第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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上调核糖核酸酶抑制因子对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响
目的 研究核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响.方法 构建RI真核表达质粒plRES2-EGFP-RI稳定转染B16细胞,未转染和空质粒作对照组(pIRES2-EGFP组),经G418筛选出阳性克隆.RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光检测RI的表达;MTF检测细胞的增殖;流式细胞术、TUNEL及Hochest33342检测细胞周期及凋亡;Western blot检测凋亡相关的蛋白及ILK/PI3 K/AKT信号通路关键分子的表达;分别注射各组B16细胞到C57/BL小鼠建立移植瘤模型,观察肿瘤的生长及肿瘤微血管的变化,进一步分析ILK/PI3 K/AKT信号通路蛋白在肿瘤组织中的表达.结果 转染RI细胞组的RI mRNA和蛋白表达水平显著升高;MTT结果显示B16-RI细胞较对照组增殖能力明显降低,流式细胞结果显示B16-RI细胞的S期明显增加,表明RI表达上调后细胞生长停滞于S期(P＜0.05);Hochest 33342、TUNEL及Annexin V和PI双染色流式法细胞凋亡检测结果证实,B16-RI细胞与对照组相比出现大量凋亡细胞(P＜0.01)及典型凋亡形态特征:染色质凝集,核碎裂和明亮的蓝色荧光等;Western blot结果显示,与对照组相比,B16-RI细胞中ILK、p-Akt、p-GSK3β、Bcl-2及β-catenin的表达明显降低,而活化的Caspase-3和Bax蛋白的表达显著增加(P＜0.01);动物的移植瘤实验结果显示,转RI组的小鼠的瘤重显著降低(P＜0.01),瘤组织中的血管密度明显减少,同时ILK、p-Akt、p-GSK3p、β-catenin在瘤组织中表达减少.TUNEL肿瘤组织凋亡检测结果与体外细胞一致.结论 过表达RI可能通过调节ILK/PI3 K/AKT信号通路显著抑制了小鼠黑色素瘤B16细胞的生长并诱导了B16细胞的凋亡.
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超声辅助改良骶管阻滞麻醉用于婴儿腹股沟疝手术的临床分析
目的 评价超声辅助改良骶管阻滞麻醉用于婴儿腹股沟疝手术的安全性和有效性.方法 择期行腹股沟疝手术的患儿60例,年龄4～12个月,ASA Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法将患几分为两组:传统方法组和改良方法组,每组30例.骶管阻滞采用0.15％罗哌卡因,推注速度0.5 mL/s,总量1 mL/kg,超声监测局麻药在硬膜外腔的扩散.记录患儿性别、年龄、体质量,麻醉诱导后(t1)、手术开始时(t2)、手术开始后10 min(t3)和手术结束时(t4)的心率、血压、呼吸、脉搏氧饱和度等生命体征.记录穿刺成功所需时间、穿刺次数、误入血管或蛛网膜下腔情况以及局麻药在硬膜外腔达到的高节段.结果 所有患儿生命体征平稳,骶管阻滞效果完善.传统方法组和改良方法组,局麻药达到腰1的比例分别为86.7％和83.3％.在传统方法组中,第1次穿刺成功率为83.3％,穿刺成功所需时间为(299.9 ±35.6)s,有3例误入血管和l例误入蛛网膜下腔.在改良方法组中,第1次穿刺失败率为96.7％,穿刺成功所需时间为(297.6 ±28.4)s,无误入血管或蛛网膜下腔的病例.结论 采用超声辅助改良骶管阻滞法,穿刺成功率高,并发症少,阻滞效果完善.
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经乙状窦前入路的脑干腹侧区微创手术的虚拟解剖学研究
目的 在虚拟现实系统中探讨乙状窦前入路显露脑干腹侧的微创手术路径解剖特征.方法 对15例尸体头颅行头颅CT和MRI扫描,影像数据输入虚拟现实系统构建颈静脉孔区三维解剖模型,选择骨性结构和颅神经出脑干处的标志点绘制圆柱模拟经岩骨乙状窦前入路显露脑干腹侧的手术路径,观察测量和比较显露脑干腹侧不同部位的路径中解剖结构空间构筑情况.结果 模拟经岩骨乙状窦前入路显露脑干腹侧的路径中清晰显示所包含的神经、血管等解剖结构的空间层叠顺序,三维影像模型中所测路径中岩骨骨性结构体积:路径b＞路径c＞路径a,后组颅神经体积:路径c＞路径b＞路径a,路径a中包含静脉和小脑前下动脉体积大,面听神经复合体体积:路径b＞路径a,面神经垂直段体积:路径c＞路径a,差异均有统计学意义(P＜0.05).路径中迷路体积路径b和路径c比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 虚拟现实系统有助于理解乙状窦前入路显露脑干腹侧不同靶点时途径骨性结构、神经、血管等的空间构筑关系.
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BMP-2、XIAP在细胞丰富型和基质丰富型涎腺多形性腺瘤中的表达及意义
目的 研究BMP-2、XIAP在细胞丰富型和基质丰富型涎腺多形性腺瘤中的表达及其与复发、恶变的相关性.方法 收集2004年1月至2013年1月我院92例多形性腺瘤标本,经HE染色后分为细胞丰富型(A)、基质丰富型(B)、其他型(C)3组,运用免疫组化法检测BMP-2、XIAP在各组的表达并分析各组复发及恶变情况;TUNEL染色法检测各组组织细胞凋亡情况.结果 疫组化结果:BMP-2表达在B、C、A组中依次递减,XIAP在A、B、C组中表达依次递减,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).复发病例中BMP-2显著高于未复发病例(P＜0.05),恶变病例中XIAP显著高于未恶变病例(P＜0.05).TUNEL结果显示,A组中凋亡指数显著低于其他2组(P＜0.05),而B、C2组差异间无统计学意义.结论 ①基质丰富型多形性腺瘤更容易复发,而细胞丰富型多形性腺瘤更容易恶变.②BMP-2的表达水平可能与多形性腺瘤的复发有关,而XIAP的表达水平与多形性腺瘤的恶变有关.
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原发性肝癌首次TACE治疗时RIPA参与肿瘤供血的影响因素分析
目的 分析原发性肝癌首次经动脉插管化疗栓塞时右侧膈下动脉(right inferior phrenic artery,RIPA)参与肿瘤供血的相关影响因素,作为术前判断其是否存在供血的重要参考依据.方法 回顾性分析我院161例原发性肝癌首次行插管化疗栓塞时即行右侧膈下动脉造影者的MRI或CT、DSA资料,按肿瘤是否有RIPA参与供血分RIPA组与NRIPA组,分析两组病例肿瘤大小、位置、包膜,并对其行单因素分析及多因素logistic回归分析.结果 161例中RIPA参与肿瘤供血77例(47.8％),单因素分析显示肿瘤大小(P＜0.01)、是否累及肝包膜(P =0.034)、肿瘤有无完整包膜(P＜0.01)、肿瘤主要部分所在肝段(P＜0.01)在两组间有统计学差异,多因素logistic回归分析显示肿瘤大小分类、有无完整包膜及肿瘤主要部分所在肝段为首次TACE治疗时RIPA参与肿瘤供血的独立预测因素.结论 原发性肝癌首次TACE治疗时,当肿瘤为位于肝裸区或膈下的大肝癌,尤其是位于Ⅶ段且无完整包膜者,RIPA参与肿瘤供血的机会增加.
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IGF-1和IGF-1R在无功能性垂体腺瘤中的表达及意义
目的 探讨胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)和胰岛素样生长因子1型受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1R)与无功能性垂体腺瘤侵袭性和复发性的关系.方法 60例无功能性垂体腺瘤分为侵袭性复发性组(16例)、侵袭性非复发性组(24例)和非侵袭性非复发性组(20例).采用qRT-PCR检测IGF-1和IGF-1R的mRNA表达水平,采用免疫组织化学法和Western blot检测IGF-1、IGF-1R和其下游信号分子血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的蛋白表达水平.结果 IGF-1和IGF-1R的mRNA表达水平及IGF-1、IGF-1R和VEGF的蛋白表达水平,侵袭性复发性组高于侵袭性非复发性组(P＜0.05),侵袭性非复发性组高于非侵袭性非复发性组(P＜0.05).相关性分析结果显示,在侵袭性复发性、侵袭性非复发性无功能性垂体腺瘤组织中IGF-1和IGF-1R蛋白表达量呈正相关(r=0.85,r=0.80,P＜0.05),IGF-1R和VEGF蛋白表达量呈正相关(r =0.74,r=0.70,P＜0.05);在非侵袭性非复发性无功能性垂体腺瘤组织中IGF-1和IGF-1R蛋白表达量呈正相关(r =0.73,P＜0.05),IGF-1R和VEGF蛋白表达量无明显相关性(P＞0.05).结论 IGF-1、IGF-1R和VEGF在侵袭性和复发性无功能性垂体腺瘤中表达上调,三者协调作用,与无功能性垂体腺瘤的侵袭性和复发性恶性行为的发生、发展可能相关.
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陆地军训所致膝关节前交叉韧带损伤的伤情特点及诊疗效果分析
目的 分析陆地军训所致膝关节前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)损伤的伤情特点及诊疗效果.方法 回顾性调查2003年6月至2013年6月于我科手术治疗的ACL损伤部队患者233例(246膝),分析其ACL损伤的机制特征、发生率、易损伤训练项目、主要确诊依据、常见合并损伤及有效治疗方法.结果 ACL损伤多于半屈曲位发生,跨越障碍训练的发生率高;易合并侧副韧带及半月板损伤;自体腘绳肌腱移植ACL重建手术疗效优良.结论 陆地军训所致膝关节ACL损伤的伤情较为严重,条件允许的情况下应积极采取重建手术.
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罂粟碱对断指再植患者血浆降钙素基因相关肽和内皮素的影响
目的 比较经局部、静脉、肌肉注射罂粟碱配伍布比卡因进行腋路臂丛阻滞对断指再植患者血浆降钙素基因相关肽和内皮素的影响.方法 120例急诊单指离断伤需行断指再植术患者,采用随机数字表法将患者均分4组:A、B、C组为观察组,D组为空白对照组.4组均采用0.25％盐酸布比卡因1.5 mg/kg,容量(40.2 ±2.9)mL作腋路臂丛神经阻滞(用神经刺激器引导定位)麻醉药物,A、B、C组分别在局麻药液中、静脉滴注中和肌肉注射中加用0.0625 mg/mL罂粟碱(0.0375 mg/kg).4组患者分别在臂丛阻滞前(T0)和臂丛阻滞后0.5 h(T1)、1 h(T2)、2h(T3)、4 h(T4)、8 h(T5)、12 h(T6)抽取静脉血,采用放射免疫法检测血浆降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)和内皮素(endothelin,ET)的含量,并记录术后1周血管危象发生率及再植指存活率.结果 A组在T1、T2、T3T4、T5时血浆CGRP水平较D组升高,而ET水平较D组下降(P＜0.05);B组在T1时血浆CGRP水平较D组升高,而ET水平较D组下降(P＜0.05).A组:T1、T 、T3 、T4、T5与T0比较血浆CGRP水平升高,而ET水平下降(P＜0.05);B组:T1与T0比较血浆CGRP水平升高,而ET水平下降(P＜0.05).A组患者没有发生血管危象,再植指全部存活,而B、C、D组患者分别有2、3、6例发生血管危象,分别有1、2、2例再植指坏死.结论 局麻药液中罂粟碱配伍布比卡因腋鞘内臂丛阻滞麻醉较其他方式能够在较长时间内升高断指再植患者血浆CGRP,降低ET的含量,可以减少断指再植患者发生血管危象,提高断指的存活率.
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干扰Nrf2基因后骨髓间充质干细胞移植对大鼠心肌梗死后心肌凋亡的影响
目的 观察干扰核因子相关因子2(Nrf2)的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)注射大鼠心肌梗死局部后细胞凋亡情况及对心功能的影响.方法 建立心肌梗死大鼠模型,随机分为:①干扰Nrf2基因的MSCs移植(Nrf2干扰组)组;②空载慢病毒修饰的MSCs移植(Nrf2正常组);③生理盐水注射对照组(对照组,n=12).心肌梗死细胞移植后7d,细胞免疫荧光法检测心肌局部caspase3蛋白的表达;移植后28 dHE染色评价梗死后心肌组织病理变化,TTC染色评估梗死面积;采用蛋白印迹法(Western blot)检测心肌梗死区Nrf2和凋亡蛋白Bcl2、Bax的蛋白表达水平.结果 心梗细胞移植后7d,心肌梗死区域有EGFP标记的MSCs,部分EGFP表达位置检测到Caspase3表达阳性,Nrf2干扰组凋亡蛋白Caspase3的荧光强度强,Nrf2正常组Caspase3的荧光强度弱,对照组无EGFP表达;细胞移植后28 d,HE染色结果显示,与Nrf2正常组比较,Nrf2干扰组心肌组织肌纤维排列紊乱,炎性细胞浸润明显,而Nrf2正常组细胞排列整齐,炎性细胞浸润减少;心肌TTC染色结果显示,Nrf2干扰组的心肌梗死面积为(35.30±0.41)％,较Nrf2正常组[(25.07±0.15)％]明显增加(P＜0.05),与对照组[(35.40±0.70)％]比较无差异(P＞ 0.05);Western blot结果显示,与Nrf2正常组比较,Nrf2干扰组心肌中Nrf2蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降,而促凋亡蛋白Bax表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05),Nrf2干扰组与对照组比较,各蛋白表达无差异性(P＞0.05);心功能改善方面,Nrf2干扰组EF[(40.83±2.67)％]较Nrf2正常组[(52.35±1.58)％]降低(P＜0.050而心室容积较[(LVDd,(1.090±0.061),LVDs (0.750±0.062)]较Nrf2正常组[(LVDd,(0.790 0±0.024 5),LVDs(0.610±0.026)]增加.结论 移植干扰Nrf2的MSCs后,心肌梗死区凋亡相关蛋白表达增加,降低了外源性MSCs对梗死心脏的修复能力.
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ACE2对脂多糖损伤人脐静脉内皮细胞的抗黏附作用
目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导血管内皮细胞损伤后细胞黏附性改变与血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)的表达变化的关系,探讨ACE2对血管内皮细胞损伤所致黏附性增加的对抗作用.方法 分别用不同浓度(0、10、100、1 000 ng/mL)LPS诱导人脐静脉内皮细胞(umbilical vein endothelial cell,HUVEC)致其损伤,人单核细胞白血病细胞(human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)黏附实验观察HUVEC的黏附性改变.本实验设置4个实验组,分别为未经任何处理的空白对照组、1 000 ng/mL LPS处理6h的模型组、以10 μmol/L氯沙坦钾预处理模型组的氯沙坦钾组及以10 μmol/L A779预处理空白对照组的A779组(n=3).Western blot及RT-PCR法分别检测ACE2的蛋白和基因表达,ELISA法检测细胞上清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)及细胞间黏附分子1(ICAM-1)的含量.结果 单核细胞黏附实验可见黏附在HUVEC上的THP-1呈绿色荧光,黏附细胞数呈LPS诱导浓度及时间依赖性显著增加(P＜0.01);Western blot结果显示,LPS诱导HUVEC损伤模型组中ACE2蛋白表达水平较空白对照组显著减少(37.33±3.50)％(P＜0.01);RT-PCR结果显示,模型组中ACE2 mRNA表达水平较空白对照组显著减少(26.31±2.19)％(P＜0.01);ELISA结果显示,模型组较空白对照组细胞上清Ang1-7显著降低(P＜0.05),AngⅡ及ICAM-1均显著升高(P＜0.01),氯沙坦钾处理组较模型组ICAM-1显著降低(P＜0.01),A779处理组较空白对照组ICAM-1显著升高(P＜0.05).结论 LPS诱导损伤HUVEC细胞后其黏附性增加与ACE2表达下调密切相关,提示ACE2具有一定抗黏附作用.
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腺相关病毒AAV2/8-CaMKⅡα-ChR2-mCherry的组织学及通道功能鉴定
目的 对腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry在大鼠内侧前额叶谷氨酸能神经元中表达的组织学及通道功能予以鉴定.方法 以立体定位注射技术将腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry注射到SD雄性大鼠内侧前额叶,当病毒注射3～4周后,采用免疫荧光组织化学技术检测标记蛋白(mCherry)在谷氨酸能神经元(特异启动子CaMKIIα)的表达情况;利用在体细胞外记录技术观测谷氨酸能神经元所表达的通道蛋白(ChR2)对不同光刺激频率的电生理反应特性.结果 病毒成功注射到内侧前额叶并特异表达通道蛋白于谷氨酸能神经元的细胞膜上,表达成功率为(94.6±0.9)％;表达ChR2通道蛋白的谷氨酸能神经元对蓝光(470 nm,20 mW/mm2,5 ms波宽,5～80 Hz)产生稳定的光激活反应,并且对低频光刺激(5、10、20 Hz)的反应性优于高频光刺激(40 Hz和80 Hz;P ＜0.001).结论 腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry能成功表达在谷氨酸能神经元的细胞膜上,对光刺激有频率选择性.
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钠钙交换体NCX1在急性胰腺炎发生、发展中的作用
目的 研究钠钙交换体NCX1在急性胰腺炎发生、发展中的作用.方法 分离SD大鼠胰腺腺泡细胞,用雨蛙素诱导体外AP模型,采用qRT-PCR、Western blot检测NCX1、TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白的表达变化;再加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943预处理腺泡细胞,检测NCX1、TNF-α、IL-6的表达变化.构建SD大鼠AP模型,分为阴性对照组,雨蛙素组及雨蛙素+NCX1抑制剂组,qRT-PCR检测比较各组大鼠胰腺组织中NCX1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达变化,采用生化分析仪检测各组血清淀粉酶浓度的变化;各组大鼠胰腺组织经HE染色后观察组织病理学改变.结果 从细胞水平证实在急性胰腺炎中NCX1及炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白表达量较阴性对照组均明显升高(P＜0.01),而加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943预处理后能明显抑制雨蛙素诱导的炎症反应,NCX1、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白表达量较雨蛙素组均明显下降(P＜0.01).从动物水平证实在AP大鼠中NCX1及炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达量较阴性对照组明显升高(P＜0.01),其血清淀粉酶浓度较阴性对照组也明显升高(P ＜0.001);但加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943后,NCX1、TNF-α、IL-6的mRNA表达量和血清淀粉酶水平较雨蛙素组均有所下降(P＜0.01),同时急性胰腺炎的病理改变程度较雨蛙素组亦明显减轻.结论 钠钙交换体NCX1介导了急性胰腺炎的发生、发展;提示NCX1可以作为急性胰腺炎治疗的靶标.
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高强度聚焦超声治疗小鼠皮下瘤后IL-6和IL-10表达的变化
目的 探讨高强度聚焦超声(HIFU)治疗小鼠结直肠癌皮下瘤的有效性和治疗前后IL-6和IL-10表达的变化情况.方法 采用结直肠癌细胞系,建立BABI/c小鼠皮下瘤模型,数量60只;采用JC-200肿瘤治疗系统,分为6组:对照组(荷瘤假照组),治疗后1、3、5、7d及14 d组,眼球取血,收集肿瘤组织,石蜡包埋后HE染色观察组织病理变化,并检测残余肿瘤组织和血清中IL-6和IL-10的表达水平.结果 HIFU能有效地消融肿瘤组织,靶区组织随时间的变化出现以水肿、出血、炎症细胞浸润、坏死、纤维增生为主的病理学变化.HIFU消融后肿瘤组织及外周血IL-6和IL-10的表达均表现为上升后下降的趋势.HIFU后1、3、5、7d血清中IL-6的浓度均显著高于对照组(P＜0.05),14 d检测,IL-6的表达则明显下降(P＞0.05);血清中IL-10的浓度与对照组相比在1、3d明显升高(P＞0.05),1d后达到高峰,而血清IL-10的浓度在5、7、14 d组与对照组相比,无明显差异(P＞0.05).结论 HIFU能有效治疗结直肠癌,且肿瘤残余组织和血清中IL-6和IL-10的表达早期升高,后期IL-6明显降低,而IL-10无明显变化.
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男性先天性中高位肛门直肠畸形的诊断及伴发畸形评估的临床研究
目的 探讨并总结男性先天性中高位肛门直肠畸形的准确诊断方法及伴发畸形情况,为手术方案选择及预后评估提供参考.方法 回顾性分析29例男性先天性中高位肛门直肠畸形患儿的临床表现、辅助检查及伴发畸形,总结其临床特点、各项辅助检查对于准确诊断直肠盲端位置的价值及伴发畸形随访变化情况.结果 (1)29例患儿均以腹胀、呕吐为主要临床表现,其中仅有6例在术前发现尿道排粪便;(2)倒立位摄片、会阴部超声、结肠造瘘后远端造影及肛门成型术时测得直肠盲端距肛隐窝的距离分别为(28.08±16.03)ram、(14.29 ±7.30) mm、(26.59±14.45)mm和(27.54±15.96)mm,经统计分析,会阴部超声与倒立位摄片、结肠造瘘后远端造影、术中测值均有显著性差异(P＜0.05);倒立位片及结肠远端造影测得直肠盲端位置与术中测值无显著性差异(P＞0.05);(3)伴发畸形中以先天性心脏结构畸形、泌尿系统畸形和脊柱脊髓畸形常见,其中部分合并心脏结构畸形和泌尿系统畸形患儿可自愈;合并脊柱脊髓畸形可能会影响患儿术后排便功能.结论 结肠造瘘后远端造影检查与术中测值相关性优于倒立位摄片,首次就诊时手术方式的选择需综合考虑临床表现、倒立位摄片及伴发畸形;造瘘口远端造影检查为肛门成型术术中操作提供重要参考;伴发畸形需密切随访,尤其是合并脊柱脊髓畸形可能会影响患儿术后排便功能.
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葫芦素E对人结肠癌细胞Caco-2增殖与迁移的影响及其作用机制
目的 研究葫芦素E(CuE)对人结肠癌细胞Caco-2增殖与迁移的影响,并探讨CuE作用的分子机制.方法 用0.001、0.01、0.1、1、10 μmol/L的CuE分别处理培养的Caco-2细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力,采用划痕实验及Transwell小室细胞跨膜实验检测细胞迁移能力,荧光法检测细胞F-actin与G-actin相对含量,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架F-actin,Western blot分别检测cofilin、p-cofilin、LIMK2及p-LIMK2蛋白表达.结果 CCK-8法、划痕实验与Transwell跨膜实验显示:0.1、1、10 μmol/L的CuE对Caco-2细胞的增殖与迁移均具有明显的抑制作用(P＜0.05),并呈现出剂量与时间依赖性;荧光法表明0.1 μmol/L的CuE能增加Caco-2细胞G-actin含量(P＜0.05),引起F-actin/G-actin的动态平衡失调,并在0.1μmol/L的CuE处理1、2、6、12、24 h后,对细胞骨架F-actin有明显的破坏作用,Western blot检测显示,不同浓度CuE处理Caco-2细胞后,cofilin、p-cofilin及p-LIMK2的蛋白表达明显降低(P＜0.05),而LIMK2表达与对照组比较无明显差异.结论 CuE可能通过抑制LIMK/cofilin信号通路而损害细胞骨架actin,从而导致结肠癌Caco-2细胞的增殖与迁移受到抑制.
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血小板活化功能及血小板微粒对重型血友病A临床异质性的意义
目的 应用流式细胞术检测血小板表面特异性抗原和血小板微粒(platelet microparticles,PMPs),并探讨血小板活化程度及PMPs对重型血友病A患者临床表现异质性的意义.方法 应用特异性荧光单抗CD41 a-APC,CD42b-PE,CD61-FITC,CD62P-PE,and CD63-PE及标准荧光校准微珠流式细胞术检测血小板微粒,比较不同临床表型重型血友病A患者(FⅧ:C＜2％)外周血血小板CD62P和CD63表达率和PMPs水平,其中轻度表型10例(年出血次数＜6),重度表型21例(年出血次数≥24),正常对照者17例.结果 重度表型组和轻度表型组CD62P阳性率均值高于正常对照组[(36.2±9.27)％ vs(22.06 ±10.72)％,P=0.001];[(49±11.81)％ vs (22.06±10.72)％,P=0.000];轻度表型组CD62P表达阳性率高于重度表型组[(49±11.81)％ vs(36.2±9.27)％,P=0.0408)].重度出血表型组和轻度出血表型组CD63阳性率均值高于正常对照组[(34.82±7.13)％ vs (19.08±17.05)％,P =0.04;(51.15±14.30)％vs (19.08±17.05)％,P=0.000];轻度表型组较重度表型组CD63阳性率均值高[(51.15±14.3)％vs(34.82±7.13)％,P=0.004 4].轻度表型组PMPs高于重度表型组及正常对照组高[(2.06±1.33)％ vs (0.95±0.64)％,P=0.02];[(2.06±1.33)％vs (1.06±1.20)％,P=0.02].结论 血小板活化功能及血小板微粒是影响重型血友病A临床表型的因素,轻度表型患者血小板活化功能、血小板微粒水平较重度表型高.
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超声内镜评分对消化道及壁外压迫性病变良恶性的诊断价值
目的 建立基于乳腺影像报告和数据系统(breast imaging reporting and data system,BIRADS)的EUS-BIRADS评分体系并评价其对消化道黏膜层、黏膜下及壁外压迫性病变良恶性的诊断价值.方法 回顾性分析我院2006年6月至2012年12月经病理学诊断明确的消化道及壁外病变509例.参照BI-RADS超声诊断标准建立EUS-BIRADS评分体系,依据EUS-BIRADS评分体系在未知病理诊断情况下为每1组超声内镜图像评分,并将评分结果与病理结果比对.ROC曲线分析示AUG=0.947,取EUS评6.5分时为临界值(对应Youden指数高值),分值＞6分的病例倾向于恶性病变,分值≤6分者倾向于非恶性病变.利用Pearsonx2检验、McNemarx2检验、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数、诊断符合率、Kappa值等评估EUS-BIRADS评分体系的诊断价值.结果 EUSBIRADS评分对于黏膜层、黏膜下及壁外病变的良恶性评定的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数、诊断符合率、Kappa值分别为85.1％、92.9％、71.2％、96.8％、0.7795、91.6％、0.723 4.Pearsonx2检验(X2值=269.573,P＜0.001)示EUS-BIRADS评分结果与病理检验结果不独立,其列联系数R=0.728示两者正相关,但McNemarx2检验(P值:0.014)示EUS-BIRADS评分体系与病理学诊断之间存在有差异.结论 基于BI-RADS标准建立的EUS-BIRADS评分体系对消化道及壁外病变的良恶性的预判与病理诊断之间有较好一致性,可以辅助临床医师预判病变性质以利于进一步检查.
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棕榈酸上调FAT/CD36表达致HepG2细胞脂质积聚的机制研究
目的 观察脂肪酸转位酶FAT/CD36在棕榈酸诱导的HepG2细胞内脂质积聚中的作用,并探讨其分子机制.方法 HepG2细胞分对照组和棕榈酸组,用Western blot、双荧光素酶报告基因、荧光定量PCR、多聚核糖体分析检测棕榈酸对CD36表达、启动子活性和蛋白翻译效率的影响;油红O染色和FFA定量测定反映细胞内脂质含量;荧光显微镜实时观察细胞对FFA的动态摄入.然后将小干扰RNA转染到HepG2细胞,构建低表达CD36的HepG2细胞和阴性对照HepG2.用油红O染色,FFA定量和荧光显微镜观测棕榈酸负荷的转染细胞内脂质积聚和FFA摄取.结果 棕榈酸能促进HepG2细胞CD36的表达,增强其启动子活性,增加蛋白翻译效率;棕榈酸组细胞内脂滴增多,FFA含量(240.17±19.83) ng/mg明显高于对照组(144.60±53.52) ng/mg(P＜0.05),脂肪酸摄取速度也明显快于对照组;低表达CD36的HepG2细胞中CD36的mRNA和蛋白含量仅为阴性对照细胞的58％和50％.低表达CD36的HepG2细胞内脂滴明显少于阴性对照,FFA水平(98.38±14.18) ng/mg较阴性对照组(240.17 ±21.12) ng/mg明显减低(P＜0.05),细胞对FFA的摄取也减慢.结论 棕榈酸在转录和翻译水平促进HepG2的CD36表达,导致细胞内脂质积聚.
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颅内动脉瘤破裂伴脑内血肿形成的急诊手术治疗疗效分析
颅内动脉瘤破裂出血致蛛网膜下腔出血Hunt-Hess分级Ⅲ～Ⅴ级的治疗方案目前尚有争议,特别是在手术时机方面[1-2].我们通过对我院2007年8月至2014年2月治疗的动脉瘤破裂伴脑内血肿患者的临床资料进行分析,现报告如下.1 资料与方法1.1 临床资料男性9例,女性5例,年龄57～72(63.0±7.2)岁,均为单一动脉瘤.后交通动脉6例,前交通动脉5例,大脑中动脉3例.血肿位于额叶6例,位于颞叶7例,位于侧裂1例;血肿量38 ～60(42.2±12.3)mL.破裂后主要表现为轻-中度昏迷、瞳孔改变.术前Hunt-Hess分级为Ⅲ级7例,Ⅳ级6例,Ⅴ级1例.
