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第三军医大学学报

第三军医大学学报杂志

Journal of third military medical university 제삼군의대학학보

统计源期刊
  • 主管单位: 第三军医大学
  • 主办单位: 第三军医大学
  • 影响因子: 1.01
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1000-5404
  • 国内刊号: 50-1126/R
  • 发行周期: 半月刊
  • 邮发: 78-91
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1979
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 第三军医大学学报编辑委员会
  • 出版地区: 重庆
  • 主编: 王正国
  • 类 别: 医药卫生综合
期刊荣誉:
  • NF-κB P65在大鼠异种心脏移植后心肌中的表达及意义

    作者:杨光伦;姚榛祥;黄平;涂刚

    目的 复制小鼠→大鼠异种心脏移植模型,探讨核转录因子κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)P65蛋白在异种移植心肌中的表达及NF-κB的DNA结合活性.方法 动物随机数字法分成2组:A组(对照组),n=6;B组(移植组),n=6.采用免疫印迹杂交法(Western blot)检测对照组及移植组心肌组织NF-κB P65表达,凝胶电泳迁移率实验检测NF-κB DNA结合活性.结果 移植组的NF-κB P65蛋白表达和NF-κB DNA结合活性均显著高于对照组(P<0.05).结论 NF-κB的激活可能在大鼠异种移植心脏排斥反应中起着重要作用.

    关键词: 异种移植 NF-κB
  • 昆明山海棠总生物碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡与细胞周期改变

    作者:刘乐斌;刘胜学;胡孝贞;杨录军;敖琳;周燕虹;黄晓春;曹佳

    目的 为探讨昆明山海棠总生物碱(alkaloidsfrom Tripterygium Hypoglaucum Hutch,THHa)抗肺癌机制,研究THHa诱导肺腺癌A549细胞凋亡与细胞周期改变的关系.方法 应用形态学观察、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测分析肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期改变.结果 THHa能够诱导肺腺癌A549细胞凋亡并主要作用于细胞周期S期(S期细胞增多).结论 THHa可能通过诱导细胞凋亡而抑制A549细胞增殖,这种作用与细胞周期有关,这些有助于将来肺癌治疗方案的合理设计.

  • 环磷酰胺对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响

    作者:刘斌;米粲;卞修武;陈代伦

    目的 检测环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞株PLA-802裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响.方法 16只裸鼠右腋皮下接种PLA-802移植瘤细胞悬液后分成空白对照组(5只)、生理盐水对照组(5只)和20 mg/kg CTX治疗组(6只).接种后第7天开始,经腹腔注射给药,隔日1次,共注射10次.每2天测量1次肿瘤大小绘制移植瘤生长曲线.接种后第26天杀鼠摘取移植瘤称重,组织经制片染色后用光镜和电镜检查.结果 ①CTX治疗组移植瘤生长被明显抑制(P<0.05),抑瘤率85.55%.②治疗后瘤细胞疏松排列成腺泡状,由纤维间质分隔,血管稀少;瘤细胞椭圆形、网拍状或短梭形;核椭圆或类圆形,大小不一;核分裂相减少.电镜见瘤细胞质内有不等量肌(微)丝,甚至有横纹肌肌原纤维结构形成.结论 CTX对人腺泡状横纹肌肉瘤PLA-802移植瘤生长具有一定程度的抑制作用,治疗后瘤组织形态结构改变.

  • 应用四环素经纤维支气管镜行微创肺减容术的动物实验研究

    作者:戴晓天;杨和平;王海晶;易斌;熊玮;胡若兰;段海琳;宋洁

    目的 探讨应用四环素经纤维支气管镜行微创肺减容术的可行性.方法 成年杂种犬5只,麻醉后经口插纤维支气管镜入亚段支气管,放入CRE球囊扩张导管,待球囊充起后注入5%四环素混悬液;采用影像学(CT,术后2、4、8、12周)和组织病理学方法(术后12周)检测局部肺组织情况以及Ⅰ型、Ⅱ型胶原表达.结果 所有操作过程顺利,未发现技术操作上的困难,没有动物死亡,术后无明显并发症;术后12周CT检查示5只杂种犬局部肺组织均呈密度增高致密影,未见炎性病变影像,病理检查肉眼见肺表面瘢痕组织形成,镜下示阻塞部位失去正常肺组织结构,形成致密纤维结构,Ⅰ型胶原表达阳性,Ⅱ型胶原表达阴性.结论 应用四环素经纤维支气管镜行微创手术操作容易,创伤小,并发症少,可用于肺减容治疗.

  • 诺帝对HPV16型亚基因永生化人宫颈上皮细胞的诱导分化作用

    作者:赵敬;赵涌;卞修武

    目的 研究诺帝(Nordy)对HPV16型亚基因(E6、E7)永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)的诱导分化作用.方法 MTT法检测诺帝对H8细胞增殖的抑制作用,流式细胞术(FCM)分析细胞周期,免疫细胞化学S-P法检测增殖细胞核抗原Ki67的表达,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化.结果 诺帝能够明显抑制H8细胞增殖;可阻滞细胞周期于G0/G1期,S期细胞减少;细胞核内Ki67蛋白的表达水平明显下降;端粒酶活性明显降低.结论 诺帝对H8细胞有诱导分化作用,这种作用可能是通过抑制增殖,阻滞细胞周期,降低端粒酶活性来实现的.

  • 匹罗卡品致大鼠癫痫持续状态后海马神经元凋亡的动态观察

    作者:张映琦;廖维宏;迟路湘;陈康宁;史树贵;范文辉;陈贞芳

    目的 探讨癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后海马细胞凋亡的发生及其与caspase-3表达的关系.方法 采用匹罗卡品诱发大鼠SE模型,用TUNEL染色和免疫组化技术检测海马神经元凋亡和caspase-3表达的动态变化.结果正常对照组大鼠海马未见TUNEL阳性细胞;SE后6 h,开始出现少量TUNEL阳性细胞;SE后72 h,达到高峰;SE后7 d,TUNEL阳性细胞开始减少.正常对照组大鼠海马可见少量caspase-3阳性表达;SE后6 h,大鼠海马caspase-3阳性表达增多,主要集中于CA1和CA3区;SE后48 h,caspase-3表达达到高峰;SE后72 h~7 d,caspase-3阳性染色细胞数开始减少;但仍显著多于对照组,差异有极显著意义(P<0.01).结果 显示caspase-3表达分布与TUNEL染色基本一致,caspase-3表达高峰早于TUNEL所示凋亡细胞出现的高峰.结论 神经元凋亡参与了SE后海马神经元迟发性死亡过程并与caspase-3的激活有密切的关系.

  • 羊脱钙骨基质作为骨组织工程支架材料的性能评估

    作者:李强;何清义;许建中;侯天勇;王序全;曾琳;冯江华

    目的 制备山羊脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM),研究其物理和生物力学特性,为其作为理想的组织工程骨支架材料提供理论依据.方法 制备山羊完全脱钙骨基质,观察其色泽、质地、孔隙度等物理性状,并用扫描电镜观察其孔隙度,测量其孔径;通过测定吸水率评估其亲水性;用生物力学测定仪测定其不同压缩比率下的瞬时形变恢复率、大形变恢复率及大极限压缩强度.结果 标准化制备DBM呈乳白色,密度均匀,表面布有较多的微孔,扫描电镜观察其孔径范围为350~450(409.2±39.7)μm,吸水后膨胀,大值吸水率达(419.0±44.4)%;生物力学测定显示,DBM位移是压缩强度的函数,DBM压缩20%和30%时其大极限强度分别为(1.43±0.35)N和(1.62±0.51)N,瞬时形变恢复率分别为100%和(91.0±8.2)%.结论 完全脱钙骨基质孔径大,亲水性强,形变恢复好,利于细胞的黏附生长,是理想的组织工程支架材料.

  • 胎鼠胃上皮细胞增殖、凋亡与胃形态发生的关系

    作者:林雪梅;汪维伟;李芳菲

    目的 研究胎鼠胃上皮细胞增殖、凋亡的时空规律及其与胃形态发生的关系.方法 每间隔0.5 d取E11~15.5 d小鼠整胎,横断连续切片,观察胃形态发生,体视学法测量胃贲门、幽门、大弯、小弯上皮分裂细胞密度(DMC)、凋亡小体密度(DAB).结果 ①E11.5 d胃开始发育,E12 d胃底膨出,胃大、小弯出现.②上皮细胞DMC峰值均在DAB峰值之前.③贲门处DMC无明显峰值,DAB峰值在E11.5、12.5、13.5 d;幽门处DMC峰值在E12.5 d,DAB峰值在E14 d;大弯DMC峰值在E11.5、12 d时,DAB值持续较低;小弯DMC峰值在E11.5 d,DAB峰值在E12.5 d.结论 胎鼠胃上皮细胞的增殖及凋亡与胃发生有密切的时空关系.

  • 间置回盲肠重建幽门后胃肌电的实验研究

    作者:张集建;郭光金;黄春霞;姜军

    目的 探讨胃大部切除带蒂回盲肠重建幽门的手术方法.方法 将14只巴马小型香猪分为假手术组和回盲肠间置幽门重建术组(间置组),每组7只.假手术组行剖腹探察;间置组行胃大部切除后将带蒂回盲肠间置替代幽门重建胃肠道.分别在术后2、4、6个月用BL-410生物实验机能系统记录消化间期的胃肌电慢波,计算并比较平均慢波频率和慢波异常节律指数.结果 手术后胃的慢波频率变化不大(P>0.05).术后2、4个月与假手术组比较,间置组的异常节律指数在术后2、4个月明显增高(P<0.01,P<0.05);术后6个月两组无显著性差异(P>0.05).结论 带蒂回盲肠间置术用于胃大部切除幽门重建方法可行,可供临床参考.

  • 低氧对大鼠睾丸支持细胞形态结构与存活率的影响

    作者:吕伟宏;田怀军

    目的 探讨低氧对体外培养大鼠睾丸支持细胞的影响.方法 应用大鼠睾丸支持细胞与生精细胞共培养系统,观察低氧条件下支持细胞的存活数,考马斯亮蓝染色后细胞骨架变化以及生精细胞脱落数.结果 在低氧条件下,支持细胞存活率显著降低,支持细胞细胞骨架出现松弛、回缩等现象;脱落生精细胞数随低氧时间的延长而增加,有明显时间-效应关系.结论 低氧可引起大鼠睾丸支持细胞形态结构及功能的损伤.

  • 三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡对端粒酶活性的影响

    作者:宁燕;米粲

    目的 探讨As2O3诱导细胞凋亡时对其端粒酶活性的影响及其作用机制.方法 采用光镜、电镜,PCRELISA,RT-PCR等技术,检测细胞凋亡,端粒酶活性及其催化亚单位的表达.结果 As2O3可诱导卵巢癌细胞凋亡,但存在作用浓度,细胞株类型差异性;端粒酶活性随药物作用时间和浓度的增加而明显减弱,同时伴随hTERT mRNA表达水平的下降.结论 端粒酶活性和hTERT mRNA表达在As2O3诱导SKOV3、3AO细胞凋亡过程中共同发挥作用,两者有密切关系,是诱导细胞凋亡的分子机制之一.

  • EB病毒LMP1 C端原核表达质粒的构建

    作者:杨玉成;王袆琴;钱迪;何芸;黄江菊;洪苏玲

    目的 通过巢式PCR技术扩增EB病毒LMP1 C端,并构建其原核表达重组质粒,经诱导获得EB病毒LMP1C端蛋白.方法 用巢式PCR技术,从B95-8细胞中扩增EBV-LMP1 exon c DNA,克隆至pET-32a载体,转化入原核表达菌BL21,IPTG诱导重组菌株表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定.结果 巢式PCR扩增的LMP1exon c DNA长度为801 bp,测序结果与LMP1 C端cDNA序列吻合,诱导pET-32a-LMP1c重组原核表达菌株获得大小约48×103的LMP1 C端融合蛋白,Western blot表明重组蛋白能与LMP1单克隆抗体特异结合.结论 通过巢式PCR成功构建了原核表达载体,获得的EB病毒LMP1 C端融合蛋白为制备国产LMP1单克隆抗体,研究LMP1致瘤机制奠定了基础.

  • 血管内皮生长因子在糖尿病大鼠脉络膜视网膜的表达

    作者:周希瑗;李琳;江雪丰;乔岗

    目的 在糖尿病的不同病程中,通过免疫组织化学方法观察血管内皮生长因子(vessel endothelial growthfactor,VEGF)在糖尿病大鼠脉络膜中表达的时间、部位,比较正常大鼠及糖尿病大鼠视网膜、脉络膜组织中VEGF的表达情况.方法 选取健康雄性Wistar大鼠,采用随机数字表法分成糖尿病组和正常对照组,用链脲佐菌素(STZ)大剂量一次性腹腔注射诱导1型糖尿病模型.取不同组、不同时期大鼠视网膜脉络膜,利用免疫组织化学方法,检测VEGF蛋白质的表达情况.结果 ①糖尿病1个月组(M1)、血糖恢复组(Mh)大鼠视网膜脉络膜VEGF蛋白质的表达与正常对照组(MO)无明显区别.②糖尿病2个月组(M2)脉络膜可见VEGF蛋白质的阳性表达(33.3%),视网膜上VEGF蛋白质的阳性表达与正常对照组无明显区别.③糖尿病3个月组(M3)脉络膜VEGF蛋白表达阳性(55.6%),视网膜的内核层及节细胞层VEGF蛋白表达阳性与正常对照组(33.3%)比较有明显差异.④糖尿病4个月组(M4)脉络膜VEGF蛋白表达阳性(66.7%),视网膜的内界膜、内核层、外核层及节细胞层VEGF蛋白表达阳性(77.8%).⑤糖尿病5个月组(M5)脉络膜VEGF蛋白表达阳性(88.9%),视网膜全层均有VEGF蛋白阳性表达(88.9%).VEGF在脉络膜和视网膜的阳性染色密度随病程逐渐增加(P<0.05).结论 VEGF在大鼠脉络膜视网膜中的表达与病程有关,VEGF蛋白在脉络膜的表达先与视网膜.

  • 激光共聚焦显微镜观察三磷酸肌醇对大鼠逼尿肌细胞内钙的影响

    作者:王军;宋波;金锡御;熊恩庆

    目的 探讨IP3/Ca2+信号转导过程与逼尿肌细胞内游离Ca2+浓度[Ca2+]i的关系.方法 建立逼尿肌过度活动大鼠模型,利用激光共聚焦显微镜观察原代培养的逼尿肌稳定及逼尿肌过度活动大鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度的变化以及10-5 mol/L IP3及其抑制剂肝素影响逼尿肌稳定大鼠逼尿肌培养细胞后细胞内钙荧光强度在有钙液及无钙液中的变化.结果 逼尿肌过度活动鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度较逼尿肌稳定鼠显著增强(P<0.01),经10-5 mol/LIP3处理后,逼尿肌稳定大鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度较处理前显著增强(P<0.01),且有钙液中细胞内钙荧光强度显著高于无钙液中细胞(P<0.01).肝素能显著抑制由IP3引起的逼尿肌培养细胞内钙荧光强度的增强.结论 由IP3激活引起的逼尿肌细胞内游离钙浓度的升高可能是逼尿肌过度活动发生的重要原因之一.

  • 小鼠PPARδ腺病毒载体的构建及其在INS-1细胞中的表达

    作者:姜友昭;张玲;周艳;陈兵

    目的 构建含有小鼠过氧化物酶增殖激活受体δ(peroxisome proliferate activated receptor delta,PPARδ)基因的重组腺病毒表达载体.方法 通过Kpn Ⅰ和EcoRⅤ双酶切,从pCDNA3.0-mPPARδ载体中得到含有小鼠PPARδ全长编码序列的片段,将mPPARδ与pAdtrack-CMV相连接并用Pme Ⅰ线性化后,转化含有pAdeasy骨架质粒的细菌BJ5183,在细菌内同源重组后得到pAd-mPPARδ质粒.pAd-mPPARδ经Pac Ⅰ线性化后用LipofectamineTM 2000转染HEK293细胞,包装得到含PPARδ基因的病毒重组子,将病毒重组子在HEK293细胞中扩增后,反复冻融得到滴度较高的含PPARδ的病毒液.将收集的病毒液感染INS-1细胞,绿色荧光观察GFP和Western blot检测PPARδ蛋白的表达.结果 成功构建了含有小鼠PPARδ基因的重组腺病毒载体,病毒滴度为1.5×1010 pfu/ml.重组腺病毒感染后可使INS-1细胞PPARδ蛋白表达明显增加.结论 该重组腺病毒载体的构建为研究PPARδ基因在胰岛细胞中生物学功能提供了一定的工作基础.

  • 异种脱蛋白组织工程骨支架材料的制备及理化特性研究

    作者:刘雷;李起鸿;唐康来;杨柳;简月奎

    目的 制备及研究可供临床使用的异种脱蛋白组织工程骨支架材料.方法 对猪肋骨进行一系列理化处理,制成脱蛋白骨,并对其进行组织学、扫描电镜、红外光谱、X射线衍射分析,X射线能量散射分析、微量凯氏定氮及力学性能测定.结果 脱蛋白骨间质胶原纤维染色阳性,黏蛋白染色阴性,而新鲜骨组织黏蛋白及胶原染色均阳性.脱蛋白骨保持原骨组织的天然网状孔隙系统,孔径为(472.51±7.02)μm,孔隙率为(78.15%±6.45%),脱蛋白骨红外光谱显示胶原存在,无脂肪.新鲜骨与脱蛋白骨皆为曲线型羟基磷灰石图谱,Ca/P比分别为(1.71±0.95)、(1.68±0.76),二者差异无显著性(P>0.05),蛋白质含量分别为(26.6%±2.23%)、(19.1%±2.14%),二者差异有显著性(P<0.05).脱蛋白骨除弹性模量比新鲜骨升高外,压缩破坏载荷及破坏极限载荷与新鲜骨差异无显著性(P>0.05).结论 制备的脱蛋白组织工程骨支架材料的理化性质及力学强度符合理想支架材料要求.其免疫原性有待于进一步实验观察.

  • 小鼠FasL全长cDNA的克隆、真核表达载体构建及其在树突状细胞中的表达

    作者:王彦;卓文磊;王长征;钱桂生;毕玉田;吴奎

    目的 克隆小鼠FasL(mouse FasL,mFasL)全长cDNA,构建其真核表达载体,并验证其在小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)中的表达.方法 采用RT-PCR和TA克隆技术,从激活的小鼠脾脏T淋巴细胞中扩增mFasL全长cDNA,亚克隆到T载体中,再克隆到pIRES2EGFP载体中.转染小鼠DC后,用RT-PCR、免疫荧光及Western blot检测mFasL mRNA和蛋白表达.结果 测序证实所得的mFasL cDNA序列与其在GenBank中的序列完全一致.mFasL真核表达载体转染小鼠DC后,能表达mFasL mRNA和蛋白.结论 成功克隆了mFasL基因,构建其真核表达载体,并证明能有效表达于DC中.

  • 核因子NF-κB p65亚基TAD的克隆及表达

    作者:侯春丽;应大君;魏勇

    目的 获得NF-κB p65亚基转录激活区域(transcription activation domain,TAD),构建真核表达载体并在内皮细胞中检测其表达.方法 培养人脐静脉内皮细胞,提取总RNA,经RT-PCR得到p65 TAD基因片段,测序正确后插入带有绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1,构建表达载体pEGFP-N1-p65 TAD,然后转染内皮细胞,荧光显微镜下观察表达情况,同时用Western blot分析蛋白的表达.结果 有效地扩增了p65 TAD 783 bp的目的基因片段.酶切结果表明所构建的含p65 TAD基因的质粒与设计相同.p65 TAD在脐静脉内皮细胞中得到了高效的表达.结论 成功地构建了p65 TAD的真核表达载体并实现了在内皮细胞中的高效表达.

  • 人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立

    作者:袁成福;杨俊霞;魏丽丽;石华;陈济;宋方洲

    目的 构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系.方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测MCHR2的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因.结论 真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础.

  • 右-苯丙胺对脑缺血大鼠细胞凋亡和生长相关蛋白43的作用

    作者:李红梅;肖农;张晓萍

    目的 采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察右-苯丙胺对脑缺血损伤的保护作用.方法 应用Koizumi线栓法建立单侧局灶性脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型.术后1、3、6周应用原位末端标记法观察细胞凋亡并计数阳性细胞,免疫组织化学方法及RT-PCR检测缺血周围区生长相关蛋白(GAP-43)表达的变化.结果 右-苯丙胺治疗组较自然恢复组细胞凋亡明显减少;免疫组化光密度定量测定及RT-PCR显示GAP-43的表达水平在第1周末明显增高,且治疗组高于自然恢复组.结论 右-苯丙胺能减少脑梗死边缘区细胞凋亡的发生,促进GAP-43的表达.

  • 组织块法培养大鼠肺微血管内皮细胞的综合鉴定

    作者:徐顺贵;吴国明;徐智;冯起甲;王关嵩;张健鹏

    目的 为组织块法培养的大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cells,RPMVECs)建立合理可靠的多指标综合鉴定方案.方法 采用外周肺组织贴块法培养RPMVECs,抽取组织块进行切片观察,以大鼠肺动脉平滑肌细胞和人脐静脉内皮细胞为对照,对培养细胞进行CD34、植物凝集素BSI、Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学鉴定,通过光镜和透射电镜观察细胞形态和超微结构.结果 组织切片显示组织块源于外周肺组织,CD34免疫细胞化学染色阳性,植物凝集素BSI结合试验阳性,而Ⅷ因子相关抗原染色阴性,透射电镜未见Weibel-Palade小体.结论 Ⅷ因子相关抗原和Weibel-Palade小体并非RPMVECs鉴定的理想指标,联合应用外周肺组织切片、CD34和植物凝集素BSI三指标为组织块法培养的RPMVECs提供了一个简单易行、合理、可靠的综合鉴定方案.

  • B7-H1慢病毒的制备及其在B16F10细胞中的表达鉴定

    作者:张立群;段文元;许雪青;黄钢;陈雪丹;白云

    目的 构建小鼠B7-H1分子慢病毒表达载体并包装成感染性病毒颗粒,获得稳定表达B7-H1的B16F10细胞.方法 以小鼠B7-H1的测序质粒为模板,PCR扩增B7-H1全长,装入pLenti6/V5-D-TOPO慢病毒表达载体,经过测序证实其序列与标准序列完全一致.将B7-H1表达载体用LipofectamineTM2000转染293FT细胞,包装成感染性病毒颗粒,感染B16F10细胞后,加入含Blasticidin(终浓度为4.0 μg/ml)的RPMI1640培养基,筛选出稳定表达B7-H1蛋白的B16F10细胞株.结果 PCR扩增得到编码小鼠B7-H1的877 bp基因片段,与预期大小一致.B7-H1重组慢病毒感染B16F10细胞后,用B7-H1单抗进行免疫组化检测,荧光显微镜观察显示B7-H1分子表达于B16F10细胞.FACS测定B16F10细胞荧光阳性率为36%.结论 成功构建了B7-H1慢病毒表达载体,包装出感染性病毒颗粒,重组慢病毒感染B16F10细胞后表达出有活性的B7-H1膜表面蛋白,为进一步研究B7-H1分子在器官移植、自身免疫性疾病以及肿瘤免疫逃逸机制中的作用奠定了基础.

  • 嘉陵江C市段水中有机污染物睾丸毒性分子机制初步研究

    作者:曹波;舒为群;曹佳

    目的 探讨水中有机污染物对大鼠睾丸损伤的分子机制.方法 采用XAD-2树脂浓缩水中有机污染物;大鼠经灌胃暴露于水中有机提取物,用TUNEL法检测细胞凋亡;免疫组化与免疫印迹方法检测水中有机提取物对fas,fasL,scf,c-kit蛋白表达的影响.结果 高剂量组水中有机污染物可增加精子细胞凋亡率(P<0.05),精原细胞也观察到凋亡,但实验组与对照组之间没有统计学差异.高剂量组水中有机污染物可明显增加精原细胞fas,fasL和c-kit蛋白表达(P<0.05).结论 水中有机污染物对精原细胞的发育分化有影响,并可诱导精子细胞凋亡,有可能破坏精原细胞的生精过程,但详细机制还需进一步研究.

  • 双功能基因APE1敲低后人体骨肉瘤细胞基因表达谱变化的研究

    作者:王东;仲召阳;李增鹏;杨镇洲;Mark R Kelley

    目的 探索APE1敲低后骨肉瘤细胞恶性表型受抑的可能机制,以及APE1相互作用的可能分子.方法 应用免疫印迹和AP核酸内切酶活性检测确证合成APE1 siRNA对人体骨肉瘤细胞HOS APE1基因的敲低作用;应用GEArrayTMQ系列cDNA微阵列研究HOS细胞APE1敲低后基因表达谱的改变.结果 APE1 siRNA对HOS细胞APE1基因具有特异性"敲低"作用,其抑制效率为91.5%.APE1抑制对cDNA微阵列六族途径均有影响,其中对细胞周期族基因影响较少;96个基因中有42个基因有明显变化(43.8%),其中CDK4、FGFR2、KAI1和NCAM1表达上升,其余38个基因表达均呈下降.结论 APE1的敲低对骨肉瘤细胞的细胞周期及DNA损伤、细胞凋亡、信号转导、细胞黏附、血管生成、肿瘤转移途径基因均有影响.

  • 仙台病毒复制序列对未成熟树突状细胞蛋白表达的影响

    作者:易发平;张平波;郭风劲;马永平;宋方洲

    目的 研究仙台病毒载体复制序列对未成熟树突状细胞(dendritic cells,DC)蛋白质表达的影响,为联合运用二者进行基因治疗提供依据.方法 提取去除仙台病毒复制序列载体(Sev/△F)、完全序列载体(SeV)转染未成熟DC的总蛋白,定量.双向凝胶电泳分离蛋白质组分,胶体银染显色,PDQuest进行图像分析后选取差异点,胶内酶解后MALDI-TOF MS进行肽指纹图谱鉴定.结果 图像分析结果显示,Sev/△F感染后的DC明显比SeV感染后的DC表达蛋白点多,其中有不少蛋白表达量也明显上调.结论 仙台病毒载体感染未成熟DC后引起蛋白表达的减少,这与SeV的复制序列有关.

  • B亚型血型1例

    作者:林子林;毕蔚茹

    患者,男性,2006年7月14日因肺泡蛋白沉积症入我院呼吸内科.我们在做患者血型检测时,发现其为B亚型[1],现报告如下.

    关键词: B亚型 血型
  • 法洛四联症根治术后急性肝功能衰竭1例

    作者:张鸿玲;刘健;肖颖彬

    患儿,男性,4岁,体质量12 kg.心脏超声诊断:先天性心脏病,法洛四联症.于2005年11月7日在全麻下行法洛四联症根治术.转流时间86 min,阻断主动脉时间60 min,自动复跳.术后肢端凉,面色差,尿少,血压65~75/45~55 mmHg,中心静脉压17~22 cmH2O,考虑合并低心排综合征.给予盐酸肾上腺素、多巴胺、米力农等治疗,2 d循环功能稳定,第4天脱除呼吸机.

  • 大龄近视患者行LASIK手术后近距离视觉满意度分析

    作者:罗启惠;汪辉;任茜;胡春明

    准分子激光原位角膜磨镶术(excimer laser in situ keratomileusis,LASIK)是目前备受瞩目的角膜屈光手术,但是年龄对手术效果的影响已逐渐引起人们的关注[1].在临床上我们发现对于年龄较大的近视患者,屈光手术后的近距离用眼往往不是很理想,为此,我们对在我院接受LASIK治疗的240例480眼大龄近视患者进行了回顾性分析.

  • 宫腔镜与气囊导尿管在宫腔黏连致不孕治疗中的联合应用

    作者:袁超燕

    宫腔黏连(intrauterine adhesion,IUA)指经宫腔手术操作或因放射、感染造成子宫内膜破坏引起宫壁相互黏连而出现的一系列临床病变,包括腹痛、闭经、月经过少或流产、不孕等现象[1].其发病率逐年增加是引起不孕的重要原因,占不孕症40%(Sirbu,1957)[2].虽然我院多年来对宫腔黏连的患者采用分离黏连后上节育环,但对不孕症患者需再次宫腔操作取出节育环,增加了宫腔操作的次数及对子宫内膜的损伤.自2004年5月以来我们对宫腔黏连致不孕患者采用宫腔镜下分离黏连后上气囊导尿管扩张宫腔的方法,使患者术后恢复正常月经周期,改善妊娠条件和提高生育功能,取得良好的效果,现报告如下.

  • "药源性"急腹症型铅中毒的诊断体会

    作者:杨彤翰;王志刚;孔佩艳;严治林

    铅中毒比较少见,接诊时易被临床医师忽略或误诊[1,2].为提高对本病的认识及警惕性,特将我们近期收治的1例铅中毒患者,并根据患者叙述,将与本患者有同样发病特点并在外地治疗的其妻子一同报告,并重点就诊断中的有关问题进行讨论.

  • 106例老年心血管病患者白内障超声乳化术中临床特征分析

    作者:陈鹏;贺翔鸽

    目的 探讨老年心血管病患者白内障超声乳化手术中收缩压、舒张压、眼心反射及术后视力改善情况,为该类患者的治疗提供基础数据.方法 选择2003年11月至2005年1月间资料完整的白内障超声乳化手术病例168例(182只眼),其中心血管病组97例(106只眼),对照组71例(76只眼).观察2组患者手术过程中的血压、眼心反射、心电图指标变化情况.结果 2组术中各阶段平均收缩压较术前均有不同程度升高,但舒张压、眼心反射发生率、心电图变化情况、术后视力恢复情况组间差异不显著.结论 术前合理用药、术中减少眼球刺激、加强监护可以确保老年心血管病患者白内障超声乳化手术的成功实施.

  • 膀胱肿瘤保留膀胱的策略

    作者:尹志康;吴小候;苟欣;唐伟;梁思敏;蒲军;刘通

    目的 探讨膀胱肿瘤保留膀胱的策略.方法 分析249例保留膀胱的膀胱肿瘤患者的复发率、复发时间和近远期存活率与手术方式、灌注药物和临床分期的关系.结果 手术方式和灌注药物种类对膀胱肿瘤首次复发时间的影响不明显,但随临床分期的增高首次复发时间明显缩短.3种手术方式后膀胱肿瘤的总复发率、3年和5年生存率无显著性差异,而10年生存率以经尿道膀胱肿瘤电切术为高(77.3%).4种药物灌注后总复发率、3、5年及10年生存率有显著差异,以卡介苗灌注后的复发率低(28.2%)、近远期存活率高(3年为100%,10年为81.7%).4个临床分期组的3、5和10年生存率组间两两比较,Tis、Ta、T13组间无显著性差异,而T2-4组与其他3组间有显著性差异;总复发率在Tis、Ta、T2-43组间无显著差异(52.5%~60.4%).结论 对于未侵及膀胱壁肌层的膀胱肿瘤,采用经尿道膀胱肿瘤电切手术,结合卡介苗灌注治疗可取得良好的预后,而对于已侵及膀胱壁肌层者,不适宜采用保留膀胱手术.

  • 外源性一氧化氮对小鼠卵母细胞及胚胎发育的影响

    作者:谭兵兵;龙兴宇;谭晓珊;杨智敏

    在某些病理情况下,腹腔液和子宫内膜组织中的免疫细胞在炎性因子和细胞因子的作用下可产生大量一氧化氮(NO)[1].有研究认为这种局部微环境NO浓度增高与女性不孕症有关[2].本研究以昆明小鼠为实验模型,以硝普钠为NO供体,模拟内源性NO生成,探讨生殖系统局部微环境NO过量产生对小鼠卵母细胞体内成熟、体外受精和早期胚胎发育的影响.

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