第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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血清葡萄糖6-磷酸异构酶在类风湿关节炎诊断中的意义
目的 探讨葡萄糖6-磷酸异构酶(gheose-6-phosphate isomerase,GPI)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断中的意义.方法 用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)双抗体夹心法检测108例RA患者、42例系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者、50例其他风湿病患者及112例健康体检者血清GPI浓度,RA患者同时检测了抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,anti-CCP)、类风湿因子(rheuma-toid factor,RF).结果 GPI浓度:RA患者为(1.840±2.821)μg/ml, SLE患者为(0.143±0.426)μg/ml,其他风湿病患者为(0.074±0.279)μg/ml,健康体检者为(0.092±0.232)μg/ml.RA患者血清中GPI浓度显著高于SLE、其他风湿病患者和健康体检者(P＜0.01).Spearman等级相关分析显示RA患者GPI浓度与类风湿因子(RF)浓度呈显著正相关(r=0.622,P＜0.01),与其他检测指标无相关性.结论 GPI浓度大于0.209μg/ml时对RA的诊断有较高的特异性, 其特异性可达93.7%,敏感性为56.5%.表明GPI的变化在RA诊断有较重要的意义.
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1,25-二羟维生素D3处理树突状细胞在过敏性气道炎症中的作用
目的 研究1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(dendritic cells,DC)表型和功能的影响及其处理后DC在过敏性气道炎症中的作用.方法 体外扩增小鼠骨髓来源的树突状细胞,采用流式细胞术和ELISA检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和分泌细胞因子IL-10和IL-12的影响;观察1,25-二羟维生素D3处理DC过继卵蛋白致敏小鼠肺组织病理特点和支气管肺泡灌洗液细胞类型.结果 经1,25-二羟维生素D3处理后,DC表达CD80和MHC Ⅱ均明显降低,而CD11c变化不明显;分泌IL-10显著增加,而分泌IL-12显著降低.过继小鼠肺组织未见典型的哮喘样病理改变,支气管肺泡灌洗液细胞类型与空白对照组无显著差异.结论 1,25-二羟维生素D3可抑制DC成熟,经其处理后DC过继致敏小鼠可诱导对抗原的免疫耐受,避免过敏性气道炎症的发生.
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慢性粒细胞白血病bcr/abl的糖基化磷脂酰肌醇锚定修饰及在COS-7细胞膜上的表达
目的 构建与糖基化磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidyl inositol,GPI)锚定序列相连的bcr/abl真核表达质粒,并检测其在COS-7细胞中基因和膜蛋白的表达.方法 以编码慢性粒细胞白血病bcr/abl融合蛋白全长序列的migP210质粒为模板,通过PCR扩增获得654 bp的bcr/abl融合基因片段,双酶切后定向插入真核表达载体pBudCF4.1中,经鉴定获得重组质粒pBB.同时用RT-PCR扩增人外周血淋巴细胞CD24分子中的GPI获得约243 bp的锚定序列,双酶切后克隆人pBB质粒中与ber/abl基因下游羧基端相连,获得重组质粒pBBG.在多聚阳离子介导下将pBBG质粒转染COS-7细胞,采用RT-PCR和Western blot检测bcr/abl融合基因和蛋白的表达.结果 经酶切和测序鉴定证实,由GPI锚定连接的ber/abl融合基因插入片段正确;RT-PCR检测到转染细胞中有bcr/abl融合基因,Western blot检测到转染细胞膜上有hcr/abl融合蛋白的表达.结论 成功构建由GPI锚定修饰的bcr/abl重组质粒pBBG,并能在COS-7细胞膜上表达出bcr/abl融合蛋白.
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重组人角质细胞生长因子异构体抑制兔角膜基质细胞增殖分化的研究
目的 观察重组人角质细胞生长因子异构体(recombinant human keratinocyte growth factor variant,K102)对实验性兔角膜损伤的治疗作用.方法 108只家兔均在显微镜下造成板层切割损伤模型,并分成K102药物大剂量(0.5 mg/ml)、中剂量(0.25 mg/ml)、小剂量(0.125 mg/ml)治疗组、贝复舒对照组(贝复舒滴眼液治疗,2 400 AU/ml)、地塞米松对照组(地塞米松磷酸钠滴眼液治疗,0.25 mg/ml)和空白组(K102滴眼液的溶媒滴眼治疗).通过裂隙灯观察角膜上皮下雾状浑浊(Haze)差别.于术后30、90 d处死动物取角膜行光镜及电镜检查.结果 术后30、90 d,K102药物治疗的各组Haze评分及前50 μm角膜基质层内平均角膜细胞数均明显低于阳性对照组及空白组(P＜0.05),光镜及电镜检查结果显示K102大剂量组角膜成纤维细胞活化及增殖程度明显轻于贝复舒对照组、空白组.结论 K102滴眼液可抑制角膜损伤后的角膜基质细胞过度增殖、活化,减少早期Haze形成.
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蛋白酶体抑制剂MG-132改善大鼠心肌梗死后心肌结构重塑
目的 探讨MG-132对大鼠心肌梗死(心梗)后心肌结构重塑的影响及机制.方法 制作大鼠心梗模型,分为MG-132干预(MG)组和心梗对照(MI)组,另设假手术(SH)组,每组大鼠16只.MG组于术后24 h腹腔注射MG-132(0.1 mg·kg-1·d-1),MI组及SH组注射生理盐水对照.连续给药28 d,然后超声检测心脏左室前壁厚度、左室后壁厚度、左室舒张末期直径;处死动物计算左室重量指数及梗死面积,RT-PCR和Western blot分别检测核转录因子-κB p65(NF-κB p65)及白介素-1β(IL一1β)的mRNA和蛋白质表达量.结果 梗死面积在MI组和MG组间差异无统计学意义(P＞0.05).与SH组比较,MI组和MG组的左室后壁厚度、左室舒张末直径、左室质量指数明显增大,左室前壁厚度明显减少,NF-κBp65和IL-1β的mRNA及蛋白质表达量明显增加,差异均具有统计学意义(P＜0.01).与MI组比较,MG组左室后壁厚度、左室舒张末直径、左室质量指数,左室前壁厚度改变明显减轻,NF-κB p65和IL-1β的mRNA及蛋白质表达量明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 MG-132能一定程度地改善大鼠心梗后心肌结构重塑,其机制可能与抑制NF-κB激活,下调炎性细胞因子如IL-1β表达有关.
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肺炎链球菌黏附素A基因疫苗的构建及对小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带的防御作用
目的 探讨肺炎链球菌表面黏附素A(PsaA)基因疫苗的免疫原性及其对小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带的防御作用.方法 PCR技术从肺炎链球菌R6标准株扩增PsaA基因,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-PsaA,脂质体法转染BHK-21细胞,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹(Western blot)检测重组质粒在BHK-21细胞中的转录和表达.应用PsaA基因疫苗肌肉注射免疫BABL/c小鼠,ELISA检测脾细胞上清IFN-γ分泌,特异性抗体IgG水平及其亚型分布(IgG1/IgG2a).利用BABL/c小鼠肺炎链球菌D39株鼻咽部携带模型,鼻咽部灌洗液菌落计数观察免疫小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带改变.结果 RT-PCR及Western blot显示重组PsaA蛋白在BHK-21细胞瞬时表达,ELISA检测到免疫小鼠血清高水平的IFN-γ及特异性IgG抗体(IsG1/IgG2a＜1),小鼠攻击实验证明PsaA基因疫苗免疫组小鼠D39携带菌落计数明显少于对照组(P＜0.01).结论 肺炎链球菌表面毒力蛋白PsaA基因疫苗免疫小鼠激发了抗原特异性的细胞及体液免疫反应,显著减少了小鼠鼻咽部肺炎链球菌的携带,为肺炎链球菌DNA疫苗理想侯选抗原之一.
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肠出血性大肠杆菌O157:H7志贺毒素ⅡA1亚单位单克隆抗体的制备和生物学特性鉴定
目的 制备出高效价的抗志贺毒素ⅡA1亚单位(STX2A1)的单克隆抗体.方法 以重组GST-SIX2A1融合蛋白作为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,运用细胞杂交瘤技术制备,以天然STX2毒素为筛选抗原,采用间接ELISA法筛选产生针对STX2A1的单克隆抗体细胞株;以体内诱生法产生腹水,并采用Protein A-Sepharose柱对其纯化,快速定性试纸鉴定McAb的Ig亚类,采用间接ELISA相加实验鉴定抗原识别表位.结果 获得3株产生针对STX2A1的单克隆抗体细胞株STX2-1A3、STX2-1E10、STX2-3A7,Ig亚类分别为IgG1λ型、IgG1κ型和IgG3κ,亲和力常数分别为5.76×109、1.21×109和3.97×108.结论 成功制备3株稳定分泌抗STX2A1的杂交瘤细胞株,产生的单克隆抗体特异性好,亲和力高,能与天然STX2A亚单位反应.
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Trappin-2对HaCaT细胞及银屑病跨膜模型增殖的抑制作用
目的 构建Trappin-2的真核表达体系,初步探讨Trappin-2对HaCaT细胞及银屑病跨膜模型增殖的影响.方法 采用DNA重组技术构建Trappin-2的表达载体pIRES2-EGFP-Trappin-2,通过脂质体法转染入宫颈癌HeLa细胞.将Trappin-2高表达上清加入HaCaT细胞及银屑病跨膜模型中,通过3H-TdR掺入法、MTT法、流式细胞术及组化染色Ki67检测对增殖的影响.结果 Trappin-2作用后MTY和cpm值变化率显示Trappin-2可抑制HaCaT细胞的代谢与DNA合成,同时可使HaCaT细胞G2+S期细胞比例下降,而G1期细胞比例增加.Trappin-2可下调银屑病皮损Ki67表达水平.结论 成功将Trappin-2基因转染HeLa细胞,并进行有效表达,初步证实Trappin-2具有抑制HaCaT细胞及银屑病跨膜模型增殖的特性.
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过氧化物酶体增殖体激活受体-γ2基因Pro12Ala多态性与肥胖的关系
目的 探讨过氧化物酶体增殖体激活受体-γ2(PPAR-γ2)基因外显子2的Pro12Ala多态性与肥胖的关系.方法 运用多聚酶链式反应.限制性片段长度基因多态性(PCR-RFLP法)分析方法,对116例超重或肥胖患者和89例正常对照者PPAR-γ2基因Pro12Ala多态性位点进行基因分型.结果 超重或肥胖组Ala等位基因频率(11.64%)显著高于正常对照组(5.06%),在所检测人群中,PA/AA基因型者具有更高的体质量指数和血浆甘油三酯水平(P＜0.05).结论 PPARγ2的Pro12Ala变异与肥胖的发生有关,12Ala更易发生肥胖.
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栀子抗内毒素组分的制备及活性初步分析
目的 从中药栀子中提取抗内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的有效成分并进行活性初步分析.方法 运用大孔树脂AB-8、聚酰胺树脂、萃取技术及高效液相色谱分离技术对栀子水提物进行分离;通过测定他与lipid A的结合强弱对分离过程进行跟踪,获得粗组分D,经过HPLC技术进一步获得与lipid A有较强结合活性的组分CJ-1;动态比浊法鲎试验检测组分CJ-1在不同浓度(0.5、1、2 mg/L)对LPS(0.2μg/L)的中和作用;ELISA法检测CJ-1组分对LPS(100μg/L)刺激RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.结果 从中药栀子中逐步分离出与lipid A结合活性较高的组分CJ-1,当CJ-1浓度为0.2 g/L时,RU值为112 arc/s;CJ-1浓度为0.5～2.0 mg/L时,对0.2μg/L LPS介导的鲎试剂的凝结反应具有显著的抑制作用(P＜0.01,P＜0.05),并呈剂量效应关系;CJ-1浓度为50～200 mg/L时,对100μg/L的LPS介导的RAW264.7细胞释放TNF-α具有显著的抑制作用(P＜0.01,P＜0.05),并呈剂量效应关系.结论 依靠lipidA为靶点指导中药栀子水煎液分离,从中分离提取出与lipid A的结合作用较强的组分CJ-1,CJ-1在体外对LPS具有一定的中和作用.
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别嘌呤醇对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用
目的 探讨黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)抑制剂别嘌呤醇对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 结扎冠脉前降支制作大鼠心肌梗死模型,随机分为假手术组(sham,n=5),心肌梗死组(MI,n=16)和别嘌呤醇组(50 mg·kg-1·d-1,n,=15),28 d后检测心肌梗死面积,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Fas蛋白表达,Western blot检测XO和caspase 3蛋白表达,比色法测定XO和清除活性氧活力.结果 MI组非梗死区心肌细胞凋亡指数升高,Fas、XO、caspase 3蛋白表达增强,XO活力增加,清除活性氧活力降低(P＜0.01);别嘌呤醇组明显缓解了上述指标的变化.结论 别嘌呤醇能够抑制非梗死区心肌细胞凋亡,其作用机制可能与减少活性氧生成及降低Fas和caspase 3的表达有关.
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缺氧应激对人肝癌细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响
目的 探讨缺氧应激对人肝癌细胞HepG2黏附、侵袭和迁移能力的影响.方法 缺氧(5%O2、5%CO2、90%N2)和常氧培养HepG2细胞.细胞.基质黏附实验测定常氧组和缺氧4、12、24h组HepG2细胞黏附能力;细胞侵袭和迁移实验测定缺氧和常氧24 h组HepG2细胞侵袭和迁移能力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定常氧组和缺氧4、12、24 h组HepG2细胞缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α mRNA的表达量.结果 随着缺氧时间的延长HepG2细胞的黏附能力明显增强(P＜0.01),缺氧24 h组HepG2细胞侵袭和迁移能力明显高于常氧组(P＜0.01).常氧下HepG2细胞不表达HIF-1α mRNA,缺氧4 h时HIF-1α mRNA表达量高,随后下降(P＜0.01),但仍高于常氧组.结论 缺氧应激上调HepG2细胞HIF-1α mRNA的表达,促进HepG2细胞黏附、侵袭和迁移.
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人体正常膝关节钙化软骨层组成成分研究
目的 分析构成关节软骨钙化层有机成分中胶原蛋白类型与含量及无机成分中羟基磷灰石含量.方法 组织库获取20例自愿捐献的人体正常股骨髁新鲜标本,组织切片采用天狼猩红染色和免疫组织化学对胶原蛋白进行定性分析;用氨基酸分析和X-射线衍射法分别对胶原蛋白和羟基磷灰石进行定量分析.结果 天狼猩红染色见钙化软骨层与透明软骨层一样黄绿色淡染、弱双折光性;Ⅱ型胶原蛋白免疫组织化学分析,钙化软骨层呈强绿色荧光,潮线附近的胶原蛋白呈板层平行分布;氨基酸定量分析钙化软骨层Ⅱ型胶原蛋白含量占组织干质量的(20.16%±0.96%);X-射线衍射定量分析钙化软骨层中的羟基磷灰石含量占无机成分的(65.09%±2.31%).结论 在关节骨软骨复合组织中,钙化软骨层是位于透明软骨层与软骨下骨之间的界面连接结构,其细胞外基质主要由Ⅱ型胶原蛋白和羟基磷灰石组成.
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模拟海上颠簸刺激对严重烧伤家兔心肌力学指标的影响
目的 观察模拟海上颠簸刺激对烧伤早期家兔心肌力学和血流动力学指标的影响.方法 132只家兔随机分成正常对照组(N组,n=6)、单纯颠簸组(DN组,n=42)、单纯烧伤组(S组,n=42)和烧伤颠簸组(DS组,n=42),单纯烧伤组和烧伤颠簸组造成40%全身体表面积(total body surface area,TBSA)Ⅲ度烧伤,分别于2、6、8、12、24、36、48 h等7个时相点经颈动脉左心室内置管,应用RM6240系列生理信号采集仪记录左心室压力波形和主动脉压力波形并应用RM6240系列生理信号采集处理系统处理分析相应波形,测量得出主动脉收缩压(AOSP)、主动脉舒张压(AODP)、平均动脉压(MAP)、左心室收缩压峰值(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)以及左心室内压变化大速率(±dp/dtmax)等心肌力学指标.结果 单纯颠簸即可使家兔心肌力学指标显著降低,烧伤颠簸组心肌力学和血流动力学指标均低于单纯烧伤组.伤后2 h,烧伤颠簸组LVEDP即显著低于单纯烧伤组,LVSP、LV-dp/dtmax自伤后6 h开始显著低于单纯烧伤组,AOSP、AODP、MAP、LV+dp/dtmax自烧伤后12 h开始均显著低于单纯烧伤组.结论 模拟海上颠簸刺激可明显加剧严重烧伤家兔心肌力学指标的下降和心功能损害.
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MRI动态增强扫描评估HIFU治疗原发性肝癌的疗效
目的 探讨MRI动态增强扫描在高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)治疗原发性肝癌疗效评价及预后判断中的价值.方法 经临床或病理确诊的28例原发性肝癌患者共51个病灶,HIFU治疗前后行MRI动态增强扫描,分析HIFU治疗后病灶内部及其周边强化特点.结果 48个病灶行1次HIFU治疗,其中39个病灶(76.47%)HIFU治疗1～2周后MRI复查病灶中央坏死、无强化,病灶周边呈环状强化,2～3个月、5～6个月、8～9个月、11～12个月、17～18个月以及20个月时上述病灶行1～6次MRI复查,未发现异常强化;4个病灶(7.84%)HIFU治疗1～2周后MRI复查病灶中央坏死、无强化,周边可见环状强化,2～3个月后MRI复查发现病灶边缘出现结节状强化;3个病灶(5.88%)HIFU治疗1～2周后MRI复查病灶内部和(或)周边仍可见点状、结节状或斑片状强化,2～3个月后MRI复查发现残存强化病灶范围扩大,数目增多;2个病灶(3.92%)合并门静脉癌栓,经HIFU治疗后MRI复查有新病灶出现.3个病灶(5.88%)因体积太大(大直径分别为9.6、12.7、14.8 cm),采取分次HIFU治疗(2～3次),末次HIFU治疗后1～2周MRI复查并与治疗前对比发现,病灶呈大片状无强化低信号区.结论 MRI动态增强扫描可以敏感地反映HIFU治疗后病灶坏死情况及其周边强化特点.
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CT血管造影减影技术在脑静脉系统疾病诊断中的应用价值
目的 探讨CTA减影技术对于脑静脉系统病变的诊断价值.方法 采用64层螺旋CT行头部或头颈部CT血管造影(CTA),回顾性分析我科20例确诊(经DSA或和手术证实)脑静脉系统病变患者CTA减影图像质量,并比较常规CTA与减影CTA显示病变的能力.结果 经CTA诊断颅内静脉窦血栓患者4例,静脉畸形患者8例,肿瘤累及静脉窦患者5例,外伤累及静脉窦患者2例,颈内动脉海绵窦瘘患者1例.20例患者减影CTA病变显示率为95%,优于常规CTA;90%病例减影图像质量优良,血管清晰显示,少数因头部轻微运动,颅骨及颅底骨未能完全减影,通过结合各种三维重建方法(VR、MIP、MPR),不影响诊断.结论 CTA减影技术诊断脑静脉系统病变可行、有效.
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金属硅膜支气管封堵器置入犬支气管的封堵效果及安全性研究
目的 评价研制的金属硅膜支气管封堵器的有效性和安全性.方法 取健康杂种犬18条,按随机数字表法分为3组(n=6),分别经支气管镜置入以镍钛合金丝编织成哑铃状、普通螺栓状、致密螺栓状3种支气管封堵器,一端覆硅胶膜,且每只犬置入相同的封堵器2枚.观察实验动物的耐受性,定期复查血象、支气管镜、胸部CT扫描,8周后观察封堵器附近支气管组织及远端肺组织变化.结果 预设的18条犬36只支气管封堵器全部经支气管镜成功置入.观察期内,除1例因误吞哑铃状封堵器致消化道梗阻而死亡外,其余犬耐受性良好;截至封堵第8周,36只封堵器中,脱落共有11只(11/36),其中哑铃状封堵器脱落9只(9/12),普通螺栓状封堵器脱落2只(2/12),致密螺栓状封堵器无脱落(0/12).胸部CT扫描和组织病理学检查证实,部分封堵的肺叶有萎陷,肺组织表面有瘢痕形成,封堵部位远端肺泡腔缩小.肺间质内有淋巴和单核细胞浸润,并伴有纤维组织增生;2例封堵部位及其周围有轻度阻塞性炎症改变,未出现肺脓肿及坏死.尸检取出的封堵器表面光整,弹性度良好,无变形、扭曲及断裂,所覆的硅胶膜无渗漏破损.结论 试制的镍钛合金覆硅胶膜支气管封堵器置入方便,组织相容性好,动物耐受性较好.3种不同的支气管封堵器中,以致密螺栓状封堵器的稳定性好,有望用于支气管封堵治疗.
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大鼠视皮层两类神经元的NMDA及GABAA受体介导的突触后电流电学特性研究
目的 在视觉发育可塑性关键期内,探讨大鼠视皮层神经元的细胞类型与兴奋性和抑制性突触后反应的关系.方法 对出生后14～28 d龄正常大鼠进行视皮层脑片膜片钳全细胞记录,分别采用神经药理学方法分离和记录谷氨酸和N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体介导的兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic currents, EPSCs)以及γ-氨基丁酸(galnma-aminobutyric acid,GABAA)受体介导的抑制性突触后电流(inhibitory postsynaptic currents,IPSCs),并进行神经元细胞内标记、免疫细胞化学染色.结果 锥体细胞和颗粒细胞的NMDA受体介导的EPSCs峰值、上升时间、下降时间及NMDA/谷氨酸电流比率并无显著性差异(P＞0.05);锥体细胞GABAA受体介导的IPSCs下降时间较颗粒细胞的短(P＜0.05),而峰值和上升时间并无显著性差异(P＞0.05).结论 在视觉发育可塑性关键期内,GABAA受体在大鼠视皮层不同神经元的突触传递中可能发挥不同的作用,而NMDA受体在不同神经元的突触传递中具有同质性.
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水通道蛋白4 RNA干扰对爆炸伤后脑水肿的影响
目的 研究水通道蛋白4 RNA干扰(aquaporin4 RNA interference,AQP4 RNAi)对爆炸伤后脑水肿的影响.方法 Wistar成年大鼠150只.按随机数字表法分为爆炸伤组、爆炸伤前RNAi组、爆炸伤后RNAi组、单纯RNAi组、假手术组(n=30).构建特异性抑制AQP4表达的短发夹环质粒载体AQP4 RNAi pGenSil-2,分别在伤前7 d和伤后1 h采用右侧脑室给药的方法 抑制AQP4的表达,右侧颞顶部开直径为1 cm的骨窗后用80 mg TNT当量电雷管在5 cm垂直距离爆炸,分别于伤后4、12 h,1、2、5、7 d对损伤区脑组织光、电镜病理形态、AQP4 mRNA和蛋白表达水平以及脑含水量进行比较.结果 爆炸伤前RNAi组、爆炸伤后RNAi组大鼠星形胶质细胞和神经元水肿的范围和程度均低于爆炸伤组;在爆炸伤后4 h,爆炸伤组、伤前RNAi组和伤后RNAi组相比,损伤区脑含水量差异不显著(P＞0.05);12 h至7 d,同一时间点爆炸伤前、后进行AQP4 RNAi组大鼠脑含水量均明显低于只行爆炸致伤而未进行AQP4 RNAi组大鼠(P＜0.01).伤前RNAi组损伤区脑含水量在伤后12 h达高峰,伤后RNAi组损伤区脑含水量伤后1 d达高峰,爆炸伤组脑含水量于伤后2 d达高峰.伤前和伤后RNAi组高脑含水量明显低于爆炸伤组高脑含水量(P＜0.01).伤前RNAi组高脑含水量低于伤后RNAi组高脑含水量(P＜0.01).结论 采用AQP4 RNAi的方法可明显减轻爆炸伤后脑水肿.AQP4可能对爆炸伤早期(4 h内)脑水肿的形成过程影响较小,而后期的脑水肿加重过程可能和AQP4表达增高有关.
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应用DNA shuffling及T7噬菌体展示技术定向进化并筛选鉴定sCD74突变体
目的 利用DNA shuffling技术,结合17噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74.以获得高亲和力突变体基因.方法 定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以Dnase Ⅰ消化,回收25-50 bp片段进行DNA shuff-ling;将500 bp shuffling产物经限制性酶切后与T7噬菌体DNA连接,与17 package extracts组建噬菌体文库;采用竞争淘洗方法进行5轮筛选,富集得到高亲和力结合MIF的噬菌体;挑取20株噬菌体单克隆进行基因克隆并测序,对测序结果进行生物信息学分析,同时以竞争ELISA初步鉴定进化效果.结果 20株噬菌体单克隆具有相同的sCD74突变基因.为相同克隆,将此克隆命名为sHCD74m,其基因命名为sHCD74mD;竞争性ELISA分析显示其MIF结合力提高.结论 得到了与MIF高亲和力结合的sCD74突变体基因sHCD74mD.
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M2-PK在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中的表达
M2型丙酮酸激酶(M2-pyruvate kinaae,M2-PK)是近年来研究发现的一种器官非特异性肿瘤标志物[1].本研究通过检测宫颈鳞癌和宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织以及患者血浆M2-PK水平,探讨M2-PK与宫颈癌发生、发展的关系及其临床意义.
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阴道斜隔综合征1例
患者,21岁,因外院人工流产时发现阴道前壁包块,人工流产术后B超提示:盆腔内见10.7 cm ×7.4 cm大小混合性包块,遂于2007年11月6日入我院治疗.查体:阴道前壁上段扪及10 cm ×6 cm的囊性包块,边界清,固定,无压痛,包块顶端与子宫颈、子宫分界不清,阴道顶端见单个子宫颈,宫底稍凹陷,双附件区软.
关键词： 阴道斜隔综合征 -
胃黏膜相关性淋巴组织淋巴瘤1例
1 临床资料患者,男性,68岁,因"上腹部饱胀不适伴烧心1年余,加重1个月余"于2004年1月27日入院.查体:体温3600 ℃,脉搏80次/min,呼吸18次/min,血压120/75 mmHg,全身浅表淋巴结未触及肿大,腹部查体无明显阳性体征.胃镜检查示:胃窦部可见两处浅表性溃疡周围黏膜可见结节状隆起.术前病理活检诊断为:胃窦黏膜急、慢性炎伴坏死渗出溃疡形成,固有层内多量淋巴细胞、浆细胞浸润聚集.
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沙棘原花青素治疗溃疡性结肠炎的疗效观察
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, uc)又称慢性非特异溃疡性结肠炎,目前尚无特效的治疗方法,是消化系统顽症.近年来我们用沙棘原花青素(sea buckthom procyanidins, SBPC)治疗UC,与西药柳氮磺胺吡啶(SASP)对照,并通过肠镜下活检肠黏膜组织检测PS2的表达,并同时检测了溃疡性结肠炎患者肠黏膜中SOD、MDA含量,旨在探讨氧自由基(oxygen flee radicals,OFR)、PS2在UC发病中的作用,为中药治疗UC提供理论依据,现报告如下.
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主动脉夹层动脉瘤腔内隔绝术后多发性脑血管病1例
我科经全脑血管数字减影血管造影术(DSA)证实主动脉夹层动脉瘤、腹主动脉动脉瘤、双髂动脉动脉瘤腔内隔绝术后左侧锁骨下动脉闭塞、左侧颈总动脉窦部次全闭塞1例,并对左侧颈动脉窦部严重狭窄处血管行血管内支架治疗及球囊后扩张术, 现报告如下.
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胆总管下段周围结核的临床分析
胆总管下段结核临床上较少见,因其临床症状不典型,易漏诊及误诊.第三军医大学西南医院2002年1月至2005年3月共收治胆总管结核患者6例,均行手术探查,并有明确病理组织学诊断资料.现报告如下.
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儿童假性垂体瘤MRI及临床表现
儿童假性垂体瘤并非真正肿瘤,它是由于不同原因引起甲状腺激素缺乏后,反馈作用至垂体前叶,使之过渡分泌增生所致[1],临床上少见.现将我院2001年1月至2006年12月收集的6例病例,结合文献加以讨论,以提高对该病的认识和诊断水平.
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MMP-7,E-cadherin与贲门癌生物学行为的关系
目的 探讨MMP-7、E-cadherin的表达及其与贲门癌和幽门癌生物学行为差异的关系.方法 采用免疫组化方法 对86例贲门癌和幽门癌标本中MMP-7、E-cadherin的蛋白表达进行了检测.结果 MMP-7在贲门癌和胃窦癌的阳性率分别为75.6%和53.3%;二者表达差异有统计学意义(P＜0.05).MMP-7和E-cadherin二者之间呈现显著的负相关(r=-0.82,P＜0.01);在贲门癌中MMP-7表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、临床分期有关(P＜0.05),E-cadherin表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、临床分期、生长方式有关(P＜0.05);MMP-7阳性、阴性5年生存率分别为19.35%、40.0%,二组间存在显著性差异(P＜0.05).结论 MMP-7、E-cadherin与胃癌的生物学行为密切相关,并且MMP-7成为判断贲门癌预后的指标.
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D-二聚体检测在尿激酶溶解血凝块体外实验中的应用
目的 通过D-二聚体定量分析,探讨尿激酶溶解体外血凝块的佳浓度和佳作用时间.方法 采用6×6拉丁方设计,通过测定D-二聚体浓度,分析不同浓度尿激酶、不同作用时间对不同时间血凝块溶解效果的影响.结果 尿激酶浓度和作用时间对血凝块溶解效果有显著影响(F=113.776,P＜0.01;F=14.612,P＜0.01),而血凝块形成时间对血凝块溶解的影响无统计学意义(F=0.733,P=0.607);50 000 IU/ml和100 000 IU/ml尿激酶浓度以及6、12 h和24 h作用时间的血凝块溶解效果明显高于其他组别(P＜0.05).结论 50 000 IU/ml为尿激酶溶解血凝块的佳浓度,6 h为佳作用时间.
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端粒酶逆转录酶启动子hTERT/U6嵌合启动子的siRNA表达载体的构建及鉴定
目的 构建有hTERT/U6嵌合启动子的小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)表达载体,并用分子生物学的技术和方法验证其对肝癌细胞SMMC-7721的效应.方法 构建siRNA-EGFP-PTZU6+1表达载体,将其转染到稳定表达EGFP的肝癌细胞株7721(EGFP-7721),观察细胞荧光的变化及RT-PCR,Western blot筛选出更有效的siRNA-EGFP-FIEU6+1载体.PCR扩增端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase promoter,hTERT)启动子的核心序列,构建针对EGFP基因的hTERT/U6嵌合启动子siRNA表达载体(EGFP-siRNA-PTZU6+1-U6/hTERT),正向和反向插入的hTERT启动子各1个,并将其转染至EGFP-7721细胞中,RT-PCR验证其效应.结果 RT-PCR,Western blot结果表明两重组质粒siRNA-EGFP-PTZU6+1转染EGFP-7721细胞后EGFP基因的表达无统计学差异,但与对照组比较均显著抑制了EGFP基因(P＜0.01).而且,RT-PCR结果显示,反向插入的重组质粒EGFP-siRNA-PT-ZU6+1-U6/hTERT与对照组相比显著抑制了EGFP基因的表达(P＜0.05).结论 构建的含hTERT/U6嵌合启动子的siRNA表达载体在肝癌细胞中具有功能活性,为探讨基因的靶向治疗奠定了基础.
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四肢骨折的微创外科治疗
微创技术是20世纪后半叶兴起的一项新的外科技术,与基因生物工程、器官移植并称为21世纪医学发展的三大主流."微创外科(minimally invasive surgery,MIS)"这一概念早由英国泌尿科医生Payne等[1]于1985年首次提出,但并未受到重视.自从1987年法国Mouret[2]成功施行了世界首例腹腔镜胆囊切除术后,"微创外科"才逐渐被广泛接受.目前微创外科技术还没有确切的定义,通常是指以小的侵入损伤和小的生理干扰达到佳外科疗效的一种新的外科技术.
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克氏针结合外固定支架治疗桡骨远端不稳定骨折
目的 探讨微创手术治疗桡骨远端不稳定骨折的临床疗效.方法 回顾性分析自2003年5月采用克氏针结合外固定支架治疗的31例33侧桡骨远端不稳定骨折,男性12例,女性19例,年龄42～81岁,平均54.15岁.根据AO/SAIF分型:B1型2侧,B2型2侧,B3型4侧,C1型8侧,C2型12侧,C3型5侧.结果 术后随访6～36个月,平均18个月,均获得骨折愈合且对位良好,患者术后腕关节活动范围明显改善,疗效依照Dienst功能评估标准进行评定:优22侧,良7侧,可4侧,优良率为88%.结论 克氏针有限内固定结合外固定支架治疗桡骨远端不稳定骨折是一种微创手术,操作简单,固定可靠,疗效满意.
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未波及关节面胫骨远端骨折的经皮内固定治疗
目的 观察微创接骨板固定技术(minimally invasive plate osteosynthesis,MIPO)经皮植入三叶草钢板治疗未波及关节面的胫骨远端骨折的疗效.方法 回顾本科2004年8月至2006年11月收治的19例未波及关节面的胫骨远端骨折.其中闭合性骨折15例,开放性骨折4例(均为Ⅰ度开放性骨折),伴有腓骨骨折16例.均采用间接复位、微创经皮植入三叶草钢板固定治疗.结果 随访6～23个月,平均12个月,愈合时间4～7.5个月,平均5.7个月,无内固定松动、断裂及畸形,有3例因挫伤术后早期出现皮肤色泽改变,予以对症、观察后好转,其余患者术后仅出现短暂的软组织肿胀,未发现感染及皮肤坏死.结论 MIPO微侵入经皮植入三叶草钢板是治疗未波及关节面胫骨远端骨折的一种理想、有效的方法.
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半环槽式外固定治疗内固定失败的胫骨骨折
目的 评估采用半环槽式外固定治疗胫骨骨折内固定失败的疗效.方法 对近15年来收治的65例胫骨骨折内固定失败的病例临床资料进行回顾性分析.65例胫骨骨折内固定失败病例,钢板螺钉内固定42例,螺丝钉加钢丝固定11例,髓内钉同定6例,螺丝钉内固定6例.其中32例有软组织缺损,62例有感染.所有病例均取出失效内同定后采用半环槽式外固定治疗.32例软组织缺损和骨外露,10例经腓肠肌皮瓣转位覆盖,6例用腓肠肌内侧头转位加植皮消除创面,16例采用筋膜皮瓣修复.结果 65例中49例伤口Ⅰ期愈合(75%),骨折愈合时间为4～8个月(平均5.9个月).结论 半环槽式外固定是治疗胫骨骨折内固定失败的有效方法.
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经皮加压空心钉微创治疗老年新鲜股骨颈骨折
目的 探讨应用闭合复位、经皮加压空心钉技术微创治疗老年新鲜股骨颈骨折的疗效.方法 对我科1997年5月至2005年12月间行闭合复位、经皮加压空心钉治疗的145例老年新鲜股骨颈骨折患者进行回顾性分析,按Garden分型:Ⅰ型7例,Ⅱ型54例,Ⅲ型78例,Ⅳ型6例.结果 随访12～104个月,平均46.2个月.139例骨折愈合,6例骨不连,骨折愈合率95.9%.17例股骨头缺血坏死,坏死率11.7%.其中Garden Ⅳ型骨折愈合率83.3%,股骨头缺血坏死率66.7%.髋关节功能评价,优58例,良73例,差14例,优良率90.3%.结论 闭合复位、经皮加压空心钉技术微创治疗老年新鲜股骨颈骨折具有创伤小、固定牢靠、可早期功能锻炼、骨折愈合率高等优点,但对Garden Ⅳ型骨折宜采用关节置换术.
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微创内固定系统在膝关节周围骨折治疗中的初步应用
目的 探讨微创内固定系统(less invasive stabilization system,LISS)治疗股骨远端及胫骨近端骨折的临床疗效.方法 回顾性分析2005年3月至2007年5月应用LISS技术治疗的12例膝关节周围骨折的病例资料.男性8例,女性4例,年龄24～47岁,平均36.5岁.股骨远端骨折7例,胫骨近端骨折5例.按国际内固定研究协会(Association for the study of internal fixation,AO/ASIF)分型:股骨远端A2型4例、C1型2例、C2型1例;胫骨近端A2型2例、C1型2例、C2型1例.均为新鲜闭合性骨折.受伤至手术时间3～15 d,平均7.5 d.除关节内骨折有限切开复位外,其他骨折均行间接复位,经小切口肌肉下骨膜外植入LISS,导向器导引下经皮自钻自攻皮质螺钉锁定.结果 平均手术时间58 min(40 ～90 min),平均出血量80 ml(60～120 ml),均未植骨.随访6～18个月,平均11个月,骨折全部愈合.X线愈合时问平均13.2周(11～24周),完全负重时间平均12.7周(8～20周).术后无1例感染、螺钉脱落、固定失效等发生.1例术后发生关节面复位丢失,术后关节活动范围96°～120°.以Johner评价标准进行评估:优7例,良4例,可1例.结论 LISS可保护骨膜及骨折部位血运,促进骨折愈合和功能恢复,是一种有效治疗膝关节周围复杂性骨折的新方法.
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儿童肱骨髁上骨折经皮克氏针治疗的临床疗效
目的 分析微创手术治疗儿童肱骨髁上骨折的临床疗效.方法 回顾分析我科自2000年8月至2007年10月采用微创手术治疗儿童肱骨髁上骨折获得随访46例,其中伸直尺偏型25例,伸直桡偏型21例.按Garland分型:Ⅰ型7例,Ⅱ型11例,Ⅲ型28例.患儿平均年龄为6岁2个月(1.6～8岁).手术方式为全身静脉麻醉下先在"C"型臂X线机引导下闭合复位,然后经皮穿入2～3枚克氏针固定骨折,并应用上肢石膏固定肘、腕关节于功能位.结果 本组46例获得随访,平均随访时间为10个月(3～36个月).所有患者均获得骨性愈合,患侧肘关节活动度:平均伸直角度为0°.平均屈曲角度为135°,无1例出现Volkmann挛缩及医源性神经损伤,1例患者出现肘内翻畸形.结论 微创手术治疗儿童肱骨髁上骨折具有创伤小、骨折固定稳定、防止Volkmann挛缩以及肘关节功能恢复良好等优点;但骨折复位不良,尤其是尺偏未恢复可能导致肘内翻畸形.
