第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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精子相关抗原6基因以非P53依赖方式促进TRAIL诱导的骨髓增生异常综合征细胞凋亡
目的 研究精子相关抗原6(sperm-associated antigen 6,SPAG6)基因是否以P53依赖方式促进TRAIL诱导的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)细胞凋亡.方法 通过P53kdRNA慢病毒转染人结肠癌细胞株HCT116筛选P53基因沉默的佳靶点,利用筛选出来的佳靶点序列转染SKM-1细胞;加入嘌呤霉素提高转染效率,RT-PCR及Western blot检验P53基因的干扰效果,构建SKM-1 P53kd细胞模型.用SPAG6kd RNA慢病毒载体转染SKM-1和SKM-1 P53kd细胞,RT-PCR及Western blot验证.用CCK-8法检测重组人可溶性TRAIL蛋白(rTRAIL)对SKM-1细胞的适宜作用浓度.Western blot检测rTRAIL处理后SKM-1和SKM-1 P53kd细胞株中Caspase-8、cleaved-PARP、PARP的表达水平.结果 构建了SKM-1 P53kd细胞模型,转染率在90％以上,P53基因在mRNA和蛋白表达水平较对照组均显著降低(P＜0.01).SPAG6kd RNA慢病毒载体成功感染SKM-1细胞和SKM-1 P53kd细胞,转染率均在80％以上,SPAG6基因表达较对照组明显降低(P＜0.01).随着rTRAIL浓度的增加,细胞生长逐渐被抑制,30 ng/mL TRAIL诱导的细胞凋亡与对照组差异没有统计学意义,100 ng/mL和300 ng/mL TRAIL显著诱导SPAG6kd细胞凋亡(P＜0.05),而P53基因沉默与否并没有影响该结果,rTRAIL处理后细胞凋亡标志分子明显激活或水平升高,细胞中Caspase-8、cleaved-PARP、PARP的表达水平在SKM-1和SKM-1 P53kd细胞中差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SPAG6基因以非P53依赖方式促进TRAIL诱导的MDS细胞凋亡.
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肾上腺髓质素在幽门螺杆菌感染中的表达调控及其功能的初步研究
目的 探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)在幽门螺杆菌感染中的表达调控及其对CD3+T细胞增殖的影响.方法 建立幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染C57小鼠及胃上皮细胞模型,运用定量PCR、免疫组织化学染色和Western blot检测ADM的表达;并在细胞模型中探讨H.pylori感染诱导ADM上调的机制;利用ADM刺激CD3+T细胞,检测其对T细胞增殖的影响.结果 H.pylori感染可诱导胃上皮细胞AGS和HGC-27上调ADM的表达,并具有时间和感染菌量依赖性(P＜0.05);PI3 K/AKT信号通路阻断可显著抑制H.pylori感染诱导的ADM上调表达(P＜0.05);相对于未感染组,H.pylori感染小鼠胃组织中的ADM水平也显著增高;而相对于野生型全毒株,敲除cagA基因后,H.pylori感染诱导ADM上调的能力则显著下降(P ＜0.05);ADM能够以剂量依赖的方式诱导CD3+T细胞的增殖并促进IFN-y的表达(P＜0.05).结论 幽门螺杆菌感染可经PI3K/AKT信号诱导肾上腺髓质素的表达上调,后者则可能通过影响CD3+T细胞的增殖和分化而发挥免疫调节作用.
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软骨细胞SHOX基因过/低表达的差异miRNA筛选与验证
目的 建立软骨细胞(HC-α)SHOX基因过/低表达模型,筛选与未处理组差异表达miRNA,并予以验证.方法 通过慢病毒过/低表达SHOX基因,用miRNA芯片筛选差异表达的miRNA.结果 SHOX过表达组与对照组有425条差异表达的miRNA;SHOX低表达组与对照组有379条差异表达的miRNA;按照表达水平差异相反的标准筛选差异miRNA,其中6条miRNA在处理组中表达水平差异相反.实时荧光定量PCR对6条miRNA(miR-126、miR-192、miR-370、miR-432、miR-3162、miR-4745)进行验证,miR-126在过表达组明显上调(P＜0.05),在低表达组明显下调(P＜0.05).结论 miR-126参与SHOX介导的软骨细胞凋亡过程.
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Kv1.1及Kv1.3通道亚型对小鼠肠系膜微细动脉的调节作用
目的 研究Kv1.1及Kv1.3通道亚型对小鼠肠系膜微细血管的调节作用.方法 以健康6～8周C57BL/6雄性小鼠肠系膜微细动脉作为研究对象,应用丹麦DMT520A离体微血管张力测定系统记录血管张力变化.应用广谱电压依赖性钾通道(Kv)阻断剂4-AP,Kv1.3通道选择性阻断剂PAP-1,Kv1.1通道选择性阻断剂TEA分别作用于静息状态,KCl及NE预收缩动脉,记录血管张力变化情况.应用Kv通道阻断剂4-AP,Kv1.3通道选择性阻断剂PAP-1作用于血管,观察Kv及Kv1.3通道在0 mmol/L Ca2+及2 mmol/L Ca2+ K-H液中对NE收缩曲线的作用.结果 Kv通道阻断剂4-AP可引起静息状态的血管收缩,并进一步收缩KCl预收缩的血管,但浓度依赖性舒张NE预收缩的动脉,并且与对照组相比,4-AP能明显抑制NE在0 mmol/L Ca2+液中所致的血管收缩[(3.45-±0.24)mN vs(0.11±0.02) mN,P＜0.01].Kv1.3通道选择性阻断剂PAP-1未能收缩静息状态的血管,但可使KCl预收缩的血管发生轻微舒张反应,却明显舒张NE预收缩的动脉,而且PAP-1既可抑制NE在0 mmol/L Ca2+ K-H液中所致的血管收缩[对照组vs PAP-1组:(4.28 ±0.53)mN vs(2.75 ±0.49)mN,P＜0.05],又可抑制在2 mmol/L Ca2+液中的收缩张力[对照组vsPAP-1组:(7.08 ±0.58)mN vs(5.90 ±0.80)mN,P＜0.05].Kv1.1通道选择性阻断剂TEA可引起静息状态的血管收缩,但在0 mmol/L Ca2+液中该作用消失,同时对KCl或NE预收缩的动脉均无明显作用.结论 Kv通道可调节小鼠肠系膜动脉的舒缩反应.其中Kv1.1通道主要发挥血管收缩调节作用,可能与促进血管平滑肌细胞外钙内流有关,而Kv1.3通道主要发挥血管舒张调节作用,可能同时抑制平滑肌细胞内钙释放和细胞外钙内流.
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紫檀芪调节PLIN5/FGF21通路抑制棕榈酸诱导的L6肌管细胞脂质沉积
目的 探讨紫檀芪(pterostilbene,PTT)对棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导的大鼠L6肌管细胞脂质沉积的影响及其相关分子机制.方法 大鼠L6成肌细胞诱导分化为肌管后,采用PA处理建立骨骼肌细胞脂质沉积模型并进行PTT干预.CCK-8法检测细胞活力,油红O染色法观察细胞内脂滴形成,GPO-PAP酶法检测细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)含量,荧光法检测细胞摄取葡萄糖能力,Western blot检测围脂滴蛋白5(perlipin 5,Plin5)、成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)的蛋白表达.Plin5基因沉默采用siRNA转染.结果 PTT(10 ～ 80 μmol/L)对L6肌管细胞活力无明显影响(P＞0.05);PA可诱导L6肌管细胞内脂质沉积、TG含量升高,并显著降低葡萄糖摄取能力(P＜0.05),同时明显下调Plin5和FGF21蛋白表达;PTT干预可明显抑制PA诱导的上述变化,而Plin5基因沉默后,PTT对PA诱导的FGF21表达下降、TG含量增加及葡萄糖摄取能力降低的抑制作用被显著削弱(P＜0.05).结论 PTT可通过调节Plin5/FGF21信号通路抑制棕榈酸诱导的L6肌管细胞脂质沉积及胰岛素抵抗.
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TCEAL7基因对结直肠癌Caco2细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响
目的 探讨TCEAL7[transcription elongation factor A(SⅡ)like 7]对结直肠癌细胞生物学功能的影响及可能的作用机制.方法 应用RT-PCR检测TCEAL7在结直肠癌细胞Caco2、HT29、HCT116、SW480以及正常结直肠组织中的表达水平,筛选出低表达的细胞,将重组质粒pEZ-M98-TCEAL7及空质粒pEZ-M98通过脂质体Lipofectamine 2000转染Caco2细胞,应用RT-PCR及Western blot分别检测TCEAL7的mRNA以及蛋白表达水平;CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖活力,Transwell检测细胞迁移及侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测NF-κB及其下游靶基因蛋白表达的变化情况.结果 TCEAL7在结直肠癌细胞Caco2、HT29、HCT116、SW480中的mRNA表达量分别为(0.19 ±0.02)、(0.25±0.03)、(0.30±0.03)、(0.28±0.04),与正常结直肠组织(1.03±0.03)、(1.06 ±0.07)相比明显下降(P＜0.01).Caco2细胞转染组TCEAL7 mRNA和蛋白表达量分别为(1.08 ±0.13)、(1.01 ±0.15),均明显高于对照组[(0.43 ±0.20)、(0.53±0.10),P＜0.01].与对照组相比,转染组Caco2细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显降低(P＜0.01),细胞凋亡增加(P＜0.01),NF-κB及其下游靶基因蛋白表达改变(P＜0.01).结论 TCEAL7在结直肠癌细胞中为低表达,过表达TCEAL7能抑制Caco2细胞增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡,可能与NF-κB信号通路有关.
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过表达TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的影响
目的 通过TPX2过表达慢病毒载体在人宫颈癌HeLa细胞过表达TPX2基因,在体外研究TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的作用及其相关机制.方法 构建TPX2过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)及阴性对照(LV11-NC),选取稳定感染过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)的HeLa细胞作为过表达组,将稳定感染(LV11-NC)的HeLa细胞作为阴性对照组,未感染病毒的人宫颈癌HeLa细胞作为空白对照组(CON).采用Transwell基底膜侵袭实验测定各组细胞的侵袭能力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞凋亡及侵袭相关蛋白质Bcl-2、Bax、Caspase-3、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)及nm23-H1的表达.结果 成功构建TPX2过表达慢病毒载体(LV 11-TPX2),可有效过表达TPX2 mRNA及蛋白质.与对照组比较,TPX2过表达组的HeLa细胞凋亡率明显减少(P＜0.05),穿过Transwell小室基底膜细胞明显增加(P＜0.01).LV11-TPX2感染组HeLa细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显上调(P＜0.05),Caspase-3及Bax的表达明显下调(P＜0.05);侵袭相关蛋白质nm23-H1及TIMP-1水平明显下调(P＜0.05),MMP-9水平明显上调(P＜0.05).结论 在宫颈癌细胞过表达TPX2基因后,能抑制细胞凋亡,增强其侵袭能力,可能的机制为在宫颈癌细胞过表达TPX2能诱导凋亡和侵袭相关蛋白Caspase-3、Bax、nm23-H1及TIMP-1水平下调,Bcl-2及MMP-9水平上调.
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PSD-95信号通路介导5-HT1A受体激动剂改善大鼠病理性攻击行为的调控机制
目的 探索突触后致密物-95(postsynaptic density-95,PSD-95)信号通路是否参与并介导5-HT1A受体激动剂对大鼠病理性攻击行为的改善作用及调控机制.方法 将成功构建的24只病理性攻击大鼠按照抽签法分为4组,分别为8-OH-DPAT组、8-OH-DPAT+ZL006组、ZL006组、NaCl组,5-HT1A受体激动剂(8-OH-DPAT)以1 mg/kg每日腹腔注射并持续2周、PSD-5阻断剂(ZL006)以1mg/kg每隔3天腹腔注射并持续2周.分别在给药前、给药1周后及给药2周后用居住-入侵实验测试大鼠病理性攻击行为变化,且每次居住-入侵实验前取大鼠眼眶后静脉血.取前额叶皮层、大鼠海马及下丘脑组织,用Western blot检测各脑区五羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor5-HT1AR)、PSD-95及糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的表达,并采用ELISA试剂盒检测血清糖皮质激素含量.结果 8-OH-DPAT组大鼠攻击总数、攻击持续时间及攻击要害部位比在给药1周及2周后均有明显下降(P＜0.05);8-OH-DPAT+ ZL006组大鼠仅在给药1周后有降低(P＜0.05).Western blot检测结果显示8-OH-DPAT组、8-OH-DPAT+ ZL006组前额叶皮层及海马5-HT1A受体表达均高于其余两组(P＜0.05);8-OH-DPAT组大鼠前额叶皮层及海马PSD-95表达高于其余3组(P＜0.05);且该组海马GR表达低于其余3组(P＜0.05);各组大鼠下丘脑5-HT1AR、PSD-95表达差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA结果显示:给药2周后8-OH-DPAT组血清糖皮质激素浓度有明显上升(P＜0.05),而其余3组在干预前后血清糖皮质激素无明显变化(P＞0.05).结论 PSD-95信号通路参与并介导了5-HT1A受体激动剂(8-OH-DPAT)对大鼠病理性攻击行为的改善作用,可能是通过对血清糖皮质激素的调控而发挥作用.
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全弓置换术后行肾脏替代治疗的危险因素分析及预测
目的 识别全弓置换术后行肾脏替代治疗(renal replacement therapy,RRT)的危险因素.方法 回顾性分析广州军区广州总医院心脏外科中心2007年3月至2017年3月诊断为I型主动脉夹层并行全弓置换的患者258例[男性215例,女性43例,年龄(47.78±8.81)岁].术后肾功能损伤严重需行RRT 46例为RRT组,未行RRT者纳入非RRT组(n=212),回顾围手术期数据,采用单因素分析得出危险因素并纳入Logistic回归明确独立危险因素,并根据ROC曲线下面积对所得危险因素预测的准确性进行判断.结果 RRT组与非RRT组单因素分析可得术前脓毒血症、双侧肾动脉累及、术前血清肌酐、手术时间、体外循环时间、术中红细胞输注量＞ 10 U为全弓置换术后RRT的危险因素,而经Logistic回归分析进一步明确术前血清肌酐(OR:1.018;95％ CI:1.008 ～1.027;P ＜0.001),手术时间(OR:1.034;95％CI:1.005 ～1.064;P=0.020)以及术中红细胞输注＞10 U(OR:3.426;95％CI:1.573 ～7.458;P =0.002)为术后RRT的独立危险因素.ROC曲线分析得出,综合3项危险因素所得的曲线下面积为0.839,95％ CI:0.786 ～0.892,P＜0.001.结论 术前肌酐水平、手术时间以及术中红细胞输注量为全弓置换术后RRT的独立危险因素.
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应用悬垂石膏结合石膏夹板治疗肱骨投弹骨折的疗效
目的 评价应用悬垂石膏结合石膏夹板治疗投弹骨折的临床效果.方法 回顾性分析2010年1月至2016年6月在本科室收治的36例投弹骨折患者,其中合并桡神经轻度损伤3例,双螺旋骨折1例,所有患者入院后即予以悬垂石膏固定,3～4周后改用石膏夹板外固定,石膏固定后允许早期未固定关节进行功能锻炼.结果 患者平均随访12个月,骨折临床愈合时间8～10周,肩、肘关节功能按Rodriguez-Merchan、Mayo评分标准评分,优34例,良2例,总优良率100％.结论 应用悬垂石膏结合石膏夹板治疗投弹骨折的方法简单易行,全程无创操作,可以取得满意的临床效果.
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我院呼吸科鲍曼不动杆菌耐药及流行病学特征分析
目的 探讨呼吸科鲍曼不动杆菌耐药及流行病学特征.方法 收集2015年1-12月陆军军医大学第一附属医院呼吸科院内感染患者各类临床标本分离的69株鲍曼不动杆菌,通过医院电子病历系统获得患者临床特征,采用琼脂平板倍比稀释法检测细菌低抑菌浓度,PCR扩增碳青霉烯酶耐药基因,脉冲场凝胶电泳对鲍曼不动杆菌进行基因分型.结果 呼吸机使用、抗菌药物使用及住院时间是患者感染鲍曼不动杆菌的危险因素(P ＜0.001).除米诺环素外,鲍曼不动杆菌对其他抗菌药物均具有较高的耐药性.所有菌株含有OXA-51基因,51株携带OXA-23基因,13株携带VIM基因,2株携带IMP-4基因.69株鲍曼不动杆菌共分为9个型和19个亚型,其中D型和H型为普遍流行.结论 我院呼吸科鲍曼不动杆菌耐药率较高,具有耐药基因水平传播和小规模暴发流行的特点.
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超声引导下C5和颈浅丛联合阻滞与高位臂丛神经阻滞在锁骨手术中应用效果的随机对照研究
目的 比较超声引导下C5和颈浅丛联合阻滞与高位臂丛神经阻滞在锁骨手术中的应用效果.方法 选择我院2016年2-11月骨科ASA分级Ⅱ～Ⅱ级拟在神经阻滞麻醉下接受锁骨手术的患者58例,按照随机数字表法分为两组进行随机对照研究:C5和颈浅丛联合阻滞组(A组,n=29)与高位臂丛神经阻滞组(B组,n=29).超声引导下穿刺,针尖到达目标位置后,回抽无液体,注入局麻药.记录患者穿刺前(T0)、穿刺成功后10 min(T1)、30 min(T2)心率,平均动脉压;术中剥离骨膜时,手术后1、6h对患者进行VAS评分,记录霍纳综合征并对各组在阻滞成功后进行麻醉效果评价.结果 超声引导下C5和颈浅丛联合阻滞比高位肌间沟阻滞麻醉起效时间更短(P＜0.05),阻滞维持时间更长(P＜0.05),运动神经阻滞概率较低(P＜0.05).霍纳征发生率较高位臂丛神经阻滞组低(P＜0.05).剥离骨膜时及术后1、6h高位臂丛神经阻患者VAS评分明显高于C5和颈浅丛联合阻滞组(P＜0.05).术中芬太尼用量及术后30 min对患者肺功能影响均较小(P＜0.05),患者感觉比较满意(P＜0.05).结论 锁骨骨折手术应用超声引导下C5和颈浅丛联合阻滞麻醉优于高位臂丛神经阻滞麻醉.
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10137例胃息肉的临床及病理特征分析
目的 分析重庆地区胃息肉的临床及病理特征.方法 回顾性分析西南医院消化内镜中心数据库2007年1月至2016年12月检出的10 137例胃息肉患者的内镜报告及临床资料.结果 10年间胃息肉的病理谱发生了显著的变化,增生性息肉所占比例由66.39％下降到43.05％(P＜0.001),而胃底腺息肉由25.04％上升到48.47％ (P ＜0.001);H.pylori感染率由57.78％下降到37.42％(P＜0.05);异型增生发生率由3.79％下降到0.90％ (P ＜0.001);高级别上皮内瘤变(high-grade intraepithelial neoplasia,HIN)发生率由1.81％下降到0.56％ (P ＜0.01).增生性胃息肉所占比例随着年龄增加而呈下降的趋势,由≤30岁组的73.62％下降到＞70岁组的48.69％ (P ＜0.001);腺瘤性息肉检出率随着年龄的增加而上升,由31 ～ 40岁组的0.34％上升到＞70岁组的6.28％(P＜0.001);异型增生和HIN在60岁以上人群中发生率分别是不超过60岁人群的3.89倍和4.75倍(P＜0.001).反流性食管炎发生率在胃底腺组(6.86％)明显高于非胃底腺组(3.54％)(P＜0.001);胃底腺息肉组中H.pylori感染率(28.48％)明显低于非胃底腺息肉组(45.30％) (P ＜0.001);异型增生发生率在腺瘤性、增生性和胃底腺息肉中分别为60.47％、0.53％和0.20％;HIN发生率在腺瘤性、增生性和胃底腺息肉中分别为47.67％、0.07％和0.03％.胃息肉的数量及位置分布在不同时间段、不同年龄组、不同病理类型间均存在差异.结论 重庆地区10年间增生性胃息肉明显下降,几乎无恶变风险的胃底腺息肉已成为主要的病理类型;临床中是否有必要对所有胃息肉进行切除治疗,应结合息肉病理类型、临床特征及患者意愿后做出差异性的管理策略.
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某综合医院684例医务人员职业暴露案例的回顾分析
目的 分析医务人员职业暴露流行病学特点.方法 收集2012年至2016年684例医务人员职业暴露信息,根据其流行病学特点,分析职业暴露原因,提出防控措施.结果 工作年限不超过5年的工作人员(76.46％)易发生职业暴露;护士(65.64％)是主要的人群;手术室的发生密度高;第3季度和每日10:00-10:59是高发季节和时段.锐器伤(79.39％)是主要的暴露方式;处理治疗后污物、拔针、手术操作是职业暴露的高危操作.随访发现1例HCV感染,感染率为0.15％.结论 护理人员与低年资工作人员是医务人员职业暴露的高危人群,手术室是职业暴露的高发地点,每年第3季度与每日交接班之前时段是职业暴露的高发季节和高发时段.构建安全工作环境,合理分配人力资源、优化工作流程、加强职业安全培训、规范操作过程、建立职业暴露“多学科协作(multidisciplinary-teamwork,MDT)”快速反应机制或可预防职业暴露发生.
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重庆市新确证HIV-1感染者传播性耐药突变研究
目的 通过对重庆市新确证人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者耐药基因型的研究,了解我市耐药病毒株的传播水平.方法 采集2014年5月至2017年6月我院新确证未治疗的HIV-1感染者的外周血175例,分离血浆后,使用一步法RT-PCR和巢式PCR扩增HIV-1 pol区的基因,PCR产物经纯化后测序,将获得的基因序列与美国雅培公司的耐药数据库对比,得出患者对药物的耐药性解释.结果 PCR扩增阳性且测序成功168例,发现16例患者存在耐药突变,传播性耐药突变检出率达9.5％ (16/168),其中2014-2017年的耐药比例分别为7.0％、8.0％、9.1％、12.5％,属中度流行.非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTIs)、核苷类反转录酶抑制剂(NRTIs)和蛋白酶抑制剂(PIs)耐药突变率分别为9.5％、2.4％和0％.V179D/E(7.1％)和M184V(2.4％)分别是出现多的NNRTI和NRTI耐药突变位点.168例感染者中,CRF07_BC亚型是主要流行亚型(42.8％),其次为CRF01_AE (38.7％)和CRF08_BC亚型(10.1％).结论 重庆市新确证未治疗HIV-1感染者耐药比例有逐年上升的趋势,应加强监测,预防原发性耐药和耐药毒株的传播.
