切相关.总结了Survivin在胃癌发病机制中的作用及诊疗中的研究进展.

FOLFOX-6方案治疗晚期胃肠道肿瘤的临床观察

为了观察FOLFOX-6方案治疗晚期胃肠道肿瘤的近期疗效及毒副反应,对36例晚期胃肠道肿瘤患者予以FOLFOX-6方案化疗,草酸铂(L-OHP)100 mg/m 2+5%葡萄糖500 mL,静脉滴入,3 h,d1;亚叶酸钙(CF)200 mg/m 2+生理盐水250 mL,静脉滴入,2 h, d1;5-氟尿嘧啶(5-FU)500 mg+生理盐水20 mL,静脉推注,d1,续以5-FU 2 500 mg/m 2微量注射泵持续静脉滴入,46 h,d1,d2,每2周重复.2个周期后评价疗效和毒副反应.全组有30例可评价疗效,其中完全缓解(CR)2例,部分缓解(PR)12例,稳定(SD)13例,进展(PD)3例,总有效率(CR+PR)46.7%.化疗后白细胞降低发生率达50.8%,恶心呕吐发生率62.5%,腹泻44.2%,周围神经毒性发生率为35.8%.初步研究结果提示, FOLFOX-6方案治疗晚期胃肠道恶性肿瘤的近期疗效较好,毒副反应可以耐受,值得临床进一步研究应用.

咽淋巴环非霍奇金淋巴瘤157例临床病理分析

目的:评价化疗、放疗、放疗+化疗3种治疗方法对原发咽淋巴环非霍奇金淋巴瘤的疗效,并对影响预后的因素进行分析.方法:9年间收治的原发咽淋巴环非霍奇金淋巴瘤157例全部经病理确诊,其中T细胞来源116例,B细胞来源35例,其他病理类型6例.放疗者靶区主要为咽淋巴环及全颈,肿瘤量DT 40～65 Gy(4～7周).辅助化疗在放疗前、中、后进行或单纯化疗,化疗方案以CHOP方案为主,也有选用COP、COPP、COMP、COBDP等方案.用Cox模型对影响预后的多因素进行分析.结果:单放组、单化组、放化综合组局部控制率分别为62%、16%和80%,5年总生存率分别为30.43%、51.35%和59.79%,除Ann-Arbor分期外,治疗方法、全身症状也是影响预后的因素,而病理类型、性别、年龄等因素对预后影响不大.结论:放化联合的生存率优于单纯放疗.

CT仿真大体病理成像对筛查大肠病变价值的探讨

目的:探讨仿真大体病理(VGP)技术对显示大肠肿瘤的价值和用于人群筛查的可能性.方法:将91例结肠肿瘤术前检查病例的多层螺旋CT(Multislice spiral CT,MSCT)平扫的容积扫描数据在图像工作站上生成VGP图像,由2名放射学医师对VGP图像的判定结果与内镜检查结果对照,同时记录三维图像生成和作出诊断所需的时间.结果:VGP对大肠癌诊断的敏感度为76.9%(70/91),进展期癌为84.9%(62/73),早期癌为44.4%(8/18).工作站VGP图像生成时间平均为90.1 s,病变检出时间平均为25.9 s.结论:VGP技术可望成为准确高效的大肠肿瘤人群筛查CT三维成像技术.

蒿甲醚对小鼠结直肠癌的抑瘤及抗血管生成的实验研究

目的:探讨蒿甲醚(Artemether)对BALB/c小鼠CT-26 结直肠癌的抑瘤及抗血管生成作用.方法:BALB/c小鼠皮下接种CT-26 结直肠癌细胞(2×10 6 mL -1)48只,雌、雄各半;随机分为6组,每组8只,分别为低剂量33.3 mg/(kg·d)、中剂量50 mg/(kg·d)、高剂量66.6 mg/(kg·d)和中剂量50 mg/(kg·d)加铁剂1.5 mg/(kg·d)组、阳性对照组为顺铂5 mg/(kg·d)、空白对照组为等体积生理盐水;均在接种5 d后,顺铂采用腹腔注射15 d停药,其余采用灌胃法持续给药15 d,每天1次,末次给药24 h后,处死动物.用Steel公式计算肿瘤体积V(mm 3)=0.5 ab 2.采用免疫组化方法检测移植瘤组织微血管密度.结果:各治疗组抑瘤率分别为42.3%、51.4%、52.0%和53.5%;血管计数分别为13±6、31±4、38±5和11±9,生理盐水对照组为49±9;各治疗组微血管密度均明显低于生理盐水对照组(分别P＜0.05,P＜0.01);移植瘤体积较对照组显著减小.结论:在一定剂量范围内,口服蒿甲醚对小鼠CT-26结直肠癌移植瘤有明显的抑制作用;与铁剂合用能使抑瘤率增加;在具有抑瘤作用的同时,蒿甲醚还具有明显抑制小鼠结直肠癌移植瘤血管生成作用.

TNF-α基因转导淋巴细胞对人胃癌细胞杀伤作用的实验研究

目的:观察将肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)基因导入淋巴细胞能否增强其对胃癌细胞的杀伤作用.方法:从胃癌转移淋巴结中分离淋巴细胞及胃癌细胞并在体外培养扩增,再用脂质体法将TNF-α基因导入淋巴细胞,在蛋白印迹法证实导入基因成功表达后,再用MTT法检测此转基因淋巴细胞对胃癌细胞的杀伤作用.结果:15例行TNF-α转导的淋巴细胞中,12例经蛋白质印迹法证实转导成功;其中4例转导入TNF-α基因后能显著增强淋巴细胞对胃癌细胞的杀伤作用,而另外8例则未见显著增强淋巴细胞的杀伤作用.结论:采用脂质体法能成功将TNF-α基因转导入淋巴细胞,而且转导入TNF-α基因有可能增强淋巴细胞对胃癌细胞的杀死作用.

应用siRNA技术下调Survivin抑制胃癌细胞SGC7901生长的研究

目的:研究小干扰RNA 对人胃癌SGC7901细胞Survivin表达及细胞生长的抑制作用.方法:将小干扰RNA 转染给胃癌SGC7901细胞来敲除Survivin的表达.用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和 Western blotting 测定Survivin mRNA 和蛋白的表达.用甲基噻唑基四唑(MTT)来分析Survivin小干扰RNA对癌细胞的生长抑制作用.用流式细胞术检测Survivin siRNA对细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:小干扰RNA能有效而稳定地抑制胃癌SGC7901中Survivin表达,下调Survivin可以在体外显著抑制肿瘤细胞的生长, 在转染后24、48和72 h, 转染Survivin特异性siRNA组生长抑制率显著高于对照组,用特异性Survivin siRNA处理后,凋亡率为13.56%, 并出现G0/G1期阻滞.结论:下调Survivin可以在体外显著抑制肿瘤细胞的生长,抑制Survivin的表达可以诱导胃癌SGC7901细胞凋亡,Survivin特异性siRNA的运用作为一种治疗癌症的新途径值得进一步研究.

大肠癌组织淋巴管生成与淋巴转移相关性的研究

目的:探讨大肠癌组织中血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)和-D(vascular endothelial growth factor D,VEGF-D)、癌旁淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LMVD)的表达及其与临床病理参数的关系.方法:应用5′-Nase-酶组织化学技术及免疫组化SP法检测对50例大肠癌组织、正常肠组织测定中VEGF-C、VEGF-D和癌旁LMVD.结果:癌旁LMVD与VEGF-C、VEGF-D的表达呈正相关,大肠癌旁LMVD与VEGF-C、VEGF-D的表达与淋巴转移、Duke分期相关.结论:VEGF-C、VEGF-D/ VEGFR-3信号传导机制促进淋巴管生成,导致癌旁LMVD的升高,进而促进大肠癌淋巴转移.

结直肠癌组织EGFR基因表达及其与临床意义的研究

目的:通过对结直肠癌上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的表达及其在体细胞突变的研究,探讨EGFR基因的表达与临床病理特征的关系.方法:收集解放军总医院病理科2004～2006年手术治疗的675例结直肠癌患者的临床及病理资料,采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织中EGFR基因的表达并探讨其与患者临床病理特征的关系.在上述病例中随机选取25例,其中5例经免疫组织化学染色显示EGFR表达呈强阳性,提取这25例石蜡组织DNA,进行PCR扩增并测序从而分析在结直肠癌中EGFR基因的突变情况.结果:免疫组化结果显示EGFR基因的阳性率为21.33%(144/675).EGFR基因的表达与结直肠癌的肿瘤直径(χ 2=0.020 4, P=0.883 6)、肠壁浸润深度(χ 2=1.128 6, P=0.288 1)、淋巴结转移情况(χ 2=0.070 8, P=0.790 2)及肿瘤的病理分期(χ 2=5.369 1, P=0.146 7)无关,但与肿瘤的分化程度(χ 2=5.779 3, P=0.016 2)、腹腔及远处转移情况(χ 2=4.398 3, P=0.036 0)密切相关.25例结直肠癌中有1例显示EGFR基因存在错义突变,有5例显示同义突变.结论:EGFR基因的表达与结直肠癌的分化程度及远处转移有关,可辅助判断患者的预后和转移情况以及指导临床治疗.EGFR基因在结直肠癌的突变可能为低频率事件.

人胃癌组织淋巴管新生的超微结构观察

目的:研究人胃癌组织微淋巴管的超微结构特点,探讨胃癌淋巴转移机制.方法:取人胃癌中心区、周边区及正常区组织块,常规固定,树脂包埋,半薄切片,光镜下定位,检出淋巴管经超薄切片,透射电镜观察.结果:人胃癌中心区未见淋巴管;胃癌周边区较正常区微淋巴管增多分别为(3.20±1.152)个和(2.10±0.968)个,t=3.270, P=0.002,管腔较小分别为(204.83±103.71) μm 2和(1 521.48±794.66) μm 2,t=-5.315,P=0.000,开放连接增多(23/59个和4/66个),χ 2=12.895,P=0.000,淋巴管破坏增多(38.80%和4.76%),χ 2 = 15.674, P=0.000;淋巴转移组胃癌周边区比无淋巴转移组胃癌周边区淋巴管多分别为(3.50±1.225)个和(2.50±0.548)个,t=2.523,P=0.021,被破坏的淋巴管多(46.15%和13.33%),χ 2=5.281,P=0.022,开放连接/非开方连接数差异无统计学意义,χ 2=0.217,P=0.641.结论:人胃癌周边区存在淋巴管新生;胃癌细胞进入淋巴管的主要途径可能是胃癌周边区被破坏的淋巴管.

大肠癌组织COX-2和Ki-67及MVD表达与肝转移相关性的研究

目的:研究COX-2、Ki-67和微血管密度(MVD)在大肠癌组织中的表达及其相互关系,探讨影响大肠癌肝转移的因素.方法:回顾性分析56例大肠癌肝转移病例的临床病理特征,并取56例无肝转移病例作对照.用免疫组织化学方法检测大肠癌标本中COX-2、Ki-67的表达和MVD,分析三者之间及其与临床病理因素的相关性.用单因素和多因素分析研究影响大肠癌肝转移的相关因素.结果:本组大肠癌COX-2蛋白阳性率为91.1%,Ki-67 LI为(44.1±15.0)%,MVD平均为(42.1±9.5)/高倍视野.大肠癌组织中COX-2、Ki-67 LI和MVD相互之间具有极强的相关性,并且三者都与肿瘤的Duke分期和肝转移密切相关.多因素Logistic回归分析发现,Duke分期、浸润深度、腹水、COX-2表达和MVD是大肠癌肝转移重要的5个影响因素.结论:Duke分期、浸润深度、腹水、COX-2表达和MVD是大肠癌肝转移的5个独立影响因素,常规检测临床和生化指标有助于早期发现大肠癌肝转移.

生长因子及其受体和COX-2过表达对结直肠癌转移及预后影响的探讨

目的:探讨生长因子及受体的表达情况及异常表达对CRC淋巴结转移和预后的影响.方法:收集1997～1998年95例CRC原发灶、癌旁组织和转移淋巴结的石蜡标本,用组织阵列仪制备组织芯片;对组织芯片进行免疫组化染色,评估不同组织中EGF、EGFR、VEGF和COX-2的表达情况.用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析.结果:EGFR和VEGF在A/B期结直肠癌组织内的表达阳性率分别为70.2%和65.5%,明显高于癌旁组织中的表达阳性率41.9%和35.9%,差异均有统计学意义,P值分别为0.005,和0.005;EGFR和VEGF在结直肠癌原发灶和转移淋巴结表达的阳性率分别为72.4%、92.9%和63.9%、93.3%,差异均有统计学意义,P值分别为0.039和0.042.Duke A、B期患者中, EGF和EGFR蛋白阳性组的5年复发转移率分别为38.7%和27.5%,显著高于阴性组的5年复发转移率12.5%和11.8%,差异均有统计学意义,P值分别为0.030和0.047. Duke C期患者中, COX-2蛋白和VEGF蛋白阳性组的5年复发转移率分别为57.1%和62.5%,与阴性组的12.5%和25.0%差异也有统计学意义,P值分别为0.031和0.049.结论:组织芯片结合免疫组化方法,可以大规模、快速、高效地检测肿瘤标志;EGF、EGFR、VEGF和COX-2与大肠癌的进展和淋巴结转移有关,可作为预测肿瘤预后的指标.

HPV感染和FHIT基因mRNA表达与非吸烟女性肺癌相关性的研究

目的:探讨HPV感染、FHIT基因mRNA表达与非吸烟女性肺癌的相关性,以及HPV感染对FHIT基因表达的影响.方法:采用病例对照研究方法,应用PCR技术检测HPV-DNA,相关序列,同时用RT-PCR技术检测FHIT基因mRNA缺失状况.结果:肺癌组织HPV-E6检出率高于对照组织,OR=4.379,高危型HPV感染肺组织中FHIT基因mRNA缺失率较高.结论:高危型HPV感染与女性肺癌的发生有关,HPV感染引发的肺癌可能与基因整合使FHIT基因缺失有关.

HIF-1α基因表达沉默对鼻咽癌组织VEGF和CXCR4表达影响的研究

目的:探讨在乏氧条件下,HIF-1α、VEGF及CXCR4在鼻咽癌细胞中的表达,并探讨HIF-1α与VEGF和CXCR4的关系.方法:利用荧光定量PCR方法检测不同乏氧时相HIF-1α、VEGF及CXCR4 mRNA表达.利用Western bolt检测HIF-1α蛋白表达.构建特异性的HIF-1α慢病毒干扰载体,利用慢病毒感染鼻咽癌细胞,杀稻瘟菌素进行药物筛选,利用荧光定量PCR和Western blot检测干扰效果.利用荧光定量PCR检测HIF-1α表达沉默后,鼻咽癌细胞VEGF和CXCR4的表达变化.结果:在乏氧条件下,鼻咽癌细胞CNE2 HIF-1α mRNA表达稳定,蛋白表达增强,VEGF及CXCR4的mRNA表达均明显增强.利用特异性的HIF-1α慢病毒干扰鼻咽癌细胞CNE2,CNE2细胞中HIF-1α表达降低了81%,说明HIF-1α载体构建成功.HIF-1α表达沉默后,VEGF及CXCR4的表达水平也明显降低.结论:乏氧可以诱导鼻咽癌细胞HIF-1α、VEGF和CXCR4的表达,且VEGF和CXCR4的表达受HIF-1α的表达调控.

氯化镉诱发16HBE细胞恶性转化中hOGG1基因表达和序列变化的研究

目的:探讨氯化镉诱发人支气管上皮(16HBE)细胞系恶性转化过程中hOGG1基因mRNA和蛋白动态变化的规律及其序列变化情况.方法:用反转录-聚合酶链反应(PT-PCR)和免疫组织化学(SP法)检测16HBE细胞、氯化镉恶性转化16HBE细胞系不同阶段(第5、15和35代细胞及成瘤细胞)hOGG1基因mRNA和蛋白的表达情况;用直接测序法分析hOGG1基因第7外显子的序列情况.结果:随着转化代数的增加,hOGG1基因mRNA和蛋白的表达逐渐降低,到第15代细胞后表达明显下降(P＜0.05);hOGG1基因第7外显子第162位点插入一个腺嘌呤A,为移码突变.结论:hOGG1基因水平的下调和突变可能是氯化镉分子致癌的重要机制.

顺铂作用HeLa细胞的蛋白质组学研究

目的:用双向电泳--质谱法分析顺铂作用于人宫颈癌HeLa细胞后蛋白质组的变化.方法:体外培养HeLa细胞,用MTT法观察不同时间、不同浓度顺铂对细胞的增殖抑制作用.加入10 μg/mL顺铂作用于细胞24 h,提取总蛋白,进行双向电泳测定,凝胶考染显色,用ImageMaster 2D Platium 5.0软件对获得的蛋白图谱加以分析,寻找差异表达的蛋白质.切取差异点,胶内酶切后进行MALDI-TO-F-MS分析和数据库搜索,实现对蛋白点的定性鉴定.结果:顺铂可显著抑制HeLa细胞的生长,且具有一定的时效和量效关系.经双向电泳和质谱后,成功鉴定了7个蛋白质,包括原肌球蛋白、肌动蛋白、磷酸丙糖异构酶,磷酸甘油酸激酶和亲环蛋白A等.结论:顺铂可显著抑制HeLa细胞的生长,并引起HeLa细胞蛋白质组的改变,可能与顺铂的抗肿瘤作用有关.

COX-2 mRNA表达与食管癌发生发展关系的研究

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxy-genase-2, COX-2)mRNA的表达与食管癌发生发展的关系.方法:用原位杂交技术检测80例食管癌组织中COX-2 mRNA的表达,并结合肿瘤的病理生物学行为进行分析.结果:80例食管癌组织中COX-2 mRNA阳性表达率为80%(64/80)明显高于正常食管黏膜(0/20),P＜0.01.COX-2 mRNA阳性表达与食管癌的分化程度显著相关,P＜0.05;但与食管癌的TNM分期、浸润深度及有无淋巴结转移无关,P＞0.05.结论:COX-2 mRNA阳性表达与食管癌的发生及其生物学行为密切相关,可作为食管癌早期诊断客观指标.

《中华肿瘤防治杂志》稿约