转化生长因子β-Smad信号通路与结肠癌研究进展

目的:了解转化生长因子B(trans-forming growth factor β,TGF-β)-Smad信号转导通路与结肠癌关系的研究现状.方法:采用关键词途径检索MEDLINE和CHKD期刊全文数据库,以发表时间、英语为限制,对TGF-β-Smad信号转导通路与结肠癌关系的研究状况进行回顾总结.结果:该信号转导通路能调节多种细胞的生长、分化,通路中任何1个环节的变化诸如突变、缺失都会导致细胞的生长、分化失去控制.结肠癌中TGF-β及其受体、Smad蛋白异常表达十分常见,并且与转移、预后相关,表明该通路与结肠癌的发生、发展密切相关.研究提示TGF-β主要从抑制免疫系统、增加血管生成、增加肿瘤细胞与胞外基质相互作用3个方面促进结肠癌的侵袭和转移.结论:TGF-βSmad信号转导通路异常与结肠癌密切相关,可能成为结肠癌防治的新靶点.

胃癌组织MUC黏蛋白表达及其与胃癌分型关系的研究进展

目的:阐述黏蛋白在胃癌中表达变化的临床病理意义,探讨黏蛋白标记的胃癌分型在研究胃癌的生物学行为和发病机制方面的意义.方法:通过Pubmed文献检索系统、万方数据资源系统和维普信息资源系统,选择了43篇研究文献,内容涉及黏蛋白的研究概况,黏蛋白在胃癌中表达的变化以及黏蛋白标记的胃癌分型的新研究进展.结果:黏蛋白MUC1、MUC5AC、MUC6在正常胃黏膜中呈强阳性表达而MUC2则不表达.在正常胃黏膜向肠上皮化生、胃癌演进过程中,MUC1、MUC5AC、MUC6表达呈下调趋势而MUC2表达上调.以黏蛋白为标记可对胃癌进行重新分型,弥补了Lauren分型的不足.结论:黏蛋白MUC质和量的变化可以反映胃上皮细胞癌变的情况.黏蛋白标记的胃癌分型有助于进一步研究胃癌的生物学行为及潜在的分子机制.

RNAi在免疫耐受诱导和终止方面的研究进展

目的:总结国内外RNAi在免疫耐受的诱导和终止方面的研究进展.方法:应用Highwire及CNKI期刊全文数据库检索系统,以RNAi、免疫耐受、移植免疫和肿瘤免疫等为关键词,检索1998～2007近10年相关的文献.文献选择标准:对参考文献进行初选,选择RNA干扰在各方面的应用及其发展近况等文献.纳入标准:l)RNAi在基础及临床研究中的应用进展;2)RNAi在肿瘤基因治疗方面的研究情况;3)RNAi在免疫耐受领域的应用前景;4)RNAi作用机制及其应用的优缺点评价.文献筛选:粗选有120篇关于RNAi方面的文献,根据纳入标准选出约近70篇,后精选30篇文献作为综述参考文献.结果:随着RNA干扰技术的广泛应用,利用RNAi特异性沉默某些基因的表达,诱导机体产生特异性的免疫耐受或抗肿瘤免疫,从而为这两种疾病在基因水平的治疗提供了可能.目前RNAi在体内的具体作用机制仍不十分清楚,投入临床和仍处于研究阶段的RNAi药物远期作用仍不肯定.结论:RNAi在医学各个领域的研究应用颇多,但其作用的准确性,特异性和高效性仍有待进一步探讨.

晚期胃肠道肿瘤时辰化疗的临床观察

为了研究晚期胃肠道癌应用Melodie泵时辰化疗的近期疗效和耐受性,将晚期胃肠道癌患者共64例,应用配对设计,随机分为时辰化疗组和常规化疗组各32例.时辰化疗组:应用Melodie多通道编程输液泵给药.两组中化疗方案和每周期的药物剂量均相同.氟尿嘧啶(5-FU)500mg/(m2·d),醛氢叶酸(CF)130mg/(m2·d),奥沙利铂(L-OHP)130mg/m2.L-OHP给药的浓度高峰时间为16:00,5-FU和CF为4:00.5d为1个周期,休息14d进行下1个周期.常规化疗组:L-HOP 130mg/m2静脉滴入,d1;CF 200mg/m2静脉滴入2h接用5-FU 400mg/m2静脉推注,继以5-FU 1.6g/m2恒速静脉滴入22h,21d为1个周期.化疗>2个周期评定近期疗效及毒副反应.结果:总有效率53.13%(34/64),时辰组65.63%(21/32),常规组40.06%(13/32),疗效差异有统计学意义,P=0.0276.不良反应主要为胃肠道反应、末梢神经炎、骨髓抑制及口腔炎等,时辰化疗组的各种毒副反应均较常规化疗组轻,其中口腔炎的发生率分别为9.37%(3/32)和34.37%(11/32),两组差异有统计学意义,P=0.0133.初步研究结果提示,L-0HP、5-FU和CF3药采用多通道编程输液泵时辰化疗对晚期胃肠道癌的有效率高,耐受性好.

Borrmann Ⅳ型胃癌新辅助化疗疗效观察

目的:对多西他赛联合顺铂(DDP)及5-氟尿嘧啶/亚叶酸钙(5-FU/CF)方案新辅助化疗治疗Borrmann Ⅳ型胃癌的疗效观察.方法:将55例Borrmann Ⅳ型胃癌分为新辅助化疗组(29例)和对照组(26例)两组,新辅助化疗组术前给予多西他赛75 mg/m2,静脉滴入,d1;DDP 30 mg/m2,静脉滴入,d1～d3;5-FU 500 mg/m2,静脉滴入,d1～d5;CF 200 mg/m2于5-FU前30 min静脉推注.每3周为1个周期,共3个周期.观察新辅助化疗后肿瘤原发病灶的缓解情况、手术根治切除率、术后病理缓解率、切缘癌残留和淋巴结转移情况,以及新辅助化疗的毒副反应等,并对两组患者进行随访.结果:29例Borrmann Ⅳ型胃癌经新辅助化疗后⑻临床有效率达58.6%(17/29),病理完全缓解率达6.8%(2/29),临床表现为原发肿瘤缩小,淋巴结转移减少,降低了临床分期.与对照组相比,提高了手术根治切除率,并降低术后切缘癌残留率,提高了手术疗效,从而延长了生存期.毒副反应轻微,未见严重感染和死亡病例.结论:以多西他赛联合DDP及5-FU/CF方案进行Borrmann Ⅳ型胃癌的新辅助化疗,疗效显著,耐受性良好.

热疗联合化疗及放疗对人结肠癌裸鼠移植瘤E-cad与β-cat表达影响的研究

目的:探讨热疗、化疗、放疗、热化疗、热放疗及热放化疗对人结肠癌裸鼠移植瘤上皮细胞黏附因子表达的影响.方法:将人结肠癌细胞株HT-29移植在裸鼠后肢,于实验室模拟大肠癌临床热疗、化疗及放疗方案,对荷瘤裸鼠分别实施热疗、化疗、放疗、热化疗、热放疗及热放化疗.分别于治疗前和治疗后2、4、8、12、24、48和72h,处死裸鼠.利用免疫组化染色观察肿瘤细胞膜、细胞质及细胞核钙黏附蛋白(E-cad)及β-链蛋白(β-cat)表达的形态学变化.结果:治疗后8～72h,6种治疗方法均能不同程度上调人结肠癌细胞株HT-29裸鼠移植瘤中E-cad的表达(P<0.05),而对β-cat表达的影响均不明显,P>0.05;治疗后12～72h,E-cad在热化组、热放组及热放化组的表达明显高于热疗组、化疗组及放疗组.结论:热疗可能通过增强放化疗对人结肠癌细胞株HT-29裸鼠移植瘤中E-cad的表达的改变,发挥对放化疗的增敏作用.

放射诱导的六株细胞系细胞周期和细胞凋亡变化的观察

目的:探讨放射诱导的6株细胞系细胞周期和细胞凋亡的变化特点.方法:正常肝细胞系HL-7702,肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721,肺小细胞癌HCI-H460,肺腺癌A549和宫颈癌细胞系Hela常规培养48 h后接受4 Gy X射线照射;收获受照前(0h)和受照后6、12、24、36和48h的细胞,采用流式细胞术(FCM)检测各细胞系细胞凋亡和细胞周期.结果:在4 Gy X线照射前,SMMC-7721和HCI-H460细胞凋亡率明显高于其他4株细胞系,两者差异有统计学意义(t=20.98,P<0.005);在照射后12 h,与照射前相比6株细胞系细胞凋亡率均有显著增加(t=5.27,P<0.05),SMMC-7721、HCI-H460和A549同时伴有S期和G2～M期细胞比率的降低;在照射后36h HCI-H460出现第2个细胞凋亡峰,伴有极低比例的S期和G2～M期细胞;HepG2在照射后12h、HL-7702和Hela在照射后24h均有明显的G2/M期阻滞.结论:4 Gy X线诱导的细胞凋亡主要发生在射线照射后12～36h,6株细胞系可能均发生了"有丝分裂前凋亡";每株细胞还呈现了不同的细胞凋亡和细胞周期变化特点,具有组织细胞特异性.

胃癌弱差异基因表达谱中DNMT3A基因表达和生物学作用的探讨

目的:明确胃癌差异基因表达谱中弱差异表达基因的敏感性和特异性;探讨胃癌弱差异表达基因DNMT3A在胃癌发生发展中的生物学作用和意义.方法:利用半定量RT/PCR方法验证了胃癌弱差异基因表达谱中DNMT3A基因的表达水平,并利用GoMiner软件研究了DNMT3A的生物学功能.结果:DNMT3A基因在胃癌组织中比癌旁正常组织表达微弱升高,基因表达变化倍数为1.13,与基因芯片的表达变化(1.10)一致GoMiner软件功能注释表明DNMT3A在甲基化和转录调控等方面具有重要生物学功能.结论:可以在实验室中利用分子生物学方法验证胃癌差异基因表达谱中的弱差异表达基因;弱差异表达基因DNMT3A的异常表达与多种肿瘤的发生有密切的联系,并且可能在胃癌的发生发展中具有重要的生物学作用.

化疗对骨肉瘤αv和β3整合素表达影响的研究

目的:探讨化疗对骨肉瘤αv、β3整合素表达的影响.方法:免疫组化法检测20例化疗前和31例化疗后骨肉瘤αv、β3整合素的表达情况.结果:αv、β3整合素在骨肉瘤细胞呈强阳性表达,而正常骨细胞均呈阴性表达.P=0.000;化疗后两者表达明显下降,P=0.000.秩和检验表明,化疗后αv整合素与肿瘤Enneking分期(P=0.014)、侵袭(P=0.007)、复发(P=0.021)明显相关;β3整合素表达与肿瘤复发明显相关,P=0.003.多因素分析显示,化疗后αv整合素表达水平是影响骨肉瘤侵袭独立因素,化疗后β3整合素是影响骨肉瘤复发独立因素.结论:αv、β3整合素可能成为骨肉瘤诊断的辅助指标;化疗可能通过下调骨肉瘤细胞αv、β3整合素表达而改变其相应的生物学活性;αv、β3整合素可能分别是影响骨肉瘤侵袭、复发的独立因素;αv、β3整合素可能作为判断骨肉瘤化疗预后的指标及化疗药物作用的靶分子.

胃癌组织Cox-2和MMP-2与MMP-9蛋白表达及其临床意义的研究

目的:探讨Cox-2、MMP-2及MMP-9蛋白在胃癌中表达、相互关系及临床意义.方法:采用免疫组化SP法检测96例胃癌组织及癌旁正常组织Cox-2、MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果:胃癌组织中Cox-2、MMP-2及MMP-9阳性表达率分别为74.0%(71/96)、72.9%(70.96)及66.7%(64/96),皆明显高于癌旁正常组织(Cox-2、MMP-2及MMP-9阳性表达率分别为32.3%、30.2%和31.3%),P<0.001;三者的表达都与肿瘤发生部位、肿瘤浸润深度、临床分期及淋巴结转移呈明显的正相关,P<0.05,而与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度无显著相关性,P>0.05;Cox-2与MMP-2、MMP-9蛋白表达呈明显的正相关性.结论:胃癌组织中存在Cox-2、MMP-2及MMP-9蛋白的高表达,Cox-2与MMP-2和MMP-9蛋白表达强度具有等级相关性.Cox-2蛋白可通过诱导MMP-2和MMP-9蛋白的表达上调,增加胃癌细胞的侵袭力,从而成为其促进胃癌浸润和转移的途径之一.

大肠癌组织EGFR和MMP-7表达与淋巴结和肝转移相关性的探讨

目的:探讨EGFR、MMP-7蛋白表达与大肠癌淋巴结和肝转移的关系.方法:应用免疫组化技术检测60例大肠癌(其中淋巴结转移33例,肝转移30例)组织中EGFR、MMP-7蛋白的表达,分析其表达水平的差异性.结果:EGFR、MMP-7的表达与TNM分期、淋巴结转移和肝转移差异有统计学意义,P<0.05. EGFR与MMP-7的高表达成正相关.结论:EGFR和MMP-7的过度表达在大肠癌的发病过程中具有协同效应.EGFR和MMP.7的联合检测对评估大肠癌淋巴结转移及肝转移有重要意义.

结肠癌肝转移与CXCR1/CXCL8信号传导通路关系的研究

目的:探讨趋化因子受体与配体(CXCR1/CXCL8)信号通路在结肠癌肝转移中的作用.方法:分析高分化、非转移性结肠癌细胞株(colon205)与低分化、肝转移结肠癌细胞株(lovo)、结肠癌原发灶及肝转移灶、正常结肠黏膜及肝组织中CXCR1的表达;分析CXCR1/CXCL8对瘤细胞增殖、侵袭能力、细胞骨架及迁移的影响.结果:正常结肠黏膜、高分化与低分化结肠腺癌中CXCR1的表达率分别为2.214%、6.652%和5.198%;正常肝组织、肝转移灶CXCR1表达率为2.728%和22.62%;lovo、colon205胞膜CXCR1表达率为3.15%和6.67%;CX-CL8刺激48h,胞膜CXCR1表达率分别为50.45%和4.93%;CXCL8刺激前、后lovo细胞的增殖能力分别为3.27%和24.17%;CXCL8刺激后,lovo细胞F-actin表现出解聚-聚合状态的改变,聚合程度呈时间性递增,高聚合状态表现在刺激后的72h;CXCR1/CXCL8作用前、后的lovo细胞侵袭数分别为6.39±1.8和74.2±13.28(P<0.01),趋化运动细胞数分别为18.53±5.59和89.67±6.16(P<0.05).结论:在CXCL8作用下,肝转移瘤细胞高表达CXCR1;CXCR1/CXCL8促进肝转移瘤细胞的生长、增殖,诱导肝转移性结肠癌细胞的定向迁移,CXCR1/CXCL8信号通路在结肠癌归巢性迁移过程中发挥作用.

乳腺癌组织瘦素和瘦素受体表达及其临床意义的研究

目的:检测Leptin和Ob-R在乳腺癌中的表达,并探讨其临床意义.方法:用免疫组化的方法检测60例乳腺癌、30例乳腺良性病变及30例癌旁正常乳腺组织中Leptin和0b-R的表达.结果:乳腺癌Leptin和Ob-R表达与癌旁乳腺组织相比差异有统计学意义(P1=0.000;P2=0.000),乳腺癌Leptin和Ob-R表达与乳腺良性病变相比差异亦有统计学意义(P1=0.000;P2=0.000),而乳腺良性病变和癌旁乳腺组织相比差异均无统计学意义(P1=0.169;P2=0.545);乳腺癌中有淋巴结转移组Leptin和Ob-R表达与无淋巴结转移组相比,差异均有统计学意义(P=0.036);乳腺癌不同TNM分期与Leptin和Ob-R表达均呈正相关(P J=0.021,γ1=0.297;P2=0.007,γ2=0.342).结论:瘦素可以作为诊断乳腺癌、判断乳腺癌分期和预后的辅助手段,能够为乳腺癌治疗提供新的思路.

结直肠癌组织IGF-ⅠR和IGF-Ⅰ与IGF-Ⅱ表达及其意义的研究

目的:通过检测结直肠癌中IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的表达情况,分析IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的表达与临床病理因素之间的关系及三者表达的相关性,探讨IGF系统在结直肠癌发生发展中的作用.方法:应用免疫组织化学SP法检测104例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、正常组织IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ单一和联合表达的情况.结果:1)IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在癌组织中表达的阳性率均显著高于癌旁组织和正常组织,P<0.05,IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ在癌旁和正常组织中表达的阳性率差异无统计学意义,P>0.05,IGF-Ⅰ在癌旁和正常组织中表达的阳性率的差异具有统计学意义.2)IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小,分化程度、Duke分期、TNM分期、原发肿瘤浸润深度T、局部淋巴结转移情况N等均无明显相关,而IGF-ⅠR的表达与肿瘤部位的关系具有统计学意义.3)IGF-ⅠR与IGF-Ⅰ在癌组织中的表达无明显相关,P>0.05,IGF-ⅠR与IGF-Ⅱ在癌组织中的表达的相关性处于临界状态(P=0.05).结论:IGF系统在结直肠癌的发生发展中的作用不明显,有待于进一步深入研究.

S100分子结合域缺失对钙周期结合蛋白生物学功能影响的研究

目的:探讨S100结合域的缺失对钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)生物学功能的影响.方法:构建野生型CacyBP/SIP及S100结合域截短突变的真核表达载体(分别为pFLAG-CacyBP和pFLAG-△S100),脂质体法转染至人胃癌细胞系MKN45,四唑盐(MTT)比色法观察细胞生长,平板克隆实验及裸鼠成瘤实验检测转染细胞的体外和体内成瘤性.结果:成功构建了野生型CacyBP/SIP及△S100截短突变的真核表达载体并转染MKN45细胞.野生型CacyBP/SIP及△S100截短突变的CacyBP/SIP均能抑制胃癌细胞MKN45的增殖,使MKN45细胞的体外及体内成瘤性降低,但是截短突变CacyBP/SIP抑制胃癌细胞增殖及成瘤性的作用更强.结论:CacyBP/SIP能够抑制胃癌细胞的恶性表型,而阻断S100分子与CacyBP/SIP的结合能增强CacyBP/SIP这种抑制作用.

脑胶质瘤分子病因相关组织芯片CyclinB1表达及其临床意义的研究

目的:探讨CyclinB1在针对胶质瘤发生、发展相关组织芯片中的表达及意义.方法:构建针对人脑胶质瘤发生、发展分子机制研究的组织芯片,应用免疫组化EnVision法检测CyclinB1在组织芯片标本中的表达,分析其表达率及表达强度.结果:CyclinB1染色阳性表达主要位于细胞核.在71例人脑胶质瘤组织中,CyclinB1阳性表达率为52.1%,与正常成人脑组织(18.2%)比较,差异有统计学意义(x2=5.15,P<0.05).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级人脑胶质瘤组织CyclinB1阳性表达率分别为11.2%、44.0%、65.2%和71.4%;病理级别与CyclinB1的阳性表达率呈正相关(r=0.959,P<0.05).两种胶质瘤细胞系多细胞球体SHG44细胞和GBM细胞的CyclinB1阳性表达率高于神经干细胞、脑肿瘤干细胞(x2=9.60,P<0.01);人胚胎脑组织、裸鼠移植瘤和裸鼠骨髓中也呈过表达.结论:CyclinB1的表达强度能客观反映被测细胞的增殖活性,处于非增殖状态的干细胞低表达或不表达.它的高表达与肿瘤恶性程度相一致.

hTERT基因启动子调控HSV-tk/GCV系统对HepG2细胞杀伤作用的实验研究

目的:研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的人单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦(HSV-tk/GCV)系统对肝癌细胞体外杀伤作用.方法:以pGL3-hT-ERT/tk为基础,构建pGL3-hTERT/lue、pGL3-basie/tk、pGL3-control/tk等真核表达载体,分别将其用脂质体法转染HepG2肝癌细胞和正常肝细胞L02,荧光显微镜观察转染效果,给予前药GCV,用原位末端标记(TUNEL)法、流式细胞仪检测hTERT调控的HSV-tk/GCV系统对两种细胞的杀伤作用,Western blot检测细胞周期素Cyclin D1、CDK2、p21蛋白表达.结果:hTERT启动子调控的HSV-tk/GCV系统对肝癌细胞有明显的杀伤作用,使41.85%的细胞凋亡;而对正常细胞作用不明显,Western也显示Cyclin D1、CDK2蛋白表达下降而p21升高.结论:hTERT启动子调控的tk基因治疗是一种具有肿瘤特异性的治疗方法,有望解决肿瘤基因治疗中的特异性杀伤及降低毒副反应等问题.

基于HPV16肿瘤基因治疗载体的构建与鉴定

目的:构建基于人乳头状瘤病毒16型(human papilloma virus type-16, HPV16)的肿瘤基因治疗栽体,并鉴定其对Hela肿瘤细胞的转染活性.方法:利用昆虫杆状病毒表达系统表达病毒蛋白,在体外变性与复性过程中用病毒蛋白包装绿色荧光表达质粒EGFP形成治疗载体.透射电镜观察治疗栽体的结构,并转染Hela肿瘤细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染效率.结果:透射电镜观察证实病毒蛋白可自我组装成病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)的结构,在转染Hela肿瘤细胞后,荧光显微镜和流式细胞仪成功检测到荧光的表达.结论:基于HPV16的新型肿瘤基因治疗载体能成功转染Hela肿瘤细胞,为肿瘤的基因治疗策略提供了理想的工具.

肿瘤复发对肠癌患者心理状态影响的观察

目的:评估根治术后发生肿瘤复发的肠癌患者的心理反应状况,为进一步探讨适合国人的中晚期肿瘤患者心理干预方案提供依据.方法:选择2003-01～2006-06在上海市长海医院肛肠外科确诊并随后于该院接受手术治疗的大肠癌患者为观察对象.试验组(肿瘤复发组)纳入160例患者,对照组(同时期肠癌术后未发现复发的患者)纳入167例患者.标准问卷有焦虑自评量表SAS、抑郁自评量表SDS和自编症状困扰自评量表10项问卷.采用SPSS 10.0统计学软件进行统计.结果:问卷收回有效率100%,均进入统计分析.两组患者的焦虑、抑郁评分却均高于中国人常模.试验组焦虑、抑郁评分在各个时段(复发确诊时、确诊后1、3和6个月)均高于对照组,差异有统计学意义,P<0.05;试验组患者有7项(睡眠障碍、食欲不振、体质量减轻、头痛、腹痛、疲倦和腹胀)测评项目评分显著高于对照组.差异有统计学意义,P<0.05;另外3项(便血、便秘和腹泻)与对照组相比,差异无统计学意义,P>0.05.讨论:肿瘤复发是一种强烈的心理刺激,可诱使肠癌患者产生激烈的心理应激反应并随之出现躯体化症状.在临床工作中应对此给予高度重视并将心理评估和干预贯穿于整个肿瘤的诊治过程中,以使患者能保持稳定、积极的心理状态配合治疗.

《中华肿瘤防治杂志》稿约

直肠肿瘤局部切除技术的现状

随着结直肠外科的发展,特别是吻合器的出现使许多医生可以实施低位盆腔吻合术或超低位吻合术,而且正成为直肠癌治疗的金标准,从而达到全直肠系膜(TME)切除的要求.

卡培他滨联合康莱特治疗老年晚期胃癌近期疗效观察

卡培他滨(capecitabine)是治疗胃肠恶性肿瘤疗效较好且不良反应较轻的新型化疗药物[1],广西柳州市人民医院肿瘤外科采用卡培他滨联合康莱特方案治疗老年晚期胃癌患者29例,取得了较好的疗效,结果总结报道如下.