第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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胰岛素样生长因子-1在骨性Ⅲ类错(牙合)畸形中的表达
目的 研究在下颌骨发育过度导致的骨性Ⅲ类错(牙合)畸形患者中,胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的表达,探讨IGF-1基因表达与下颌骨生长的关系.方法 选取骨性Ⅲ类错(牙合)畸形患者27例,骨性Ⅰ类患者(包括个别正常(牙合))27例,应用荧光定量PCR技术和酶联免疫吸附剂测定(ELISA)技术研究下颌骨中IGF-1基因的表达变化.结果 RT-PCR检测结果显示,骨性Ⅲ类错(牙合)畸形组中IGF-1mRNA的表达量为(5.5410±2.044 7)μg/μl,骨性Ⅰ类组中IGF-1mRNA的表达量为(1.2821±0.273 1)μg/μl,2组比较具有统计学差异(P＜0.05).根据1GF-1基因光密度值与浓度关系曲线,得回归系数0.998.ELISA检测结果显示,骨性Ⅲ类错(牙合)畸形组中IGF-1蛋白浓度为(84.1259±29.294 7) ng/L,骨性Ⅰ类组中IGF-1蛋白浓度为(22.406 4±4.9312) ng/L,2组相比具有显著差异(P＜0.05).结论 下颌骨生长量越大,IGF-1基因mRNA和蛋白表达越高.
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载脂蛋白E亚型通过细胞外信号调节激酶途径影响轴突生长锥的生长
目的 观察载脂蛋白E( apolipoprotein E,ApoE)各个亚型对神经元轴突生长锥的影响并探索其机制.方法 体外培养小鼠皮质神经块,加入重组人类ApoE到神经块培养基中,免疫荧光和Western blot检测重组人类ApoE能否进入轴突及其生长锥;鬼丙环肽染色生长锥观察重组人类ApoE2、3、4对生长锥的影响;加入细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路抑制剂,观察ERK信号通路是否参与ApoE亚型对生长锥的影响.结果 免疫荧光和Western blot显示加入重组人类ApoE后的神经块轴突及其生长锥中ApoE为阳性;加入重组人类ApoE2、3、4组的荧光强度分别为(50.7±19.4)、(58.5±15.4)、(23.4±13.5),其中加入重组人类ApoE4的轴突生长锥荧光强度低于加入重组人类ApoE2、3的生长锥荧光强度(P＜0.05);同时加入重组人类ApoE4和ERK信号通路抑制剂的实验组生长锥荧光强度为(32.8±13.2),而仅加入重组人类ApoE4的实验组生长锥荧光强度为(21.9±6.9),实验组生长锥荧光强度高于对照组(P＜0.05).结论 重组人类ApoE能进入轴突及其生长锥,ApoE4能负性影响生长锥生长,阻断ERK信号途径能抑制ApoE4对生长锥的负面影响.
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华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤的抑制作用
目的 研究华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤的治疗作用.方法 50只SD大鼠按随机分为对照组和实验组,实验组40只大鼠膀胱灌注N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MUN),每3周1次,共4次;于第14周将实验组大鼠随机分为生理盐水组(膀胱灌注生理盐水)、丝裂霉素组(5 mkg)、低浓度华蟾素组(5 mg/kg)及高浓度华蟾素组(20 mg/kg),每周灌注1次,连续灌注5次,计算抑瘤率,TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况.结果 MNU膀胱灌注成功建立膀胱肿瘤动物模型,以膀胱肿瘤质量计算高浓度华蟾素组的抑瘤率为76.7％,高浓度华蟾素组抑瘤率较丝裂霉素组及低浓度华蟾素组高;TUNEL法检测高浓度华蟾素组AI值为(24.21±1.24)％,较其他各组AI值明显增高,提示高浓度华蟾素组凋亡指数高于丝裂霉素及低浓度华蟾素组.结论 华蟾素对膀胱肿瘤有抑制生长、促进凋亡的作用,且高浓度时抑瘤作用及促凋亡作用较强.
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慢性电刺激对成肌分化的C2C12细胞肌型转换的影响
目的 研究钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)在低频复合生理频率慢性电刺激(chronic electrical stimulation with lower physiological frequency,CESLPF)对骨骼肌细胞肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)亚型表达的影响.方法 以体外2％马血清诱导小鼠成肌母细胞C2C12成肌分化为模型.实验分3组:对照组、CsA组和KN93组.对照组为正常分化的细胞;CsA组和KN93组在细胞诱导分化3d后,分别用CaN抑制剂环孢菌素A(CsA,8μmol)、Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶(CaMK)抑制剂KN93(6μmol)单一或联合CESLPF(10 +40 Hz,1.5 h/d,共2d)处理.通过RT-PCR、Western blot检测观察成肌分化过程中肌球蛋白重链亚型的表达水平及其转换情况,采用比色法检测CaN的活性.结果 在成功构建的体外成肌分化模型上发现,CsA和KN93能够抑制C2C12细胞MHC Ⅰ的mRNA及蛋白的表达.与分化对照组MHC Ⅰ mRNA相对表达量(0.79 ±0.04)相比,CsA组(0.62±0.03)和KN93组(0.69±0.05)能够抑制C2C12细胞MHC Ⅰ型纤维的表达(与对照组比P＜0.05);对照组、CsA和KN93处理组MHC Ⅰ蛋白相对水平分别是(0.91±0.05)、(0.36±0.01)和(0.66±0.02).对照组MHCⅡb相对表达量为(0.53±0.01),CsA(0.63±0.02)和KN93 (0.75±0.03)促进MHCⅡb型纤维的表达(与对照组比较,P＜0.05);CESLPF能够逆转上述改变(与对照组比较,P＞0.05).CsA能够抑制CaN的活性表达;CESLPF能够显著提高CaN活性(P＜0.05),但仍显著低于正常水平(P＜0.05).结论 CaN和CaMK是骨骼肌细胞MHCⅡ型向MHC Ⅰ型转变的重要调控酶,CESLPF可能是经CaN通路和非CaN通路联合作用促进肌型转换,该结果为临床应用CESLPF治疗OSAS提供了实验依据.
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Cx43基因干扰对大鼠星形胶质细胞谷氨酸基础释放的影响
目的 构建能有效抑制大鼠星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)连接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因表达的siRNA载体,并检测抑制Cx43表达对星形胶质细胞谷氨酸释放的影响.方法 合成针对大鼠Cx43基因的siRNA寡核苷酸,构建pGCsi.U6.neo.GFP质粒载体.质粒通过电转方法转染原代星形胶质细胞后,用免疫荧光染色及Western blot检测转染干扰质粒对大鼠ASTs Cx43蛋白表达的影响.用谷氨酸ELISA定量试剂盒检测释放至培养基中谷氨酸的浓度,并用DAPI染色进行细胞计数.结果 测序结果显示,Cx43基因的目的片段正确插入载体,并保持正确的读码框.干扰质粒转染ASTs 48 h后与对照组相比,Cx43蛋白表达明显下降(P＜0.05),细胞存活未受影响,而谷氨酸释放明显减少(P＜0.05).结论 成功构建了抑制大鼠Cx43基因表达的siRNA载体,抑制Cx43表达可降低ASTs谷氨酸的基础释放.
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经皮腔内血管成形术治疗糖尿病膝下动脉病变
目的 探讨分析糖尿病膝下动脉狭窄及闭塞病变的特点及腔内治疗方法,总结技术要点,观察经皮腔内血管成形术(percutaneous transluminal angioplasty,PTA)治疗的临床疗效.方法 回顾性研究2008年5月至2011年5月本科收治的糖尿病合并缺血性下肢动脉病变患者67例,共154条动脉施行了PTA.观察技术成功率、疗效及并发症.结果 67例(81条肢体)患者共154条动脉分别行PTA,术后ABI明显提高(P＜0.05),患者症状改善.8条肢体行踝关节上截肢术,保肢率90.1％ (73/81).本组病例技术成功率88.9％ (72/81).术后随访52例,平均15.6(6 ～36)个月,6个月通畅率82.4％,12个月通畅率69.1％.无严重并发症发生.结论 PTA是治疗糖尿病膝下动脉狭窄和闭塞性病变的安全、有效和微创的方法.
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银杏酚酸通过抑制PKD-2活性提高Tca8113细胞对化疗药物的敏感性
目的 探讨蛋白激酶D-2( protein kinase D-2,PKD-2)在银杏酚酸(ginkgolic acid,GA)提高舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113对化疗药物敏感性过程中的作用.方法 通过MTT方法检测GA对Tca8113的增殖抑制及提高Tca8113对化疗药物敏感性;Western blot检测在GA不同作用时间下PKD-2在Tca8113中的表达及磷酸化特性;利用shRNA干扰技术基因沉默Tca8113中的PKD-2基因;利用佛波酯(PMA)诱导Tca8113中的PKD-2高磷酸化;以MTT方法检测经shRNA干扰后的Tca8113和及经PMA诱导后的Tca8113细胞对GA及化疗药物的敏感性.结果 GA抑制Tca8113生长的半数抑制浓度( IC50)为20 mg/L,GA明显提高Tca8113对化疗药物卡铂(CBP)和紫杉醇(PTX)的敏感性,分别提高4.37倍和39.20倍(P＜0.05);在野生型Tca8113中与非磷酸化PKD-2蛋白质表达相比较,GA对Tca8113中磷酸化PKD-2蛋白质的表达呈时间依赖性抑制作用(P＜0.05);经shRNA沉默后的Tca8113细胞建立稳定细胞株,同与GA联合用药作用相似,PKD-2基因沉默后的Tca8113细胞对CBP和PTX的敏感性明显提高,分别提高1.6517倍和1.5016倍(P＜0.05);PMA激活Tca8113中的PKD-2后,Tca8113对CBP和PTX的敏感性明显降低,同时发现GA能明显拮抗PMA作用.结论 GA通过抑制PKD-2活性途径提高Tca8113对化疗药物的敏感.
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外源性硫化氢对大鼠肝纤维化的影响
目的 探讨外源性硫化氢对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的预防作用.方法 将24只Wistar雄性大鼠随机分为3组,每组8只,即正常对照组、模型组、硫化氢(H2S)预防组.H2S预防组除腹腔注射40％ CCl4外,还给予NaHS腹腔注射,1次/d,至第8周,所有大鼠均被处死,收集大鼠血液,检测肝纤维化指标;取肝组织检测脂质过氧化指标及观察肝脏病理变化;应用RT-PCR和Western blot方法检测肝组织NF-κB的表达.结果 外源性H2S能降低血清HA、LN、PCⅢ及肝组织MDA含量(P＜0.01或P＜0.05),增加肝组织SOD、GSH-Px活性(P＜0.01),减轻肝纤维化程度(P＜0.05),而且能使NF-κB表达明显减少.结论 外源性硫化氢对CC14诱导的大鼠肝纤维化具有保护作用,其机制可能与硫化氢抑制NF-κB表达有关.
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快速检测TOX、CMV IgG抗体的适配子型SPR传感器微阵列的初步构建
目的 初步构建弓形虫(toxoplas ma gondii,TOX)、巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)IgG抗体的适配子型SPR传感器微阵列的快速检测方法.方法 采用SELEX技术筛选TOX、CMV IgG的适配子,并将其整合于SPR生物传感器实时在线分析系统,通过在传感器表面固定探针分子,对溶液中的TOX、CMV IgG进行杂交检测,并进一步研究该检测方法的稳定性与线性检范围.结果 该新型快速检测方法能够实现对TOX、CMV IgG的实时检测,检测系统稳定性良好,八通道间检测时互不影响,线性检测范围为20～300 μmol/L.结论 该实验建立的快速检测方法,具有稳定性好等优点,SPR传感器技术结合适配子技术在临床诊断工作中有着广阔的应用前景.
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核心蛋白聚糖抑制人软骨细胞MMP13基因表达的体外研究
目的 体外原代细胞培养人正常关节软骨细胞,观察不同浓度的外源性核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对软骨细胞基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteases 13,MMP13)表达的影响.方法 采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶结合消化法分离培养人透明软骨细胞,观察体外培养的软骨细胞形态,阿尔新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化鉴定透明软骨细胞,从基因水平(实时定量PCR)检测不同浓度的外源性DCN(对照组:0,A组:2.5μg/ml,B组:25 μg/ml,C组:250 μg/ml)作用下透明软骨细胞对MMP13、X型胶原(Collagen X)表达的影响.结果 ①正常透明软骨细胞培养呈多角型,扁平状,换液培养5d时,细胞呈多边形、星形等,排列紧密呈“铺石板”样.②本法分离培养的原代透明软骨细胞的阿尔新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化均为阳性.③随着外源性DCN浓度(0～250μg/ml)的不断增大,Collagen X的表达明显降低(P＜0.01),且成剂量依赖关系(A:0.78±0.03,B:0.71±0.04,C:0.63±0.01),MMP13的表达则在DCN高浓度组(250 μg/ml)时明显降低(0.85±0.02,P＜0.01).结论 外源性DCN抑制透明软骨细胞的Collagen X的表达且成剂量依赖关系,高浓度(250μg/ml)对MMP13的表达起明显抑制作用.表明外源性DCN可能通过抑制透明软骨细胞肥大化抑制软骨细胞MMP13的表达.
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不同年龄小鼠脱髓鞘动物模型中脑内星形胶质细胞激活情况的观察
目的 观察星形胶质细胞在不同年龄(青壮年及中老年)cuprizone(CPZ)脱髓鞘小鼠模型中的激活特点,探讨星形胶质细胞激活与髓鞘脱失可能存在的内在联系.方法 选取6周龄(青壮年)及9月龄(中老年)雄性C57 BL/6小鼠建立CPZ导致的急性脱髓鞘动物模型,经0.2％ CPZ处理6周后,通过体质量测量及卢卡斯快蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察模型建立是否成功,利用免疫组织化学染色检测实验组(CPZ)和对照组(CTL)小鼠胼胝体(corpus callosum,CC)及皮层( cortex,CTX)区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达变化,并通过Western blot方法进一步检测GFAP及MBP蛋白表达差异.结果 0.2％ CPZ处理6周后,青壮年CPZ小鼠于胼胝体及皮层区GFAP阳性细胞数显著增多(P＜0.01),同时伴有显著的MBP表达下降(P＜0.01);中老年小鼠于胼胝体区GFAP阳性细胞数增多较明显(P＜0.05),并伴有MBP表达明显下降(P＜0.05);GFAP阳性细胞数的增多和MBP表达下降均表现为青壮年组更加明显(P＜0.01).结论 星形胶质细胞的激活于青壮年小鼠更加明显,并与髓鞘损伤呈现出一定的正相关性,星形胶质细胞激活可能是参与髓鞘损伤的重要原因.
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转染ANT1基因诱导颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞凋亡
目的 通过腺病毒载体在体转染大鼠颈总动脉球囊损伤模型,研究过表达腺嘌呤核苷酸转位酶-1( adeninenucleotide translocase 1,ANT1)对血管平滑肌细胞凋亡的影响.方法 将72只雄性SD大鼠随机分为正常组、单纯损伤组、Ad-GFP转染组、Ad-ANT1转染组,每组18只.用携带ANT1的腺病毒载体(Ad-ANT1)或空载体腺病毒载体(Ad-GFP)局部感染大鼠颈总动脉球囊损伤动物模型,在损伤后7、14、28 d,取大鼠损伤侧颈动脉RT-PCR检测ANT1mRNA表达,West-ern blot以及免疫组化检测BAX和Bcl-2表达,TUNEL法原位检测新生内膜及中膜VSMCs凋亡率.结果 Ad-ANT1腺病毒转染后大鼠颈动脉ANT1大量表达,在14 d达到高峰,显著高于Ad-GFP转染组及单纯球囊损伤组(P＜0.01),至28 d时仍有表达.在7、14 d时,Ad-ANT1转染组BAX阳性表达率显著高于Ad-GFP转染组及单纯损伤组(P＜0.05);Bcl-2阳性表达率高于正常血管,但与Ad-GFP转染组和单纯损伤组无显著差异(P＞0.05);Ad-ANT1转染组新生内膜及中膜平滑肌细胞凋亡率显著高于其他各组(P＜0.05);在14、28 d时,Ad-ANT1转染组新生内膜及中膜面积比(IA/MA)小于Ad-GFP转染组及单纯损伤组(P＜0.05).结论 腺病毒载体介导过表达ANT1可诱导大鼠颈总动脉球囊损伤动物模型新生内膜及中膜VSMC的凋亡,其作用可能通过上调促凋亡蛋白BAX的表达实现.
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PEI/ASON纳米组装体对肺腺癌A549细胞增殖活性及其hTERT基因表达的影响
目的 以聚乙烯亚胺多聚阳离子纳米载体( polyethylenimine,PEI)作为端粒酶逆转录酶(human telomerasereverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的增殖活性及hTERT mRNA表达的影响.方法 采用MTT法检测PEL/ASODN纳米组装体对细胞的增殖作用情况;激光共聚焦显微镜检测5'-FITC标记的ASODN( FASODN)转染细胞后PEI/FASODN纳米组装体的细胞摄人情况;RT-PCR检测转染后hTERT mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测端粒酶hTERT蛋白的表达;流式细胞术Annexin-V-FITC和PI双标法检测细胞凋亡情况;PEI/ASON-PEG-CNGR组装体动物体内分布实验观察NGR的肿瘤靶向作用.结果 PEI/ASODN纳米组装体转染细胞后产生良好的生长抑制作用;FASODN转染细胞后,PEI/FASODN组细胞内有大量荧光物质,而单纯FASODN组细胞内无明显荧光;RT-PCR检测结果表明PEI/ASODN纳米组装体作用于A549细胞72h时,hTERTmRNA水平明显降低,与空白对照组相比有显著差异(P＜0.05);细胞hTERT蛋白的表达也显著降低;转染72h后PEI/ASODN组出现明显早期凋亡和晚期凋亡,凋亡率分别为36.53％和54.28％;动物体内分布实验表明PEI/ASON-PEG-CNGR具有良好的肿瘤靶向作用.结论 PEI介导的hTERT ASODN能有效抑制A549细胞增殖,降低hTERT mRNA水平从而抑制hTERT蛋白的表达,使细胞产生凋亡,对该细胞生长有明显抑制作用.
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慢病毒介导BC047440基因沉默逆转HepG2/ADM细胞化疗耐药性机制的探讨
目的 利用siRNA方法沉默HepG2/ADM细胞系中BC047440基因,观察其受抑制后对细胞多药耐药性的影响及其分子机制.方法 建立BC047440蛋白在HepG2/ADM细胞系siRNA干扰模型,采用Western blot检测BC047440蛋白的表达;实验分3组:BC047440-shRNA组、control-shRNA组和HepG2/ADM组.CCK-8法分析阿霉素对细胞生长抑制率的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布;Western blot检测BC047440沉默后NF-κB蛋白表达的变化;Realtime PCR检测Survivin、CCNL1基因mRNA水平的变化.结果 成功建立BC047440蛋白siRNA干扰模型;NF-κB蛋白表达BC047440-shRNA组约为HepG2/ADM组67.69％,约为control-shRNA组67.39％;细胞毒性实验中24、48 h阿霉素对BC047440-shRNA组细胞毒性作用明显增强;流式细胞仪检测结果显示BC047440-shRNA组细胞凋亡明显增多,细胞周期分布多停留于G1/G0期,S期细胞明显减少.Real-time PCR检测BC047440-shRNA组Survivin基因mRNA表达约为control-shRNA组37％,约为HepG2/ADM组42％;检测BC047440-shRNA组CCNL1基因mRNA表达约为control-shRNA组3.5倍,约为HepG2/ADM组2.4倍.结论 沉默BC047440基因可通过NF-κB信号通路及其下游Survivin、CCNL1信号逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药性,提示BC047440基因可能是形成肝癌多药耐药的重要分子之一.
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IBP促进人涎腺腺样囊性癌细胞对紫杉醇耐药
目的 探讨IBP对SACC细胞抗紫杉醇凋亡能力的影响及其机制.方法 将ACC2转染IBP组和空白对照组各自根据不同紫杉醇浓度分成5组,紫杉醇作用72h后,MTT法检测在紫杉醇作用下IBP对SACC细胞增殖的影响;通过微管蛋白Tubulin免疫荧光染色,观察紫杉醇作用前后ACC2细胞微管的变化及IBP与微管的关系.结果 IBP使ACC2细胞对紫杉醇产生一定程度的耐药,在5μg/ml的紫杉醇浓度下为明显;紫杉醇开始作用后,ACC2-C1细胞的微管点状聚集成团,而ACC2-C1/IBP细胞的微管则出现明显的紊乱、断裂,IBP能促进微管的解聚;IBP所发的绿色荧光与微管的红色荧光糅合在一起呈黄色,IBP与微管存在一定程度的共定位.结论 IBP促进SACC细胞对紫杉醇耐药.
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母体血浆游离DNA分子浓度和片段完整性分析
目的 应用荧光定量PCR技术研究母体血浆游离DNA分子的浓度和片段的完整性的分子生物学特性.方法 提取本院2011年8月42例门诊16 ～20周妊娠女性和40例进行体检的非妊娠女性的血浆游离DNA,靶基因为lep-tin基因和SRY基因,用荧光定量PCR技术分别对其不同片段进行特异性扩增.leptin基因的扩增片段长度为80、202bp,SRY基因为83、206 bp,观察其片段完整性和DNA浓度的变化.结果 妊娠组和对照组leptin基因80 bp片段长度的DNA浓度平均值分别为681、439拷贝/ml(P＜0.01);在片段长度为202bp的DNA浓度平均值分别为157、91拷贝/ml,中位数为134、85拷贝/ml,表明均有显著性差异(P＜0.01).妊娠组胎儿SRY基因83 bp和206 bp的DNA浓度的平均值为94(38 ～369)拷贝/ml、80(71～88)拷贝/ml,与妊娠组leptin基因比较,有显著性差异.结论 妊娠女性血浆DNA分子浓度明显高于非妊娠正常女性和胎儿游离DNA分子浓度.
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斑点追踪成像评价冠心病患者CABG或PCI术治疗前后左室收缩功能
目的 应用斑点追踪成像技术( speckle tracking imaging,STI)评价冠心病患者行冠脉内支架置入术(percutaneous coronary intervention,PCI)或冠脉搭桥术(coronary artery by pass grafting,CABG)前后不同阶段左心室的局部和整体收缩功能.方法 选取新桥医院心内科2010年11月至2011年10月期间行PCI术治疗的冠心病患者35例(男性21例,女性14例),年龄(56.1±12.5)岁,选取本院心外科同期行CABG手术治疗的冠心病患者30例(男性19例,女性11例),年龄(57.8±14.8)岁,分别于手术前3d、术后1、3、6个月时行超声心动图检查,采集相应时间点的左心室二维图像;另选年龄性别相匹配的48名健康者作为正常对照组;比较分析其常规超声心动图参数、二维应变参数的变化差异,以及各组在各时间点内的相关性.结果 ①冠心病PCI组及CABG组术前常规心脏超声参数(E/A、LVEF)STI,参数(GBLS、GBRS、GBCS、Prot apex、Prot base、Ptw)均显著低于正常对照组(P＜0.05).②冠心病PCI组术后1、3、6个月各阶段的参数值均较术前增高且呈递增趋势,但仍低于正常对照组(P＜0.05);术后各阶段参数值与术前比较差异显著(P＜0.05).③冠心病CABG组术后3、6个月STI参数与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),但术后1个月测值较术前比较无明显改善(P＞0.05).④PCI及CABG组的GBLS、GBRS、GBCS均与LVEF显著性相关(P＜0.01).结论 STI可以定量评价冠心病患者行PCI或CABG手术治疗前后左室局部及整体收缩功能,对评价治疗效果及预后具有重要的临床价值.
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硼替佐米对U87胶质瘤放射增敏及细胞周期分布的影响
目的 探讨硼替佐米( bortezomib,BTZ)对放射治疗U87胶质瘤裸鼠移植瘤的增敏作用和细胞周期分布的影响.方法 建立裸鼠U87胶质瘤模型.造模成功的裸鼠随机分为4组:空白组(C)、照射组(RT)、硼替佐米组(BTZ)和联合组( BTZ+ RT),裸鼠经8 MeV-β线照射治疗,联合组在照射基础上分别经腹腔注射BTZ,剥离瘤组织,称量计算抑瘤率,测定细胞周期分布、肿瘤生长延迟时间(TGD)、放射增敏比(SER),并比较各组裸鼠平均生存时间.结果 BTZ+ RT组抑瘤率为46.5％,优于RT组的31.5％ (F=25.6,P＜0.01);BTZ+ RT组生长延迟时间(TGD)长于RT组(59 d vs 38 d,P＜0.01),BTZ+ RT使单独放疗的敏感性提高1.44倍;RT联合应用BTZ后,G0/G1期细胞比例下降(79.9％ vs 66.0％,P＜0.01),G2/M期细胞比例显著提高(3.2％ vs 16.4％,P＜0.01);BTZ联合RT对小鼠生存时间也有较大改善.结论 BTZ对放射治疗U87胶质瘤具有明显的增敏效应,能够有效逆转放射所致细胞G0/G1期进程阻滞,提高G2/M期细胞比例,延长带瘤小鼠生存时间.
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骨髓间充质干细胞表达分泌型蛋白IFN-β/EGFP对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响
目的 β干扰素(interferon-beta,IFN-β)/增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)真核质粒转染人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs),观察转染后的hMSCs (IFN-β-hMSCs)对前列腺癌细胞株PC-3增殖情况的影响.方法 构建IFN-β/EGFP分泌型真核表达质粒pEGFP-N2-IFN-β,脂质体介导下转染hMSCs,使用荧光显微镜检测IFN-β/EGFP蛋白中绿色荧光的表达;ELISA法检测细胞上清中IFN-β的表达水平.将IFN-β-hMSCs与PC-3在Transwell培养体系中共培养,同时设立hMSCs共培养组、空质粒转染hMSCs共培养组、PC-3单独培养组为对照组,分别于共培养后第1、3、5天对PC-3进行台盼蓝染色,计数存活细胞数目.结果 荧光显微镜下观察到IFN -β-hMSCs显示出绿色荧光,ELISA检测证实IFN-β-hMSCs的细胞上清中存在IFN-β的分泌表达.实验组PC-β细胞增殖受抑制,实验组与各对照组之间比较差异存在统计学意义(P＜0.05).结论 分泌型蛋白IFN-β/EGFP在hMSCs中可获得表达且保持其各自的生物学特性,在Transwell共培养中可以有效抑制前列腺癌细胞增殖.
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内侧内嗅皮层微注射Orexin-A对大鼠睡眠-觉醒及空间记忆的影响
目的 探讨内嗅皮层注射Orexin-A对Sprague-dawley (SD)大鼠睡眠-觉醒周期以及对空间记忆的影响.方法 选用健康成年雄性SD大鼠45只,体质量250～300 g,采用同步记录大鼠脑电和肌电活动,观察Orexin-A及Orexin1受体阻断剂SB-334867内侧内嗅皮层微注射后大鼠睡眠-觉醒周期变化.采用T-迷宫交替选择次数,观察SB-334867内侧内嗅皮层微注射后大鼠T-迷宫选择正确率的变化.结果 以人工脑脊液(ACSF)、二甲亚砜(DMSO)自身对照相比,分别给予大鼠内侧内嗅皮层双侧微注射Orexin A及SB-334867 0.5μl后3 h(11:00- 12:00、12:00 - 13:00、13:00 - 14:00)觉醒周期时间无影响(P＞0.05),给药后24h觉醒周期时间也无显著差异(P＞0.05).微量注射药物后,Orexin-A(0.1nmol/0.5 μl)及SB-733467(6mmol/0.5 μl)在11:00- 14:003 h内对觉醒时间、NREM时间及REM时间均无影响(P＞0.05),即对3h内(11:00 - 14:00)大鼠总睡眠觉醒时间无显著性差异(P＞0.05).与DMSO组比较大鼠内侧内嗅皮层双侧微注射SB-334867 0.5 μl后,T-迷宫交替选择正确次数明显减少,正确率下降,有显著性差异(P＜0.001).结论 内侧内嗅皮层Orexin系统的支配可能参与了空间记忆,而不参与睡眠-觉醒周期调节.
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人工气胸在腔镜食管癌切除术中的临床分析
目的 初步探讨胸腹腔食管癌切除术中,建立人工气胸对呼吸、循环的影响,评价其安全性及可行性.方法 2010年5月至2011年6月本院在人工气胸条件下采用胸腔镜联合腹腔镜食管癌切除术治疗食管癌患者80例,其中双腔气管插管60例、单腔气管插管20例.在充气流速3 L/min、维持胸内压6～8 mmHg的条件下,监测心率、有创动脉压(ABP)、脉搏血氧饱和度(SpO2)、气道压及呼气末CO2分压(PetCO2)等呼吸、循环指标和血气分析结果,观察其在CO2充气前、后的变化趋势.结果 手术开始建立人工气胸后,患者的心率、有创动脉压(ABP)、脉搏血氧饱和度(SpO2)基本没有变化,气道压、PetCO2及CO2分压(PCO2)均有不同程度升高,血气pH值下降,停止充气后,检测指标均恢复至基础值水平.所有病例均顺利完成胸腹腔食管癌切除腔镜食管癌切除术,术后仅1例患者由于误吸出现肺部并发症,其余患者均无肺部并发症发生,所有患者均顺利出院.结论 在胸腹腔镜下行食管癌切除术中,在充气流速3 L/min、胸内压维持6～8 mmHg,采用二氧化碳建立人工气胸条件下,其增加显露且安全、有效.与双腔插管相比,单腔插管建立人工气胸对患者的呼吸影响更小,更为安全.
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Cuprizone致小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞数及动物运动能力的影响
目的 研究Cuprizone (CPZ)诱导C57BL/6小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞变化情况,并探讨对小鼠运动能力的调控特点.方法 以正常饲料喂食的6周龄雄性小鼠作为对照,实验组用含0.2％ Cuprizone的混合饲料持续喂食6周龄雄性小鼠6周,诱导中枢神经系统脱髓鞘.用LFB组化和MBP免疫组化技术鉴定脑胼胝体区的脱髓鞘改变,确认模型的稳定可靠性.结合MBP和CC-1免疫荧光双标技术,观察脱髓鞘的胼胝体区少突胶质细胞变化情况.并通过体质量监测观察小鼠的整体功能状态变化,进一步采用行为学实验技术(旋转棒测试和旷场实验)观察对小鼠运动能力的调控效果和特点.结果 与正常组相比,Cuprizone诱导脱髓鞘6周后,脑胼胝体区的髓鞘缺失明显,髓鞘结构蛋白MBP含量明显减少[ (0.395±0.019)vs (0.242±0.016);P＜O.01];应用图像分析和统计学分析发现,成熟少突胶质细胞的胞体(CC-1+)和(MBP+)呈平行性减少[(42.62±2.48)vs (25.04±3.68)/100 μm2;P ＜0.05];在实验监测过程中,正常小鼠体质量呈上升增加,而CPZ组小鼠体质量先急剧下降,后趋于平稳并稍有恢复;同时行为学实验结果表明,小鼠的运动协调能力、自发活动能力都有明显减弱[( 156.17±22.17)vs(78.50±7.80);(240.91±29.52)vs(163.31±21.05);P＜0.05],但是对小鼠的探索习性并无明显影响(3.7％/5.4％ vs3.6％/5.3％;P＞O.05).结论 利用Cuprizone诱导小鼠脱髓鞘改变与少突胶质细胞减少有关,其主要影响小鼠的运动协调能力和自发活动而不影响探索习性等高级功能.
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慢加急性肝衰竭前期临床常规预警指标研究
目的 分析慢加急性肝衰竭前期的临床特征,发掘预警肝衰竭发生的指标,建立基于临床指标的早期肝衰竭预警模型.方法 回顾性分析我科2002年5月至2008年4月慢加急性肝衰竭前期病例50例、慢性乙型肝炎重度病例62例,比较其发病诱因、发病特点以及临床常规辅助检查指标变化特征间差异,并通过Logistic回归建立判断肝衰竭发生风险的模型.结果 两组病例间性别、发病诱因、黄疸出现时间、有无肝硬化、HBeAg阳性率无显著性差异,CHB重度组患者发病年龄分布范围较大(12～72岁),Pre-ACLF组患者发病年龄较集中(29 ～ 69岁),两者有显著差异.首次辅助检查指标中,两组凝血检验指标与TBil存在显著差异.指标的变化速率中,Pre-ACLF组PT、INR、TBil大增加速率显著高于CHB重度组(P=6.386 ×10-11、1.905 × 10-11、0.0065).ACLF发生概率的预警模型为P=1/[1+e^-(-2.414 +7.687×PT延长速率)],PT大延长速率每天增加1s,肝衰竭的风险增加2179.045倍.结论 与CHB重度病例比较,Pre-ACLF病例病变相对较剧烈,主要表现为凝血功能的大幅下降与黄疸的大幅增加.其中PT大延长速率是预测肝衰竭发生强的风险因素.
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血清淀粉样P蛋白缺失对小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响
目的 观察血清淀粉样P蛋白(serum amyloid P component,SAP)缺失对小鼠动脉粥样硬化形成的影响.方法 构建载脂蛋白E( Apolipoprotein E)和SAP双基因敲除小鼠(ApoE-/-;SAP-/-)作为实验组,ApoE-/-小鼠作为对照组.2组小鼠各12只,组内雄雌小鼠各半.在小鼠第8周龄时,体质量约20 g,此时开始同时给予2组小鼠高脂饮食,于第16周龄时获取小鼠全血分离得到血清进行血脂分析,处死小鼠后获取其心脏,胸腹主动脉进行油红O染色并进行病理统计.结果 双基因敲除小鼠组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显高于对照小鼠(P＜0.01),低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的比值和动脉粥样硬化指数(AI)小于对照组小鼠且差异显著(P＜0.01),而总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度无显著性差异(P＞0.05);主动脉根部切片和胸腹主动脉的油红O染色结果表明SAP缺失明显减轻了小鼠动脉粥样硬化斑块面积(P＜0.01).结论 AP缺失可能通过上调HDL从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成.
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特殊类型的T1a期肺癌1例
1临床资料患者,男性,51岁.因"咳嗽、咯血1个月"入院.入院前1个月,患者无明显诱因出现咳嗽,咯白色粘痰,并咯血或痰中带血,晨起明显.无气紧、胸痛等症状.体格检查中,双肺呼吸音清晰,未闻及明显的干湿罗音.既往吸烟史30年,吸烟指数＞400支/年.外院以"肺炎"治疗1周,症状无缓解.行胸部CT检查:双侧肺野清晰,双肺纹理增多、紊乱,气管及叶、段支气管未见狭窄、闭塞等,未见肺部及纵隔区块影(图1).遂继续抗炎、止血等对症处理,患者症状仍未见缓解.
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冠状动脉CT血管成像诊断左冠状动脉主干-肺动脉瘘1例
左冠状动脉主干-肺动脉瘘是一种罕见的冠状动脉畸形,因其临床表现多样,易误诊、漏诊.本院心血管内科近期收治1例,现分析其冠状动脉CT血管造影表现如下.1临床资料患者,女性,59岁,上楼时心悸、气促,伴有夜间阵发性呼吸困难6月余,自服药物治疗,症状无明显缓解,近来因上述症状加重1周入我院治疗.既往高血压病史1年.外院冠状动脉CTA检查提示:"冠状动脉-肺动脉瘘可能".
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50例顺产后阴道松弛症的手术治疗及功能锻炼的临床疗效观察
目的 探讨手术结合功能锻炼对顺产后阴道松弛症的治疗效果.方法 选取2006年9月至2010年12月在本科就诊的50例患者进行回顾性分析,采用手术恢复损伤肛提肌的解剖结构,并进行功能康复锻炼.结果 50例受术者均愈合良好,没有出现阴道直肠瘘或感染并发症.术后随访6个月至2年,多数受术者自诉对术后效果满意,感觉阴道收缩有力,无下垂感,排尿、排便控制自如,夫妻性生活和谐.结论 顺产后阴道松弛症是由于肌肉损伤引起,根据肛提肌损伤的情况,手术收紧肛提肌,保留阴道黏膜的完整性,并配合功能康复锻炼促进肌肉及阴道的弹性恢复,可以矫正阴道松弛,提高患者性生活质量,效果确切.
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蜂胶对人牙周膜成纤维细胞毒性及细胞回复能力的影响
目的 体外研究蜂胶对人牙周膜成纤维细胞的细胞毒性及毒性的可逆性.方法 体外培养人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLFs),选用蜂胶为实验组,碘酚溶液和奥硝唑溶液为药物对照组,培养基作为空白对照组,分别与HPDLFs接触进行细胞培养24h,用MTT法测定细胞相对增殖率(RGR),更换新鲜培养基继续培养细胞24h,测定细胞回复度.结果 3种药物随着药物浓度的增加,细胞相对增殖率均成下降趋势,同种药物不同浓度间比较,差别具有统计学意义(P＜0.05).所选浓度的蜂胶和奥硝唑细胞毒性为1～2级,而对照药物碘酚细胞毒性为4级.更换新鲜培养基继续培养细胞24h后,蜂胶组和奥硝唑组细胞回复度均大于80％,表现出较小的细胞毒性;而碘酚组回复度小于30％,表现出一定的细胞毒性.结论 蜂胶对HPDLFs具有较小的细胞毒性,且毒性可逆.
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热带医学的起源与发展趋势
热带医学( tropical medicine)是研究发生于热带或亚热带地区各种疾病的诊断、治疗、预防、控制和如何消灭这些疾病的一门综合性科学,主要由热带病学和热带卫生学两部分组成[1].热带医学有着非常久远的历史,在19 世纪末、20世纪初世界各国成立了专门的热带医学研究和教育的机构,热带医学得到较好的发展,热带病的预防、诊断、治疗取得了较好的效果,部分热带病得到有效的控制.随着全球气候变暖、工业污染、人口增长、自然疫源地的商业开发、旅游业的发展、抗生素和杀虫剂等大量使用,促使病原物种变异和传染源,媒介昆虫活动途迁范围扩大,新发和再发的热带病给人类提出 了新的挑战,现就热带医学的起源和发展趋势做评述.
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第6届国际人类环境诱变大会简介
1会议概况第6届国际人类环境诱变大会(The 6th International Conference on Environmental Mutagens in Human Populations)于2012年3月26 -29日在卡塔尔首都多哈隆重举行.此次大会由卡塔尔基金会( Qatar Foundation)主办.来自世界各地环境诱变对人类健康影响领域的350多名专家学者参加了本届大会,参会者报告了各自新的研究成果,并展开了热烈的讨论,也为进一步的国际合作打下了坚实基础.
