第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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miR-378对骨髓增生异常综合征细胞凋亡及增殖的影响
目的 研究miR-378对骨髓增生异常综合征SKM-1细胞凋亡和增殖的影响.方法 我们分别用miR-378重组慢病毒和阴性对照病毒感染SKM-1细胞.然后采用CCK-8检测miR-378对SKM-1细胞生长的影响,流式细胞仪检测各实验组细胞凋亡和周期情况,并用Western blot检测凋亡过程中的关键因子cleaved-caspase-3蛋白的表达.用生物信息学方法预测miR-378可能的靶基因,用PCR和Western blot进行初步验证.结果 miR-378慢病毒转染组的细胞增殖活性明显降低,流式细胞术检测miR-378组的细胞凋亡率为(12.90±3.72)％,明显高于阴性对照病毒转染组和空白对照组[(3.21±1.91)％、(2.78±1.04)％,P＜0.01];miR-378组的G0/G1期细胞增多,S期细胞减少.同时,Western blot结果显示miR-378过表达引起了cleaved-caspase-3的表达升高.用生物信息学方法预测抗凋亡蛋白基因BCL2L2为miR-378潜在的靶基因,并发现miR-378可以抑制BCL2L2蛋白的表达.结论 miR-378可以通过引起细胞凋亡和细胞周期阻滞来抑制SKM-1细胞的增殖,并降低BCL2L2蛋白的表达.
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索拉非尼诱导的耐药性肝癌细胞的生物学特征分析
目的 探讨索拉非尼对肝癌细胞Huh-7、PLC/PRF/5以及原代细胞T1115、T1224的影响及索拉非尼耐受型细胞的生物学特征.方法 通过长时间10 μmol/L索拉非尼处理建立索拉非尼耐药细胞模型,采用MTS法和克隆形成实验测定不同浓度索拉非尼处理对不同细胞的增殖影响.采用Western blot检测细胞内p-AKT、p-STAT3以及干性相关基因(Nanog、Sox2、Oct4)的表达情况;采用RT-PCR检测多药耐药基因ABCC1的表达,并通过划痕实验和Transwell实验检测索拉非尼耐药细胞和亲本对照细胞的迁移能力的变化情况.结果 索拉非尼对肝癌细胞系和原代细胞的增殖抑制作用随着索拉非尼浓度的提高而增强,并且索拉非尼能够有效地下调p-AKT、p-STAT3的表达.成功建立了PLC/PRF/5索拉非尼耐药细胞株模型,并发现耐药细胞相对于亲本细胞的增殖能力显著下降,但迁移能力显著增强.进一步实验结果表明耐药细胞株高表达ABCC1、Nanog、Sox2和Oct4.结论 索拉非尼能够有效地抑制肝癌细胞的生长,其耐受型细胞具有更强的迁移能力,并且具有干细胞样特征.
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丙泊酚后处理对肾性高血压大鼠心肌的保护作用
目的 探讨丙泊酚后处理对肾性高血压大鼠(renal hypertensive rats,RHR)的心肌保护作用,并探讨其可能的机制.方法 健康成年雄性SD大鼠采用“两肾一夹”法制备肾性高血压大鼠模型,在此模型基础上制备结扎RHR左冠状动脉前降支30 min、再灌注60 min的急性心肌缺血再灌注损伤模型.将24只RHR按照随机数字表法分为3组(n=8):缺血再灌注组(I/R组)、丙泊酚组(P组)、丙泊酚+苍术苷(ATR)组(PA组).3组分别于再灌注同时通过尾静脉缓慢注入生理盐水1.5 mL(I/R组)或丙泊酚(2 mg/kg)(P组)或丙泊酚(2 mg/kg)+苍术苷(Atractyloside,ATR)(5 mg/kg)(PA组),然后再灌注至60 min.记录左冠状动脉结扎前(T0)、结扎后15 min(T1)、结扎后30 min(T2)、再灌注15 min(T3)、再灌注30 mim(T4)、再灌注60 min(T5)时收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和心率(HR).电子显微镜下观察再灌注60 min时的心肌细胞超微结构的改变情况,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 再灌注15 min和30 min时P组的SBP和DBP较I/R组和PA组高(P＜0.05).电子显微镜观察再灌注60 min后的心肌细胞超微结构,P组心肌细胞线粒体膜轻度水肿,而I/R组和PA组心肌细胞线粒体肿胀明显,数量减少.P组的心肌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)[(16±4)％]低于I/R组[(48±5)％]和PA组[(38±8)％],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 丙泊酚后处理对RHR大鼠心肌缺血再灌组损伤具有保护作用,其机制可能与抑制线粒体通透性转换有关.
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结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中HIF-1α与miRNA-200b表达的相关性
目的 探讨缺氧诱导因子HIF-1α与miRNA-200b在结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中的表达以及两者的相关性.方法 采用实时定量PCR检测50例结直肠癌患者的结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α与miRNA-200b的表达.利用CoCl2构建结肠癌细胞系的缺氧诱导模型,通过实时定量PCR和Western blot分别测定缺氧的Caco-2细胞中HIF-1α和miRNA-200b基因表达并确立两者相关性.结果 HIF-1α在癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P＜0.O1),miRNA-200b在癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P＜0.01),且HIF-1α和miRNA-200b在癌组织中的表达呈负相关(r=-0.324,P ＜0.05).缺氧处理2h后,HIF-1α表达升高,miRNA-200b表达降低;随着缺氧时间延长(4～12 h)HIF-1α表达逐渐降低,miRNA-200b的表达缓慢上升;缺氧16 h,HIF-1α的表达回升且达到另一个高峰,miRNA-200b的表达降至低.Real-time PCR和Western blot联合检测发现,HIF-1α和miRNA-200b表达呈相反的趋势.结论 HIF-1α可能通过抑制miRNA-200b的表达从而参与结直肠癌上皮细胞EMT的过程.
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DIM对胃癌细胞SGC-7901体外增殖与侵袭的抑制作用
目的 探讨3,3-二吲哚基甲烷(3,3-Diindolylmethane,DIM)对胃癌细胞SGC-7901增殖和侵袭的抑制作用.方法 用MTT法检测不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L) DIM对胃癌细胞SGC-7901生长抑制情况;Transwell小室检测40 μmol/L的DIM对胃癌SGC-7901细胞侵袭力的影响,Western blot检测胃癌细胞中血小板源性生长因子-D(PDGF-D)和β-catenin蛋白表达的变化,ELISA法检测培养液上清中MMP-2、MMP-9的浓度.结果 不同浓度的DIM对胃癌细胞SGC-7901均有抑制作用(P＜0.05),随着药物浓度增加,抑制作用增强;但40 μmol/L和80 μmol/L差异无统计学意义(P＞0.05).40μmol/L的DIM作用24 h后胃癌细胞SGC-7901侵袭力下降75.2％(125.4 ±10.8 vs 31.1 ±4.5,P＜0.05),PDGF-D和β-catenin的表达分别下降了55.8％和52.5％(P＜0.05),培养液上清中的MMP-2、MMP-9的浓度明显下降(23.5 ±2.6 vs 13.2 ±1.9;30.4 ±2.4 vs 15.8±2.1,P＜0.05).结论 DIM对胃癌细胞的增殖和侵袭有抑制作用,其机制可能与PDGF-D、β-catenin、MMP-2、MMP-9的表达下降有关.
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MicroRNA-30a在胃癌组织的表达分析及其靶基因成纤维活化蛋白α的鉴定
目的 分析microRNA-30a (miR-30a)在胃癌中的表达水平并鉴定其新的靶基因.方法 选取29例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,利用qRT-PCR检测miR-30a的表达.通过miRNA靶基因预测数据库TargetScan预测miR-30a的靶基因.构建含有miR-30a结合位点的3'UTR片段的荧光素酶载体(pMIR-FAPα),通过荧光素酶报告实验对预测靶基因进行检测.利用Western blot和qRT-PCR对预测靶基因成纤维活化蛋白α(fibroblast activation proteinα,FAPα)的表达进行检测.结果 miR-30a在胃癌组织样本中的表达明显下调,通过生物信息学预测(TargetScan)和荧光素酶实验表明miR-30a mimic 可与FAPα基因结合,qRT-PCR和Western blot结果表明miR-30a mimic可抑制FAPα mRNA和蛋白质水平的表达.结论 miR-30a在人胃癌组织样本中表达下调,FAPα是其靶基因.
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肺炎克雷伯菌突变株ΔrcsB的构建及其菌株超粘性与生物膜表型
目的 构建肺炎克雷伯菌rcsB基因缺失的无痕突变株和回补株,通过对突变株的超粘性和生物膜表型进行分析,探讨转录调控子RcsB对细菌超粘性和生物膜形成能力的影响.方法 首先构建突变株ΔrcsB,PCR扩增rcsB基因上下游同源臂片段,克隆到质粒pKO3-Km上,将重组质粒导入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,经同源重组后筛选得到无痕突变株.然后构建回补株,扩增rcsB基因片段,克隆到质粒pBAD33上,将重组质粒导入突变株ΔrcsB中,得到回补株.测定野生株、突变株、回补株的超粘性和生物膜形成能力.结果 成功构建rcsB基因缺失的无痕突变株ΔrcsB和回补株C-ΔrcsB.与野生株相比,突变株超粘性和生物膜形成能力均减弱,回补株介于野生株和突变株之间.结论 转录调控子RcsB对肺炎克雷伯菌超粘性和生物膜形成具有正向调控作用.
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结肠癌组织中补体C5a/C5aR通路活化上调FGL2的表达
目的 探讨补体C5a/C5aR通路在结肠癌发病中对纤维介素蛋白-2凝血酶原酶(fibrinogen-like protein 2,FGI2)的调节机制,明确补体系统在结肠癌发病中的功能和作用.方法 收集2013年12月至2015年7月第三军医大学西南医院普外科、新桥医院消化科15例经病理活检确诊的住院临床结肠癌患者癌及癌旁组织.采用免疫组织化学方法检测结肠癌患者癌及癌旁组织中补体活化片段C5b-9、活化C3及C5aR的表达,佐证补体系统在结肠癌中的活化状态;进一步通过体内外实验(Western blot)验证结肠癌患者癌及癌旁组织MAPK信号通路中P38的磷酸化水平及FGL2的沉积,明确结肠癌发病中补体C5a/C5aR通路与二者的调节关系.结果 免疫组织化学及Western blot实验证实结肠癌患者癌组织C5b-9、活化C3及C5aR的表达明显高于癌旁组织,FGL2的沉积亦显著高于癌旁组织;体外结果提示C5a能促进巨噬细胞系Raw264.7 MAPK通路中P38的磷酸化水平(P =0.0013)及FGL2的产生能力(P =0.0071),加入C5aR阻断剂之后,二者表达随之减弱.结论 C5a/C5aR通路能通过MAPK信号途径中的P38信号完成对FGL2的调节作用进而参与结肠癌的发病进程.
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活性氧与细胞核共染影响因素的实验研究
目的 利用二氯荧光黄二乙酸酯(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针和4',6'-二脒基-2-苯基吲哚(4',6'-diamidino-2-phenylindole,DAPI)探讨影响活性氧(reactive oxidative species,ROS)和细胞核共染的因素,以优化佳的研究方案.方法 以RAW 264.7细胞株为研究对象,首先采用不同浓度的多聚甲醛分别固定10、30 min,1、2、4h,进行ROS和DAPI检测;再用不同的固定试剂分别在ROS检测前和后固定,检测ROS荧光强弱;将DAPI在DCFH-DA探针加入前12、4、2、1h,20 min加入和两者同时加入,检测DAPI染色情况;后,DAPI在ROS检测前12 h加入,以不加DAPI组为对照,分别用LPS和H2O2刺激产生ROS并检测,计算其荧光数和平均荧光强度,利用SPSS18.0软件进行t检验分析.结果 不同固定浓度、固定试剂、固定顺序的结果均表明,固定虽然会增强DAPI的染色,但同时会减弱ROS的荧光强度;活细胞DAPI染色时,随着染色时间的延长,核着色强度和均匀度都更好;DAPI染色12 h后检测ROS,对ROS的荧光数和平均荧光强度都没有统计学影响(P＞0.05).结论 DCFH-DA探针法检测ROS荧光时不能与细胞固定连用;DAPI在DCFH-DA探针孵育前12h加入,并不影响ROS荧光的产生和检测,该研究方案可有效实现ROS与DAPI的共染.
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类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统蛋白BsaL的制备和免疫反应性分析
目的 构建表达重组的类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统结构蛋白BsaL的大肠工程菌,制备高纯度、高质量的重组BsaL蛋白样品,探讨其作为类鼻疽菌检测的候选抗原的可行性.方法 基因工程技术构建表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,通过亲和层析、凝胶过滤层析等纯化方法得到高纯度的BsaL蛋白.包被BsaL蛋白于96孔板,分析其用于检测临床类鼻疽菌株的敏感性和特异性.结果 成功构建了表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,诱导、表达及纯化后得到高纯度(＞99％)、高浓度(20 mg/mL)的重组BsaL蛋白.该蛋白在类鼻疽菌检测方面表现出较好的灵敏度(85％)和特异性(89％).结论 成功表达了重组的BsaL蛋白,获得了高纯度的BsaL蛋白样品,在类鼻疽菌的诊断方面展示出较好的应用价值.
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尿苷三磷酸通过PTEN/Vimentin抑制胃癌细胞的侵袭
目的 研究尿苷三磷酸(uridine triphosphate,UTP)对胃癌细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制.方法 采用细胞划痕实验检测UTP对胃癌细胞MKN-45和SGC-7901迁移能力的影响;Transwell检测UTP对正常人胃黏膜细胞GES-1和胃癌细胞MKN-45、SGC-7901侵袭能力的影响;Western blot检测UTP对胃癌细胞MKN-45和SGC-7901 PTEN磷酸化水平及Vimentin表达的影响.结果 细胞划痕实验表明UTP组抑制胃癌细胞MKN-45和SGC-7901迁移(P＜0.05).Transwell实验结果显示UTP组抑制胃癌细胞MKN-45和SGC-7901侵袭(P＜0.01),但对正常人胃黏膜细胞GES-1无影响(P＞0.05).Western blot实验证实UTP组可增强胃癌细胞MKN-45和SGC-7901 PTEN磷酸化水平,同时下调Vimentin的表达.结论 UTP抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,可能是与其上调PTEN磷酸化水平,抑制Vimentin表达有关.
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二氯乙酸盐增强盐酸吡柔比星杀伤肝癌细胞的研究
目的 探讨二氯乙酸盐(Dichloroacetate,DCA)增强盐酸吡柔比星(Pirarubicin,THP)杀伤肝癌细胞的效果及可能机制.方法 用40 μmol/L DCA与不同浓度(0、200、400、600、800 μmol/L)盐酸吡柔比星(THP)联合处理肝癌HepG2细胞24 h,采用CCK-8法检测对细胞增殖的影响.然后用40 μmol/L二氯乙酸盐与600 μmol/L盐酸吡柔比星联合处理肝癌HepG2细胞24 h,用Western blot检测细胞中PARP的表达变化及JNK的磷酸化水平;用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS的水平.结果 DCA可显著增强不同浓度THP对肝癌HepG2细胞的杀伤效果,与PBS组相比具有统计学差异(P＜0.05);DCA联合THP处理24 h可显著升高细胞内的ROS水平,与PBS联合THP组相比具有统计学差异(P＜0.05);此外,DCA联合THP可使HepG2细胞中凋亡相关分子PARP的剪切明显增加,并增强JNK的磷酸化水平.抗氧化剂NAC可显著降低DCA与THP联合处理对HepG2细胞中JNK的激活作用.结论 DCA可显著增强THP杀伤肝癌细胞效应,其机制可能与ROS/JNK通路的激活有关.
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巨噬细胞在结肠癌CT-26细胞获得性5-FU耐药中的作用
目的 探讨巨噬细胞在结肠癌CT26细胞对5-FU产生获得性耐药过程中的作用及其机制.方法 分别用正常培养基(NM)、巨噬细胞培养上清(CM)及预先用低剂量5-FU处理过的巨噬细胞培养上清[CM(5-FU)]处理CT-26细胞,并给予10μmol/L 5-FU处理,用CCK-8检测各组细胞增殖情况,PI/Annexin-V流式细胞术检测各组细胞凋亡情况及Western blot检测各组细胞凋亡信号通路.建立CT26小鼠皮下移植瘤模型,应用上述条件培养基处理联合5-FU化疗,动态观察移植瘤生长情况.结果 检测细胞凋亡情况发现,5-FU处理组CT26细胞的凋亡细胞百分比显著高于对照组(P＜0.05);Western blot检测结果显示5-FU处理组凋亡相关蛋白cleaved caspase-3及P-JNK的表达较对照组显著上调(P＜0.05);Western blot检测结果及结肠癌CT26细胞小鼠移植瘤模型发现P-JNK抑制剂可显著抑制由5-FU诱导的CT26细胞Caspase-3凋亡信号通路的激活;CCK-8检测结果及小鼠移植瘤模型中均发现CM(5-FU)能够显著降低CT26细胞对5-FU的化疗敏感性;细胞凋亡检测及Western blot检测结果发现CM(5-FU)可抑制由5-FU诱导的P-JNK/Caspase-3凋亡信号通路的激活.结论 5-FU可激活结肠癌CT-26细胞的P-JNK依赖的Caspase-3凋亡信号通路以发挥抗癌作用;5-FU诱导的巨噬细胞可导致结肠癌CT26细胞产生5-FU获得性耐药,其机制可能是5-FU诱导的巨噬细胞上清可拮抗CT-26细胞中5-FU激活的P-JNK/Caspase-3凋亡信号.
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过表达长链非编码RNA H19促进miR-124-3p表达抑制肝癌细胞增殖
目的 探讨长链非编码RNA H19 (long non-coding RNA H19,IncRNA H19)对miR-124-3p表达的影响及在肝癌细胞增殖中的作用.方法Real-time PCR检测肝癌细胞系及临床标本中lncRNA H19和miR-124-3p的表达;在肝癌细胞系HepG2和SMMC7721中过表达lncRNA H19,Real-time PCR 检测miR-124-3p及其靶基因cyclinD1的表达;Western blot检测cyclinD1蛋白表达水平;CCK-8法检测lncRNA H19对细胞增殖的影响;过表达lncRNA H19同时加入antagomiR-124-3p后,检测miR-124-3p及其靶基因表达情况及细胞增殖情况.结果lncRNA H19和miR-124-3p在肝癌细胞系及肝癌组织中均低表达(P＜0.05);过表达lncRNA H19后miR-124-3p表达显著增加(P＜0.05),miR-124-3p的靶基因cyclinD1蛋白和mRNA表达明显下降(P＜0.05),细胞增殖受到抑制(P＜0.05);过表达lncRNA H19同时干扰miR-124-3p后,细胞增殖抑制作用减弱(P＜0.05).结论长链非编码RNA H19通过促进miR-124-3p表达,进而抑制其靶基因cyclinD1表达而抑制肝癌细胞增殖.
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杨梅素减轻去卵巢大鼠骨质疏松
目的 观察杨梅素对去卵巢大鼠骨量的影响,初步探讨机制.方法 12只雌性SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢组(OvX)和杨梅素注射组(OVX+Myricetin).建模后1周,OVX+Myricetin组、假手术组和OVX组分别腹腔注射杨梅素85 mg/kg和甲醇溶剂,2次/周,8周.取材前10 d和前3d分别皮下注射茜素红.microCT扫描股骨远心端.HE染色观察骨小梁.Elisa检测血清PINP浓度.荧光显微镜观察茜素红荧光条带.ALP染色检测BMMSCs成骨能力.荧光标记法检测BMMSCs活性氧水平.Real-time PCR检测基因表达.结果 OVX组的骨量/组织量(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)和骨小梁厚度(Tb.Th)低于假手术组;骨小梁间隙(Tb.Sp)大于假手术组,HE切片OVX组的骨小梁少于假手术组,OVX组的血清PINP、茜素红荧光条带间距低于假手术组.OVX+Myricetin组的BV/TV、Tb.N和Tb.Th大于OVX组;Tb.Sp小于OVX组,HE切片OVX+Myricetin组的骨小梁多于OVX组,OVX+ Myricetin组的血清PINP、茜素红荧光条带间距高于OVX组.OVX组BMMSCs的ROS水平高于假手术组,SOD表达降低,ALP活性和成骨基因表达降低;OVX+Myricetin组低于OVX组,SOD表达升高,ALP活性和成骨基因表达升高.H2O2处理后的BMMSCs的ROS水平升高,SOD表达降低,ALP活性和成骨基因表达降低;加杨梅素处理后的BMMSCs的ROS水平降低,SOD表达升高,ALP活性和成骨基因表达升高.结论 杨梅素通过降低ROS水平恢复内源性BMMSCs的成骨能力,减少去卵巢大鼠骨量丢失.
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白藜芦醇通过上调SIRT1/自噬通路改善Aβ25-35对PC12细胞增殖的抑制作用
目的 探讨SIRT1/自噬通路在白藜芦醇改善Aβ25-35诱导的PC12细胞增殖活力下降中的作用.方法 用不同浓度(1、5、10、20 μmol/L)白藜芦醇(resveratrol,RSV)单独或加入5 mmol/L自噬特异抑制剂(3-methyladenine,3-MA)、2μmol/L SIRT1选择性抑制剂(EX527)处理PC12细胞2h后,再加入30μmol/L淀粉样蛋白25-35片段(Amyloid β-protein fragment 25-35,Aβ25-35)处理24 h.采用CCK-8检测细胞增殖活力,电镜检测自噬体,Western blot检测自噬标志蛋白P62、LC3和SIRT1蛋白的表达水平.结果 30 μmol/L Aβ25-35可显著降低PC12细胞的增殖活力,为对照组的45.14％(P＜0.05).RSV预处理可显著改善Aβ25-35诱导的PC12细胞增殖活力下降(P＜0.05),且随浓度增加,保护作用增强.同时,RSV可明显促进自噬体的形成,上调SIRT1、LC3-Ⅱ的表达和降低P62的表达,且随浓度增加,表达变化越显著;而加入3-MA和EX527处理能显著抑制RSV的上述效应.结论 RSV可通过激活SIRT1/自噬通路改善Aβ25-35诱导的神经细胞毒性.
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MiR-17-5p调控STAT3信号通路在心肌慢性缺氧适应中意义的研究
目的 探讨心肌慢性缺氧环境下,miR-17-5p的表达变化以及miR-17-5p对STAT3信号通路的调控对于缺氧心肌细胞的影响.方法 ①选取新桥医院心外科2014年8月至2015年4月期间先心病患儿20例,其中紫绀型(年龄61.5±46.5月,术后诊断为法洛氏四联症)与非紫绀型(年龄43.2 ±32.1月,术后诊断为室缺伴右心室流出道狭窄)各10例.术中取右室流出道心肌组织作为标本,采用RT-PCR检测两组先心病患儿心肌组织miR-17-5p的表达情况.②建立大鼠源H9c2心肌细胞慢性缺氧适应模型,分为缺氧0、12、24、48、72 h组(n=5),RT-PCR分别检测各组miR-17-5p的表达.③脂质体转染antagomir miR-17-5p和agomir miR-17-5p至H9c2心肌细胞,建立过表达miR-17-5p和沉默miR-17-5p的H9c2心肌细胞系,慢性缺氧培养48 h,CCK8实验检测细胞增殖情况,TUNNEL实验检测细胞凋亡情况,Western blot检测STAT3,p-Tyr-705-STAT3及其下游调控蛋白c-myc蛋白表达.结果 ①与非紫绀组(0.482 ±0.163)相比,紫绀组(1.450±0.705)患儿miR-17-5p表达明显升高(P＜0.01).②慢性缺氧细胞模型研究结果显示慢性缺氧时H9c2细胞miR-17-5p表达逐渐增高(P＜0.01).③缺氧环境下miR-17-5p过表达明显抑制p-Tyr-705-STAT3、STAT3、c-myc表达,引起心肌心肌细胞增殖受抑制,凋亡增加(P＜0.01);而抑制miR-17-5p对p-Tyr-705-STAT3、STAT3、c-myc表达改变不明显,且对于心肌细胞的增殖和凋亡改变也不明显(P＞0.05).结论 在心肌慢性缺氧过程中,miR-17-5p可能参与调控STAT3-c-myc信号通路,对于心肌细胞的存活和功能调节有重要意义.
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根治性切除治疗结直肠癌肝转移的效果及术后肝转移瘤复发危险因素分析
目的 观察结直肠癌肝转移(colorectal cancer with liver metastasis,CRCLM)患者行根治性切除的疗效,分析影响术后肝转移瘤复发的危险因素.方法 回顾性分析我院1993-2013年收治的行根治性切除术的结直肠癌肝转移患者164例资料,绘制其术后远期生存率及无瘤生存率曲线.对影响术后肝转移瘤复发的因素分别进行单因素分析和多因素分析.结果 术后第1、2、3、5年生存率分别为90.9％、72.1％、57.1％和26.0％,中位生存期为32(1 ～162)个月;术后第1、2、3、5年无瘤生存率分别为49.4％、38.4％、25.0％和14.0％,中位无瘤生存时间为12个月.术后并发症发生率为16.5％,术后30 d死亡率为1.2％.术后肝转移瘤复发率为46.3％,其中,边缘复发5例(6.6％),同一肝段复发7例(9.2％),邻近肝段复发7例(9.2％),远隔肝段复发13例(17.1％),多发肝段复发44例(57.9％).各复发类型相比差异无统计学意义(P =0.062).单因素分析显示原发瘤分化程度(P=0.035)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA) (P =0.013)、原发瘤区域淋巴结转移(P =0.043)和肝转移瘤切缘(P =0.012)与术后肝转移瘤复发相关;多因素分析显示原发瘤分化程度(P =0.021)和CEA(P =0.015)为影响术后肝转移瘤复发的独立危险因素.结论 结直肠癌肝转移根治性切除术后远期生存率高,原发瘤分化程度和术前血浆CEA水平为影响术后肝转移瘤复发的独立危险因素.
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277例弥漫性实质性肺疾病住院患者死亡危险因素分析
目的 探讨277例弥漫性实质性肺疾病住院患者死亡的影响因素.方法 本院呼吸内科弥漫性实质性肺疾病(DPLD)的病例依据病因分为结缔组织疾病相关DPLD组(CTD-IP)、其他已知病因DPLD组和特发性间质性肺炎(IIPS)组,每组按预后情况分又为非死亡组和死亡组两个亚组,采用病例对照的研究方法进行风险因素回顾性分析.结果 IIPS组死亡亚组年龄平均、基础疾病患病率及CRP、ALT、AST指标高于非死亡组,CTD-IP组死亡亚组的CRP、WBC、AST指标高于非死亡组,其他病因组两亚组的病因构成提示有统计学差异,其死亡亚组CRP、PT、APTT、ALT、AST高于非死亡组.将上述各组指标进行曲线分析,AUC大于0.7指标作为死亡风险预测指标,并计算出其截断点作为佳诊断阈值纳入多因素logistics回归分析.结果显示IIPS组中CRP ＞40(mg/L)和年龄＞70(岁)、CTD-IP中CRP ＞40(mg/L)、其他组中CRP＞ 50(mg/L)为独立死亡危险因素.结论 CRP升高、高龄及药物继发性DPLD是弥漫性实质性肺疾病患者住院死亡的危险因素,其中前者是DPLD患者的共同危险因素,而后两者分别是IIPS组和其他病因组的独立危险因素.上述因素在用于预测不同类型DPLD患者死亡风险中需区别分析.
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梗阻性结直肠癌中E-cadherin、CD44v6的表达及与预后的关系
目的 探讨梗阻性结直肠癌中E-cadherin(E-cad)、CD44v6的表达及与预后的关系.方法 采用免疫组织化学方法分别检测48例梗阻性结直肠癌、121例非梗阻性结直肠癌组织和30例癌旁肠黏膜组织中E-cad和CD44v6蛋白的表达,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Cox比例风险模型多因素分析.结果 梗阻性结直肠癌组织中E-cad和CD44v6的标准化阳性率分别为30.2％和81.3％,非梗阻性结直肠癌组织中E-cad和CD44v6的标准化阳性率分别为51.8％和58.9％,两组差异有统计学意义(P＜0.05).E-cad的表达与肿瘤pTNM分期、淋巴结转移、分化程度、浸润深度有关(P＜0.05).CD44v6表达与肿瘤pTNM分期和淋巴结转移有关(P＜0.05).单因素生存分析显示:梗阻、E-cad和CD44v6表达是影响预后的危险因素.Cox回归模型显示:E-cad的表达、淋巴结转移、分化程度为影响结直肠癌患者预后的独立危险因素.结论 E-cad表达下降和CD44v6表达升高与梗阻性结直肠癌较差的预后密切相关.
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经直肠超声引导下前列腺穿刺活检结合血清PSA在诊断前列腺癌中的价值
目的 探讨经直肠超声(transrectal ultrasound,TRUS)引导下前列腺穿刺活检结合血清前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)在诊断前列腺癌(prostate cancer,PCA)中的临床意义.方法 经直肠超声检查联合超声引导下穿刺病理证实的前列腺癌患者62例,病例来源于2005年1月至2014年8月在本院超声诊断科检查的3 874例前列腺疾病门诊患者,年龄(68.5±13.5)岁,分析前列腺癌经直肠超声图像特征分型及其PSA值的分布情况.结果 前列腺癌的经直肠超声图像特征可分为隐匿型、结节型、弥漫浸润型及弥漫浸润伴结节型,且弥漫浸润型和弥漫浸润伴结节型各自与前两种(隐匿型和结节型)之间的PSA值差异有统计学意义(P＜0.01),而隐匿型和结节型之间以及弥漫浸润型和弥漫浸润伴结节型组别之间的PSA值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 血清PSA值结合TRUS引导下前列腺穿刺活检,对于前列腺癌(尤其是隐匿性和弥漫浸润型前列腺癌)具有重要诊断价值.
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利用微流控免疫磁珠分选仪高效富集外周血循环肿瘤细胞
目的 观察利用微流控免疫磁珠分选仪富集外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的效果.方法采用IsoFlux系统(微流体免疫磁珠分选系统),对16例肺癌患者(TMN分期法,Ⅰ～Ⅳ各4例患者)外周血中循环肿瘤细胞进行分离富集,并通过免疫荧光的方法标记CTCs的标记蛋白,对分选出的CTCs细胞进行了鉴定.结果 16位肺癌患者血样中10位患者的血样中均发现了Cytokeratine阳性和CD45阴性的CTCs,Ⅰ～Ⅳ期各4例患者的血样中检出CTCs细胞检出率分别为50％、50％、75％和100％.结论利用微流控免疫磁珠分选仪可以有效地富集外周血中稀有的循环肿瘤细胞,具有较高的灵敏性及特异性.
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中国四城市足月新生儿体格发育变化调查
目的 了解中国四城市新生儿体格发育现状.方法 采取整群随机抽样的方法收集北京、哈尔滨、长沙及广州4个城市单胎活产新生儿体格发育资料,与1986-1987年建立的中国新生儿体格发育参考标准及其有关原始资料进行对比分析.结果 共收集单胎活产足月儿5 140例.与现行参考标准1986-1987年比较,2012年四城市各胎龄足月新生儿体格发育三项指标整体呈不同程度增长,其中体质量增长显著(P＜0.01);不同胎龄出生体质量百分位数变化表现为2012年新生儿出生体质量值大于参考标准;与2006年世界卫生组织(WHO)发布的儿童生长标准参考值比较,头围小于WHO参考值,体质量及身长大于WHO参考值.结论 中国四城市足月新生儿体格发育变化呈增长趋势,部分指标已超过我国现行标准.
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重庆地区汉族人群FGF23基因多态性与冠心病的相关性分析
目的 探索重庆地区汉族人群中成纤维细胞生长因子23(FGF23)基因多态性同冠心病发病的相关性.方法 筛选2014年5月至2015年3月在我科接受冠脉造影检查的重庆汉族人群431例,其中冠心病(CHD)组231例与对照组200例.提取血液DNA样本后采用Sequenom Massarray 系统对于rs7955866、rs13312756、rs3812822这3个FGF23基因TagSNP位点进行基因分型,对其等位基因、基因型及单体型的组间分布进行统计学分析.结果 CHD组rs7955866 A等位基因和rs3812822 C等位基因频率明显高于对照组(P ＜0.001),两位点组间基因型分布也存在明显差异(P＜0.01).单因素Logistic回归分析示rs7955866 GA基因型携带者患病风险为GG基因型的2.146倍,具有统计学意义(P=0.01,OR=2.146,95％ CI[1.393 ～3.306]),rs3812822 CT基因型与TT基因型携带者患病风险亦具有统计学差异(P=0.01,OR=2.010,95％CI[1.327 ～3.046]).多因素非条件Logistic回归分析调整性别、年龄、BMI、吸烟饮酒史、高血压病史、高胆固醇血症等混杂因素后,结果显示rs7955866及rs3812822位点均与CHD发病独立相关(P＜0.001,OR=2.478,95％ CI[1.613 ～3.806];P ＜0.001,OR=2.123,95％CI[1.439 ～3.132]).单体型rs7955866-rs1 3312756-rs3812822统计学分析结果显示,单体型ACC具有增加冠心病患病风险的作用(P＜0.001; OR=2.074,95％ CI[1.391～3.091]).结论 重庆汉族人群FGF23基因多态性及与冠心病患病风险相关.
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基于不同自我相关条件下抑郁情绪个体解释偏向的特点研究
目的 探讨抑郁情绪个体在不同自我相关条件下的歧义性信息中解释偏向的变化特点.方法 采用贝克抑郁自评量表第2版(BDI-Ⅱ)筛选出抑郁情绪组被试(n=20)及正常对照组被试(n=20).使用词句联想范式(WSAP)的行为学任务测量两组被试在不同自我相关条件下对歧义性信息的解释(词汇)认可率及反应时.数据采用SPSS 18.0进行统计分析.结果 ①抑郁情绪组与正常对照组在良性解释(词汇)、负性解释(词汇)的总体认可率、反应时上存在统计学差异(P＜0.01).②抑郁情绪组在3种不同自我相关度的条件下(无关的他人情境/亲密关系情境/自我情境)对良性解释(词汇)、负性解释(词汇)的认可率、反应时分别存在统计学差异(P ＜0.05,P＜0.01);正常对照组在3种不同自我相关度的条件下对良性解释(词汇)、负性解释(词汇)的认可率和反应时也分别存在统计学差异(P ＜0.05,P＜0.01).③在自我情境中,抑郁情绪组的负性解释(词汇)认可率高且反应时短;在亲密关系情境中,抑郁情绪组的良性解释(词汇)认可率高且反应时短.结论 抑郁情绪个体在歧义信息的解释加工过程中,存在显著的负性解释偏向及可能的良性解释偏向缺乏,其中负性解释偏向同时存在于自我与非自我相关情境.
