第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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超声空化致犬前列腺损伤的形态学观察
目的 探讨微泡激励的超声空化效应对正常犬前列腺组织的损伤作用.方法 15只健康成年雄性犬随机分为超声微泡组、单纯超声组和微泡假照组.在开腹情况下,联合经静脉推注微泡0.1 ml/kg和脉冲式超声辐照前列腺10 min,治疗后获取前列腺组织,进行大体、光镜和电镜检查.结果 超声微泡组,光镜见前列腺细胞间隙可见显著的微血管破裂、大量出血和血肿形成;电镜可见细胞器肿胀,桥粒等细胞连接断裂,红细胞露出.结论 超声激励的微泡空化效应对犬前列腺有明显的机械损伤作用.
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胆碱能受体在大鼠膀胱ICC样细胞的表达
目的 探讨胆碱能受体(musearinie acetylcholine receptors,M受体)各亚型在大鼠膀胱ICC样细胞(interstitialcells of Cajal,ICC)的表达及意义.方法 制备SD大鼠膀胱组织铺片,通过免疫荧法检测大鼠膀胱组织内ICC样细胞分布情况,并进一步采用免疫荧光双标法(c-kit抗体及M受体业型抗体)检测膀胱ICC样细胞上M受体亚型的表达.结果 在大鼠膀胱肌层及肌间发现膀胱ICC样细胞呈散在或者彼此连接的分布,M受体的5种亚型中,ICC样细胞上不表达M_1、M_4、M_5受体亚型,表达M_2和M_3两种受体亚型.结论 胆碱能神经可能通过激活膀胱ICC样细胞上胆碱能受体来调节膀胱功能.
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马兜铃酸对人肾小管上皮细胞损伤的体外实验研究
目的 研究马兜铃酸(aristoloehie acid,AA)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)的损伤及可能机制.方法 将细胞分为4组:正常对照组与AA30、60、120 μmol/L组(n=6),分别作用于HK-2细胞培养48 h后,倒置相差显微镜观察细胞形态,CCK8试剂盒(Cell Counting Kit-8)检测增殖,流式细胞仪检测凋亡,Western blot分析激活型Caspase-3的表达,全自动生化检测仪测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和B-N-乙酰氨基匍萄糖苷酶(NAG酶)的含量,激光共聚焦扫描荧光显微镜(Laser scanning eonfocal microscope,LSCM)观察α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle aetin,α-SMA)和E-钙黏连蛋白(E-cadherin)的表达,ELISA测定上清液中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和Ⅲ型胶原的分泌.结果 HK-2分别在30、60、120 μmoi/L AA作用48 h后,出现增殖抑制,凋亡增加,激活型Caspase-3表达增多,LDH和NAG酶升高,均旱剂量依赖性.60μmol/1.浓度的AA还表现E-cadherin表达减弱,α-SMA表达增强,TGF-β1和Ⅲ型胶原分泌明显增加(P<0.05).结论 AA可引起HK-2细胞明显的增殖抑制、凋亡和上皮-间允质转分化呈一定的浓度依赖性.
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自噬体在紫绀型先天性心脏病患儿心肌中的表达
目的 检测紫绀型先天性心脏病患儿心肌细胞中自噬体的表达,探讨细胞自噬作用在心肌慢性缺氧适应中的意义.方法 人选行手术矫治的先天性心脏病患儿18例,其中紫绀型先天性心脏病患儿10例,非紫绀型先天性心脏病患儿8例.取手术中切除的右室流出道心肌组织作为标本,采用透射电镜技术观察心肌细胞超微结构的改变,应用western blot检测自噬体特异性标志物LC3一Ⅱ的表达情况.结果 紫绀组患儿术前血氧饱和度明显低于非紫绀组(P<0.01):紫绀组患儿心肌细线粒体数量增多、排列紊乱,内质网肿胀,可见典型自噬体形成;与非紫绀组相比,紫绀组患儿LC3-Ⅱ蛋白表达显著增高(P<0.01).结论 紫绀型先天性心脏病患儿心肌细胞自噬作用增强,可能参与慢性缺氧条件下心肌细胞的适应性调节.
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人pre-miR-15a真核表达载体的构建及其对Raji细胞生长的抑制作用
目的 构建人pre-miR-15a真核表达载体,并研究其对Raii细胞的生长抑制作用.方法 将pre-miR-15a与目标载体(PGCSIL-GFP)定向连接,转化细菌感受念细胞,PCR鉴定阳性克隆,并测序.利用脂质体法将该载体转染Raji细胞,实验分为空白对照组、阴性对照质粒组和pre-miR-15a组(n=5).RT-PCR检测Bel-2 mRNA表达,间接免疫荧光法检测Bcl-2蛋白表达,台盼蓝细胞计数法检测细胞增殖活性.结果 PCR 阳性克隆鉴定及测序结果 均与日的序列一致.倒置荧光显微镜下见绿色荧光表达;RT-PCR法示各组间Bcl-2 mRNA表达差异无显著性(P>0.05);间接免疫荧光法示pre-miR-15a组的Bcl-2蛋白表达量较空白对照组和阴性对照质粒组显著降低(P<0.05);台盼蓝拒染法示pre-miR-15a组Raji细胞生长受抑.结论 本实验成功构建了per-miR-15a真核表达载体,且pre-miR-15a可以抑制Raji细胞生长.
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直径匹配性递增性尿道内切开术治疗前列腺术后复杂性前尿道狭窄临床疗效
目的 研究治疗良性前列腺增生术后复杂性前尿道狭窄的新手术--直径匹配性递增性尿道内切开术的疗效和安全性.方法 自2004年1月至2007年7月,对确诊的39例患者(前尿道均不能通过12 F尿道探条)行直径匹配性递增性尿道内切开术,用小号尿道内切开镜切开狭窄段尿道,中号尿道内切开镜切开次狭窄段和次正常段尿道,术后配合尿道扩张和相应药物治疗以抑制瘢痕生成.结果 39例患者术后随访4～30个月,终35例治愈(89.7%),可通过20～24 F尿道探子,排泄性膀胱尿道造影显示尿道恢复通畅,大尿流率(maximum flow rate,Q_(maxx))为15.5～39.8 mL/s,平均(23.4±6.7)ml/s;3例好转,能通过16～18 F尿道探子,Q_(max)分别为11.2、11.9和14.8 ml/s;1例失败,先后经历3次手术,仍不能白行排尿.结论 直径匹配性递增性尿道内切开术是治疗良性前列腺增生术后复杂性前尿道狭窄的一种较好的方法 .
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靶向EGFR基因RNA干扰对人卵巢癌SKOV_3细胞增殖的抑制作用
目的 利用RNA干扰技术下调表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的表达,观察其对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响.方法 构建针对EGFR基因的siRNA真核表达载体,转染入卵巢癌SKOV_3细胞中,并筛选稳定表达siRNA的转化克隆,RT-PCR及Western blot分别检测EGFR mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,克隆形成实验及MTY法检测细胞克隆形成率及细胞体外的增殖情况.结果 成功构建表达质粒pGenSil-HK、pGcnSil-EGFRI和pGenSil-EGFR2,并转染SKOV,细胞,通过G418筛选后获得稳定转染克隆,RT-PCR及Western blot分析表明转染pGenSil-EGFRI、pGenSil-EGFR2后的细胞EGFR mRNA和蛋白表达均受到了明显抑制,FGFR mRNA抑制率分别为41.87%和68.07%,蛋白表达抑制率分别为45.21%和70.25%.与未转染组和pGenSil-HK组相比,pGenSil-EGFR2组细胞凋亡比例显著增加,G_1期细胞增多,而S期细胞减少(P<0.05);转染pGenSil-HK组克隆形成率为(0.82±0.03),转染pGenSil-EGFR2组克隆形成率为(0.61±0.04),二者比较差异显著(P<0.05),MTT显示细胞培养36 h后,pGenSil.EGFR2组的细胞生长均显著低于未转染组和转染pGenSil-HK组(P<0.05).结论 靶向EGFR基因RNA干扰能够阻抑卵巢癌SKOV_3细胞中的EGFR表达,诱导细胞凋亡、调控细胞周期再分布、抑制细胞增殖.
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去甲肾上腺素促进骨髓间充质干细胞增殖的研究
目的 观察去甲肾上腺素对骨髓问充质干细胞增殖的影响及其作用途径.方法 将BMSCs细胞随机分为3组:①正常对照组;②去甲肾上腺素(10~(-6)～10~(-4)mol/L)处理组;③酚妥拉明(10~(-6)mol/L)采+去甲肾上腺素(10~(-5)mol/L)处理组.采用3H-TdR掺入实验榆测不同实验组对BMSC8增殖的影响;免疫组化和免疫印记法检测去甲肾上腺素埘蛋白激酶C的作用.结果 ①10~(-6)～10~(-4) mol/L的去甲肾上腺素作用8 h后均促进了骨髓问充质干细胞的增殖,并且在10~(-5)mol/L时去甲肾上腺素对骨髓问充质干细胞的促增殖作用为显著;②酚妥拉明阻断了去甲肾上腺素埘骨髓间充质干细胞的促增殖作用;③去甲肾上腺素诱导蛋白激酶c从细胞质到细胞膜转位,酚妥拉明抑制了去甲肾上腺素诱导的蛋白激酶C激活.结论 去甲肾上腺素能够促进骨髓间允质干细胞的增殖,并且这种促增殖作用足通过肾上腺素能受体、蛋白激酶C信号通路来调节的.
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人乳头瘤病毒亚型在其感染相关疾病中检测的意义
目的 通过分析人乳头瘤病毒(human papiilomavirus,HPV)不同亚型的分布特点,探讨不同的基因型与HPV感染相关疾病的关系.方法 回顾性分析在门诊确诊为宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia.CIN)Ⅰ、CIN Ⅱ、CINⅢ、宫颈浸润癌、生殖道湿疣、宫颈HPV亚临床感染共353例患者的HPV哑型的分布情况.结果 353例妇女中HPV阳性176例,阳性率为49.86%.浸润癌中HPV的检出率为100%,且均为高危性HPV感染;HPV感染率在CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CINⅢ、浸润癌逐渐增高,与病变程度密切相关(P<0.05).共检测出15种HPV亚型,依次为16、58、52、33、53、11、31、6、18型等,前4种亚型在宫颈癌和癌前病变中常见,16、58型等高危型HPV感染在HPV感染相关的良性疾病中仍然常见,低危型HPV在生殖道湿疣、亚临床感染中却相对少见.结论 HPV检测和分型具有重要意义,HPV感染的型别具有地域差异性;HPV16型的感染仍是女性健康的大威胁;应重视生殖道湿疣和SPI等良性病变患者的治疗和随访.
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EOLAl基因启动子序列的鉴定
目的 鉴定EOLA1基因启动子序列,为深入研究EOLAl的转录调控机制奠定基础.方法 通过PCR反应进一步缺火突变EOLAI基因5'侧翼区-1672～+51(1723 bp)序列,将产物插入到含荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中,转染ECV304细胞,瞬时表达后测定荧光素酶活性.采用生物信息学分析该1 723 bp片段可能存在的转录因子结合位点.结果 缺失到785 bp片段仍具有肩动子活性,进一步缺欠到717 bp片段后活件消失,从而确定启动子位于-738～ -676 bp序列,其附近含Spl和Myf顺式作用元件.结论 确定了EOLAI启动子范围和转录因子结合位点.
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门冬氨酸钾镁对风湿性心脏病患者瓣膜置换术后心律失常和心功能的改善
目的 观察门冬氨酸钾镁对风湿性心脏病患者瓣膜置换术后心律失常和心功能的改善.方法 将280例风湿性心脏病患者按随机表随机分为2组,治疗组155例,对照组125例,2组在性别、年龄及病因等方面无差异(P>0.05).治疗组给予门冬氨酸钾镁40 ml,静脉滴注,每日1次;对照组常规治疗.同时保持两组患者每天出入相当,动态监测血清钾、镁浓度.观察患者心律失常发生率,以及心功能的变化.结果 手术后的第1天和第2大,治疗组的血清钾、镁浓度高于对照组(P<0.05).治疗组术后14 d的心脏每搏输出量、心输出量和射血分数高于对照组(P<0.05);而左室舒张末内径无差异(P>O.05).治疗组术后3 d心律失常发牛率小于对照组(P<0.05).治疗组频发室早、房颤和室上速的发生牢低于对照组(P
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超声联合微泡造影剂携p53基因转染宫颈癌HeLa细胞的实验研究
目的 探讨超声联合微泡造影剂介导野生型p53(wtp53)基因转染宫颈癌HeLa细胞的可行性、效率性及作用效果.方法 以前期实验所筛选的超声辐照参数(300 kHz,0.5 W/cm~2,30 s)为实验条件,将HeLa细胞分为质粒组(A组)、质粒+超卢组(B组)、质粒+超声+微泡组(C组)、质粒+脂质体组(D组)、空白对照组(E组),分别进行处理.转染24～48 h后,收集各组细胞,荧光显微镜观察细胞基因转染效率、RT-PCR检测p53 mRNA表达,流式细胞仪检测细胞周期,M1Tr检测细胞增殖抑制情况.结果 荧光显微镜下见C、D组均有较多绿色荧光蛋白表达的细胞(转染率分别为14.15%和10.86%),B组仅有极少的荧光细胞(0.81%);A组和E组无荧光表达;RT-PCR结果 显示,C组和D组均可见特异性p53电泳条带,C组的电泳条带的光密度比值高于D组(P<0.05);流式细胞仪测细胞周期展示,转染野生型p53基因能使细胞周期出现明显的G_1期阻滞,C、D组与E组相比差异有显著性(P<0.05);MTT测定结果 显示c组细胞生长明显受抑,且随时间的延长,抑制程度逐渐增强.结论 适当浓度的微泡和优化的超声辐照条件可增强基因转染效率,野生型p53基阒能使HeLa细胞产生G_1期阻滞,抑制宫颈癌细胞生长.
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反复缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤大鼠TLR4和致炎细胞因子TNF-α、IL-1β的影响
目的 探讨缺血预适应(ischemie preconditioning)对心肌缺血再灌注损伤(myocardial isehemieal reperfusioninjury,MI/RI)大鼠的具体保护机制.方法 18只雄性SD大鼠(350～400 g)被随机分为假手术对照组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)和缺血预适应组(IP组),每组6只大鼠.成功制备上述3种动物模型后,收集动物外周血和切取病变心肌组织.采用酶标记免疫吸附法(enzyme-labeled immunosorbent assay,Elisa)测定动物外周血血清中致炎细胞因子TNF-α、IL一1β的含量;分别采用RT-PCR和Western blot技术检测大鼠病变心肌组织中TOll样受体4(Toll-like roceptor4,TLR4)在转录水平和蛋白水平上的变化.结果 相对于IR组,缺血预适应可有效降低心肌缺血再灌注损伤大鼠血清中致炎细胞因子TNF-α、IL-Iβ的水平(P<0.01);同时,相对于IR组,PC组中TLR4 mRNA和蛋白水平明显下调(P<0.01).结论 缺血预适应作为心肌缺血再灌注损伤的内源性保护措施,其具体作用机制可能与其降低心肌中TLR4和外周致炎细胞因子TNF-α、IL-1β的表达有密切联系.
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糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马CA4区神经元中磷酸化ERK1/2的表达上调
目的 探讨细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)在糖尿病脑缺血再灌注大鼠海马CA4区神经元表达的意义.方法 在链脲佐菌素性糖尿病大鼠脑缺血再灌注模型基础中,应用TUNEL、免疫组化方法 观察糖尿病脑缺血组与正常血糖脑缺血组在全脑缺血15 min、再灌注1 h海马CA4区神经元凋亡和磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)的表达变化.结果 糖尿病脑缺血组在缺血15 min、再灌注1 h海马CA4区神经元凋亡发生率均明显高于正常血糖脑缺血组(P<0.05);糖尿病脑缺血组各时间点磷酸化ERK1/2明显增高,于再灌注1 h明显高于正常血糖组(P<0.01).结论 糖尿病加重脑缺血再灌注神经元的损伤,其机制可能与ERK1/2的激活有关.
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保险从业人员职业紧张对生命质量的相关性研究
目的 评价保险从业人员生命质量,探讨职业紧张对其生理、心理健康和生命质量的相关性.方法 整群抽样抽取某市保险公司3家,从中随机抽取保险公司内勤、外勤主管、普通业务员共173人,采用(occupational stress inventory-revised.OSI-R)和(the MOS 36-item short form health survey,SF-36)量表对职业紧张和生命质量进行评价.结果 工作环境差、任务过重、任务不适对员工生理健康、心理健康和生命质量有显著的负向性影响.业务紧张对生理健康、心理健康、生命质量有显著的负向性影响.自我保健、休养对生理健康、心理健康和生命质量均有显著的止向性影响.结论 保险从业人员的生命质量受工作环境、工作任务、业务紧张等多方面的影响.保险公司应重视保险从业人员的健康状况,提高保险从业人员工资待遇,改善其工作条件,减少保险从业人员的职业紧张感,进而改善其生命质量.
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脉动色素浓度测定法检测有效肝脏血流量对肝病患者的临床意义
目的 介绍一种肝储备功能与肝脏有效血流量(effective hepatic blood flow,EHBF)的检测方法 ,探讨其临床意义.方法 采用脉动色素浓度测定法(pulse dye densitometry,PDD)和传统的分光光度仪比色法同时检测92例患者吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)15 min滞留率(ICGR_(15)),分析榆测结果 的相关性;采用PDD法检测1 181例肝癌、85例门脉高压和120例肝血管瘤患者ICGR_(15)、ICG清除率(K)、全身血容量(BV)、心输出量(CO)及EHBF.结果 PDD测定法检测的ICGR15与分光光度仪比色法的测定结果 显著相关(Y=0.789x+2.109,r=0.945,P<0.01).肝癌和门脉高压患者EHBb、较肝血管瘤组显著降低,ICGR_(15)和CO显著升高.ICGR15值小于10%的肝癌患者EHBF平均为1.233 L/min,EHBF随着ICGR_(15)的升高显著降低;60岁以上肝癌患者K值、CO和EHBF较60岁以下组均显著降低.结论 脉动色素浓度测定法具有无创、实时、便捷等优点,检测的各项数据对评估肝储备功能和EHBF,把握手术方式和范围有一定的参考价值.
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siRNA干扰骨形态发生蛋白2对肝癌SMMC7721细胞迁移和侵袭能力的抑制作用
目的 设计并化学合成针对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins,BMP-2)的siRNA分子片段,转染人肝癌SMMC7721细胞,观察其对SMMC7721细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 设计并化学合成针对BMP-2的3个siRNA分子序列,阳离子脂质体法瞬间转染SMMC7721细胞,运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测细胞中BMP-2在mRNA水平和蛋白水平的变化,体外侵袭实验榆测转染后细胞侵袭能力的变化.实验共分6组,①正常对照组;②空白对照组;③阴性对照组;④～⑥分别为BMP-2-siRNA-A、BMP-2-siRNA-B、BMP-2一siRNA-C转染组.结果 RT-PCR和Western blot显示3对特异性BMP-2-siRNA转染肝癌细胞SMMC7721之后,其BMP-2的基凶和蛋白表达均受到抑制,以siRNA-B抑制效果明显[(0.32±0.07)vs(0.92±0.14),(0.37±0.10)vs(0.89±0.17),P<0.01].体外侵袭实验显示转染后肝癌细胞数明显低于未转染组和阴性对照组[分别为(6.48±3.62)、(23.72±3.24)、(22.38 4-3.84),P<0.05].结论 BMP-2与肝癌的侵袭转移潜能相关,siRNA-BMP-2能明显抑制肝癌细胞SMMC7721的BMP-2表达,从而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力.
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急诊外科治疗危重婴儿先天性心脏病的临床疗效分析
目的 回顾性分析258例小于1岁的危重婴儿先天性心脏病的急诊外科治疗的临床疗效.方法 从2006年1月至2009年2月期间,我院心血管外科住院患儿中,诊断明确后24 h内接受外科手术治疗的258例危重先天性心脏病患儿,男性150例(58.1%),女性108(41.9%);年龄6 d至11个月[(7.5±4.3)个月];体质量2.1-9.5(5.5±3.3)kg.术前合并有急性心功能衰竭、呼吸功能衰竭、肺部感染、重度贫血、营养不良、肝肾功能不全等严重并发症患儿占90.2%(233例).全组中246例(95.3%)在体外循环下行心脏畸形矫治,12例(4.7%)行动脉导管结扎术.结果 全组心血管畸形一期矫治率为92.3%,总治愈率达到96.9%.患儿的心内直视手术是在心脏停跳与心脏不停跳两种方法 下进行.两者体外循环时间分别约(105.00±38.71)、(71.89 4-27.78)min.术后呼吸机支持时间为6～154(16.5±9.3)h;ICU住院时间为48-174(98.5±33.6)h;术后低心排综合征发生率为6.9%;心肺脑肝肾重要脏器严重并发症发牛率为12.9%;死亡8例(3.1%),死产原因:7例复杂畸形患儿中死于低心排综合征5例,心律紊乱1例,呼吸衰竭1例;另1例患儿死于心率紊乱.结论 危重婴儿先心病在明确诊断后尽快进行外科手术治疗,并发有心肺肝肾等重要脏器功能不全者并不是手术绝对禁忌证;低月龄和畸形复杂是婴儿先天性心脏病手术治疗风险增加的重要因素.
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抗HIF-1tx肺腺癌人源单链抗体的筛选和初步鉴定
目的 从单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗HIF-lα肺腺癌人源单链抗体(scFv),并进行初步鉴定.方法 先后以肺腺癌细胞A549、HIF-1α为抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"从大容量噬菌体抗体库中筛选特异性抗体.感染大肠杆菌HB2151,实现可溶性抗体的表达,ELISA、免疫细胞化学检测抗原-抗体结合活性,SDS-PAGE和Western blot检测可溶性抗体表达和相对分子质量.结果 经筛选后,单链抗体得到富集.随机选取10个克隆,ELISA检测5个与HIF-lα抗原呈阳性反应,阳性率为50%.免疫细胞化学表明抗体与A549细胞特异性结合.SDS-PAGE、Western blot证明单链抗体成功可溶表达,且相对分子质量在30×10~3左右,ELISA显示其有较好的特异性.结论 利用单链大容量噬菌体抗体库技术成功获得特异性抗HIF-1α的肺腺癌人源单链抗体.
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异氟烷对老年大鼠海马胆碱乙酰转移酶的作用和空间学习记忆的影响
目的 探讨异氟烷对老年大鼠海马胆碱乙酰转移酶(choline aeetyltransferase,ChAT)表达的作用和空间学习记忆的影响.方法 20月龄老年雄性SD大鼠54只,随机分为3组(n=18).A组(对照组):吸入30%氧气的空氧混合气体6 h;B组(异氟烷单次吸入组):单次吸入1.2%异氟烷和30%氧气的空氧混合气体6 h;C组(异氟烷多次吸入组):吸入1.2%异氟烷和30%氧气的空氧混合气体2 h,1次/d,连续3 d.各组处理巾随机抽取5只行血气分析,5只完成处理24 h后处死取脑分离海马,免疫组化法和RT-PCR法检测ChAT的表达,剩余行Morris水迷官实验检测大鼠的空间学习记忆功能,持续6 d.结果 与A组比较,B、C组海马ChAT mRNA及蛋白表达下调(P<0.05);2～5 d的逃避潜伏期延长(P
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2007-2008年北京地区CAl6VPl区系统进化分析
目的 了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsaekievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型.方法 收集北京地区2007-2008年133例手足13病病例临床标本,从中筛选CAl6毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析.结果 共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列.其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸ILd源性为97.98%～100%.该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%.16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近.结论 CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树七有分别归属于两支的趋势.
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凝血酶对人肝癌细胞株HepG_2增殖影响及诱导凋亡作用研究
目的 观察凝血酶对人肝癌细胞株HepG_2增殖的影响及其诱导凋亡的作用.方法 体外培养人肝癌细胞HepG_2,MTT法观测不同浓度凝血酶在不同时间点对肝癌细胞增殖的影响,TUENL法检测其诱导凋亡作用.结果 高浓度凝血酶对肝癌细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05),当浓度大于100 U/ml作用时间在48 h后,其抑制率高可达到(39.08±2.32)%,且不随浓度的提高和时间的延长而增加;高浓度凝血酶能够诱导肝癌细胞凋亡,当浓度大于100 U/ml且作用时间大于48 h后,各组凋亡指数无显著性差异(P>0.05).结论 高浓度凝血酶能够明显抑制体外生长的人肝癌细胞株HepG_2并诱导肝癌细胞凋亡,且存在一定时间(48 h内)及浓度(<100 U/m1)依赖性.
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常规体外授精中正常受精率患者的精液参数分析
目的 了解常规体外授精(in.vitro fertilization,IVF)中正常受精率患者处理前后精液的参数范围及其对受精结果 的影响.方法 回顾性分析在本生殖医学中心接受常规IVF治疗且获得正常受精及移植胚胎的408个周期的精液参数及其与受精结果 的关系.结果 精子密度正常者399人次(97.79%),而活力正常者仅21人次(5.15%).处理前精液量0.2～8 ml,精子密度(3～400)×10~6个/ml,活率10%～85%,前向运动精子比率(progressive motile sperm,PMS%)2%～40%,前向运动精子总数(total progressive motile sperm count,TPMSC)2～597×10~6.处理后的精子活率、PMS%及精子总数与处理前精子密度、活率、PMS%以及A+B级精子总数均呈显著的正相关(P<0.05).处理后的精子活率与受精率明显相关(r=0.132,P=0.008).结论 常规IVF正常受精者精液参数波动范围大,轻、中度的弱精或少精可能不影响正常受精,但处理后的精子活率可影响受精率.
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革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用
目的 构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性.方法 构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ4paⅠ-SfiⅠ-SacⅠ-NotⅠ-SpeⅠ-NdeⅠ-Sac Ⅱ-BgtⅡ;反向选择标志SacB;正向选择标志卡那霉素抗性片段.载体构建完成后,采用该载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行框架内敲除,以验证其有效性.结果 成功构建了敲除载体,命名为pYG4,并对yeeZ基因进行了框架内精确敲除获得突变株.结论 本研究构建的载体适用于对革兰阴性菌进行目的 基凶的精确敲除,将在细菌基因功能研究中得到广泛的应用.
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重庆地区人工机械瓣膜置换术后患者VKORCI-1639A/G遗传基因多态性与华法林剂量调整的研究
目的 探讨重庆地区人工机械瓣膜置换术后患者VKORCI-1639A/G基因多态性与华法林剂量和抗凝效果的关系.方法 采用PCR-RFLP技术对100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝治疗患者VKORC1-1639A/G多态性位点进行检测,计算其基因型和等位基因频率,同时记录患者服药期间的用药剂量.结果 100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝治疗患者中共筛选到2种等位基因:A和G.等位基因频率分别为92%和8%.,同时VKORC1-1639A/G基因多态性共检测到3种基因型,以AA基因型常见,基因型频率86%,其次为AG和GG型,分别为12%和2%.在达到抗凝指标(1.5～2.0)后,含有等基因G的患者需要的华法林维持剂量[(5.27±0.55)mg]明显高于基因型为AA患者的华法林维持剂量[(2.41±0.75)mg].100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝治疗患者VKORC1-1639A/G基冈多态性与相应的患者的口服剂量有相关.结论 VKORC1基因多态性与术后扰凝治疗患者华法林维持剂量有关系.
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类鼻疽病早期诊断依据的探讨
目的 探讨类鼻疽病的早期诊断依据.方法 筛选1996年12月至2007年12月在海南医学院附属医院和海南省人民医院就诊的49例类鼻疽患者(观察组)及其他细菌性肺炎患者(对照组)的一般资料及基础疾病、临床表现、实验室检杏、影像学检查、并发症等资料进行描述性统计分析和非条件Logistic回归分析.结果 观察组和对照组比较:基础疾病(糖尿病)、局部脓肿、肝脾肿大、感染性休克、败血症等差异均有统计学意义(P<0.05).结论 糖尿病、畏寒、发热、局部脓肿、肝脾肿大、休克、败血症等可作为人类鼻疽病诊断依据.
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乙型肝炎病毒PreSl蛋白与初期多肽相关复合体α亚单位特异性结合的研究
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)PreSl蛋白与人类初期多肽相关复合体α亚单位(nascent-polypeptide-asso-ciated complex alpha polypeptide,NACA)之间的结合作用.方法 采用交合实验验证PreS1蛋白和NACA在酵母细胞内的结合作用,利用离体结合实验证实二者在体外的结合作用,免疫共沉淀实验证实二者在哺乳动物细胞中的特异性结合.结果 携带NACA基因的酵母同携带preS1基因的酵母交合后发生反应,LacZ活性检测菌落旱现蓝色,离体结合实验Western印迹中出现特异性结合活性反应条带,提示PreS1蛋白和NACA在体外存在直接相互作用,免疫共沉淀实验在13×lO~3处出现蛋白条带,提示在哺乳动物细胞水平仍能榆测到PreS1蛋白和NACA的特异结合.结论 NACA与PreS1蛋白在酵母细胞和哺乳动物细胞中均存在特异性结合,推测NACA可能通过与PreS1蛋白的结合影响病毒黏附及反式激活等过程.
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R-莫达非尼的合成及条件优化
目的 合成R-莫达非尼,并对合成条件进行优化.方法 以二苯甲醇为原料,与2-巯基乙酸反应合成2.二苯甲基硫代乙酸,再经成酯保护、H_2O_2氧化、脱保护、拆分,后氨化合成R-莫达非尼.结果 合成了目标化合物,结构经旋光仪、~(13)C NMR、~1H NMR、IR分析确证,总收率为10.1%.结论 合成思路和路线切实可行.
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颅内压增高时岩下窦改变的CT初步研究
目的 观察颅内压增高时岩下窦(inferior petrosal sinus,IPS)的多层螺旋CT(multi-slice spiral CT,MSCT)影像学改变.方法 临床收集8例颅内压增高患者和120例正常人IPS的CT资料,通过连续断面观察及多种后处理技术,对IPS分段测量后对比两组IPS的影像学变化.结果 颅内压增高组:IPS起始部宽度为(9.56±2.31)mm,深度为(2.39±0.55)mm;垂直段直径为(1.76±0.60)mm;出颅处直径为(2.28±0.44)mm;汇入颈内静脉(internaljugular vein,LJV)处的直径为(2.46±O.59)mm.与正常组比较显示:IPS起始部的宽度、出颅处直径大于正常组,IPS起始部的深度、垂直段直径、汇人LJV处的直径均小于正常组.结论 IPS在颅内压增高时存在一定程度的影像学改变,MSCT是评价IPS影像学变化的准确影像学检查技术.
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142例哮喘患儿严重程度与血清总IgE水平、过敏原特异性IgE的关系研究
支气管哮喘是儿科常见的变态反应性疾病,其发病机制复杂.目前认为是由多种细胞和细胞组分共同参与的气道慢性炎症性疾病,血清总IgE水平与哮喘的严重程度和气道高反应性相关.而在各种触发因素中,吸入及食物过敏原起着重要的作用.
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乳腺癌胃转移1例
1 临床资料患者,女性,57岁,主因乳腺癌术后化疗感觉上腹疼痛入院.患者于2008年6月凶右乳腺肿物行右乳腺改良根治术,术后病理为浸润件小叶癌,腋窝淋巴结可见转移,术后采用环磷酰胺加阿霉素及5-氟尿嘧啶(CAF)方案化疗3次.2008年12月第4疗程化疗感觉上腹疼痛而行胄镜检查.结果显示:黏膜光滑,皱襞规则,呈脑回状,胃大弯底体交界处黏膜料糙,充血水肿,质地僵硬(图1).
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中枢神经系统孤立性纤维瘤1例
孤立性纤维瘤(solitary fibrous tumors,SFT)是一种间叶来源的梭形细胞肿瘤,免疫组织化学指标以波形蛋白(vimentin)和CD34为代表.主要发生于胸膜腔,中枢神经系统少见.我院收治右侧桥小脑角孤立性纤维瘤1例,报告如下.
关键词： 中枢神经系统孤立性纤维瘤 病理 -
1例安装临时起搏器引起急性心包填塞的抢救护理
老年患者合并严重缓慢性心律失常,外科手术前安置临时起搏器,能够扩大手术适应症,提高麻醉及手术安全性,使患者能够安全度过围手术期~([1]).
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宫腔镜联合甲氨喋呤诊疗子宫憩室妊娠1例
1 临床资料患者,27岁,未婚,孕3产0流2,因停经52 d,宫腔镜疑憩室妊娠于2009年3月23日入院.患者末次月经2009年2月1日,月经规则,停经后尤腹痛及阴道流血,3月21日我院门诊就诊,B超示:子宫大小约67 mm×55 mm×66 mm,官腔被一宽6 mm的低回声分成两部分,左侧内膜厚7 mm,右侧官腔内见-30mm×20 mm孕囊声像,内可见卵黄囊、胚芽及原始心管搏动,考虑宫内早孕、子官纵隔.于3月23日门诊行可视人流术,术中见宫深7 cm,腔内末见孕囊,宫腔下段右前壁见一小孔,轻轻探入可见一较大腔隙及绒毛组织.
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成人返流性肾病1例
1 资料资料 患者,男性,43岁,因"腰痛伴夜尿增多4年余,发现肾功能减退1年"入院.患者入院前4年开始出现腰痛,伴夜尿增多,起夜2-3次,总量600～800 ml,外院查腹部平片示"左侧输尿管上段靠近盆腔入口处轻度扩张",诊治不祥.
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食管旁型食管裂孔疝CT诊断1例
1 病例资料患者,女性,36岁,近半月来不明原因胸闷、上腹不适、恶心及轻度呼吸困难,饭后症状加剧,三大常规检查和生命体征正常.1个月前胃镜检查胃黏膜充血,少许糜烂斑.
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高血压病高尿酸血症与心脏舒张功能异常关系研究
高血压是伴有代谢紊乱的临床综合征,常伴随糖耐异常、高血脂、高尿酸血症(HUA)及异常的体质量指数(BMI).未经治疗的高血压患者有10.4%～27.3%伴有HUA,而HUA 是心血管疾病的独立危险因素.舒张功能的改变是高血压心功能改变的早期指标,对于高血压HUA等生化异常与舒张功能改变关系的研究国内外少见报道,本研究探讨原发性高血压合并高尿酸血症者与心脏舒张功能改变的关系.
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尿激酶加肝素混合使用对永久血液透析导管封管效果观察及护理
血管通路是维持血液透析患者的生命线,是保证血液透析治疗有效进行的重要保证.目前长期留置导管作为无法建立动静脉内瘘的维持性血液透析患者较好的血管替代通路,在临床上应用越来越广泛~([1,2]).
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促红细胞生成素对维持性血液透析患者炎症反应及氧化应激状态的影响
目的 探讨慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)维持性血透患者应用人类重组促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r-HuEPO)对体内炎症反应及氧化应激状态的影响.方法选择35例慢性肾衰维持性血透患者(肾衰组),35例健康成人作对照(对照组).肾衰组应用r-HuEPO治疗3个月及6个月后,检测患者血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)及晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA),红细胞膜Na~(+-)K~+-ATP酶活性的变化.结果 治疗前肾衰组患者血浆中hs-CRP、MDA、AOPP含量明显高于对照组患者,而红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活性明显低于对照组(P<0.01),且呈显著负相关(r=-0.57、r=-0.67、r=-0.78.P<0.05).r-HEPO治疗3个月后,血Hb、Hct明显上升,而hs-CRP、MDA、AOPP含量和Na~+-K~+-ATP酶活性变化不显著,在治疗6个月后,Na~+-K~+-ATP活性显著升高(P<0.05),hs-CRP、MDA、AOPP含苗则显著下降(P<0.05).结论 r-HuEPO长程治疗在改善慢性肾衰维持性血透患者贫血状态的同时,可有效缓解患者体内炎症及氧化应激状态.
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占位性病变引起踝管综合征的临床诊断和手术治疗
目的 探讨占位性病变引起踝管综合征的临床诊断及手术疗效.方法 对我科2003年6月至2008年2月收治的14例因占位性病变引起的踝管综合征就其术前诊断及术后疗效进行回顾性分析,所有患者术前均进行磁共振检查,术后随访应用Pfeiffer法进行评价.结果 术后6-16个月(平均1年)随访,对患足进行Pfeiffer法评价:优11例,良3例.结论 根据症状、体征,并结合磁共振检查,可明确临床诊断.由于神经的损伤程度与病程的长短、卡压的程度有关,特别是对于出现占位性病变的患者应早期手术.
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临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较
目的 比较几种骨组织的脱钙溶液与脱钙方法 的效果,获得快捷、简便、适用于临床病理检验的脱钙技术.方法 考察在常温、恒温、搅拌状态下,几种常用的脱钙液对猪干骨中段脱钙、染色效果.结果 40℃恒温搅拌条件下,盐酸一氯化钠脱钙液(脱钙液I)、高浓度盐酸-甲酸-氯化钠脱钙液(脱钙液Ⅳ)、低浓度盐酸-甲酸-氧化钠脱钙液(脱钙液Ⅶ)、Plank-Rycho脱钙液(脱钙液Ⅸ),都具有脱钙时间短、组织损伤小、不影响染色效果.结论 恒温搅拌条件下,脱钙液I是适合于临床病理检验的脱钙溶液.
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右丙亚胺对颅脑损伤大鼠脑组织水和离子含量的影响
目的 探讨右丙亚胺(Dexrazoxane,DEX)对颅腩损伤(traumatic brain injury,TBI)的大鼠脑组织水和离子含量的影响.方法 选择SD大鼠36只,计算机编号随机抽取方法 分成止常对照组(n=6)、假手术组(n=10)、损伤组(n=10)和DEX治疗组(n=10),应用液压冲击方法 制作TBI模型.DEX组在制作模型后即刻给予DEX,3 d后将大鼠处死观察脑组织基底节区域的铁染色情况,以及该区域的水及钠钾离子的变化情况.结果 损伤组大鼠脑皋底节区域在TBI后3 d铁染色明显增强,铁染色阳性细胞比例明显上升,水及钠离子含量也明显上升,而钾离子则没有明显变化.应用DEX治疗后的TBI大鼠铁阳性细胞比例,水及钠离子含量都有明显的下降,显著低于损伤组(P<0.05).结论 DEX可以降低TBI后的水及钠离子含量,这直接影响到脑组织的水肿,其机制可能与降低脑组织的铁沉积有关.
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细胞培养中污染支原体的检查
目的 探讨细胞培养中简便可靠的支原体污染的检查法.方法 收集本室现有不同批次的种子细胞和试剂等,根据检查方法 不同分类.①DNA荧光染色检查法:包括成纤维细胞(I:ibroblast,Fb)、角朊细胞(Keratinocyte,KC)小牛血清、Vero细胞-1、A549细胞、Vero细胞-2、DMEM完全培养基、DMEM尤抗菌素培养基、1640培养基、胎牛血清、鼠尾胶原、牛尾胶原、壳多糖、硫酸软骨素透明脂酸酶、磷酸盐缓冲液、D-Hanks液等待检标本16种.②培养检查法:包括Fb、KC和小牛血清3种主要标本,采用"精氨酸支原体肉汤培养基"、"支原体半流体培养基"培养法.结果 DNA荧光染色法检查16种标本,阳性率为18.75%(3/16).培养法检查:Fb、KC和小牛血清3种主要标本中,阳性率为33.3%(1/3).结论 细胞培养中支原体检查方法 ,DNA荧光染色法较之培养法具有简单、方便,相对需时较短等优点,结果 稳定、可靠.
